孤雌卤虫雌激素相关受体基因(ERR)的表达特性分析

雌激素通过其相关受体进而影响动物的生殖发育与成熟。为了探究雌激素相关受体基因ERR在孤雌卤虫卵巢发育和成熟过程中发挥的作用,本研究对孤雌卤虫(Artemia parthenogenetica)的ERR基因进行了克隆及相关生物信息学分析,并对该基因在不同组织(卵巢、头部、躯干)和卵巢在不同发育时期〔卵黄发生早期(early oocytes,EO)、卵黄发生晚期(late oocytes,LO)、早期胚胎(early embryos,EE)、晚期胚胎(later embryos,LE)〕的表达特征进行了探究。结果显示,ERR基因的开放阅读框(ORF)长1536 bp,共编码521个氨基酸,编码蛋白质的相对分子质量和等电点分别为5.7114×10^(4)和5.06,该蛋白质具有两个结构域,没有信号肽和跨膜结构。蛋白质的二级结构主要以无规则卷曲(46.97%)和α-螺旋(40.7%)为主,三级结构与二级结构的结果一致。在NJ系统进化树中,孤雌卤虫(A.parthenogenetica)与大型溞(Daphnia magna)和苏拉威西秀体溞(Diaphanosoma celebensis)最为相近,而与湿木白蚁(Zootermopsis nevadensis)、台湾乳白蚁(Coptotermes formosanus)的亲缘关系较远。表达特征结果显示,ERR基因在孤雌卤虫头部组织中的表达量显著高于卵巢组织和躯干组织中的表达量,且随着卤虫卵巢的发育,表达量逐渐上升,在EE达到最高,随后在LE显著下降(P<0.01)。

乳腺癌患者人乳头状瘤病毒感染与癌组织凋亡相关蛋白雌激素受体、孕激素受体、表皮生长因子受体-2表达水平相关性分析

目的:探究乳腺癌患者人乳头状瘤病毒(HPV)感染与癌组织相关蛋白雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)以及表皮生长因子受体-2(C-erbB-2)表达水平之间关系。方法:选取宜都市人民医院2020年12月~2023年1月134例乳腺癌患者及同期56例乳腺良性病变患者为研究对象,所有患者均行手术治疗,手术期间收集患者病灶组织,术后病理检查测定组织中HPV感染率以及雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、C-erbB-2蛋白表达情况,分析HPV感染与ER、PR、C-erbB-2表达情况之间关系。结果:乳腺癌组织HPV16/18感染率显著高于乳腺良性病变,差异有统计学意义(P<0.05);乳腺癌组织ER、PR阳性率低于乳腺良性病变,C-erbB-2蛋白阳性率显著高于乳腺良性病变,差异有统计学意义(P<0.05);乳腺癌HPV16/18感染患者ER阳性率、PR阳性率低于无HPV16/18感染患者,C-erbB-2阳性率高于无HPV16/18感染患者,差异有统计学意义(P<0.05);多元Logistic回归分析结果显示ER、PR、C-erbB-2阳性率是宫颈癌组织HPV16/18感染影响因素,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:HPV感染、ER、PR、C-erbB-2表达与乳腺癌发病关系密切,HPV感染后其可能经由调节癌组织凋亡相关蛋白ER、PR、C-erbB-2表达水平介导乳腺癌发生以及进展。

雌激素相关受体ERR的功能及其调控

雌激素相关受体(estrogen-relatedreceptor,ERR)属于核受体超家族,是第一个发现的孤儿核受体,包括ERRα,ERRβ和ERRγ.ERR的生物学功能主要体现在以不同的方式参与雌激素信号途径,ERR与雌激素受体(estrogenreceptor,ER)在骨骼组织和乳腺组织中拥有共同的靶基因,其中ERRα和ERRγ的表达状况还可作为乳腺癌诊断标志.另外,ERR还在代谢调控中起重要作用.由于至今未在体内找到ERR的小分子配体,因而找到ERR活性调节因子对理解与雌激素相关的疾病如骨质疏松症、乳腺癌和糖尿病等将是非常有用的.

