雌激素受体1基因多态性与早产儿脑室内出血相关性的研究

目的检测早产儿血中雌激素受体1(ESR1)基因多态性,并分析其与早产儿脑内出血症(IVH)的相关性,从而了解早产儿脑室内出血的发病基础和影响因素,做到更好地针对病因的预防、诊断、治疗,进一步改善预后。方法选取2012年1月-2015年2月经头颅CT检查后诊断为脑室内出血的早产儿45例,正常对照组50例。采用PvuⅡ内切酶对病样及正常样本的ESR1基因的多态性进行检测,分析ESR1基因多态性在早产儿脑室内出血患儿中的基因型分布及相关性。结果显示早产儿脑室内出血患儿的ESR1基因呈多态性分布,rs2234693位点基因型主要有CC基因型(213bp)、TT基因型(179/34bp)和CT基因型(213/179/34bp)三种,IVH实验组ESR1(rs2234693)位点的TC与TC基因型频率均高于对照组,两组之间差异有统计学意义(χ2=6.57,P<0.05)。IVH实验组ESR1(rs2234693)位点的T等位基因频率均高于对照组,两组之间差异有统计学意义(χ2=5.40,P<0.05)。结论 ESR1基因rs2234693位点T等位基因与早产儿脑室内出血存在某种相关性。

内分泌治疗激素受体阳性乳腺癌的效果及其与ESR1基因位点的关系

目的研究内分泌治疗激素受体阳性乳腺癌的效果及其与雌激素受体1基因(ESR1)单核苷酸多态性位点(rs2077647和rs3798759)的关系。方法选择2014年1月—2018年12月于江苏省常熟市第五人民医院收治的86例激素受体阳性乳腺癌患者为研究对象,均接受内分泌治疗,并接受ESR1单核苷酸多态性位点(rs2077647和rs3798759)检测。分析内分泌治疗后短期疗效,并观察其与ESR1单核苷酸多态性位点的关系。结果86例患者内分泌治疗后完全缓解、部分缓解、疾病稳定共45例,均归入ETR组;疾病进展41例,归入ETNR组。ETR组rs2077647位点基因型为CC型者占比显著高于ETNR组(P<0.05),rs3798759位点基因型为TT型者占比显著低于ETNR组(P<0.05),且基因型为TG型者占比显著高于ETNR组(P<0.05)。ETR组rs2077647位点等位基因为C者占比显著高于ETNR组(P<0.05),rs3798759位点等位基因为G者占比显著高于ETNR组(P<0.05)。ESR1基因多态性是患者内分泌治疗效果的独立影响因素(P<0.05)。结论内分泌治疗激素受体阳性乳腺癌后疗效与ESR1单核苷酸多态性位点(rs2077647和rs3798759)密切相关。

