氢溴酸常山酮对雏番鸭的毒副作用研究

本试验旨在研究氢溴酸常山酮对雏番鸭的毒副作用。选取1日龄天露白番公鸭972只,随机分为3个处理组,每个处理组6个重复,每个重复54只鸭,研究分别添加0、0.12、2.4mg/kg氢溴酸常山酮对雏番鸭胃肠道发育和生长性能的影响。试验结果表明:在饲粮中添加2.4mg/kg的氢溴酸常山酮会造成雏番鸭肌胃炎和肠道炎症,影响雏番鸭的生长性能,添加0.12mg/kg氢溴酸常山酮对雏番鸭的肌胃、肠道发育和增重无影响;鸡料和鸭料可共用生产线,但应做好洗仓工作,同时鸡预混料和鸭预混料需单独存放,避免交叉污染。

雏番鸭细小病毒病的病毒分离和鉴定

从以腹泻和呼吸困难为主要症状的雏番鸭肝、脾中分离到2株番鸭细小病毒(Muscovy Duckling Parvovirus,MPV)MPV-F和MPV-P。番鸭胚胎接种病毒后8～7天死亡,胚体呈弥漫性充血、出血。病毒能在番鸭胚肾(MDEK)细胞和番鸭胚成纤维(MDEF)细胞上增殖。雏番鸭人工感染病毒后出现与自然罹病者相似的症状,并回收到病毒。小鹅和雏半番鸭接种病毒后不出现临床症状。病毒耐乙醚、胰蛋白酶、酸和热。但是,对紫外线照射敏感。在电镜下病毒呈晶格排列,有实心和空心两种病毒粒子,直径为20～24nm,无囊膜。有4种结构蛋白;VP1(85kD)、VP2(70kD),VP3(56kD)和VP4(39kD),其中VP3是主要结构蛋白。病毒核酸为单链DNA,分子量约为5.1kb。酶联免疫吸附试验(ELISA),荧光抗体试验(FA)、胶乳凝集(LPA)试验、琼脂扩散沉淀(AGP)试验和中和试验(NT)中,MPV的单抗与鹅细小病毒(Gosling Parvovirus,GPV)不发生交叉反应,GPV单抗也不与MPV发生反应。证明MPV是雏番鸭以泻、喘为主要症状的疫病的病原,是细小病毒科的一个新成员。

番鸭呼肠孤病毒病雏番鸭实质器官的超微结构

对人工感染番鸭呼肠孤病毒发病雏番鸭的心、肝、肺、肾、脾脏、胸腺、法氏囊等7种实质器官的超微结构进行了观察。电镜下发现:心、肝、肺、肾等实质器官出现不同程度的细胞变性、水肿以及局灶性溶解坏死;各器官血管内皮细胞脂滴增多、水肿以至坏死脱落,通透性增加;浆细胞、淋巴细胞和吞噬细胞呈散在或灶性浸润于坏死区和实质细胞间。免疫器官脾脏、胸腺和法氏囊中的部分淋巴细胞、浆细胞坏死和不同程度凋亡,且细胞溶解坏死形成大小不一的坏死灶并被大量增生的吞噬细胞所吞噬,淋巴细胞数量明显减少。上述结果提示,番鸭呼肠孤病毒能导致番鸭免疫抑制。

