雏鸭肝炎病毒侵染下肝脏消减cDNA文库的构建及差异基因筛选

本研究通过构建雏鸭肝脏消减cDNA文库,旨在筛选并鉴定与雏鸭病毒性肝炎相关的基因,对相关基因进行功能聚类分析进而探究其作用机理。利用抑制性消减杂交(Suppression subtraction hybridization,SSH)技术构建3日龄健康全同胞金定鸭人工感染雏鸭肝炎病毒(Duck hepatitis virus,DHV)与同期注射等量生理盐水差异表达基因的SSH-cDNA文库。对其中563个阳性克隆进行测序,共获得299条差异表达序列标签(Expres sedsequence tags,ESTs)。去除冗余的cDNA序列载体并聚类拼接后,进行核酸和蛋白质同源性的比较和功能聚类分析。结果表明:有70个不同的基因与ESTs具有高度的同源性(E值<e-10,匹配长度>150bp,匹配度>80%),且多数基因与细胞组分合成、信号转导以及病理状态下的生物学调控过程相关。I型雏鸭病毒性肝炎的发生和发展是多基因多步骤的复杂过程,该结果为深入研究雏鸭肝炎病的分子调控机制提供基础。

Ⅰ型雏鸭肝炎病毒侵染后鸭组织中ALB基因表达的分析

检测Ⅰ型雏鸭肝炎病毒侵染后ALB基因mRNA以及ALB蛋白分别在肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、大脑、小脑、腿肌和胸腺等组织中的相对表达量和含量并分析其意义。分别利用实时荧光定量RT-PCR技术和ELISA法检测ALB基因在易感组、抗病组和对照组各组织中mRNA的表达量以及ALB蛋白含量。总体而言,除腿肌外,ALB基因mRNA在易感组中的表达量极显著低于对照组和抗病组(P<0.01),抗病组显著或极显著低于对照组(P<0.01或P<0.05);各处理组间,肝、小脑和胸腺中ALB蛋白含量与ALB基因mRNA相对表达量规律一致,在其他组织中,各处理组间ALB蛋白含量差异均不显著(P>0.05)。RT-PCR与ELISA的结果比较可见,两者在肝脏、胸腺、小脑等与雏鸭肝炎病直接相关的指示性组织中表现一致。本试验研究结果,进一步揭示了ALB基因为Ⅰ型雏鸭肝炎病的抗性基因,与前期抑制性消减杂交法得到的结果一致,其表达量的变化可以作为区分易感鸭和抗病鸭的标志。

高免蛋黄抗体中和雏鸭肝炎病毒(DHV)的效价测定

用鸭胚测定半数致死量并进行中和试验.测定了用雏鸭肝炎病毒(Ⅰ型)免疫蛋鸭收获的鸭蛋所制成的蛋黄抗体的滴度.结果表明,雏鸭肝炎病毒(Ⅰ型)的半数致死量为3.50,该毒株的高免蛋黄抗体以1:532稀释可保护50％的鸭胚免于死亡;病毒对照组全部死亡;空白对照组全部存活.该雏鸭病毒性肝炎高免蛋黄抗体滴度较高,可用于预防和治疗雏鸭病毒性肝炎.

雏鸭肝炎病毒感染后鸭CD8α基因及其通路相关基因表达变化

本研究旨在了解雏鸭肝炎病毒感染后鸭CD8α基因及其通路相关基因表达变化。通过对3日龄无母源抗体的金定鸭雏鸭感染雏鸭肝炎病毒(DHV),构建雏鸭肝炎感染实验动物模型,对雏鸭肝炎病毒发病组、未发病组和对照组的胸腺、肝脏、脾脏、肺、肾脏、大脑、小脑等组织CD8α基因及其信号通路上MHCⅠ、MHCⅡ、TNF-α等基因进行RT-qPCR检测。结果表明:在攻毒组(发病组和未发病组)扩增出DHV 3D基因的保守区域特异性条带,表明成功构建了雏鸭肝炎感染模型CD8α基因,RT-qPCR结果显示,CD8α、MHCⅠ和MHCⅡ基因在发病组各组织表现为不同程度的下调,在未发病组表现为不同程度的上调;而TNFα在发病组和非发病组的肝、脾、肺和肾等组织中表现为不同程度的上调。研究揭示了雏鸭肝炎病毒感染后CD8α基因及其通路相关基因表达变化,其结果有助于更好地了解duCD8α基因在细胞免疫中表达调控作用。