维生素D受体基因和雌激素受体基因多态性与老年人低骨量的关系

目的探讨维生素D受体基因(VDR)和雌激素受体基因(ESR1)多态性与老年男性、女性低骨量的关系。方法 378名老年男性[平均年龄(61.1±7.0)岁,其中260名健康男性、110例骨量减少和8例骨质疏松患者]和334名绝经后妇女[平均年龄(58.4±6.3)岁,其中148名健康女性、153例骨量减少和33例骨质疏松患者]共712人,均为居住在上海30年以上汉族人。用双能X线测量仪检测上述受试者左侧股骨颈骨密度(bone mineral density,BMD)。按照股骨颈BMD低于同性别正常峰值BMD的-1～-2.5和-2.5标准差为标准诊断骨量减少和骨质疏松,排除继发性低骨量。检测VDR基因FokⅠ、ApaⅠ、CDX 2位点ESR 1基因的PvuⅡ和XbaⅠ位点单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs)。结果 378名老年男性中,FokⅠ的基因型频率为FF(28.0%)、Ff(50.0%)和ff(22.0%),ApaⅠ的基因型频率为AA(9.5%)、Aa(43.4%)和aa(47.1%);CDX 2的基因型频率为AA(22.2%)、AG(45.8%)和GG(32.0%);PvuⅡ的基因型频率为PP(14.1%)、Pp(46.0%)和pp(39.9%);XbaⅠ的基因型频率为XX(5.0%)、Xx(36.8%)和xx(58.2%)。334名老年女性中,FokⅠ的基因型频率为FF(25.7%)、Ff(55.1%)和ff(19.2%),ApaⅠ的基因型频率为AA(10.2%)、Aa(44.0%)和aa(45.8%);CDX 2的基因型频率为AA(22.8%)、AG(47.9%)和GG(29.3%);PvuⅡ的基因型频率为PP(9.9%)、Pp(45.2%)和pp(44.9%);XbaⅠ的基因型频率为XX(2.1%)、Xx(36.8%)和xx(61.1%)。等位基因频率分布均符合Hardy-Weinberg定律。老年男性和女性的骨质疏松组、骨量减少组和骨量正常组之间上述基因SNP频率分布未见差异(P均>0.05)。结论 VDR的FokⅠ、ApaⅠ及CDX 2位点和ESR 1的PvuⅡ及XbaⅠ位点多态性可能不是纳入本研究汉族老年男性和女性低骨量的风险因子,尚需更大样本量的实验予以证实。

雌激素受体基因与微小RNA在冠心病中的相关性

目的探讨微小RNA miR-18a和miR-22与雌激素受体基因(ESR)1在冠心病(CAD)中表达的相关性。方法从GEO数据库中获取110例冠心病患者和112正常人的芯片数据集,通过高通量分析方法,确定异常表达基因,并采用Target Scan对该基因进行分析,预测对其进行调控的微小RNA;收集30例正常组织为对照组,30例CAD为实验组,用实时荧光定量PCR方法检测ESR1、miR-18a、miR-22的mRNA相对表达量。结果通过对芯片数据进行分析,一共发现390个在CAD中异常表达的基因,分子网络分析显示ESR1是其中的关键节点基因,并预测ESR1可能是miR-18a和miR-22调控的靶点基因;30对临床样本的检测结果显示,miR-18a水平和ESR1水平呈负相关关系,而miR-22的表达与ESR1表达量之间并无明显的相关性。结论 CAD中有显著表达异常的基因及micro RNA可为将来相关的治疗研究提供数据和理论支持。

雌激素受体基因Pvu Ⅱ多态性与偏头痛相关性研究

目的:探讨雌激素受体基因PvuⅡ多态性与偏头痛基因易感性的关系。方法:选取偏头痛患者41例和健康对照者44例进行病例对照研究,通过聚合酶链反应一限制性片段长度多态性分析(pCR—RFLP)对其雌激素受体基因PvuⅡ基因型进行检测分析。结果:雌激素受体基因PvuⅡ基因型频率在偏头痛患者中′PP′基因型频率为17.1%、′Pp′基因型频率为43.9%、′pp′基因型频率为39%,在健康对照组中各基因型频率分别为13.6%、38.6%、47.7%。偏头痛组与健康对照组基因型频率比较未发现显著性差异(χ2=0.676,P=0.713)。结论:ESR 1基因PvuⅡ多态性可能与偏头痛发病无显著相关性。

子宫内膜样腺癌组织PELP1/MNAR表达及其与雌激素受体相关性

目的探讨脯氨酸-谷氨酸-亮氨酸富集蛋白1/雌激素受体非基因组活性辅助调节因子(PELP1/MNAR)和雌激素受体(ER)在子宫内膜样腺癌组织中的表达及意义。方法采用免疫组化PV二步染色法,对40例正常子宫内膜组织、60例子宫内膜增生过长组织和60例子宫内膜样腺癌组织中PELP1/MNAR、ER进行测定。结果子宫内膜样腺癌及不典型增生组织腺上皮细胞核中PELP1/MNAR阳性表达率高于正常子宫内膜及单纯性、复杂性增生组织(χ2=6.25～16.90,P<0.05);子宫内膜样腺癌绝经后组织间质中PELP1/MNAR阳性表达率低于未绝经组织(χ2=7.17,P<0.05);子宫内膜样腺癌及增生期内膜腺上皮细胞核中ER阳性表达率高于分泌期及增生过长组织(χ2=5.208～12.907,P<0.05)。子宫内膜样腺癌组织中ER与PELP1/MNAR的阳性表达率呈正相关(r=0.315,P<0.01)。结论 PELP1/MNAR在子宫内膜各个时期的表达异常可能与子宫内膜样腺癌的发生发展有关。

