睫状神经营养因子和雪旺细胞神经营养活性物质对大鼠视神经损伤后轴突数的影响

目的 观察睫状神经生长因子 ( ciliary neurotrophicfactor,CNTF)和雪旺细胞神经营养活性物质 ( Schwann cellsneurotrophic agent,SCNA)对视神经损伤后轴突的形态和纤维数目变化的作用 .方法 采用镊夹法制作大鼠视神经损伤模型 ,损伤后立即一次性向玻璃体内注射 CNTF( 5 0 ng)或SCNA ( 10μL ) ,在损伤后 1,2 ,3和 4 wk时观察夹伤视神经的形态 ,及进行图像分析和轴突纤维计数 .结果 损伤后视神经轴突减少 ,间质增多 .CNTF组和 SCNA组的轴突数密度在 1wk时分别为正常值 ( 0 .10 65± 0 .0 0 5 6个·μm- 2 )的0 .5 9和 0 .61,而对照组为 0 .5 5 ,实验组与对照组比较差异显著 ( P<0 .0 5 ) .但在夹伤 2 wk后 3个组间、各时间点间数据差异均不显著 ( P>0 .0 5 ) .结论 CNTF及 SCNA一次玻璃体给药能在 1wk内减缓视神经损伤后轴突数目的减少 .

用细胞钓蛋白带技术初探脊髓源性神经营养活性物质

用5只单侧后肢备用根猫术后5d的两侧脊髓背角组织提取液进行聚丙烯酰肢凝胶电泳，再以鸡胚背根节种经细胞构蛋白带技术找寻有神经营养活性的蛋白带．结果显示：手术侧组的电泳凝胶条上相对迁移享0．10～0．13和0．43～0．50两处均有较多的神经细胞附着，细胞数分别是165个2.5×105μm2、216个／2．5×105μm2．非手术侧组凝胶条相应两处同一面积内仅有1或2个细胞．两侧相比有显著性差异（P＜0001），提示手术侧组电泳凝胶条相对迁移率0．10～013与043～0．50两处含有能维持种经元存活的神经营养活性物质．

雪旺细胞无血清条件培养液中的神经营养蛋白活性

目的 进一步探测雪旺细胞无血清条件培养液中神经营养蛋白活性 .方法 收集成年大鼠坐骨神经雪旺细胞无血清条件培养液 (Schwanncellserum -freecondionedmedium ,SC -SFCM ) ,通过PM10超滤获取 >10Kd浓缩液 ,再经Disc -PAGE分离和Biotrap电洗脱 ,从SC -SFCM中分离出A、B、C、D四组蛋白带 ,选择其最佳活性浓度 ,四组蛋白带按照 7种不同组合加入脊髓前角神经元 (SAHN)培养液中 ,通过MTT法进行神经营养活性检测 .结果 含D蛋白带的各组 ,其OD值均显著高于对照组 p <0 .0 1) ,而不含D蛋白带的其它各组 ,其OD值与对照组比较无显著性差异 (p >0 .0 5 ) .结论 来自于SC

骨髓基质细胞源性神经活性物质的提取与纯化

目的 分离纯化骨髓基质细胞(marrow stromal cells,MSCs)胞浆中神经营养蛋白,并验证其神经活性作用。 方法 自小鼠股骨分离培养MSCs,超声粉碎后离心并收集其上清液,超滤浓缩后收集大于10 ku浓缩蛋白液。Sephadex G- 10 0层析、高效液相色谱分析(high performance liquid chromatography,HPL C)和十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶不连续电泳(sodium dodecyl sulfate- polyacrylamide gel electropheresis,SDS- PAGE)等技术分离神经活性蛋白,培养脊髓运动神经元,通过MTT法及观察细胞形态来验证其神经活性作用。 结果 MSCs胞浆上清液经SephadexG- 10 0层析后发现, 峰对神经细胞生长有促进作用。对 峰行HPL C分析发现,A峰对神经细胞生长有明显促进作用。对A峰行SDS- PAGE分析,提示为单一蛋白带,分子量为13ku。 结论 MSCs胞浆中含有神经营养蛋白,其分子量为13ku。

备用背根猫脊髓源性神经营养活性物质的初步分离及生物活性检测

本研究组对脊髓可塑性研究已证实，切除猫部分背根后，保留的背根（备用报）纤维可则侧支出芽代偿被切断的传入纤维，并与其靶区（背角）重建突触联系。用电泳和体外培养等方法亦发现备用背根猫去传入侧脊髓背角组织提取液中一些蛋白质的含量发生了变化，而且其促神经突起生长的作用增强。在以上研究的基础上，我们采用凝胶过滤层析方法，分离提取液中对神经突起生长有促进作用的相关蛋白质。实验采用成年雄性家猫30只，切除一侧T10～L1，L3～L5，L7～S2背根节，保留L2和L5背极为备用背根。术后五天取手术侧和非手术侧T9～S3节段脊髓背角组织，分别匀浆、离心后，所得上清液即为提取液。提取液经SephadexG－200凝胶过滤层析后，获得三个主峰，分别收集手术侧和非手术侧三个峰值处的洗脱液，透析、冻干，用再改良的悬滴培养法进行生物活性检测。结果发现：手术侧背角提取液中第二峰值洗脱液促鸡胚背根节神经突起生长的作用明显张于非手术侧者（Pwto．01），在加入量为50ug／ml时，促神经突起生长作用最强。本研究结果为进一步分离纯化该神经营养活性物质奠定了基础。

