雷公藤单体T_(10)对Aβ1-42所致PC12细胞凋亡的抑制作用

阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)是发病率最高的中枢神经系统退变性疾病。目前AD的病因不清,亦无有效的防治手段,其重要的原因是尚无适宜的AD模型。因此,本实验首先建立了PC12细胞系β淀粉样蛋白(β—amyloid,Aβ)细胞损伤模型,在此基础上,探讨了中药免疫抑制剂雷公藤单体T10对细胞的保护作用及其机制。首先用不同浓度的Aβ(5×10～4、5×10-3 、5×10-2 、5×10-1、5、50 μmol/L)与PC12细胞共孵育48 h,用MTT法检测细胞存活率。选取Aβ致使细胞存活率降低的浓度(0.5、5、50 μmol/L)与PC12细胞共孵育48 h,通过流式细胞仪检测凋亡细胞百分比。用1×10-11mol/L的T10预孵育PC12细胞48 h后,加入50μmol/L Aβ共孵育48 h,亦用流式细胞仪检测凋亡细胞百分比,激光共聚焦显微镜检测细胞内钙离子浓度变化。结果显示,Aβ的浓度在50 μmol/L时可使细胞存活率降低至55.1％,凋亡细胞比例显著增加,而1×10-11mol/L的T10可明显降低50μmol/L,Aβ诱导的PC12细胞死亡。50μmol/L。Aβ可促进PC12细胞胞外钙离子内流,1×10-11mol/L的T10对Aβ诱导的胞外钙离子内流有抑制作用。这些观察结果表明T10对Aβ导致的PC12细胞损伤具有明显的保护作用,其机制可能与抑制Aβ诱导的胞内钙离子浓度升高和细胞凋亡有关。

雷公藤单体T4治疗IgA肾病的实验研究

目的 研究雷公藤单体T4对实验性IgA肾病的治疗作用。方法 肝叶切除 ,4、8周后静脉注射脂多糖 (LPS)制作IgA肾病模型 ,予该模型 12 0 μg·kg- 1 ·d- 1 雷公藤单体T4腹腔注射 4周。采用考马斯亮兰法测定 2 4h尿蛋白量 ,采用ELISA法测定血清IgA FN水平 ,采用免疫荧光法检测肾小球系膜区IgA的沉积。 结果 雷公藤单体T4可抑制IgA肾病大鼠尿蛋白的产生 ,显著降低其血清IgA FN水平 ,明显减少肾小球系膜区IgA的沉积并改善其组织学病变。结论 雷公藤单体T4对该IgA肾病模型有明确治疗作用。其抑制系膜细胞增生、IgA系膜区沉积可能是通过降低血清IgA

多种雷公藤单体抑制HL-60细胞腺苷脱氨酶活性

目的研究多种雷公藤单体对HL-60细胞腺苷脱氨酶(ADA)的影响和诱导细胞凋亡作用。方法分别用雷公藤春碱、雷公藤内酯甲、雷公藤乙素、雷公藤黄素、雷公藤呋喃南蛇碱、雷公藤定碱(10mg/L、1mg/L、0.1mg/L)与HL-60细胞共孵育24h后测定ADA活性,选出抑制作用最强的雷公藤内酯甲。将HL-60细胞与雷公藤内酯甲10mg/L、1mg/L、0.1mg/L以及0.1mg/L雷公藤内酯甲+腺苷0.5mmol/L、腺苷0.5mmol/L共孵育24h后测定细胞凋亡率。结果①雷公藤内酯甲和雷公藤呋喃南蛇碱均能明显抑制HL-60细胞ADA活性(P<0.01),抑制作用与浓度成正比;雷公藤春碱仅在10mg/L浓度时有明显的ADA抑制作用(P<0.01);雷公藤黄素、雷公藤定碱与雷公藤乙素无明显ADA抑制作用(P>0.05)。②HL-60细胞与雷公藤内酯甲10mg/L、1mg/L作用均可见明显的凋亡,单加内酯甲0.1mg/L时或单加腺苷时与对照组比较凋亡率无显著差异,但同时再加入腺苷有很高的凋亡率,两者有协同作用。结论雷公藤内酯甲、雷公藤呋喃南蛇碱和雷公藤春碱等雷公藤单体在一定浓度下对HL-60细胞ADA有抑制作用,可能是ADA一种抑制剂。雷公藤内酯甲在抑制细胞ADA活性的同时也造成明显的细胞凋亡。

