不同干燥方式对钠基蒙脱石吸附雌酮的影响研究

为了探明2种干燥方法对钠基蒙脱石吸附的影响及机制,通过冻干和110℃烘干方式分别制备钠基蒙脱石并作为吸附剂,以雌酮(E1)为吸附质,考察2种不同干燥方式下制备的钠基蒙脱石对E1的等温吸附和吸附动力学,并分析pH值对吸附的影响。结果表明,冻干钠基蒙脱石比表面积和孔容积均大于烘干钠基蒙脱石,2种处理方式对钠基蒙脱石官能团影响较小。吸附动力学结果显示,2种蒙脱石对E1均具有较快的吸附速率,冻干钠基蒙脱石45 min达到吸附平衡,烘干钠基蒙脱石20 min达到吸附平衡。其中,冻干钠基蒙脱石符合拟一级动力学方程,烘干钠基蒙脱石符合拟二级动力学方程。吸附等温线结果表明,冻干钠基蒙脱石对E1的吸附亲和力明显高于烘干钠基蒙脱石。pH值对2种钠基蒙脱石吸附E1的影响相似,pH呈强酸性或碱性均不利于钠基蒙脱石对于E1的吸附,pH值为6左右时吸附效果最好。

绝经后患者雌酮及其代谢物与乳腺癌的相关性

目的:探讨循环雌酮(Estrone,E1)、2-羟雌酮(2-hydroxyestrone,2-OHE1)、16α-羟雌酮(16α-hydroxyestrone,16α-OHE1)水平及2-OHE1∶16α-OHE1比值与绝经后乳腺癌的相关性。方法:采用ELISA法检测绝经后40例乳腺癌、21例乳腺纤维腺瘤和19例乳腺病患者循环E1、2-OHE1和16α-OHE1水平并计算2-OHE1∶16α-OHE1比值。结果:3组患者循环E1、16α-OHE1水平和2-OHE1∶16α-OHE1比值差异无统计学意义(P>0.05),3组患者2-OHE1水平差异有统计学意义(P<0.05),乳腺癌组较乳腺病组低,差异有统计学意义(P<0.05)。循环E1、2-OHE1、16α-OHE1水平和2-OHE1∶16α-OHE比值与雌激素受体(Estrogen receptor,ER)、人表皮生长因子受体2(HER2)情况、腋窝淋巴结转移情况以及肿瘤大小无关(P>0.05)。乳腺癌危险性与2-OHE1∶16α-OHE1比值无相关性[OR,0.828;95%CI for exp(B),0.425～1.611;P=0.578],与2-OHE1呈负相关性[OR,0.418;95%CI for exp(B),0.180～0.971;P=0.043]。结论:实验结果提示2-OHE1水平与乳腺癌危险性呈负相关,未发现2-OHE1∶16α-OHE1比值预示乳腺癌危险性。

妊娠妇女血中雌酮和硫酸雌酮的测定

本文测定了30例妊娠妇女周围静脉血中的雌酮简称E_1(estrone)和硫酸雌酮简称E_1-S(estrone sulfate),采用乙烯醋酸抽提,LH-20 Sephadex柱分离E_1,高效液相色谱仪分离E_1-S。分离E_1-S所用的流动相为50%CH_3CN,50% 0.02M phosphate和2.5g CIMABr。收集的E_1-S片段液经酶解,然后同E_1片段分别用放射免疫法测定。结果是妊娠妇女血中E_1和E_1-S随妊娠周数的增加而增加,其变化关系可分别用以下回归曲线方程描述。妊娠早、中、晚各期的平均值与正常月经周期妇女比较有显著和非常显著差别(P<0.05,P<0.001和P<0.001),反映了妊娠期随着胎儿-胎盘功能的逐步建立,甾体激素除游离型的含量渐增加外,结合型的含量也逐渐增加。本文结果又表明妊娠期随妊娠周数的增加,E_1-S和E_1含量的增加呈非常显著相关性,r=0.95(r_(0.001)=0.46)提示妊娠期随着妊娠周数的增加,游离型和结合型激素的内在调节。为有利于提高胎儿产前监护的正确性,可研究各种游离和结合型的甾体激素。