雏鸭肝炎的诊断与防治

鸭病毒性肝炎是由鸭肝炎病毒引起雏鸭的一种病死率高的急性、接触性、致死性传染病,该病的死亡率高,严重危害养鸭业的发展,对该病的诊断方法与防治措施进行介绍,以期为养殖户提供参考。

ALB、TLR7、PSPH和WSB1基因在雏鸭肝炎病毒易感与抗性群体间的差异表达分析

采用实时荧光定量RT-PCR技术检测雏鸭肝炎病毒侵染后对照组、易感组与抗性组ALB、TLR7、PSPH和WSB1mRNA分别在肝、脾、肺、肾、大脑、小脑、腿肌和胸腺等组织中的相对表达量并分析其意义。结果表明,除腿肌外,ALB和TLR7基因在易感组中的表达量极显著低于对照组和抗性组(P<0.01),抗性组的表达量显著或极显著低于对照组的表达量(P<0.01或P<0.05);PSPH和WSB1基因在易感组中的表达量极显著高于对照组(P<0.01),而抗性组与对照组差异不显著(P>0.05)。研究结果揭示了鸭ALB和TLR7基因为雏鸭肝炎病毒的抗性基因,其表达量的变化可以作为区分易感鸭和抗病鸭的标志。

国内雏鸭病毒性肝炎的研究进展

本文就国内雏鸭病毒性肝炎的病原特性、疾病诊断和防制等做一简要综述并提出了该病今后的研究方向。

抗雏鸭病毒性肝炎卵黄抗体粉饲料添加剂的研制

当雏鸭病毒性肝炎卵黄抗体效价达到1∶320倍时，收集免疫鸡蛋分离卵黄，减压低温干燥制成卵黄抗体细粉并进行抗体效价测定和安全检验。最后将合格的卵黄抗体细粉以不同比例加入雏鸭饲料，对雏鸭进行预防量饲喂后强毒攻毒试验及强毒攻毒后治疗量的饲喂试验、小区域雏鸭饲喂试验。结果：预防试验为每kg饲料添加30g卵黄抗体粉末时，攻毒保护率为85.0%；治疗试验为每kg饲料添加50g卵黄抗体粉末时，发病治愈率达到65.0%以上；小区域试验表明：卵黄抗体粉末预防量添加组比同期常规饲养组总发病率降低11%，抗生素用量降低12.3%，增重率提高9%。有效的防治了雏鸭病毒性肝炎病。

中药“鸭肝散”防治人工感染雏鸭病毒性肝炎的试验报告

雏鸭病毒性肝炎（ＤＶＨ）是危害雏鸭的一种急性、高度接触性传染病。对该病的防治，许多学者进行了大量研究［１］；有报道表明，临床用中草药防治该病有良好效果［２］。我们经临床对比试验，筛选出“鸭肝散”中药制剂，并对该制剂防治人工感染ＤＶＨ的效果进行了试验，...

新型雏鸭病毒性肝炎简报

1999年5月北京、广西等地3～13日龄北京鸭和樱桃谷鸭发生一种类似于1型鸭病毒性肝炎的疾病,死亡率从20%至80%左右,病鸭表现为突然发病、抽摔并很快死亡,剖检可见肝脏肿胀、表面树枝状充血或有出血点和出血斑,胆囊充盈,肾脏轻度淤血.取病死鸭肝脏做细菌分离培养阴性,然后做病毒分离,分别从北京和广西的病料中各分离到1株病毒(编号为B株和G株)经过鸭胚血清中和试验表明二者为同一血清型,但与1、3型鸭肝炎病毒阳性血清无交叉中和反应.人工感染雏鸭可复制出与临床病例相似的病变.现将研究结果简要通报如下:

