雏鹅新型病毒性肠炎病毒对鸭胚成纤维细胞的适应性及增殖特性

为了获得适宜雏鹅新型病毒性肠炎病毒（NGVEV）体外培养的细胞系，开展了NGVEV强毒株在鸭胚成纤维细胞（DEF）适应性和增殖特性的研究。结果表明，NGVEV强毒株经尿囊腔接种10日龄鸭胚传4代，取尿囊液接种DEF，第1代无明显细胞病变；第2代培养至72～96hDEF出现颗粒状缺失、脱落，但无典型蚀斑出现；第3代培养至96～120h，DEF形成大小不等、圆形或椭圆形的典型蚀斑；第5代以后的NGVEV可稳定适应于DEF，典型细胞病变出现于48～72h。取适应DEF的NGVEV感染DEF细胞后制作超薄切片经电镜观察，可见典型的腺病毒粒子，大小为70～90nm。NGVEV在DEF上的TCID5。值随着传代次数增加而增高，由第1代的10^1.23增加到第8代的10^8.02，最高毒价出现于96～144h，96～120h是收获病毒的最佳时间。

小鹅瘟和雏鹅新型病毒性肠炎二联PCR检测试剂盒组装和初步应用

本试验旨在研制小鹅瘟和雏鹅新型病毒性肠炎二联PCR检测试剂盒,观察临床应用效果。根据小鹅瘟和鹅病毒性肠炎基因序列,设计合成一对特异性引物,对PCR反应条件进行优化,并分别对试剂盒的特异性、敏感性、重复性和保存期进行研究,之后进行临床扩大试验。该二联PCR诊断试剂盒能扩增出预期的小鹅瘟375bp核酸片段和鹅病毒性肠炎223bp核酸片段,与鸭瘟病毒、鹅副黏病毒无交叉反应;最低能检测到小鹅瘟病毒104 ELD50/mL,雏鹅新型病毒性肠炎病毒2.5×10-1ELD50;不同批次的试剂盒对同一样品检测结果一致;常温下至少可保存5个月;临床应用效果显著。该二联PCR检测试剂盒能够对小鹅瘟和雏鹅病毒性肠炎早期诊断、流行病学调查和卫生检疫提供了检测手段。

雏鹅新型病毒性肠炎病原快速检测技术的建立及应用

根据小鹅瘟病毒(GPV)和鹅源禽腺病毒(FAV)基因组序列特征分别设计了各自的PCR引物,经对反应条件的优化建立了能同时检测两种病毒的二重PCR方法.该法能从雏鹅新型病毒性肠炎和小鹅瘟疫苗株以及分离的鹅源腺病毒蚀斑克隆株分别扩增出相应的特异性产物,而对其它常见鹅病的病原及正常鹅胚肝组织的扩增结果均为阴性;对来自广西不同地方的36份临床病例样品的检测发现,其中具有雏鹅新型病毒性肠炎典型病变的22份样品均可检出GPV和FAV两种病毒,其它的有4份只检出GPV,3份只检出FAV;12份健康雏鹅肝组织中仅有一份检测到GPV;健康成鹅泄殖腔中GPV和FAV的检出率分别达44.29%、37.14%二者都有的占1.43%.结果表明,雏鹅新型病毒性肠炎的病原可能包括GPV和FAV两种病毒;建立的PCR诊断技术具有快速、敏感、特异的特点,可用于该病征的临床快速鉴别诊断以及流行病学的调查研究.

雏鹅新型病毒性肠炎病毒的诊断与防控研究

对近年来全国各省市出现的雏鹅新型病毒性肠炎病毒(New type gosling viralenteritis virus,NGVEV)流行病学、临床症状、病理组织结构、病原学、病毒的检测和诊断、免疫预防、临床预防和治疗等方面的研究情况进行了论述。该病是由腺病毒引起的一种尚未被认识的新病毒,目前仅有NGVEV高免血清的预防和治疗效果较好,其余药物和生物制剂都尚需要进一步研究和改良。这些研究结果可为进一步深入研究和开发有效的药物提供基础资料,进而可提高我国养鹅业的经济效益。