雷公藤单体对大鼠睾丸间质细胞及支持细胞毒性与其抗生育作用不相关

本文用体外培养的睾丸间质细胞和支持细胞筛选了２２种从雷公藤根、皮中分离、纯化的单体，并选择其中对两种细胞杀伤作用强、弱不同的化合物ＴＷ－９，ＴＷ－５，ＴＷ－２８和ＴＷ－２７进行抗生育试验以及体外杀精试验。结果发现对两种细胞毒性作用最弱的ＴＷ－１９对大鼠有明显的抗生育作用；而毒性作用较强的ＴＷ－５，ＴＷ－２８和最强的ＴＷ－２７则无明显的抗生育作用。然而这四种化合物的体外杀精强度则依次为：ＴＷ－２７，ＴＷ－５，ＴＷ－１９，ＴＷ－２８。与它们的抗生育作用不相关。

环孢素A联合雷公藤单体T_4对人肾小球系膜细胞Ⅳ型胶原合成及Ⅳ型胶原α1、转化生长因子β1mRNA表达的影响

目的探讨环孢素Ａ（ＣsＡ）、雷公藤单体Ｔ４单独或联合使用对肾小球系膜基质合成的影响及可能机制。方法用ＥＬＩＳＡ法测定人系膜细胞培养上清Ⅳ型胶原含量，用ＲＴ－ＰＣＲ法测定人肾小球系膜细胞Ⅳ型胶原α１ｍＲαＮＡ（Ｃｏｌｌα１（Ⅳ）ｍＲＮＡ）、转化生长因子β１（ＴＧＦβ１）ｍＲＮＡ的表达。结果ＣｓＡ可双向调节人系膜细胞Ⅳ型胶原的合成，ＣｓＡ１．０ｕｇ／ｍｌ为促进作用，ＣｓＡ０．０１～０．１ｕｇ／ｍｌ为抑制效应。Ｔ４剂量依赖性促进Ⅳ型胶原产生。两药联合应用具有协同效应，小剂量ＣｓＡ和Ｔ４联合在获得较强免疫抑制作用的同时促胶原生成作用较弱。ＣｓＡ１．０ｕｇ／ｍｌ和Ｔ４１０ｎｇ／ｍｌ均可上调人系膜细胞Ｃｏｌｌβ１（Ⅳ）、ＴＧＦβ１ｍＲＮＡ表达，两者变化趋势基本一致。结论ＣｓＡ和Ｔ４均参与调节基质合成，两药小剂量联合促胶原生成作用减轻，这一作用可能由ＴＧＦβ１介导发生于转录水平。

雷公藤单体对胶质瘤细胞体外抑制作用的实验研究

目的 研究雷公藤单体对胶质瘤细胞的体外抑制作用。方法 MTT法测定 3种雷公藤单体对胶质瘤细胞株SHG44、C6、U2 5 1的体外抑制作用 ;免疫组化法观察雷公藤甲素与雷公藤红素对SHG44胶质瘤细胞bax、bcl- 2蛋白表达的变化。结果 雷公藤二萜类单体雷公藤甲素对胶质瘤细胞有极明显的抑制作用 ;雷公藤三萜类单体雷公藤红素的抑制作用次之。两者均使SHG44细胞bax表达增加 ,bcl- 2表达下降。结论 雷公藤甲素与雷公藤红素对胶质瘤细胞有明显的抗肿瘤作用 ,其作用与促进bax表达 ,抑制bcl- 2表达 。

