雷公藤-甘草配伍干预肾病综合征大鼠AVPR2/AQP2的表达

目的探讨阿霉素诱导的肾病综合征大鼠AVPR2和AQP2的表达以及雷公藤-甘草配伍的干预机制。方法选取成年健康雄性SD大鼠,随机选取10只作为空白组,其余大鼠均接受尾静脉注射给予6.5 mg·kg^(-1)的阿霉素诱导复制大鼠肾病综合征模型。并采用随机数字法将造模成功的大鼠分为4组(n=10):模型组(n=10)、阳性对照组(雷公藤多苷片80 mg·kg^(-1)·d^(-1),n=10)、雷公藤组(雷公藤提取物240 mg·kg^(-1)·d^(-1),n=10)及雷公藤-甘草组(雷公藤提取物240 mg·kg^(-1)·d^(-1)+甘草提取物80 mg·kg^(-1)·d^(-1),n=10)。测定大鼠24 h尿蛋白含量、血清白蛋白、尿素、肌酐水平、肾脏中AVPR2和AQP2 mRNA表达水平。结果大鼠经阿霉素造模后表现出大量蛋白尿、低蛋白血、高度水肿症候。相比于模型组,雷公藤及配伍给药组大鼠精神状态较好,体质量增加明显。与模型组相比,雷公藤组24 h尿蛋白、尿素、AQP2 mRNA表达均显著下降(P<0.05);雷公藤-甘草组24 h尿蛋白、血清白蛋白、尿素、肌酐、AVPR2 mRNA及蛋白、AQP2 mRNA及蛋白表达均显著回调(P<0.05)。相比于雷公藤组,雷公藤-甘草组的24 h尿蛋白、血清白蛋白、AVPR2 mRNA、AQP2蛋白表达回调更加显著(P<0.05)。结论雷公藤可显著降低肾病综合征大鼠AVPR2和AQP2 mRNA高表达,且与甘草配伍后效果更优,雷公藤-甘草配伍给药干预阿霉素诱导的肾病综合征大鼠的机制与纠正AVPR2与AQP2的高表达、减少水的重吸收有关。

雷公藤甘草配伍干预肾病综合征大鼠的血清代谢组学分析

目的采用代谢组学方法研究雷公藤甘草配伍后,肾病综合征大鼠血清内源性物质的动态变化,提示配伍减毒增效机制。方法取SD大鼠,进行随机分组:空白组、模型组、雷公藤给药组(TPW组)和雷公藤甘草配伍给药组(TPW-GLY组)。应用UPLC-Q-TOF-/MS技术手段,识别血清样品的代谢物谱,并采用PCA和OPLS-DA进行生物标记物鉴定。结果4组大鼠血清的代谢轮廓具有显著差异,空白组与模型组间识别出24个具有显著性差异的生物标记物,有21个生物标记物在TPW-GLY组内识别并回调,有15个生物标记物在TPW组中被回调。最终筛选并鉴定了7个内源性生物标记物,分别为溶血磷脂酰胆碱(22:6[4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z])、磷脂酰乙醇胺(24:1[15Z]/15:0)、油酸酰胺、花生四烯酸、亚油酸、棕榈酸、油酸。结论通过雷公藤甘草配伍后,血清中7种生物标记物水平发生变化,可能改善了肾病综合征大鼠机体的磷脂代谢、脂肪酸生物合成与代谢、花生四烯酸新陈代谢等过程,起到减毒增效的作用。

复方雷公藤汤对肾病大鼠肝脏减毒增效作用的实验研究

目的：借助复方雷公藤汤及其拆方对肾病大鼠的干预效应,考察雷公藤不同配伍对雷公藤的减毒增效作用;筛取治疗肾病综合征毒效关系最优化的中药小复方。方法：大鼠尾静脉注射阿霉素,复制微小病变肾病综合征模型。以复方雷公藤汤及其拆方实施干预,以强地松做阳性对照,检测生化指标、组织病理学指标。结果：与模型公藤组24 h尿蛋白（92.60±18.124 3）相比较,全方组（48.60±11.749 2）、雷芪组（53.20±13.206 1）、雷甘组（56.40±16.520）降低24 h尿蛋白;全方组TP 68.47±5.250 4、ALB 28.97±3.009 3、雷芪组TP 68.21±4.191 27、ALB 27.58±2.618 2、雷甘组TP 67.51±5.420 8、ALB 26.56±1.898 1与模型公藤组TP 58.98±4.8401、ALB 20.98±3.493 4均升高TP、ALB,与模型公藤组chol 1.487 0±0.647 1、TG 1.704 0±1.582 4相比较,全方组chol 0.786 0±0.134 4、TG 0.557 0±0.138 7、雷芪组chol 0.70±0.129 7、TG 0.650 9±0.120 3、雷甘组chol0.974 0±0.328 9、TG 0.668 0±0.184 5均降低;与模型公藤组AST 133.2±7.871 2、ALT 62.60±7.919 0相比较,全方组AST 72.70±10.144 0、ALT 41.80±8.966 6、雷甘组AST 84.20±5.633 2、ALT 38.20±5.846 2、雷金组AST 115.50±9.686 8、ALT 66.10±9.596 9、雷归组AST 128.7±10.739 9、ALT 61.60±8.821 7;差异显著（均P〈0.05）。雷公藤不同配伍组对肾脏组织形态学、超微结构上较对照组病理损害有不同程度减轻。全方组、雷甘组、雷何组肝脏组织形态学、超微结构上较对照组病理损害有不同程度减轻。结论：全方组、雷芪组、雷甘组起到增效作用。全方组、雷甘组、雷何组可减低雷公藤肝脏毒性。

