雌激素受体α亚基基因小干扰RNA表达载体的构建

目的探讨构建雌激素受体α（ERα）亚基基因小干扰RNA（siRNA）表达载体的方法，为建立基因敲除ERα亚基突变株提供素材和依据。方法利用计算机辅助设计ERα特异性siRNA，体外合成siRNA基因，并将其定向克隆入pSilencer4．1-CMV质粒中，构建真核表达载体。采用PCR扩增、酶切分析鉴定。结果双酶切法鉴定重组质粒后，RT-PCR法鉴定ERasiRNA载体可特异地抑制人成骨样细胞株MG63细胞中ERα的表达。结论ERα亚基特异性siRNA表达载体被成功构建，为进一步研究雌激素受体在骨代谢中的作用机制提供了实验素材和依据。

鸡FSHβ和ESRα基因SNPs分析与早期产蛋性能关系

采用PCR-SSCP法对85羽绿壳蛋鸡进行促卵泡激素β亚基(FSHβ)和雌激素受体α亚基(ESRα)基因多态性检测并测序,分析其与早期产蛋性状的关系。基因FSHβ和ESRα都发现了多态,测序结果表明:FSHβpro 2位点有3处SNPs,分别是:A-464G,-450插入碱基A,A-405G。FSHβexon 3有1处碱基突变,即A2447G;ESRα基因5'-UTR区有4处碱基变异,分别是:A-34G,T-76C,T-79C,C-102T。ESRα基因内含子1区发现3处SNPs,分别是:T122C,A155G,C169T。与早期(36周)产蛋关系分析表明,FSHβ基因调控区的AA基因型36周平均产蛋量显著高于AB型(p<0.05),没有发现BB型,外显子3的AA型和AB型开产日龄呈显著相关(p<0.05),也没发现BB型;ESRα基因5'侧翼调控区的CC型和CD型36周平均产蛋量差异显著(p<0.05),而没发现DD型,其他均不显著(p>0.05)。