雪花莲凝集素基因转化菊花及转基因植株的抗蚜性研究

针对菊花存在的蚜虫虫害问题 ,采用农杆菌介导法将gna基因导入菊花叶片 ,共获得 93个转化克隆。研究了影响转化频率的主要因素 ,得出在使用 pH5 6的YEB培养基 ,菌液浓度OD60 0 =0 4 ,4 5日苗龄中部叶片预培养 1d ,共培养 4d ,共培养的培养基中加入 0 5mg/LGA3 的条件下可使转化频率提高到 11 2 1%。PCR、实时荧光PCR检测结果表明 ,外源基因已整合到植物细胞基因组中。转化植株幼苗饲虫实验表明 ,不同转化克隆的抗蚜性差异较大 ,蚜口密度抑制率从 10 %～ 84 %不等 ,平均蚜口密度抑制率为 39.4 %。

转雪花莲外源凝集素基因烟草对桃蚜的抑制作用

将编码雪花莲外源凝集素成熟蛋白的ｃＤＮＡＧＮＡ１２和其前体蛋白ｃＤＮＡＧＮＡ３４插入到二元载体ｐＢｉｎ４３８的双倍增强子ＣａＭＶ３５Ｓ启动子或二元载体ｐＢｃｏｐ１的ＣｏＹＭＶ启动子下游，分别构建成植物表达载体ｐＢＧｎａ１２、ｐＢＧｎａ３４、ｐＢＣＧｎａ１２和ｐＢＣＧｎａ３４。土壤农杆菌介导的转化再生植株的ＰＣＲ和Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分析表明，ＧＮＡ基因已整合到烟草ＤＮＡ中。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析发现ｐＢＧｎａ３４和ｐＢＣＧｎａ３４的转基因植株能有效地表达外源ＧＮＡ，表达量约占可溶性总蛋白的００８％～０１５％，并且前体蛋白基因编码的蛋白在植物体内进行了正确的加工；而ｐＢＧｎａ１２和ｐＢＣＧｎａ１２的植株几乎检测不到外源ＧＮＡ的表达。有效表达外源ＧＮＡ的ｐＢＧｎａ３４和ｐＢＣＧｎａ３４的转基因植株具有较强的抗蚜活性，平均能够抑制桃蚜（Ｍｙｚｕｓｐｅｒｓｉｃａｅ）４５％～６０％蚜口密度，有的高达９０％以上。在转基因烟草中含双倍增强子的ＣａＭＶ３５Ｓ启动子与韧皮部特异表达的ＣｏＹＭＶ启动子介导ＧＮＡ基因表达具有相似的强度，但它们的抗蚜活性存在差异。

雪花莲凝集素基因转化小麦及转基因小麦抗蚜性的研究

雪花莲凝集素对具有刺吸式口器的同翅目害虫具有毒杀作用。用基因枪法将 1个新的雪花莲凝集素 (GNA)基因转入普通春小麦品种中 60 63 4和生产上正在推广的冬小麦高产品种———豫麦 66中 ,分别获得了转基因小麦植株。抗蚜实验证明 ,转化gna基因的小麦植株对我国北方冬麦区的主要麦蚜———麦长管蚜和禾谷缢管蚜的抗性效果不尽相同。对禾谷缢管蚜 ,在接种当代即表现出明显的毒杀作用。对麦长管蚜 ,则表现为虫体发育减缓并且降低了其所生产的若蚜成活率。在自然放养条件下 。

农杆菌介导的雪花莲凝集素基因转入玉米骨干自交系

以农杆菌AGL0介导,将雪花莲凝集素基因转入玉米骨干自交系齐319和掖515胚性愈伤组织细胞,从筛选后的抗性愈伤组织获得再生植株.农杆菌浓度和共培养时间均能显著影响侵染后玉米愈伤组织的抗性频率.在农杆菌浓度OD6000.2～0.3,共培养时间3d时,侵染后玉米愈伤组织的抗性频率最高,平均约4%.对再生植株及其子代基因组DNA的PCR及Southern杂交分析表明雪花莲凝集素基因已经整合到玉米基因组中,并遗传给后代.在蚜虫人工接种试验中,转基因植株上蚜虫的繁殖力为非转基因对照植株上的50%,这表明转基因植株抗蚜性显著增强.