鹌鹑ESR1基因外显子1多态性与早期生长性能的关联分析

为了探讨雌激素受体基因1(ESR1)的多态性对鹌鹑早期生长性能的影响,采用PCR-RFLP法,对3个鹌鹑群体(中国黄羽鹌鹑、朝鲜鹌鹑、北京白羽鹌鹑)的ESR1基因外显子1进行多态性检测,并与鹌鹑早期生长性能进行关联分析。结果表明,ESR1基因外显子1在3个鹌鹑群体中均检测到3种基因型,分别为TT、CC、CT基因型,ESR1基因外显子1在中国黄羽鹌鹑、北京白羽鹌鹑、朝鲜鹌鹑中的CC基因型频率分别为0.515、0.600、0.723,TT基因型频率分别为0.088、0.014、0.015,CT基因型频率分别为0.397、0.386、0.262。关联分析表明,ESR1基因外显子1与朝鲜鹌鹑的胫长、胸骨长、体长、胫围有相关性(P<0.05),与中国黄羽鹌鹑的体质量、胫长、胸深、体长、胸骨长有相关性(P<0.05),与北京白羽鹌鹑的体质量有相关性(P<0.05)。以上结果提示,ESR1基因外显子1可作为候选基因应用于蛋用鹌鹑早期生长性能的分子标记辅助选择。

基于网络药理学和分子对接的白藜芦醇治疗口腔鳞状细胞癌的机制研究

目的通过网络药理学及分子对接等生物学信息方法,探讨白藜芦醇治疗口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)的分子机制,为白藜芦醇治疗OSCC的临床应用提供参考。方法利用Swiss Target Prediction(http://www.swisstargetprediction.ch)、SEA数据库(http://sea.bkslab.org)、Pharm mapper数据库(http://lilab-ecust.cn)检索获得白藜芦醇的相关靶点,以DISGENET(www.disgenet.org)、OMIM(https://omim.org)、GeneCards(https://www.genecards.org)数据库筛选OSCC疾病靶点,取药物与疾病靶点的交集,再采用Cytoscape 3.7.2软件构建“药物-疾病-靶点-通路”网络,String数据库构建靶蛋白相互作用网络,采用DAVID数据库对关键蛋白进行富集分析,最后通过AutoDock及PyMOL对关键蛋白进行分子对接验证,结合富集分析和分子对接结果预测白藜芦醇治疗OSCC可能的分子作用机制;细胞水平采用Western blot检测不同浓度(50、100μmol/L)白藜芦醇对OSCC细胞株HSC-3细胞Src酪氨酸激酶(Src tyro-sine kinase,SRC)、表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)、雌激素受体基因1(estrogen receptor gene 1,ESR1)及磷脂酰肌醇三激酶/蛋白激酶B(phosphatidylinositol 3 kinase/protein kinase B,PI3K/AKT)信号通路蛋白表达的影响。结果数据库得到白藜芦醇药物靶点243个,OSCC疾病靶点6094个,将药物与疾病的靶点进行交集获得116个潜在靶点,潜在靶点主要集中参与体内蛋白质自磷酸化、肽基酪氨酸磷酸化、跨膜受体蛋白酪氨酸激酶信号通路、RNA聚合酶Ⅱ启动子转录的正调控等生物过程,干预PI3K/AKT信号通路发挥抗OSCC的作用。分子对接结果表明白藜芦醇与EGFR、ESR1、SRC等OSCC关键靶点具有较好的结合活性。细胞实验结果表明,白藜芦醇药物干预以剂量依赖的方式抑制了HSC-3细胞中SRC、EGFR、ESR1及p-PI3K和p-AKT的蛋白表达。结论白藜芦醇对OSCC细胞SRC、EGFR、ESR1、p-PI3K、p-AKT靶点具有抑制作用。