高效液相色谱-串联质谱法测定海水中雌酮、雌二醇、雌三醇

建立了测定海水中雌酮、雌二醇和雌三醇的高效液相色谱-串联质谱的分析方法。样品的提取方法为固相萃取,流动相为乙腈和0.1%氨水,梯度洗脱,流速0.2 mL/min,运行时间10 min。质谱采用负离子扫描模式,定量的碎片离子分别是：雌酮：269.02/144.99;雌二醇：271.04/182.96;雌三醇：287.03/170.94。仪器检出限均为0.001 ng,方法检出限均为0.2 ng/L。回收率分别是78.0-110.0%,82.2-103.2%,76.4-95.1%。该方法适用于海水中雌激素类物质的检测。

超快速液相色谱-串联质谱法检测人血清中雌酮、雌二醇及雌三醇的方法学研究

建立灵敏、可靠、稳定的柱前衍生化超快速液相色谱-串联质谱（ultra-fast liquid chromatography-mass spectrometry,UFLC-MS/MS）方法检测人血清中超微量雌酮、雌二醇和雌三醇。方法：取200μL血清样品,采用两步液萃取法,通过丹磺酰氯衍生化后进行样品分析,以雌二醇-d3作为内标。采用Welch Ultimate UHPLC XB-C18色谱柱（2.1mm×50mm,1.8μm）,乙腈-水（含0.1%甲酸）为流动相,梯度洗脱,流速0.20mL/min,柱温40℃,进样量10μL。在电喷雾离子（electrospray ionization,ESI）源正离子模式下,选择多反应监测（multiple reaction monitoring,MRM）模式。经检测,雌酮、雌二醇、雌三醇及内标的检测离子对分别为：m/z为504.0→171.0、m/z为506.0→171.0、m/z为522.0→171.0和m/z为509.0→171.0。结果：丹磺酰氯衍生法可大幅度提高雌酮、雌二醇、雌三醇在ESI源下的离子化效率,血清中3种成分的线性范围均为0.01-5.00μg/L,定量下限均达到10ng/L,样品回收率50%以上,批内、批间准确度与精密度均小于15%,满足生物样品的分析要求。结论：该方法灵敏度高、重现性好,可以用于临床血清样品中雌激素水平的定量分析。

高效液相色谱-串联质谱法测定青菜中雌酮、雌二醇和雌三醇残留

为了监测蔬菜被粪源类固醇激素污染状况,本试验建立同时测定青菜中雌三醇、17β-雌二醇、17α-雌二醇和雌酮残留量的高效液相色谱-串联质谱方法。青菜经乙腈超声提取,C18 固相萃取柱去除杂质,氮吹浓缩处理后,用梯度洗脱上机检测。结果显示：青菜中雌三醇、17β-雌二醇、17琢-雌二醇和雌酮得到很好的分离,标准曲线在10 ng/ ml至1 000 ng/ ml浓度范围内呈线性关系,相关系数逸0.999,各自的保留时间分别为2.6 min、8.2 min、8.9min 和9.9 min;当添加浓度为50 μg/ kg、100 μg/ kg和500 μg/ kg时,雌三醇、17β-雌二醇、17α-雌二醇和雌酮在青菜中的平均回收率分别为75. 15%-86.32%、73. 82%-83.21%、72. 01%-81.33% 和81. 08%-90.35%,相对标准偏差为1. 03% -6.19%,该方法17β-雌二醇和17α-雌二醇的定量限均为10 μg/ kg,雌三醇的定量限为5 μg/ kg,雌酮的定量限为1 μg/ kg。表明该方法适用于蔬菜中雌三醇、17β-雌二醇、17α-雌二醇和雌酮残留的同步快速检测。

同期发情剂四烯雌酮的应用进展

四烯雌酮是一种具有口服活性的合成孕激素,可有效调控母畜发情周期,促进其同期发情。论文对四烯雌酮的药理学和毒理学特征等研究进展进行了综述,并分析和展望了其未来研究趋势,以期为该药的合理应用提供有价值的参考。