毒杀芬对孤儿受体雌激素相关受体1(ERRα-1)的拮抗作用

目的 研究毒杀芬 (Toxaphene)对孤儿受体雌激素相关受体 1 (Estrogen relatedreceptor,ERRα 1 )活性的影响。方法 细胞瞬时和稳定转染及氯霉素酰基转移酶和芳香族化酶活性测定。结果 毒杀芬抑制了由ERRα 1所介导的氯霉素酰基转移酶的转录表达和辅活化子 (Coactivator)GRIP1诱导的ERRα 1的活性。在构建的稳定高表达ERRα 1的HepG2肝癌细胞株中 ,ERRα 1增加了芳香族化酶的转录表达 ,ERRα 1高表达细胞株与 1 0 μmol/L浓度的毒杀芬温育 2 4h后 ,芳香族化酶活性降低到非ERRα 1转染的HepG2细胞中芳香族化酶活性的水平。结论 毒杀芬是ERRα 1的拮抗剂 ,它拮抗了ERRα 1调节芳香族化酶转录的作用 ,从而使该酶的表达量降低。

雌二醇经雌激素受体调控分拣蛋白相关受体A对小鼠海马神经元树突棘密度和突触蛋白表达的影响

目的探讨雌二醇(E_(2))调控分拣蛋白相关受体A(SorLA)表达对小鼠海马神经元树突棘密度和突触蛋白表达的影响及机制。方法32只C57BL/6雌性小鼠随机分为假手术(sham)组、卵巢切除(OVX)组、卵巢切除+E_(2)组(OVX+E_(2))组、卵巢切除+氟维司琼(Fu)+E_(2)组(OVX+Fu+E_(2))组,通过Western blotting和免疫组织化学染色检测小鼠海马CA1区SorLA表达;40只C57BL/6雌性小鼠随机分为假手术+空白病毒(sham+NC-sgRNA)组、卵巢切除+空白病毒(OVX+NC-sgRNA)组、卵巢切除+空白病毒+E_(2)(OVX+NC-sgRNA+E_(2))组、卵巢切除+SorLA敲降病毒+E_(2)组(OVX+Sorl1-sgRNA+E_(2))组,通过高尔基染色检测小鼠海马CA1区神经元树突棘密度;通过Western blotting和免疫组织化学染色检测小鼠海马CA1区突触后致密蛋白95(PSD-95)和突触蛋白1(SYN1)表达。结果与sham组相比,和OVX组和OVX+Fu+E_(2)组SorLA蛋白表达显著降低(P<0.05),和OVX+E_(2)组差异无显著性(P>0.05);与sham+NC-sgRNA组相比,OVX+NC-sgRNA组和OVX+Sorl1-sgRNA+E_(2)组树突棘密度和PSD-95、SYN1表达显著降低(P<0.05),与OVX+NC-sgRNA+E_(2)组差异无显著性(P>0.05)。结论E_(2)可通过雌激素受体上调SorLA表达,进而增加小鼠海马神经元树突棘密度和突触蛋白表达。