雏鸭病毒性肝炎的病理学诊断与防控措施

鸭病毒性肝炎（duck viral hepatitis）是由鸭肝炎病毒引起幼鸭的一种急性、高度致死性传染病。主要发生于3周龄以内的雏鸭,3-10日龄的雏鸭最易感。病鸭临床主要表现：精神沉郁、转圈、抽搐、角弓反张等神经症状。其病理形态学变化以肝脏肿大、出血和坏死为主要特征。

鸭肝宁防治雏鸭病毒性肝炎的试验研究

中药口服制剂“鸭肝宁”防治雏鸭病毒性肝炎的结果表明：在实验室攻毒试验中保护率达84%，在临床试用中保护率达85%，仅次于鸭传染性肝炎卵黄抗体的防治水平，具有临床应用价值．

雏鸭病毒性肝炎的诊治

2008年4月，岱岳区大汶口镇一养殖户购进鸭苗5000只，于5日龄开始发病，2d内死亡700多只。次日邀诊，通过临床观察、病鸭表现为角弓反张，不久即抽搐而死，经过对发病鸭群的临床及剖检诊断，确诊为鸭病毒性肝炎。经综合防治，除500余只重症死亡外，其余均治愈。

雏鸭病毒性肝炎的诊断与防治

鸭病毒性肝炎是危害养鸭业的重大传染病之一，近几年来我省断断续续有鸭病毒性肝炎发生，给养鸭专业户造成了巨大损失，严重挫伤了专业户的积极性和养殖信心。在该病的诊断上，依据其发病日龄、临床症状和病理变化可做出初步诊断，但确诊必须依赖实验室诊断。目前该病防治尚无特效药，故该病重在预防。

雏鸭病毒性肝炎和传染性浆膜炎混合感染的诊治

鸭疫里默氏杆菌病（Riemerella anatipes—tifer，RA）又称为鸭传染性浆膜炎．是侵害雏鸭的一种急性或慢性败血性传染病。1932年，由美国学者Herdrikson和Hibert首次在纽约长岛的鸭场中发现。1982年郭玉璞等在北京郊区鸭场分离鉴定出RA血清型为Ⅰ型，RA主要感染家鸭，1～8周龄鸭均可感染。但对2～3周龄的雏鸭最易感，发病率高，一般为60％-70％，有时高达90％。鸭病毒性肝炎（Duck virus Hepatitis，DVH）是引起小鸭高致死性、传播迅速的病毒性疾病，以2周龄内雏鸭最易感，对新生鸭可引起90％以上的死亡。2006年4月山东昌乐某鸭场所饲养的樱桃谷肉鸭鸭群突然大批发病死亡，发病死亡时最小的为12日龄，最大的为38日龄，送我中心诊断后。经流行病学调查。结合临床症状、病理剖检变化和实验室病原分离鉴定初步确定为雏鸭病毒性肝炎和传染性浆膜炎混合感染。现将诊断结果整理汇报如下。

雏鸭病毒性肝炎的诊治

我市郊区养鸭数量很多，主要是养殖户中、小规模饲养和很多农户的散养。由于饲养管理粗放、防疫卫生差等方面原因，鸭病时有发生。粗略估算，在这些鸭病发生数量中，鸭疫里默氏杆菌病发病最多，鸭病毒性肝炎占第二，其它病则较少发生。2007年10月，笔者接诊一病例，根据临床症状、剖检变化，结合实验室诊断，确诊为雏鸭病毒性肝炎。现报道如下：

雏鸭病毒性肝炎和传染性浆膜炎混合感染的诊治

鸭疫里默氏杆菌病（Riemerella anatipes-tifer．RA）又称为鸭传染性浆膜炎，是侵害雏鸭的一种急性或慢性败血性传染病。1932年，由美国学者Herdrikson和Hiben首次在纽约长岛的鸭场中发现，1982年郭玉璞等在北京郊区鸭场分离鉴定出RA血清型为Ⅰ型，RA主要感染家鸭，1～8周龄鸭均可感染，但对2～3周龄的雏鸭最易感，发病率高，一般为60％～70％，有时高达90％。