控温相变免疫分析测定雌酮

通过热引发聚合与氧化还原引发聚合 ,合成水凝胶 ,作为雌酮全抗原 (E1 BSA)载体 ;以异硫氰基荧光素标记雌酮的单克隆抗体 (McAb )作为示踪剂 ,建立了控温相变竞争免疫分析测定雌酮 (E1 )的方法并应用于分析血清样品。实验表明 :以热引发聚合合成的水凝胶为载体的荧光免疫分析方法具有更高的灵敏度 ,它的线性范围为 1 0～ 70 0 μg L ,检出限为 1 μg L(n=1 0 ,3倍空白 )。经水凝胶性质的比较 (包括LCST、非特异性吸附、抗原与抗体反应时间及固定化抗原活性 ) 。

雌酮、17β－雌二醇与17α－乙炔基雌二醇在污水样中的稳定性研究

雌酮(E1)、雌二醇(E2)和炔雌醇(EE2)在ng.L-1的浓度水平即可干扰生物的内分泌系统,在英国即将被限制排放。论文研究了在三种水样保存方式下污水厂进水和尾水中E1,E2和EE2浓度的变化。研究显示:(A)在4℃,避光保存,三种雌激素在进水样中降解率为22%、34%和4%;在尾水样中则分别为14%、26%和2%。(B)在4℃避光及pH=2(英国环保署常规有机污染物保存方法)保存条件下,E1、E2和EE2在2天内在进水样中的损失率为8%、20%和4%;在尾水样中的损失率分别为4%、17%和1%。(C)在水样中加入Cu(NO3)2抑制剂至250mg.L-1并用HCl调节至pH=3在低于10℃避光保存,可保证E1、E2和EE2在15天内损失<3%。采用方式C保存水样有利于提高分析检测E1、E2和EE2的准确度和重现性。

液相色谱串联质谱法检测人血清雌酮、雌二醇

目的建立同时测定人血清中雌酮（E1）及雌二醇（E2）水平的液相色谱串联质谱（LC-MS/MS）法,并初步应用于临床血清样品的雌激素检测。方法血清样品经乙酸乙酯提取,丹磺酰氯衍生化后进行LC-MS/MS分析。用Agilent ZORBAX SBC18色谱柱进行线性梯度洗脱,流动相为乙腈（0.05%甲酸）-水（0.05%甲酸）,流速为0.3 m L/min。用多重反应离子监测（MRM）正离子模式对血清中的E1、E2进行质谱检测,并根据＂生物样品定量分析方法验证指导原则（中国药典,2015）＂对该方法的特异性、线性范围、灵敏度、精密度、提取回收率和稳定性等进行评价。用本法对172例健康成年女性血清标本进行E1、E2检测,用百分位数法计算不同月经周期E1、E2的浓度区间。结果 LC-MS/MS法可同时检测人血清中E1、E2的含量,在0.05~10 nmol/L范围内线性关系良好。该法的定量限为0.05 nmol/L,日内与日间不精密度均小于15%,稳定性良好。初步临床应用显示,用LC-MS/MS法计算所得的E1、E2浓度区间符合女性月经周期生理性变化规律。结论 LC-MS/MS法能有效分离并定量检测人血清中E1、E2的浓度水平,其线性范围广、灵敏度高、精密度好,有望作为临床血清雌激素检测的参考方法。

UV-Vis/Fe(Ⅲ)/H_2O_2体系对水中雌酮的光降解

以250 w照明金属卤化物灯为光源,研究了水中雌酮(E1)在UV-Vis/Fe(Ⅲ)/H2O2体系中的光降解;考查了初始pH、Fe(Ⅲ)、H 2O2、E1初始浓度对E1光降解的影响.结果表明,UV-Vis/Fe(Ⅲ)/H2O2体系能有效地光降解E1,在[Fe(Ⅲ)]0=20.8μmol/L、[H2O2]0=1 664μmol/L、pH=3.0时,光照160 min,18.5xmol/L E1的光降解率可达98.4%;在pH 3.0～8.0范围内,pH初始值越小,E1降解率越大,反应初始速率越大;实验条件下,Fe(Ⅲ)、H2O2初始浓度越大,E1降解率越大,反应初始速率越大;E1初始浓度越低,E1降解率越大,反应初始速率越小.pH=3.0,实验浓度范围内的表观动力学方程为:-dCE1/dt=0.000 93[H 2O2]0.47[Fe(Ⅲ)0.62[E1]0.24;Fe(Ⅲ)是影响反应速率的主要浓度因素.