老年脑梗死后认知功能障碍患者血清骨钙素、G蛋白耦联雌激素受体30水平变化及其与预后的相关性研究

目的研究老年脑梗死后认知功能障碍患者血清骨钙素、G蛋白耦联雌激素受体30(GPER 30)水平变化及其与预后的相关性,为评估患者预后提供参考。方法选取2021年1月至2022年10月平顶山市第二人民医院收治的115例老年脑梗死患者为研究对象,于脑梗死后第3天采用蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评估患者的认知功能,根据有无认知功能障碍分为障碍组(54例,MOCA评分≤26分)和无障碍组(61例,MOCA评分>26分),比较两组患者的一般资料及血清骨钙素、GPER 30水平,同时比较不同认知障碍程度患者及障碍组中预后良好组和预后不良组患者的骨钙素、GPER 30蛋白相对灰度值、GPER 30 mRNA相对表达量,采用多因素Logistic回归分析老年脑梗死后认知功能障碍的影响因素,采用Spearman分析障碍组血清骨钙素、GPER 30水平与认知障碍程度及预后的相关性。结果两组患者的年龄、神经功能缺损(NIHSS)评分、骨钙素、GPER 30蛋白相对灰度值、GPER30 mRNA相对表达量比较,差异均有统计学意义(P<0.05);经Logistic回归分析结果显示,年龄、NIHSS评分、骨钙素、GPER 30蛋白相对灰度值、GPER 30 mRNA相对表达量均是老年脑梗死患者认知功能障碍发生的影响因素(P<0.05);不同认知障碍程度患者的骨钙素、GPER 30蛋白相对灰度值、GPER 30 mRNA相对表达量比较,轻度>中度>重度,差异均有统计学意义(P<0.05);经Spearman分析结果显示,血清骨钙素、GPER 30蛋白相对灰度值、GPER 30mRNA相对表达量与老年脑梗死后认知障碍程度呈正相关(r=0.784、0.715、0.673;P<0.05);障碍组预后良好患者血清骨钙素、GPER 30蛋白相对灰度值、GPER 30 mRNA相对表达量水平明显高于预后不良组,差异均有统计学意义(P<0.05);经Spearman分析结果显示,血清骨钙素、GPER 30蛋白相对灰度值、GPER 30 mRNA相对表达量与老年脑梗死后认知障碍预后呈负相关(r=-0.675、-0.663、-0.584;P<0.05)。结论骨钙素、GPER 30蛋白相对灰度值、GPER 30 mRNA相对表达量是老年脑梗死患者认知功能障碍发生的影响因素,其水平变化与认知障碍严重程度及预后均存在相关性。

G蛋白耦联雌激素受体在癌症相关成纤维细胞中的活化对乳腺癌转移的作用及其中药干预研究

乳腺癌的转移是其临床治疗面临的重点和难点,其侵袭性的高低受周围基质的影响很大。癌症相关成纤维细胞(CAFs)是肿瘤基质的重要成分,同时也是新型膜雌激素受体——G蛋白耦联雌激素受体(GPER)阳性细胞。研究表明,GPER可能是作用于癌细胞与肿瘤微环境(TM)的多种重要传导因子之间的关键交叉点,GPER在CAFs中活化对乳腺癌发生、发展和转移过程中发挥着重要的作用。多种中药单体的抗乳腺癌作用也与其靶向激活CAFs中的GPER通路是相关的。现就GPER在CAFs中的活化机制及其对乳腺癌转移的作用、中药单体对该过程的干预研究进行综述,以期为寻找乳腺癌治疗的新靶点、拓展乳腺癌症治疗策略提供思路。

几种昆虫雌激素相关受体基因(ERR)的生物信息学分析

采用生物信息学的方法和工具对已在GenBank上注册的黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)、致倦库蚊(Culex pipiens quinquefasciatus)、埃及伊蚊(Aedes aegypti)、意大利蜜蜂(Apis mellifera)、丽蝇蛹集金小蜂(Nasonia vitripen-nis)的雌激素相关受体ERR的核酸及氨基酸序列进行分析,并对其组成成分、理化性质、疏水性/亲水性、蛋白质二级及三级结构、分子系统进化关系等进行了预测和推断.结果表明:昆虫ERR是一个亲水性蛋白.在ERR整体蛋白结构中α-螺旋和不规则卷曲是ERR最大量的结构元件,而β-折叠则散布于整个蛋白质中.ERR蛋白的DNA结合区(DBD)主要由三个α-螺旋和三个β-折叠构成,包含两个锌指结构.配体结合区(LBD)主要由3个β-折叠和11个α-螺旋构成.