雷公藤单体T_4的一般毒性和致突变性实验研究

雷公藤单体Ｔ４的一般毒性和致突变性实验研究高玉桂王灵芝王桂芬关慕珍范培东张淑敏雷公藤单体Ｔ４（以下简称Ｔ４）是由雷公藤（Ｔｒｉｐ－ｔｅｒｙｇｒｕｍｗｉｌｆｏｒｄｉＨｏｏｋ．ｆ．）中提取的一种单体成分，化学名为雷公藤氯内酯醇（Ｔｒｉｔｃｈｏｌｏ－ｒｏｌ...

雷公藤单体T_4对类风湿关节炎患者周围血单个核细胞及滑膜细胞产生肿瘤坏死因子的影响

观察了经雷公藤单体Ｔ_４处理２ｈ后对正常人和类风湿关节炎（ＲＡ）患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）及ＲＡ患者消化的滑膜单个细胞（ＲＡ－ＤＳＳＣ）分泌ＴＮＦ的影响。在３５ｎｇ／ｍｌ浓度下，正常人ＰＢＭＣ（ｎ＝１０）及ＲＡ－ＰＢＭＣ（ｎ＝６）Ｔ_４处理组产生ＴＮＦ活性水平明显低于对照组（Ｐ＜０．００１）。延长Ｔ_４作用时间至６ｈ，ＲＡ－ＰＢＭＣＴ_４处理组ＴＮＦ活性水平下降更为明显（Ｐ＜０．００１），表明Ｔ_４可抑制ＰＢＭＣ体外产生ＴＮＦ活性水平，其对ＲＡ－ＰＢＭＣ作用不同时间的抑制率分别为２５．５４％及４０．５１％（Ｐ＜０．０１），说明Ｔ_４抑制作用可能与作用时间有关。同时Ｔ_４亦可抑制ＲＡ－ＤＳＳＣ体外产生ＴＮＦ活性水平（Ｐ＜０．０１），提示Ｔ_４有望成为一新的植物性治疗ＲＡ药物。

雷公藤单体(TW_(19))雄性抗生育活性的研究

雷公藤单体(TW_(19))系从雷公藤中分离、提纯出的一个二萜类化合物,本实验观察其对雄性大鼠抗生育作用及可能机理.TW_(19)(400μg/kg·d)给药三周后无抗生育作用,五周后生育力丧失,附睾尾部精子活力和密度明显降低,畸形率升高,附睾重量减轻,但对附睾上皮的形态变化无明显影响,管腔内可见畸形精子及脱落生精细胞.附睾尾部液中肉毒碱含量,给药组较对照组显著降低.TW_(19)对附睾头部α-糖苷酶和酸性磷酸酶含量没有明显影响;对生精上皮影响轻微,各期曲细精管基本正常,少数表现出精子细胞轻度损伤;TW_(19)可使睾丸重量减轻,并可显著降低睾丸透明质酸酶含量,但对睾丸乳酸脱氢酶-C_4没有明显抑制作用;对前列腺、储精囊等附属性腺器官重量没有影响.结论:TW_(19)对雄性大鼠具有确定的抗生育效果,作用环节可能在精子细胞及附睾.

雷公藤单体Y_4对大白鼠精子作用的超微结构观察

雄性成熟大白鼠经口喂雷公藤单体＆＿４５０μｇ／ｋｇ／日，每周６天，６周后断头处死，采用电子显微镜观察睾丸曲细精管内和附睾内的精子，结果显示Ｔ＿４影响曲细精管内精子形成过程，经过附睾后精子损伤加重。微管与微丝的结构和功能的破坏是导致精子畸形的主要原因，精子膜结构对Ｔ＿４作用也非常敏感。