联合培养法的改良及其在检测神经营养活性物质中的应用

著者已用细胞钓蛋白带技术证明，在备用根猫脊髓背角手术侧提取液电泳带相对迁移率（R；）0．11—0．12，045－0．48两处蛋白带中含有某些神经营养活性物质。为进一步验证该两蛋白带所含物质对神经元存活的影响，本文用改良的联合培养法观察手术Rfo．11－0．12、Rro．45—0．48两蛋白带对鸡胚背报节神经元存活的影响。具体方法如下：将常规的联合培养法（即将合某神经营养活性物质的凝胶小条放置于鸡胚DRG附近进行联合培养后，可见DRG的神经突起明显朝向凝胶小条的一面生长）改为将DRG的神经细胞悬液接种于涂有鼠尾胶原的24孔培养板孔内，并将磨碎的凝胶小条分别加入培养孔内。根据神经营养活性物质可从凝胶内折至培养液中的原理直接观察其对神经元存活的影响。结果显示：加入手术侧Rf0．11－0．12、Rr0．45－0．48蛋白带凝胶碎末的培养，其神经细胞存活率分别为082±0．05、081±0．02；而非手术侧组者其神经细胞存活率分别为0．55±0．07、0．54±0．08。分别比较两组的两带细胞存活率，均有显著性差异（P＜0.01）。说明手术侧组Rf0．11－0．12及0．45—0．48两条蛋白带内均含有促进神经元存活的神经营养活性物质。

吗啡备用根大鼠脊髓组织神经营养活性物质的分离纯化和生物活性测定

目的 分离纯化吗啡备用根大鼠脊髓组织提取液 ,以期获得某些神经营养活性物质。 方法 应用SephacrylS 2 0 0HR凝胶层析、高效液相色谱 (HPLC)和组织培养等技术分离和检测神经营养活性物质。 结果 备用根大鼠脊髓组织提取液能够促进体外培养的鸡胚背根节 (DRG)神经突起的生长 ;吗啡作用的大鼠脊髓组织提取液也具有同样的作用 ,但备用根大鼠和吗啡作用的大鼠脊髓组织提取液在促神经突起生长作用方面并没有明显的差异。吗啡备用根大鼠脊髓组织提取液具有明显的神经营养活性作用。吗啡备用根大鼠脊髓组织提取液的SephacrylS 2 0 0HR凝胶层析Ⅱ峰洗脱液和Ⅳ峰洗脱液能够促进DRG神经突起的生长。经SDS PAGE分析 ,Ⅱ峰洗脱液呈现 1条分子量约为 6 5kD的蛋白质主带 ,Ⅳ峰洗脱液的蛋白质成分较为复杂。应用HPLC对凝胶层析Ⅳ峰洗脱液作进一步的分离 ,发现HPLCA峰洗脱液能够促进DRG神经突起的生长。经SDS PAGE显示 ,A峰洗脱液的两条蛋白质主带分子量分别为 30kD和 18kD。 结论 吗啡备用根大鼠脊髓组织提取液中具有神经营养活性作用的物质可能是分子量约为 6 5kD、30kD和

备用根大鼠脊髓后角组织神经营养活性物质的分离纯化和生物活性测定

目的 进一步分离纯化备用根大鼠部分去传入纤维支配 (手术侧 )的脊髓后角组织提取液 ,以获得某种神经营养活性物质。 方法 用 Superdex G- 75 prep grade凝胶层析、高效液相色谱 (HPL C)层析和细胞培养等技术分离和检测神经营养活性物质。 结果 手术侧脊髓后角组织提取液经 Superdex G- 75 prep grade凝胶层析和 HPL C层析后 ,得到的 A峰洗脱液具有促进体外培养鸡胚背根节 (DRG)分离神经元存活及其神经突起生长的神经营养活性作用。经 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE)显示 ,A峰洗脱液呈现一条分子量约为 6 0 k D的蛋白质主带。 结论 结合生物活性检测结果 ,分子量约 6 0 k

载有活性物质的载体对新生大鼠海马细胞的影响

目的采用自制的载有神经细胞营养因子的载体与新生大鼠海马神经细胞共同培养,观察其生长特点。方法取新生零天大白鼠海马组织,进行原代分离培养,观察、记录培养过程中活细胞的生长情况,定期取出培养皿中长有细胞的盖玻片进行固定及染色。结果大鼠海马神经细胞在含有神经细胞营养因子的载体表面和周围生长旺盛。结论所选的载体对细胞无毒性,海马细胞在含有神经细胞营养因子的载体表面和周围长势旺盛,可望为组织工程学的研究提供参考。