雌激素相关受体a对脑胶质瘤细胞耐受替莫唑胺的影响

目的:探究雌激素相关受体a对脑胶质瘤细胞耐受替莫唑胺(temozolomide,TMZ)的调控作用及其机制。方法:建立耐受TMZ的胶质瘤细胞株,并构建胶质瘤裸鼠移植模型;从离体和在体层面分析特异性敲减ERRa或使用ERRα反向激动剂XCT790对耐药胶质瘤细胞增殖的影响;并结合荧光定量PCR实验检测Wnt通路相关基因的表达。结果:敲减ERRα或给予XCT790均显著抑制耐药胶质瘤细胞增殖,并抑制Wnt5a信号通路关键基因的表达,动物模型中XCT790联用TMZ可有效抑制耐受TMZ的胶质瘤细胞生长。结论:抑制ERRa功能可逆转胶质瘤细胞对替莫唑胺的耐药性,这一作用可能与抑制Wnt5a信号通路的功能密切相关。

肺腺癌转移相关转录本1、Fas相关死亡结构域蛋白、雌激素相关受体α在乳腺癌中的表达及与患者临床分期和预后的关系

目的探讨肺腺癌转移相关转录本1(MALAT1)、Fas相关死亡结构域蛋白(FADD)、雌激素相关受体α(ERRα)在乳腺癌中的表达及与患者临床分期和预后的关系。方法选取122例乳腺癌患者,取其乳腺癌组织及相应癌旁组织,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测MALAT1的相对表达量,免疫组化法检测FADD、ERRα蛋白的表达情况。比较不同临床分期及预后乳腺癌患者乳腺癌组织中MALAT1、FADD、ERRα的表达情况。绘制受试者工作特征(ROC)曲线,计算曲线下面积(AUC),评估MALAT1、FADD、ERRα单独及联合检测对乳腺癌患者预后的预测价值。结果乳腺癌组织中MALAT1的相对表达量、ERRα阳性表达率均明显高于癌旁组织(P﹤0.01),FADD阳性表达率明显低于癌旁组织(P﹤0.01)。Ⅲ~Ⅳ期乳腺癌患者乳腺癌组织中MALAT1的相对表达量、ERRα阳性表达率均明显高于Ⅰ~Ⅱ期患者(P﹤0.01),FADD阳性表达率明显低于Ⅰ~Ⅱ期患者(P﹤0.01)。随访1年,死亡23例,生存99例,生存率81.15%(99/122),死亡乳腺癌患者乳腺癌组织中MALAT1的相对表达量、ERRα阳性表达率均明显高于生存患者(P﹤0.01),FADD阳性表达率明显低于生存患者(P﹤0.01)。ROC曲线显示,MALAT1、FADD、ERRα联合检测预测乳腺癌患者预后的AUC为0.872(95%CI:0.813~0.941),高于各指标单独检测。结论MALAT1、FADD及ERRα在乳腺癌组织中异常表达,可能与患者临床分期、预后有关,上述因子联合检测对乳腺癌患者预后的评估价值较高。

罗氏沼虾雌激素相关受体(ERR)基因原核表达与纯化

根据已知罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)雌激素相关受体基因序列(Gen Bank登录号KU899089),设计含有酶切位点的特异性引物,PCR扩增得1 374 bp的开放阅读框序列,构建原核表达载体p ET-32a-ERR,并优化诱导浓度、诱导时间、诱导温度等表达条件。结果表明,ERR蛋白在温度35℃、IPTG浓度0.1 mmol/L条件下,诱导4 h时表达量较佳。

双酚A(BPA)与黑腹果蝇雌激素相关受体(dERR)的结合模式及对其基因表达的影响

【目的】雌激素相关受体(estrogen-related receptors,ERRs)属于核受体(nuclear receptor,NR)超家族,在昆虫新陈代谢和能量转换调节中发挥重要作用。双酚A(bisphenol A,BPA)与昆虫生殖和神经系统疾病有关。本研究旨在探究BPA影响黑腹果蝇Drosophila melanogaster ERR(dERR)的作用机理。【方法】通过AutoDock Vina模拟小分子BPA与Modeller 9.25构建的dERR蛋白的分子对接,使用Gromacs 5.1.9进行分子动力学模拟,并结合自由能的计算探究BPA与dERR的结合模式。利用qRT-PCR方法检测3种浓度(0.1,1和10μg/L)BPA处理6,12和24 h对黑腹果蝇成虫和2龄幼虫中dERR基因转录水平的影响。【结果】通过分子对接和极性溶剂化能发现,Phe370及Leu334等侧链氨基酸是BPA与dERR结合的关键氨基酸。qRT-PCR分析显示,不同浓度的BPA处理6和12 h时黑腹果蝇成虫和2龄幼虫中dERR基因转录水平均发生显著变化,而0.1μg/L BPA处理24 h时的几乎接近对照。【结论】BPA能够影响黑腹果蝇体内dERR的表达,作用机理可能跟BPA与dERR的潜在特异性结合有关。