雪花莲外源凝集素基因的克隆及序列分析

外源凝集素(lectin)是自然界中广泛分布的一组蛋白质,在多种生物中均有发现。外源凝集素为一类能特异地识别并可逆结合糖类复合物的糖基部分而不改变被识别糖基的共价结构的非免疫性蛋白。它对植物有很重要的生理作用。例如保护功能,在植物生长的各个阶段以不同的方式保护植物免于害虫的侵害;作为储藏蛋白,在植物发芽和幼苗生长阶段,裂解的外源凝集素为其提供氨基酸;外源凝集素还可能参与细胞间的识别,如在植物建立共生关系中,根部的外源凝集素可能是宿主特异性的重要决定因素。

雪花莲凝集素基因(gna)的改造及其抗蚜性(英文)

用定点突变方法对编码雪花莲凝集素 (Galanthusnivalisagglutinin ,GNA)前体蛋白的DNA序列进行了改造和转基因烟草 (NicotianatabacumL .)抗蚜性的研究。结果表明 ,将GNA编码序列中含有的稀有密码子改造后 ,GNA的表达水平从占总可溶性蛋白的 0 .17%增加到 0 .2 5 % ,转基因烟草的抗蚜性也随之增强 ,从平均抑制桃蚜 (Myzusper sicae (Sulzer) )虫口密度 6 3.7%显著地提高到 71.0 %。

雪花莲外源凝集素基因的克隆及其多态性分析

从雪花莲（Ｇａｌａｎｔｈｕｓｎｉｖａｉｌｓ） 叶片中分离出了长度为４８４ｂｐ 的雪花莲外源凝集素ｃＤＮＡ，包含了完整的雪花莲外源凝集素编码序列。通过限制性酶切图谱及ＤＮＡ序列分析， 从中筛选出５ 种核苷酸且氨基酸序列均有差别的外源凝集素基因ＧＮＡ１１、ＧＮＡ１２、ＧＮＡ１３、ＧＮＡ１４和ＧＮＡ１５。将这５ 个克隆与６个已报道的序列进行比较， 发现其中ＧＮＡ１４ 与ＧＮＡ１５同源性最高，它们之间核苷酸序列及推导出的氨基酸序列的同源性分别为９８０％ 和９６２％ ， ＬＥＣＧＮＡ１ 与ＧＮＡ１１ 同源性最低， 它们之间核苷酸序列及推导出的氨基酸序列的同源性分别为７７３％ 和６５０％ 。

雪花莲凝集素基因转化新疆甜瓜抗蚜虫的研究

采用农杆菌介导法对新疆甜瓜进行了遗传转化研究,对影响转化频率的不同因素,即:抗生素浓度、预培养有无及感染时菌液的不同处理、外植体与农杆菌的感染时间和共培养时间等进行了研究,通过农杆菌介导法将雪花莲凝集素基因导入四日龄甜瓜子叶外植体,获得了卡那霉素的抗性植株。移栽成活并生长良好。卡那霉素抗性鉴定及转化株总DNA的PCR分析表明,GNA基因已整合到甜瓜的基因组中。初步抗蚜虫实验证明,转基因甜瓜有一定的抗棉蚜幼虫效果。

雪花莲凝集素抗虫作用研究进展

本文就雪花莲凝集素的杀虫机理、杀虫活性、及其对天敌昆虫影响的研究进展做了着重介绍,并讨论了转雪花莲凝集素基因植物应用可能存在的问题及前景。

利用花粉管通道法获得转雪花莲凝集素基因(sgna)小麦

利用适用于禾谷类作物的表达载体pGU4AGBar和pGBIU4AGBar,采用花粉管通道法 ,将人工合成的雪花莲凝集素基因sgna导入了优良冬小麦品系西农 2 2 0 8和西农 1 3 2 ,经PCR和Southernblot鉴定 ,证明获得了 2 0株导入了sgna基因的转基因植株 ,转化率约为 0 .2 8%～ 0 .84% 。