雌酮主动免疫对美利奴母羊发情产羔和生殖内分泌的影响

20头母羊在配种季节开始前6周和3周,用雌酮免疫原免疫2次(E组),13头不作处理为对照(C组)。免疫不影响母羊正常发情,可使母羊产羔率由115.38％提高到156.25％,发情当天的LH水平显著提高(3.06±0.61对1.93±0.88miu/ml);发情周期黄体期的孕酮水平亦增加,周期12天时差异显著(9.31±3.53对3.71±0.92ng/ml);整个发情周期内E组的睾酮水平显著高于C组,而17β-雌二醇水平两组间无差异。

雌二醇及雌酮对人子宫内膜细胞GJIC及连接蛋白的影响

【目的】探讨雌二醇(E2)及雌酮(E1)对体外培养的人子宫内膜腺上皮细胞及间质细胞间隙连接细胞间通讯(GJIC)及连接蛋白(Cx)43、32表达的影响。【方法】采用划痕染料标记示踪技术及激光共聚焦显微镜扫描技术(LSCM),观察E2及E1对原代培养的20例人子宫内膜腺上皮细胞及间质细胞GJIC的影响,采用激光共聚焦显微镜扫描技术,观察E2及E1对Cx 43、Cx 32表达的影响。【结果】5×10-5mol/L雌二醇作用48 h后间质细胞及腺上皮细胞GJIC功能没有明显变化(P>0.05),2.5×10-5mol/L雌酮作用间质及腺上皮细胞48 h后,细胞GJIC功能有所下降(P<0.01),同种Cx腺上皮细胞表达较间质细胞强(P<0.05),5×10-5mol/L E2、2.5×10-5mol/L E1对两种细胞Cx的表达没有影响(P>0.05)。【结论】E1抑制细胞GJIC功能,提示其在子宫内膜增殖性病变的阶段扮演重要角色;E1及E2均未影响子宫内膜细胞Cx43、Cx32的表达,提示Cx表达量不能完全反映GJIC功能。

生物素—亲和素体系测定雌酮

雌酮与牛血清白蛋白共价结合,合成雌酮的完全抗原.利用此抗原免疫小鼠,通过细胞融合技术制备了雌酮的单克隆抗体经纯化表征知,抗本是IgGl型,相对分子量为164000,与固定抗原的亲和常数为8 2×108L/mol. 以生物素化的羊抗鼠免疫球蛋白及辣根过氧化物酶标记的链亲和素为标记体系,通过竞争抑制的方式测定游离的雌酮.结果表明:雌酮在10～10000

KMnO4氧化降解雌酮反应动力学与氧化产物

为探讨KMnO_4氧化降解雌酮(E1)的效能和反应机理,在假一级条件下,研究KMnO_4氧化降解E1的动力学规律,利用三重四级杆串联线性离子阱液相-质谱联用仪(LC-MS/MS)对KMnO_4氧化降解E1的产物进行分析.结果表明,KMnO_4氧化降解E1符合假一级动力学规律,且假一级动力学常数Kobs(s-1)随着KMnO_4浓度的增加呈线性增加,二级反应动力学常数k(L·mol^(-1)·s^(-1))随着pH的升高而增大.通过与HOCl和O_3氧化E1对比,在中性p H附近,KMnO_4氧化E1的二级反应动力学常数与HOCl相当,但远低于O_3.然而,实际水体中KMnO_4的除污染效能明显高于HOCl和O_3,主要是由于HOCl和O_3在实际水体中的消耗速度比较快,有效剩余浓度低,而KMnO_4在实际水体中的消耗速度比较慢.LC-MS/MS测定KMnO_4氧化降解E1产物的结果表明,KMnO_4易氧化进攻E1苯环上的活性位酚羟基,形成一系列羟基化、醌型、羧酸化芳香开环产物,并且有效降低其内分泌干扰活性.