雌激素受体基因多态性与复发性流产的相关性研究

目的 探讨雌激素受体 (ER)基因多态性与复发性流产的相关性。方法 取实验组与对照组妇女外周血 ,采用聚合酶链式反应 限制性片段长度多态性 (PCR RFLP)方法研究ER基因的XbaⅠ和PvuⅡ酶切多态性 ,通过统计学分析探讨ER基因的多态性分布与复发性流产的关系。结果 ER基因PvuⅡ酶切多态性分布与复发性流产存在显著相关性 (P <0 .0 1) ,而ER基因XbaⅠ酶切多态性分布与复发性流产无显著相关性 (P >0 .1)。结论 ER基因PvuⅡ酶切多态性分布与复发性流产显著相关 (P <0 .0 1)。

雌激素受体相关受体α与雌激素受体在子宫内膜癌组织中的表达

目的雌激素受体(estrogen receptor,ER)α、β在子宫内膜癌的发生发展中起着非常重要的作用。有研究提示,雌激素受体相关受体α(estrogen receptor-related receptorα,ERRα)与ER竞争配体也参与子宫内膜癌的发生,但详细的机制尚不明了。文中研究的目的是检测ERRα和ERα、ERβ在子宫内膜癌中mRNA的表达水平,并探讨其关系。方法采用real-time TaqMan PCR定量的方法,检测37例子宫内膜癌组织(内膜癌组)、25例癌旁组织(癌旁组)以及20例正常子宫内膜(对照组)中ERRα和ER亚型mRNA的表达量。结果3组患者中所有受体均有表达,在内膜癌组中,ERα和ERβ表达水平较对照组明显下降(P<0.05),ERRα的表达水平明显升高(P<0.05)。癌旁组患者的所有指标与癌组织和正常内膜组织相比均显著升高(P<0.05)。结论子宫内膜癌组织中ERα、ERβ低表达,而ERRα相对高表达,癌旁组织中3种受体均为高表达,说明癌组织中部分ERα、ERβ失活,ERRα在内膜细胞向癌细胞进展过程中起着非常重要的调节作用。

实时荧光定量PCR分析雌激素受体相关受体α,β,γ与雌激素受体α,β在卵巢癌中mRNA的表达模式

目的:明确孤儿受体—雌激素受体相关受体(estrogen receptor-related recep-tor,ERRs)各亚型以及雌激素受体亚型在卵巢癌中mRNA的表达模式。方法:采用Light-Cycler-PCR定量检测40例卵巢癌标本以及15例正常卵巢组织中各种ERRs亚型和ERs亚型mRNA的表达丰度。采用ELISA方法分析各样本血清CA-125水平。结果:卵巢癌组织中ERRαmRNA表达的丰度和阳性表达率显著高于正常卵巢组织(P=0.04和P=0.02),ERRβ在卵巢癌组织和正常卵巢组织中的RNA表达的丰度和阳性表达率差异无统计学意义(P>0.05);ERRγmRNA在正常卵巢以及卵巢癌组织中表达的丰度差异无统计学意义(P>0.05),但卵巢癌组织中ERRγ的阳性表达率显著增高(P=0.045)。ERRs家族和ERs家族在卵巢癌中有很高的共同表达率,ERα/ERRα的比率在卵巢癌组织中明显下降(P=0.0412)。结论:ERRs与ERs在卵巢癌中有共同表达,两个家族间的相互作用可能是卵巢癌复杂的肿瘤内分泌生物学行为的分子基础。