雪花莲凝集素基因(GNA)植物表达载体的构建及其对烟草的遗传转化

将雪花莲凝集素基因(GNA)取代GUS基因正向插入到Ti质粒载体pBI121的35S启动子之下,构建成植物表达载体pBI121/GNA,并将其导入农杆菌LBA4404中。通过该农杆菌介导转化烟草红花大金元,得到卡那霉素抗性植株159株,PCR检测表明其中102株为阳性。对8株PCR阳性植株进行了抗蚜虫生物活性检测,抑制蚜虫密度为25％-90％。

雪花莲外源凝集素基因在水稻保持系上的转化

通过把雪花莲外源凝集素基因(GNA)与潮霉素抗性基因(Hyg)构建到同一表达载体上,利用基因枪转化方法,把雪花莲外源凝集素基因导入粳稻保持系中,通过PCR方法和潮霉素抗性筛选,检测该基因的导入情况,发现部分克隆植株只具有单一潮霉素抗性,需要结合抗虫性测定来确定GNA基因的导入及表达。

重组雪花莲外源凝集素(GNA)表达条件的优化

研究了含有GNA基因的重组大肠杆菌菌株G2和G3在不同诱导培养温度、起始诱导菌体密度(OD600值)、诱导剂异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)浓度及诱导培养时间等重要因子对重组GNA表达的影响,以期获得重组GNA表达的最佳条件.实验结果表明,不含信号肽的G2菌株和含有信号肽的G3菌株的最佳培养条件分别为:起始诱导菌体密度为OD600≈0.6;诱导剂IPTG浓度为0.1mmol/L;诱导培养时间为6 h;G2和G3的诱导培养温度分别为37℃,28～30℃.该研究结果将为发酵生产重组GNA的工艺提供依据,也为重组GNA开发成为生物农药、试剂和免疫增强剂提供支持.

雪花莲凝集素在转基因蔬菜中的抗虫性

综述了雪花莲凝集素的结构、特性、杀虫机理以及在转基因蔬菜中抗虫性和应用前景。

国槐转雪花莲凝集素基因及抗蚜性

通过农杆菌介导法将雪花莲外源凝集素基因(gna)导入国槐叶片,获得转基因再生植株,经卡那霉素抗性筛选,PCR和Southern blot检测证实,gna基因已经整合进入国槐基因组中。凝血活性检测表明,大部分转基因植株表现出一定的凝血活性,对照未转化植株的凝血活性很低。室内离体叶片虫试试验进一步证明,转基因植株较非转基因植株有一定的抗蚜虫能力。

雪花莲外源凝集素基因在大白菜中的表达和抗蚜性遗传分析

通过农杆菌介导法将雪花莲外源凝集素基因 (gna)导入了大白菜自交系 2 82。分子检测和抗虫试验表明gna基因已整合进大白菜基因组 ,转基因植株较非转化对照植株有一定的抗蚜虫能力 ,抗虫性好的植株可以检测到较强的gna基因转录产物 ;后代遗传分析表明外源基因在转基因大白菜植株 2 82 3和2 82 9的T1代呈 3∶1的孟德尔分离比例。

转雪花莲凝集素酶基因枸杞对蚜虫的抑制作用

利用农杆菌介导法将雪花莲外源凝集素酶基因导入枸杞叶片,获得了完整的转基因植株。对36个经PCR检测为阳性的转基因株系进行了两年抗蚜虫筛选试验,结果表明:蚜口密度抑制率在13.19%-95.4%,平均蚜口密度抑制率为78.59%。

雪花莲

你见过雪花莲吗?如果没有,那就读一读安徒生的这个故事吧。看这个故事之前,小编可真是从没见过这种美丽的花。乍一看,以为这只是一个讲述雪花莲曲折经历的故事,但在最后,我们就会发现作者是借雪花莲赞扬丹麦的一位诗人。我们可能没听说过这位诗人,但故事歌颂的那些思想进步的人则存在于我们周围。隆冬之际,你可有留意身边开放的雪花莲?