雏番鸭胰腺型鸭1型甲肝病毒分离鉴定及VP1基因分析

采集自胰腺发黄或出血的雏番鸭病料经RT-PCR检测为鸭1型甲肝病毒阳性后,接种11日龄非免疫番鸭胚获得一株病毒(命名为MPZJ1206)。该株病毒在不同温度下均不凝集鸡、鸭和绵羊红细胞;鸭胚中和试验表明蚀斑纯化毒可被经典的鸭1型甲肝病毒高免血清特异性所中和。该株病毒对7日龄雏番鸭的致死率为38.5%,病死鸭剖检病变与临床发病鸭相同,且从病死鸭脏器中回收分离到的病毒经鉴定仍为鸭1型甲肝病毒。应用鸭1型甲肝病毒VP1基因特异性引物从该株病毒克隆获得的714bp的基因片段,与经典鸭1型甲肝病毒分离株Du/CH/LGD/111239VP1基因的同源性最高,为99.1%,经遗传进化分析表明该株病毒属鸭1型甲肝病毒谱系。以上结果表明,雏番鸭胰腺炎是由鸭1型甲肝病毒感染所致,这一新病型明显不同于经典的鸭1型甲肝病毒感染引起的肝脏出血,鉴于此,建议将本试验分离株命名为胰腺型鸭1型甲肝病毒。

番鸭呼肠孤病毒诱导雏番鸭免疫器官细胞凋亡的研究

以番鸭呼肠孤病毒腿部肌肉接种10龄健康雏番鸭,复制番鸭'花肝病',并研究其不同时期诱导免疫器官细胞凋亡的能力.结果表明,雏番鸭在感染病毒后的12 h、24 h、48 h、72 h、144 h均能观察到胸腺、脾脏、法氏囊细胞凋亡的典型形态学变化,在12～24 h达到高峰,72 h后逐渐降低.由此可知,雏番鸭呼肠孤病毒对雏鸭免疫器官的细胞凋亡具有诱导作用.揭示该病毒致病机理与淋巴细胞凋亡从而引起的免疫抑制相关.

雏番鸭胰腺和肠道消化酶活性变化规律研究

本试验以 0～ 3周龄雏番鸭为研究对象 ,分别测定 0 ,1,4 ,7,10 ,14 ,17和 2 1日龄雏番鸭胰腺和肠道中脂肪酶、淀粉酶、胰蛋白酶和总蛋白酶活性的变化。结果表明 :在胰腺中脂肪酶、淀粉酶、胰蛋白酶和总蛋白酶的活性分别在 4 ,14 ,10和 17日龄达到峰值 ;在肠道中 ,脂肪酶、淀粉酶、胰蛋白酶和总蛋白酶的活性分别在 10 ,14 ,17和 14日龄达到峰值。从消化酶的发育规律显示 10～

雏番鸭细小病毒病显微和超微结构研究

应用光镜和电镜技术研究了人工感染雏番鸭细小病毒病死鸭的心、肝、脾、肺、肾、胰、法氏囊和大脑等 8种器官的显微结构和发病鸭的心、肝、脾、肺、肾、胰等 6种器官的超微结构变化。结果如下 :1 显微结构变化主要表现为 :各器官的血管扩张、充血 ,以肺脏尤为严重 ,并见少量淋巴单核细胞浸润 ,同时心、肝、肾、胰和大脑均呈现不同程度的变性 ;而免疫器官脾、法氏囊则主要表现为淋巴细胞数量减少。 2 超微结构变化主要表现为 :(1)各实质细胞内线粒体肿胀 ,嵴变少或崩解 ,内质网减少 ,脂滴增多 ,部分细胞水肿坏死 ;(2 )血管内皮均有不同程度的脂滴增多 ,水肿以至脱落 ;(3)吞噬能力加强 ,表现为细胞内次级溶酶体增多 ,吞噬细胞数量增加 。

雏番鸭感染禽副黏病毒1型的分离鉴定

从呼吸困难、肠道粘膜出血、胰腺大量白色坏死点为特征的7日龄病死雏番鸭的肝脏中分离到1株病毒。经电镜观察发现该病毒为多形性有囊膜病毒,表面有呈辐射状分布的纤突;血清学鉴定表明,能在4℃下凝集鸡和鸽红细胞,其血凝活性能被NDV标准阳性血清特异性抑制。该病毒对10日龄SPF鸡胚的半数致死量(ELD50)和平均致死时间(MDT)分别为10-8.5/0.1 mL和63.2 h,对番鸭胚成纤维细胞的TC ID50为10-6.32/0.1 mL。经静脉和腿部肌肉两种途径分别接种10日龄雏番鸭和非免疫雏鸡,均可引起发病死亡,并从死亡雏番鸭和雏鸡中可回收到原攻击病毒。依据以上结果表明所分离病毒为中等偏强毒力的禽副黏病毒1型。