雌激素相关受体及其在雌激素信号转导体系中的作用

雌激素生理效应的发挥是通过靶细胞雌激素受体介导的;但近年来发现,孤儿受体中的一种枛雌激素相关受体也参与了雌激素信号转导体系,并与雌激素受体传导通路相互交叉、相互影响,在雌激素相关生理和病理过程的发生和调节中也发挥着重要的作用。本文将就雌激素相关受体的组成、结构、功能及其与雌激素相关病理过程间的关系进行综述。

雌激素受体基因多态性与女性脑出血的相关性研究

目的 探讨中国汉族女性人群中雌激素受体 (estrogenreceptor,ER)基因PvuII酶切多态性与脑出血的相关性。方法 采用病例 -对照研究方法和PCR RFLP方法 ,检测 63例脑出血及 160名健康人对照的ER基因PvuII酶切多态性 ,用多元Logistic回归模型分析与脑出血的相关性。结果 经年龄、吸烟、饮酒、文化程度、高血压、糖尿病、冠心病调整后 ,①经年龄分层 ,在≥ 6l岁组中ER基因PvuII酶切多态性的Pp基因型致脑出血发病危险性显著增加 (OR =4 78,P =0 0 3 9) ;②ER基因PvuII酶切多态性与高血压对脑出血的发生具有明显协同作用。结论 ER基因PvuII酶切多态性可能与≥ 61岁的中国汉族女性人群脑出血具有相关性。

中国鲎(Tachypleus tridentatus)雌激素相关受体基因的克隆与分析

采用RT-PCR、RACE、Genome Walking等方法从中国鲎克隆得到了雌激素相关受体基因的cDNA全长及基因组DNA序列,命名为ttERR(GenBank登录号为HQ386702),并采用生物信息学方法对其序列和编码的蛋白质的理化性质、分子系统进化关系等进行预测和推断。结果表明,ttERR基因cDNA全长2722bp,包含一个1413bp的开放阅读框、626bp的5’-UTR和683bp的3’-UTR,编码一个由470个氨基酸组成的蛋白质。ttERR基因由10个内含子和11个外显子组成。系统发育分析表明,ttERR属于核受体超家族第三亚族。本文为将来深入研究中国鲎ttERR的功能奠定了基础。

芳香化酶和雌激素相关受体在人骨髓间充质干细胞中的表达

背景:骨髓间充质干细胞中可能存在芳香化酶和雌激素受体相互作用的雌激素信号途径,调控骨髓间充质干细胞生物活性。目的:观察成人骨髓间充质干细胞成骨诱导分化过程中芳香化酶和雌激素相关受体的表达。方法:将骨髓间充质干细胞分为单纯培养组和成骨诱导组,分别用低糖DMEM完全培养基和成骨诱导分化完全培养基培养,MTT检测细胞增殖能力,茜素红染色观察成骨矿化能力,q PCR和Western blot检测芳香化酶、雌激素受体α、雌激素受体β和雌激素受体相关受体αm RNA和蛋白表达,ELISA检测细胞上清液和裂解液中雌二醇水平。结果与结论:培养72 h,成骨诱导组增殖能力最强;培养21 d,成骨诱导组茜素红染色显示大量钙沉积;q PCR和Western blot结果显示成骨诱导组能促进芳香化酶和雌激素受体αm RNA和蛋白表达,抑制雌激素受体相关受体αm RNA和蛋白表达,成骨诱导组雌激素受体βm RNA和蛋白表达与单纯培养组无差异;ELISA结果显示成骨诱导组上清液中雌二醇水平高于裂解液及单纯培养组上清液中雌二醇水平。结果表明成人骨髓间充质干细胞及成骨诱导分化后能表达芳香化酶、雌激素受体α、雌激素受体β和雌激素受体相关受体α,亦能自身合成和分泌雌激素,由此产生的雌激素可能是通过相关受体对骨髓间充质干细胞成骨分化发挥作用。