HPLC法同时测定昆明山海棠中雷公藤吉碱和雷公藤次碱的含量

目的:建立HPLC法同时测定昆明山海棠中雷公藤吉碱和雷公藤次碱的含量测定方法。方法:采用高效液相色谱法测定含量,使用Phenomsil C18色谱柱,检测波长230 nm,以乙腈-0.02 mol/L磷酸二氢钾水溶液(42∶58)为流动相,流速1.0 mL/min,柱温25℃。结果:通过方法学考察,雷公藤吉碱进样量在164.96～1649.60 ng范围内与峰面积呈良好的线性关系,r1=0.9997;雷公藤次碱在81.76～2044.00 ng范围内与峰面积呈良好的线性关系,r2=0.9998,两者的平均回收率分别为97.8%(RSD=4.9%,n=6)、93.7%(RSD=3.6%,n=6)。结论:该方法准确、重复性好,适用于昆明山海棠中两种生物碱的含量测定。

雷公藤吉碱对粘虫成虫飞行肌结构的影响

【目的】明确雷公藤吉碱对粘虫Mythimna separata成虫飞行肌结构的影响,为进一步探讨其杀虫机理奠定基础。【方法】采用饲喂法测定了雷公藤吉碱对粘虫成虫的胃毒活性及致毒症状。采用光镜和透射电镜技术,从显微和超微水平观察雷公藤吉碱(300μg/mL)对粘虫成虫飞行肌结构的影响。【结果】雷公藤吉碱对粘虫成虫具有较强的胃毒作用,其24 h致死中浓(LC_(50))值为194.53μg/mL;试虫中毒的典型特征为麻痹致死;显微观察显示处理组试虫肌肉组织结构紊乱,肌纤维间距增大,肌膜消解,横纹结构消失,且随中毒程度的加深,病变程度加剧;超微观察显示处理试虫肌细胞结构破坏,肌膜脱落,线粒体肿胀,肌质网扩张,肌原纤维断裂,且随中毒程度的加深,病变呈渐进性加剧。【结论】雷公藤吉碱可致粘虫成虫飞行肌病变,影响肌肉正常收缩,从而引起试虫麻痹致死,其作用靶标可能位于肌肉系统。

HPLC法测定湿疹净中雷公藤吉碱和苦参碱的含量

目的 建立湿疹净喷雾剂的质量控制标准。方法 采用HPLC法同时测定样品中雷公藤吉碱和苦参碱的含量。色谱条件 :HypersilODS色谱柱 (4.6× 2 5 0mm ,5 μm) ;流动相 :乙腈 - 0 .0 2mol·L-1磷酸二氢钠水溶液 (6∶4 ) ;流速 1ml/min ;检测波长2 10nm ;柱温 2 0℃ ;进样量 1～ 6 μl。结果 线性范围分别是 :雷公藤 0 .6 2 4～ 3.74 4 μg ,r =0 .9995 ;苦参碱 0 .88～ 5 .2 8μg,r =0 .9996。平均回收率 :雷公藤吉碱为 97.4 % ,RSD =1.5 1% ;苦参碱为 97.5 % ,RSD =1.15 %。结论 本方法测定结果准确、灵敏。

雷公藤中雷公藤甲素、雷公藤吉碱和次碱的高效液相色谱-电喷雾串联质谱分析方法

建立了一种高效液相色谱-电喷雾串联质谱法（HPLC-ESI-MS/MS）测定雷公藤提取物中雷公藤甲素（triptolide）、雷公藤吉碱（wilforgine）和雷公藤次碱（wilforine）3种活性物质的分析方法,比较了雷公藤不同植株部位和不同组织培养产物中3种活性物质的含量差异。分别采用回流和超声两种方法提取。回流提取中,样品经V（甲醇）：V（乙腈）=1：1溶液回流,采用Supelclean LC-Si固相萃取小柱净化;超声提取中,样品经乙醇超声,用OASIS HLB固相萃取柱净化。采用C18色谱柱分离,乙腈和水作为流动相进行梯度洗脱,采用HPLC-ESI-MS/MS测定。结果显示：在雷公藤植株中,雷公藤甲素含量最高的是不定根,发状根、根皮中含量次之,茎、叶中含量很少;雷公藤次碱含量最高的是发状根,其次是根皮,叶中未检测出;发状根和根皮中雷公藤吉碱的含量相当。在0.01~2 mg/kg添加水平下,3种活性物质的回收率在81%~109%之间,相对标准偏差（RSD）为0.4%~1.8%（n=5）。检出限在0.08~0.12μg/m L之间。该方法可以准确、快速地对雷公藤提取物及其产品进行质量监控。

雷公藤生物碱乳油中雷公藤次碱和吉碱的分析测定

雷公藤次碱和吉碱是雷公藤生物碱杀虫剂的主要活性成分。试验采用高液相色谱法对雷公藤生物碱乳油中的雷公藤次碱和雷公藤吉碱进行了分析测定，色谱条件为：Microsorb-100 C18反相色谱柱（250mm×4．6mm，5μm），以乙腈和0．02mol/L磷酸二氢钾水溶液作为流动相，梯度进行洗脱：1～8min时从30：70到100：0，最后保持乙腈洗脱2min，进样量10μl，流速为1ml／min，检测波长为254nm，柱温为35℃。方法的线性相关性为0．9996—0．9998；二种生物碱的加样回收率分别为98．9％，99．8％，RSD分别为0．86％，0．54％。

正交试验优选雷公藤药材生物碱的提取工艺

目的:建立雷公藤药材生物碱的最佳提取工艺。方法:以雷公藤总生物碱、雷公藤吉碱、雷公藤次碱和浸膏得率为指标,采用正交设计优选提取工艺参数。结果:最佳工艺条件:药材提取前浸泡1h,分别用12、10倍量的80%乙醇回流提取2次,每次1h,调pH为4。结论:此工艺合理可行,适用于雷公藤药材生物碱的提取。

雷公藤生物碱的分离鉴定

我们从雷公藤（ＴｒｉｐｔｅｒｙｇｉｕｍＷｉｌｆｏｒｄｉｉＨｏｏｋ．ｆ．）中按常法分离得到总碱后经ＨＰＬＣ分析出现８个峰，经硅胶柱层析及硅胶ＲＰ－１８反相中压柱层析分离得到５个生物碱，由化学方法和光谱分析证明为雷公藤吉碱（Ｗｉｌｆｏｒｇｉｎｅ２０）．雷公藤次碱（Ｗｉｌｆｏｒｉｎｅ２１），雷公藤春碱（Ｗｉｌｆｏｒｔｒｉｎｅ２２），雷公藤碱戊（Ｗｉｌｆｏｒｉｄｉｎｅ２３），呋喃南蛇碱（Ｃｅｌａｆｕｒｉｎｅ１６）。ＨＰＬＣ分析指出含量最高为雷公藤吉碱，其次为呋喃南蛇碱。