日粮锌水平对雏番鸭免疫器官中细胞凋亡及Fas表达的影响

为了探讨微量元素锌对雏番鸭主要免疫器官中细胞凋亡及Fas表达的影响,选取135只1日龄体况一致的健康番鸭随机分成3组,A组为低锌组,B组为对照组,C组为高锌组,分别饲喂含锌20、40和200mg/kg的日粮,试验期45d,通过TUNEL法和免疫组织化学法观察15、30、45日龄3组雏番鸭胸腺、法氏囊和脾脏中细胞凋亡的变化规律及Fas的表达情况。结果表明,15d时,胸腺、法氏囊中细胞凋亡数,A组极显著高于B组(P<0.01),B组显著高于C组(P<0.05);脾脏中细胞凋亡数A组显著高于B组(P<0.05),B组极显著高于C组(P<0.01);30d时,胸腺、法氏囊、脾脏中细胞凋亡数A组仍最多,与B、C组差异极显著(P<0.01),胸腺、法氏囊中细胞凋亡数C组和B组差异不显著(P>0.05),脾脏中细胞凋亡数C组显著地低于B组(P<0.05);45d时,胸腺和法氏囊中细胞凋亡数C组均显著高于B组(P<0.05),而脾脏则仍表现为C组最少(P<0.01)。Fas的表达情况与细胞凋亡规律具有一致性,但略有不同,主要表现为Fas蛋白表达的变化早于细胞凋亡。提示,低锌能够诱导雏番鸭免疫器官细胞凋亡,试验早期高锌抑制细胞凋亡,但是较长时间的添加高锌反而会诱导免疫细胞凋亡。细胞凋亡的死亡因子Fas的表达情况进一步表明,日粮锌对雏番鸭主要免疫器官中细胞凋亡的影响是通过Fas/Fas-L途径来调控的。

一种新的雏番鸭病毒性传染病的诊断

多年来,福建省福州、莆田等地禽场和专业户饲养的雏番鸭群不断发生一种以气喘、腹泻,以及胰脏坏死和出血为主要特征的传染病。发病多在7～20日龄(当地称“三周病”),死亡率在20～50%之间,严重威胁番鸭生产。经初步诊断认为其病原是细小病毒,现报告如下。

雏番鸭细小病毒病病毒分离鉴定

采集以腹泻、呼吸困难为主要症状的雏番鸭肝、脾病料 ,接种 14d龄非免疫番鸭胚 ,80 %胚在 3～ 7d死亡 ,胚体呈弥漫性充血、出血。接种番鸭胚成纤维原代细胞 72h可见细胞圆缩、聚团等变化。收集尿囊液及细胞培养物 ,以番鸭细小病毒 (Muscovyducklingparvovirus ,MDPV)阳性血清进行聚苯乙烯乳胶凝集 ,病料培养物均呈阳性反应 ,提取病料接种的尿囊液及细胞基因组DNA ,用自行设计引物PCR扩增到与设计相符的 60 0bp片段 ,经酶切鉴定 ,结果表明克隆到的片段为雏番鸭细小病毒特异性片段 。

雏番鸭细小病毒病的研究进展

本文对雏番鸭细小病毒病的临床症状、危害、病原学、疾病的诊断和防制等方面的研究进展进行了综述,重点介绍了该病的特征和病原的生物学特性,并对番鸭细小病毒新的研究方向做出了展望。