雏鹅新型病毒性肠炎病毒强毒在感染鸭胚体内形态发生学和宿主细胞超微病理学研究

将雏鹅新型病毒性肠炎病毒（NGVEV）强毒CH株经尿囊腔途径人工感染10日龄鸭胚，应用透射电镜和超薄切片技术研究病毒在宿主细胞内的形态发生及各组织器官的超微结构变化。结果表明：感染后不同时间剖杀及死亡鸭胚的尿囊膜、肠、心、肝、脑和肌胃组织中，均观察到60～70nm的病毒粒子。病毒粒子主要通过与细胞膜融合而进入细胞质内，然后在细胞核内进行复制和装配。最后病毒粒子通过核膜和细胞膜破裂的方式被释放。病毒侵害的主要靶细胞包括鸭胚尿囊膜上皮细胞、肠上皮细胞、肠道平滑肌细胞、成纤维细胞、肝细胞、肌胃黏膜上皮细胞和心肌细胞等，表现为细胞核内外膜间隙严重扩张，细胞质整体结构严重空化。病毒侵害的主要靶细胞器包括粗面内质网和线粒体，表现为粗面内质网扩张呈囊状；尿囊膜上皮细胞的线粒体出现固缩和异常聚集变化，而其他组织细胞的线粒体均表现为肿胀和嵴断裂、消失。本试验还发现NGVEV可诱导宿主细胞发生严重的细胞凋亡现象，表现为细胞皱缩，胞核内染色质密度增高，核固缩成一个或数个团块凝聚在核膜周边，胞质浓缩深染并形成凋亡小体。

小鹅瘟和雏鹅新型病毒性肠炎二联PCR检测方法的建立

根据鹅细小病毒(GPV)和雏鹅新型病毒性肠炎病毒(NGVEV)保守基因序列,分别设计合成了两对引物并且进行PCR检测,分别扩增出预期的375bp条带和223bp条带。然后,对混合样品进行二联PCR反应条件的优化试验。结果得到最佳退火温度54℃,并且清晰得到与试验设计相符的375bp(GPV)和223bp(NGVEV)两条特异性条带。特异性强,敏感性好。因此,此方法可以用来诊断小鹅瘟和雏鹅新型病毒性肠炎。

雏鹅新型病毒性肠炎PCR方法的建立及应用

根据雏鹅新型病毒性肠炎病毒(NGVEV)保守基因序列,设计合成一对引物并且进行PCR检测,扩增出预期的223 bp条带。该方法能在雏鹅新型病毒性肠炎病毒BC07株中扩增到特异性片段,而鹅细小病毒、鸭瘟病毒、鹅副黏病毒的扩增结果均为阴性;敏感性试验表明该方法最低检出限量为2.5×10^(-1)EID_(50)。表明所建立的PCR方法具有敏感性高、特异性强的特点。可以用来检测雏鹅新型病毒性肠炎。

雏鹅新型病毒性肠炎病毒的研究进展

本文就当前对雏鹅新型病毒性肠炎的临床症状、病原学、病毒的检测和诊断、免疫预防、临床预防和治疗等方面的最新进展进行了综述,并提出一些有待进一步研究的问题。

雏鹅新型病毒性肠炎

1993年以来,四川省一些地区的雏鹅发生一种传染病。四川农业大学禽病防治中心程安春副教授对该病进行了调查。结果表明,雏鹅发病龄为3—30日龄,死亡高峰期为10—18日龄,发病率为30％—100％,死亡率为25％—75％,有时高达100％,其临床症状和病理变化与小鹅瘟有很多相似之处。在此基础上,他利用原代鸭胚成纤维细胞培养及蝕斑克隆技术,从不同地区分离到的10个毒株。经电镜检查可见病毒呈球型或椭圆形,无囊膜,直径70—90mm,不凝集鸡、鸭、鹅、鸽、黄牛、水牛及猪的红细胞,对氯仿不敏感,56℃作用3—5小时不影响病毒的致病性,病毒的核酸类型为DNA。

雏鹅新型病毒性肠炎的防治措施

结合雏鹅新型病毒性肠炎的流行特点和临床症状进行诊断,并提出相应的防控措施。

用Dot-IGS检测雏鹅新型病毒性肠炎

四川农业大学程安春副教授用斑点免疫金染色法（Dot-IGS）检测雏鹅新型病毒（VGVEV）性肠炎抗体。结果表明,1.每个抗原斑点吸附提纯NGVEV抗原的最低量为0.05μg/点,高于此量的抗原诊断膜片与兔抗NGVEV的IgG及NGVEV-CN40弱毒疫苗免疫的成年鹅血清反应呈现明显的红色斑点。诊断片的抗原实际用量为0.030μg/点。2.制备的抗原诊断膜片分别与兔抗NGVEV的IgG,