精液金属浓度、ESR1基因与精液质量关系

目的了解男性精液金属浓度、雌激素受体α基因(ESR1)与精液质量之间的关系,为进一步研究金属影响精液质量的可能作用机制提供流行病学基础。方法采用以医院为基础成组病例对照研究方法,选择2016年9月—2017年11月在广东省深圳市某三甲医院生殖医学中心进行精液检查的91例精液质量异常和91名精液质量正常的男性人群进行问卷调查及11种金属浓度和ESR1基因mRNA表达水平检测。结果病例组男性人群精液金属铬(Cr)、锰(Mn)、铜(Cu)和铊(Tl)中位数浓度分别为2.12、9.61、107.00和0.23μg/L,均高于对照组男性人群的1.64、8.18、91.40和0.19μg/L,差异均有统计学意义(均P<0.01);病例组和对照组男性人群ESR1基因mRNA相对表达水平分别为(–0.66±4.85)和(0.63±3.96),差异有统计学意义(t=-1.974,P<0.05)。在控制年龄、体质指数(BMI)和禁欲时间后,多因素非条件logistic回归分析结果显示,精液金属Cr、Mn和Cu最高四分位数浓度组发生精液质量异常的风险分别为最低四分位数浓度组的3.16倍(OR=3.16,95%CI=1.32~7.58)、3.58倍(OR=3.58,95%CI=1.45~8.83)和3.17倍(OR=3.17,95%CI=1.32~7.64),Tl第三四分位数浓度组和最高四分位数浓度组发生精液质量异常的风险分别为最低四分位数浓度组的2.77倍(OR=2.77,95%CI=1.15~6.70)和3.96倍(OR=3.96,95%CI=1.55~10.08);ESR1基因mRNA低表达组发生精液质量异常的风险为高表达组的1.89倍(OR=1.89,95%CI=1.04~3.46)。在控制年龄、BMI和禁欲时间后,多元线性回归分析结果显示,与最低四分位数浓度组相比,金属Tl最高四分位数浓度组与ESR1基因mRNA表达水平呈负相关(b=-2.49,95%CI=-4.44~–0.54)。中介效应分析结果显示,ESR1基因在Tl与精液质量的关系中起部分中介效应,该效应占总效应的18.6%。结论精液金属Cr、Mn、Cu和Tl暴露及ESR1基因mRNA低表达是精液质量的危险因素,精液金属Tl对精液质量的影响部分由ESR1基因介导。

绿壳蛋鸡ESR1基因与早期产蛋性能的关联性研究

为了提高绿壳蛋鸡的产蛋性能,筛选出有利的分子辅助标记,试验采用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)和DNA测序技术对124只长顺绿壳蛋鸡雌激素受体1(ESR1)基因进行多态性分析,并与其产蛋性能进行关联性分析。结果表明:绿壳蛋鸡群体ESR1基因In4片段出现CC、CD和DD 3种基因型,其中C为优势等位基因,该位点群体遗传处于Hardy-Weinberg非平衡状态(P<0.05),多态信息含量(PIC)为0.359 5,遗传杂合度(He)和有效等位基因数(Ne)分别为0.474 6,1.903 3。基因型与产蛋性能关联性分析显示,3种基因型个体间的开产体重、开产蛋重、平均连产天数差异均不显著(P>0.05),而CC与DD基因型个体的开产日龄和300日龄产蛋量均存在显著差异(P<0.05)。在该试验群体中,选择DD基因型个体可增加产蛋量,提高产蛋性能。