不同孵化温度对雏番鸭第二性比及孵化率的影响研究

试验研究孵化前期(1~10d)7个不同温度(36.3~39.3℃)对雏鸭出壳时第二性比(♂∶♀)和受精蛋孵化率的影响结果表明,不同孵化温度出壳的雏番鸭公母性别存在明显差异(P<0.01),且公雏率随温度升高而升高,母雏率随温度升高而下降;孵化前期温度为36.3~37.3℃时出壳雏番鸭公少于母,第二性比介于0.24~0.95;而孵化前期温度为37.8~39.3℃时出壳雏番鸭公多于母,第二性比为1.39~5.38;且只有在温度37.3℃和37.8℃时第二性比与遗传性比(1∶1)无差异(P>0.05),而其他温度时第二性比均表现明显差异(P<0.05或P<0.01)。雏番鸭第二性比与孵化前期温度间相关指数R2为0.99,预测误差率为-34.88%^+14.58%间,说明调控孵化温度可在一定程度上控制雏番鸭第二性比,孵化温度对受精蛋孵化率有明显影响,36.3~37.8℃内孵化率随温度的升高而升高,在37.8~39.3℃内则随温度的升高而降低。

雏番鸭基因IX型禽1型副黏病毒分离鉴定及F基因序列分析

自发病死亡雏番鸭中分离到一株（XBT14株）基因Ⅸ型禽1型副黏病毒,该病毒可引起雏鸭明显神经症状及急性死亡,致死率达44.4%;病毒融合（F）蛋白裂解位点处具有强毒株特有的多碱性氨基酸序列（112RRQRR↓F117）,与Gen Bank数据库中已发布的基因IX型毒株核苷酸序列同源性高达99.7%-99.9%,与基因VII型毒株核苷酸序列同源性为85.5%-86.6%。该分离株与近来报道的GD09-2等基因IX型毒株处于同一进化分支。以上结果表明对水禽致死性的禽1型副黏病毒呈现基因型多样性,水禽禽1型副黏病毒病的防控日益严峻。

雏番鸭“白点病”细菌分离及药敏试验

将从自患“白点病”雏番鸭体内分离出的大肠杆菌(1株)、沙门氏菌(1株)、多杀性巴氏杆菌(1株)、鸭疫里氏杆菌(8株)等革兰氏阴性杆菌作为供试菌株,以26种常用的抗菌药物进行体外的药物敏感性试验。结果表明:供试用的4种革兰氏阴性杆菌对头孢菌素类的头孢唑啉(4种菌)、头孢氨苄(大肠杆菌、沙门氏菌)、头孢拉定(大肠杆菌、沙门氏菌、鸭疫里氏杆菌)敏感,此类药物可作为防治本病细菌学上的首选药物。对喹诺酮类的氧氟沙星,氨基糖甙类的丁胺卡那霉素、新霉素、大观霉素、庆大霉素,大环内酯类的氯霉素、红霉素,多肽类的多黏菌素B等8种药物,不同的菌种有不同程度的敏感性,并在临床上取得一定的治疗效果。

锌对雏番鸭淋巴器官中肥大细胞数量的影响

选择1日龄健康雏番鸭45只,随机分为3组,分别喂以每kg含锌离子20mg、40mg、200mg的饲料,饲养期为45d。于15日龄、30日龄和45日龄每组随机宰杀5只,取法氏囊、脾脏、胸腺,Carnoy法固定,甲苯胺蓝染色,显微镜观察肥大细胞数量的变化规律。结果表明:15日龄时,低锌日粮组鸭子胸腺和脾脏的肥大细胞数量均比另外两组高,(P>0.05),而法氏囊中低锌日粮组肥大细胞数量比另外两组明显高(P<0.01)。30日龄时,低锌日粮组鸭子胸腺、脾脏和法氏囊中肥大细胞数量均比高锌日粮组显著增多(P<0.05),而与正常锌日粮组相比,差异不显著(P>0.05)。45日龄时,法氏囊高锌日粮组与低锌日粮组和正常锌日粮组差异显著(P<0.05);脾脏各组间差异不显著(P>0.05),但高锌日粮组肥大细胞数量最多;胸腺低锌日粮组与高锌日粮组和正常锌日粮组差异极显著(P<0.01)。因此,锌具有稳定免疫器官中肥大细胞数量的重要作用,但长时间添加高剂量锌反而会增加肥大细胞数量。