一个未知的子宫雌激素反应蛋白ULF-250的鉴定

鉴定一个未知的子宫雌激素反应蛋白ULF-250.去卵巢大鼠补充给予雌二醇造成子宫产生大量宫腔液(uterine luminal fluid,ULF),受雌激素调节的蛋白分泌其中.收集ULF分别进行SDS-PAGE和双向电泳(2-DE)分离;通过Western印迹和2D-Western确认抗ULF-250抗体识别的蛋白成分并与凝胶上的条带或斑点相对应;对目标蛋白分别用MALDI-TOF-MS和HPLC-ESI-MS/MS两种方法进行质谱分析并获得肽段序列数据;与蛋白数据库比对及文献检索鉴定未知蛋白.2D-Western显示抗ULF-250抗体特异识别的蛋白成分.从2D胶上切下对应的蛋白斑点进行MALDI-TOF-MS,结果提示:ULF-250是ebnerin/DMBT1.经SDS-PAGE分离的250 kD蛋白条带进行液-质联用分析,结果同样提示:ULF-250是ebnerin/DMBT1.与文献报道比较,ULF-250与ebnerin/DMBT1在子宫的组织定位和调节是相同的,认为ULF-250是子宫表达的ebnerin/DMBT1.通过2-DE结合质谱分析以及查阅文献,确认未知的雌激素反应蛋白ULF-250是ebnerin/DMBT1.此外,研究提示,该蛋白不仅在子宫上皮细胞表达而且分泌到子宫腔液中,其功能值得进一步研究.

慢性砷暴露对雌鼠子宫和卵巢组织雌激素受体结合位点相关抗原9和雌激素反应指蛋白mRNA表达的影响

目的观察慢性砷暴露对雌鼠子宫和卵巢组织雌激素受体结合位点相关抗原9（Ebag9）和雌激素反应指蛋白（efp）mRNA表达的影响。方法将50只雌性Wistar大鼠按体质量随机分成5组，每组10只，分别饮用含砷量（三氧化二砷，As2O3）为0．00（对照）、0．05、0．10、0．20、0．40mg／L的水溶液，31周后通过实时定量PCR方法检测大鼠子宫和卵巢组织中Ebag9和efpmRNA的表达。结果对照、0．05、0．10、0．20、0．40mg／L组大鼠子宫组织Ebag9和efpmRNA表达量分别为0．761±0．178、0．521±0．130、0．544±0．035、0．525±0．198、0．498±0．240和0．795±0．171、0．874±0．077、0．797±0．066、0．796±0．040、0．832±0．096。与对照组比较，染砷各组Ebag9mRNA表达呈降低趋势，但差异无统计学意义（P均〉0．05），其中0．40mg／L组P值为0．055；与对照组比较，染砷各组efpmRNA表达呈升高趋势，但差异无统计学意义（P均〉0．05）。对照、0．05、0．10、0．20、0．40mg／L组大鼠卵巢组织Ebag9和efpmRNA表达量分别为0．702±0．484、0．719±0．336、0．693±0．095、0．706±0．055、0．728±0．073和0．924±0．061、1．009±0．034、0．930±0．085、0．929±0．068、1．012±0．101。0．05、O．20、0．40mg/L组Ebag9mRNA表达呈升高趋势，但与对照组比较，差异无统计学意义（P均〉0．05）；染砷各组efpmRNA表达均呈升高趋势，其中0．05、0．d0mg／L组与对照组比较，差异有统计学意义（P均〈0．05）。结论慢性砷暴露可引起雌性大鼠卵巢组织efomRNA表达改变。砷可能对雌性大鼠卵巢组织存在内分泌干扰效应。

慢性砷暴露对雌性大鼠心肌雌激素受体结合位点相关抗原9和雌激素反应指蛋白mRNA表达的影响

【摘要】目的观察慢性砷暴露对雌性大鼠心肌雌激素受体结合位点相关抗原9（Ebag9）和雌激素反应指蛋白（efp）mRNA表达的影响。方法将50只雌性Wistar大鼠按体质量随机分成5组，每组10只，分别饮用含砷（三氧化二砷）量为0．00（对照）、O．05、0．10、0．20、0．40mg／L的水溶液，32周后通过实时定量PCR方法检测大鼠心肌中Ebag9和efpmRNA的表达。结果0．00、0．05、O．10、O．20、O．40mg／L组大鼠心肌Ebag9、efpmRNA表达量分别为0．54±0．14、0．52±0．10、0．48±0．24、0．58±0．13、0．45±0．19和0．85±0．14、0．86±0．12、0．87±0．09、0．99±0．10、0．86±0．19。与对照组比较，0．20mg／L组Ebag9mRNA表达有升高趋势，而其他各染砷组有降低趋势，但差异均无统计学意义（P均〉0．05）。与对照组比较，0．20mg／L组efpmRNA表达明显升高（P〈0．05），而其他各染砷组有升高趋势，但差异均无统计学意义（P均〉0．05）。结论慢性砷暴露可引起雌性大鼠心肌Ebag9和efDmRNA表达改变。砷可能对雌性大鼠心肌存在内分泌干扰效应。