雏鹅新型病毒性肠炎

本文报道一种新的雏鹅传染病。自1993年以来四川省不同地区的3～30日龄雏鹅发生一种新的传染病,死亡高峰期为10～18日龄,发病事30%～100%,死亡率25%～75%,甚至100%,其临床症状和病理变化与小鹅瘟极相似,利用原代鸭胚成纤维细胞培养及蚀斑克隆技术从四川省不同地区分离到10株病毒,暂定该病名为"雏鹅新型病毒性肠炎"(NGVE)。病毒(NGVEV)呈球形或椭圆形,无囊膜,直径70～90mm,不凝集鸡、鸭、鸽、黄牛、水牛及猪的红细胞,对氯仿不敏感,56℃作用3～5小时不影响病毒的致病性,病毒核酸类型为DNA。10株病素的抗原性一致,但与鸭瘟病毒和小鹅瘟病毒没有中和抗原相关性;分离的病毒通过人工感染可以复制出与临床表现一致的病例。根据分离到的病毒的部分特性,初步将这种病毒归为腺病毒(暂定)。利用生物学技术获得一株对雏鹅不致病的、具有良好免疫原性的弱毒株(CN40),对开产前种鹅进行一次免疫,可使下一代获得有效的免疫保护(5～6个月)。利用分离毒制备的高免血清对雏鹅具有良好的预防和治疗作用。我国是世界养鹅的主要国家,仅四川省1997年出栏的鹅数量近2亿只。国内外已经报道的能够引起雏鹅感染发病的并且具有典型肠道炎症变化的病毒只有细小病毒和鸭瘟病毒[1～3]。自1993年以来,四川省很多地区的30日龄以内的雏鹅群发生一种疾病,其流行病学、临床症状、病理变化及其组织学变化与小鹅瘟几乎一致,但是种鹅在开产前注射1次(有的甚至2～3次)小鹅瘟弱毒疫苗,但其下一代于3日龄开始仍然出现发病和死亡,应用小鹅瘟高免血清进行预防和治疗无效,是小鹅瘟出现了新的血清受?亦或是小鹅瘟病毒发生了抗原变异?经过几年的工作,认为该病是由腺病毒(暂定)引起的雏鹅新型病毒性肠炎(NGVE)(暂定),现报道如下:

雏鹅新型病毒性肠炎的诊治

雏鹅新型病毒性肠炎(Gosling new type viral enteritis,GNTVE)是一种由禽腺病毒(Fowl adeno virus,FAV)引起雏鹅肠炎的新型传染病。近年来,该病在我国的养鹅业普遍流行,给养鹅业带来严重的危害。该文对雏鹅新型病毒性肠炎的病原、流行病学、临床症状、病理变化、诊断、防治等方面的最新进展进行了综述,以期为该病的诊断与防治提供参考。

小鹅瘟与雏鹅病毒性肠炎鉴别诊断

临床上,小鹅瘟与雏鹅的新型病毒性肠炎经常发生,两者皆是有腹泻和神经症状,剖检时小肠内都有凝固性栓子,故两者很难区别,稍不留心会造成误诊,给养鹅业造成损失。现根据临床病例,结合二者的流行情况与临床表现、病理解剖等特点进行简单的总结。

鹅四种主要病毒性传染病的诊断与防制

文章对小鹅瘟、雏鹅新型病毒性肠炎、鹅副粘病毒病、鹅禽流感四种鹅病毒性传染病的特点及鉴别诊断进行了分析和探讨,并提出一系列综合性防制措施,以降低鹅发病率和死亡率。

新近发现的几种畜禽传染病研究进展

No.1 Bovine Spogiform Encophalopethy．BSE No.2 Porcine Roprodutive and Respiratory syndrome,PRRS No.3 Renal the of Adsn infectious Bronchitis No.4 New Gosling Virus Enteritis .

北京国际禽病会议暨展览会概况

由中国兽药监察所、中国家禽业协会、中国农业大学动物医学院和中国畜牧兽医学会禽病学分会协办,由全国畜牧兽医总站和中国国际科技会议中心主办的“北京国际禽病会议暨展览会”于7月28日至7月30日在北京国际会议中心隆重举行。会议主题是“家禽保健与21世纪的家禽生产”。出席会议的代表来自英、美、加拿大、法国、德国、印度等20个国家的52位禽病学专家、教授和来自全国90多个有关单位和院校的200多位代表。会议开幕式由大会秘书长阎汉平先生主持,大会主席胡祥壁教授,国际禽病学会主席J.Lloyd Spencer教授,农业部畜牧兽医局副局长冯静兰女士,全国畜牧兽医总站站长徐定人先生等到会并致词。