雷公藤单体TZ93对人外周血单个核细胞表型的影响

研究雷公藤治疗系统性红斑狼疮的作用机制。以激活的正常人外周血单个核细胞（PBMC）为细胞模型，应用荧光激活细胞分类仪（FACS）分析雷公藤单体TZ93对PBMC细胞表型的影响。10名正常女性的PBMC分成3组：Ⅰ组PBMC，Ⅱ组PBMC＋PHA，Ⅲ组PBMC＋PHA＋TZ93，分别加入鼠抗人CD8、CD4、CD25、NK抗体。结果：FACS显示TZ93能显著抑制激活的PBMC中CD4＋、CD8＋、CD25＋的表达及NK活性。结论：TZ93能明显抑制PBMC表型的表达，是一种有效的细胞免疫抑制剂。

雷公藤单体T_4及人工麝香对实验变态反应性神经炎的治疗作用

雷公藤单体Ｔ４及人工麝香具有调节免疫机制及抗炎作用，人工麝香越早应用其抗炎作用越强，根据此两种药的药理特性及实验变态反应性神经炎（ＥＡＮ）的发病机制，本实验设立了５组进行比较：即发病假治组、人工麝香预防及治疗组、地塞米松及雷公藤单体Ｔ４治疗组。结果：Ｔ４单体可使ＥＡＮ动物模型发病兔临床评分减低，对炎细胞渗出及脱髓鞘均有明显改善，与地塞米松相似，尽管人工麝香对ＥＡＮ的临床和病理变化有轻微的预防及治疗作用，但与假治组无统计学差别。提示地塞米松及Ｔ４单体有肯定的治疗价值，而人工麝香的预防及治疗价值不肯定。

雷公藤单体T_4体外给药对IL-2产生及IL-2R表达的影响

目的 探讨雷公藤单体T4 的抗炎作用。方法 应用体外细胞培养技术观察不同浓度T4 对单个核细胞 (BPMC)产生IL - 2及IL - 2R表达的影响。结果 T4 对IL - 2及IL - 2R有剂量相关的抑制作用。

雷公藤单体T4对小鼠免疫系统的影响

中草药雷公藤的化学成份包括萜类、甙类和生物碱等，经过临床应用和实验研究证明：雷公藤的多种成份具有抗炎和免疫抑制作用，其中甙类的疗效好，而副作用淖从以藤甙类粗提物各分离提纯的单体成份。作为医科院雷公藤协作组成员之一，在参考了以往各家报导的基础上我们通过把用药稀释度和加大的方法观察了Ｔ４在小鼠体内，体外对免疫的影响，得 往报导不同的结果。

棉酚和雷公藤单体T_7对人精子ATP酶活性的比较研究

目的 比较两种男性节育药棉酚和雷公藤单体T_7对人精子ATP酶活性的作用。方法 将人精子放入反应体系(80mmol/L NaCl,20mmol/L KCl,3mmol/L MgCl_2,40mmol/L Tris-HCl,3mmoL ATP,5mmol/L EDTA)根据所释放的无机磷含量计算ATP酶活性。结果 棉酚对人精子ATP酶活性具有抑制作用,且呈浓度依赖关系,雷公藤单体T_7则无抑制作用。结论 棉酚与T_7抗生育作用环节不同。

环孢素A联合雷公藤单体T_4对人系膜细胞增殖及其表达、合成白细胞介素-6的影响

目的探讨环孢素Ａ（ＣｓＡ）和雷公藤单体Ｔ４（Ｔ４）的免疫抑制机制以及两药联合使用的效应，特别是小剂量ＣｓＡ、Ｔ４联合获得较强免疫抑制效应的可能性。方法用３Ｈ－ＴｄＲ掺入率法测定人系膜细胞（ＭｓＣ）增殖，用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）和ＥＬＩＳＡ法测定细胞ＩＬ－６ｍＲＮＡ表达及培养上清ＩＬ－６含量。结果ＣｓＡ和Ｔ４均剂量依赖性抑制系膜细胞增殖及ＩＬ－６合成，两药联合产生明显的协同作用，小剂量ＣｓＡ、Ｔ４联合与大剂量ＣｓＡ作用相当。