基于分子印迹材料的雌酮快速检测方法研究

以合成的雌酮分子印迹聚合物为微柱填料,建立了分子印迹聚合物富集雌酮原位显色反应的方法,并对影响测定结果的显色剂用量、填料量、上样流速和上样时间等主要实验参数进行了优化,在印迹材料填料量为0.030g,上样流速为1.0mL·min-1,1.00μg·L-1雌酮-甲醇标准溶液富集10.0mL条件下,再加入稀氢氧化钾-乙醇溶液1.0mL条件下,显色剂15.00g·L-1间二硝基苯溶液1.0mL,在暗处反应1h,最低检出限可达10.00μg·L-1。为了验证所建立的方法的实用性,本研究对湖水样品中的痕量雌酮残留进行了检测分析。通过对检测为空白的样品进行浓度为10.00,50.00,100.00μg·L-1的添加,以所建立的分析方法进行检测,结果均有比较明显的颜色反应,从而说明所建立的检测方法的可行性。

硫酸雌酮含量与母猪产仔数关系的研究

50头二白母猪(长白×苏白),于人工授精后10、20、30和40天经耳静脉采血,取血浆,用放射免疫法(RIA)测定血浆中硫酸雌硐(E_1S)含量。结果表明:在母猪妊娠30天时,血浆E_1S含量显著高于未妊母猪(P<0,01),而其它各点两者差异不显著,并且未妊母猪E_1S含量始终低于1ng/ml,因此,可以以妊娠30天时E_1S含量1ng/ml为判定妊娠与否的标准;妊娠30天E_1S含量与母猪产仔数呈显著正相(r=0.4032,P<0.01,n=46),据此,可以以妊娠30天E_1S含量初步预测产仔数高低,但其相关性未达到据E_1S含量推算产仔数多少,从而达到淘汰低产母猪的程度。

雌酮人工抗原的制备与鉴定

目的制备雌酮人工抗原。方法采用碳化二亚胺法将雌酮半抗原与载体蛋白牛血清清蛋白连接制备免疫耦联物,用紫外分光光度法测定耦联率,并测定兔抗体血清效价。结果测得耦联率比为12:1,血清抗体效价为6.4×103。结论该方法简便、结果准确可靠,可应用于雌酮免疫原合成。

CD58、雌酮及孕酮对附植早期山羊EML的体外活化

研究了 CD5 8、雌酮及孕酮对附植早期山羊子宫内膜淋巴细胞 (EML)体外活化作用的影响。结果表明 ,山羊红细胞源性 CD5 8(总玫瑰花结形成抑制率为 5 8.89% )能以剂量依赖方式促进妊娠 1 6、1 7及 2 0 d山羊 EML的体外活化。极低浓度的雌酮 (4 0 pg/m L)对妊娠 1 6d山羊 EML表现极显著的活化作用 ,对妊娠 1 7d山羊 EML只表现微弱的激活作用 ,对妊娠 2 0 d山羊 EML的激活作用不明显。生理水平的孕酮 (2 .5～ 1 0ng/m L)单独作用时 ,能以剂量依赖方式显著促进妊娠 2 0 d山羊

污水处理中雌酮的定量分析

采用酶联免疫吸附检测(ELISA)试剂盒定量分析了某采用生物脱氮活性污泥工艺的污水厂中的原水、一级处理出水、二级处理出水、尾水和出水口下游受纳河水中的雌酮浓度,分析方法的定量检测限为0.5 ng/L。ELISA分析中增加的凝胶色谱净化步骤可降低E1检测值73.0%的假阳性,使其检测结果平均值从液相色谱-飞行时间质谱联用(HPLC-MS(TOF))的对照分析结果平均值的1.52倍降为1.15倍。ELISA分析检测值的假阳性与水样的污染程度呈正相关。