一条新的可诱导PC12细胞转化为交感神经原表型的小分子肽链

目的根据神经生长因子 (NGF)的氨基酸序列及其晶体构象资料 ,对 β NGF进行限制性酶解 ,从而获得关键的功能区域片段。方法选择溴化氰在 9位Met处 ,Trypsin在Arg或Lys处裂解 β NGF ,用SephadexG 5 0色谱、DE5 2离子交换色谱和反相高效液相色谱进行分离纯化。所得片段用PC12细胞测定活性 ,对活性片段进行氨基酸组成及序列分析。结果从 β NGF裂解片段中获得一可诱导PC12细胞分化的活性片段 ,氨基酸组成及序列分析表明 ,此片段由 16肽GEFSVCDSVSVWVGDK与 14肽HWNSYCTTTHTFVK通过一对二硫键连接而成 ,与 β NGF肽链的10～ 2 5和 75～ 88氨基酸残基序列相对应。生物活性分析表明其最佳作用浓度为 0 .0 0 1～ 0 .1ng/ml。结论此实验获得了 β NGF关键的功能区域片段 ,虽然其空间结构和功能的关系尚需研究探讨 。

雪旺细胞增殖和分化的研究

本文概述了雪旺细胞增殖和分化两方面的研究。在周围神经发育、损伤和再生过程中，存在着增殖激活和抑制两种机制。雪旺细胞增殖受到轴突、促细胞分裂因子、膜电位、神经损伤产物等的刺激，到一定阶段，又通过负反馈机制使其增殖受到抑制，提示在雪旺细胞研究中，应注意为不同研究目的而打破或维持这种平衡，雪旺细胞分化的研究从不同层次阐述了外周神经髓鞘形成的机理以及分化受到的各方面的调节。关于生物活性物质分泌的研究。

雪旺细胞源神经营养因子的神经营养活性及其抗NO神经毒性作用

目的：研究雪旺细胞源神经营养因子对脊髓前角神经元的神经营养活性及对抗一氧化氮（ＮＯ）神经细胞毒性的作用。方法：分４组进行神经元培养：（１）营养因子组：加入不同浓度的雪旺细胞源神经营养因子；（２）ＮＯ组：加入ＮＯ体外供体硝普钠；（３）营养因子＋ＮＯ组：同时加入雪旺细胞源神经营养因子和硝普钠：（４）对照组：加Ｄ－Ｈａｎｋ，培养２天后，ＭＴＴ法观察各组细胞情况。结果：营养因子组ＯＤ值均明显高于对照组；ＮＯ组ＯＤ值明显低于对照组：营养因子＋ＮＯ组，当神经营养因子浓度大于３０ｎｇ·孔－１时，ＯＤ值显著高于ＮＯ组。结论：ＮＯ抑制体外培养脊髓前角神经元的存活；雪旺细胞源神经营养因子对体外培养脊髓前角神经元具有明显的神经营养活性，且能对抗ＮＯ的神经细胞毒性。

浅谈牛磺酸在食品动物中的应用

牛磺酸（2-氨基乙磺酸，Taurine）又名牛胆酸，牛胆素，1827年首次从牛胆汁中分离出来而得名。是机体内含硫氨基酸的代谢产物，对动物机体具有重要的生理、药理和营养功能。自从Hayers（1975）研究发现，幼猫食物中缺乏牛磺酸能够导致视觉能力减退甚至失明后，牛磺酸的研究越来越广泛。国内外学者研究发现，牛磺酸不仅能够维持视觉、血液、免疫、生殖的正常功能，还能作为中枢神经递质调节中枢神经系统，是机体内不可缺少的一种生物活性物质。

知识分子应有业余爱好

中年知识分子的工作节奏是紧张的。八小时内连续工作,机体负荷往往过重,久之会影响身体健康。医学权威人士认为,脑力劳动者应从事一项业余爱好,这样就能调节生活,陶冶性情,有益于身心健康。

吃葡萄后别马上喝水和奶

葡萄果实营养成分丰富，不仅含有一般果品所共有的糖、酸、矿物质。而且含有与人类健康密切相关的生物活性物质．如叶酸、维生素等。葡萄中所含有的大量的葡萄糖和果糖。进入体内后会转化成能量，可迅速增强体力，有效地消除肉体的疲劳。因此常食葡萄，对于神经衰弱和过度疲劳均有补益的作用。新鲜的葡萄除含较多的糖类外，还含有大量的果酸。能帮助消化，因此。适量吃一些葡萄。可以健胃消食。另外。经常少量饮用葡萄酒。具有舒筋活血、开胃健脾、助消化、提神等功效。

以蜜代糖益处多

以蜜代糖益处多寿琦蜂蜜除了如白糖、红糖一样含有能产生甜味的营养成分如葡萄糖、果糖、蔗糖、糖精外，还含有蛋白质、维生素、铁、钾、钙、镁、铜、锰、磷、蜡质、天然芳香化合物、氧化酶、淀粉酶、还原酶、转化酶、过氧化酶等营养物质和生物活性物质。其中，果糖占３９...