复方雷公藤汤对肾病大鼠心脏减毒增效作用的实验研究

目的:研究复方雷公藤汤及其拆方对肾病大鼠心脏的减毒增效作用。方法:大鼠尾静脉注射阿霉素复制微小病变肾病综合征模型,检测生化指标、组织病理学指标。结果:与模型公藤组比较,全方组、雷芪组、雷甘组降低24 h尿蛋白,全方组TP(Total protein总蛋白)、ALB(albumin白蛋白)、雷芪组TP、ALB、雷甘组TP、ALB均升高;与模型公藤组chol(cholesterol胆固醇)、TG(Triglycerides甘油三脂)比较,全方组、雷芪组、雷甘组cho、TG均降低;与模型公藤组CK(Creatine kinase肌酸激酶)、CK-MB(Creatine kinase isoenzyme肌酸激酶同工酶)比较,全方组、雷何组、雷芪组、雷甘组、雷金组、雷归组CK、CK-MB均降低,差异有统计学意义。雷公藤不同配伍组在肾脏组织形态学、超微结构有不同程度减轻,各配伍组心脏组织形态学、超微结构病理损害均有不同程度减轻。结论:全方组、雷芪组、雷甘组起到增效作用,雷公藤不同配伍组可减低雷公藤心脏毒性,全方组、雷何组、雷芪组、雷甘组较雷归组、雷金组效果好。

复方雷公藤汤对肾病大鼠血液系统减毒作用的实验研究

目的借助复方雷公藤汤及其拆方对肾病大鼠的干预效应,考察雷公藤不同配伍对雷公藤血液系统减毒作用;筛取治疗肾病综合征毒效关系最优化的中药小复方。方法大鼠尾静脉注射阿霉素,复制微小病变肾病综合征模型。以复方雷公藤汤及其拆方实施干预,以强地松做阳性对照,检测血常规WBC、PLT指标。结果与模型公藤组比较,全方组与拆方五组WBC、PLT差异显著。结论雷公藤不同配伍组均可对抗雷公藤血液系统毒性,其中全方组、雷何组、雷金组较佳。

清络通痹精简方中雷公藤“异类相制”减毒机制的化学基础

目的:通过测定清络通痹精简方、单味雷公藤、雷公藤配伍三七、雷公藤配伍地黄组合中雷公藤3种毒性成分雷公藤甲素、雷公藤红素、雷公藤内酯甲的溶出含量,从化学成分角度探索"异类相制"减毒的规律,为雷公藤的临床配伍减毒应用提供实验依据。方法:利用高度选择性和灵敏度的三重四级杆质谱(LC-MS/MS)同时对3种有效成分——雷公藤甲素、雷公藤红素和雷公藤内酯甲进行检测,比较单味雷公藤组、雷公藤配伍三七组、雷公藤配伍地黄组、清络通痹精简方组中3种有效成分的溶出变化。结果:雷公藤药材水提液中雷公藤甲素的含量最高,雷公藤内酯甲次之,雷公藤红素的含量最低。而当雷公藤药材用量相同的情况下,雷公藤中3种有效成分在不同配伍环境下的溶出趋势一致,溶出顺序为单味雷公藤组>雷公藤配伍地黄组>雷公藤配伍三七组>清络通痹精简方组。结论:在配伍组合中三七对雷公藤3种有效成分的溶出有显著地抑制作用,地黄的抑制作用较弱,而清络通痹精简方中雷公藤3种有效成分的溶出明显降低。该研究结果为雷公藤的临床"异类相制"配伍减毒理论提供了实验依据。

复方雷公藤汤对肾病大鼠肾脏减毒增效作用的实验研究

目的通过复方雷公藤汤及其拆方对肾病大鼠的干预效应，考察雷公藤不同配伍对雷公藤的减毒增效作用；选取治疗肾病综合征毒效关系最优化的中药复方。方法按完全随机化原则将110只Wister大鼠分为11组，其中。肾病模型组9组（雷公藤组、雷何组、雷归组、雷芪组、全方组、雷金组、雷甘组、强地松组、肾病模型组），空白组2组（正常对照组、正常公藤组），每组10只，分笼饲养。正常对照组、正常公藤组大鼠尾静脉注射生理盐水0．65ml；肾病模型组9组尾静脉注射阿霉素0．65ml复制微小病变肾病综合征模型。复方雷公藤汤及其拆方实施干预，其全方及拆方中药按体表面积换算确定各药剂量。以强地松做阳性对照，采用全自动生化仪检测24h尿蛋白、总蛋白、白蛋白、尿素氮、肌酐等指标。结果治疗2周后，与雷公藤组24h尿蛋白（92．60±18．12）mg比较，全方组（48．60±11．75）mg、雷芪组（53．20±13．206）mg、雷甘组（56．40±16．52）mg均降低。全方组总蛋白、白蛋白[分别为（68．47±5．25）g／L、（28．97±3．01）g／L]、雷芪组[分别为（68．21±4．19）g／L、（27．58±2．62）g／L]、雷甘组[分别为（67．51±5．42）g／L、（26．56±1．89）g／L]，与雷公藤组[分别为（58．98±4．84）g／L、（20．98±3．49）g／L]比较均升高（P均〈0．05）。与雷公藤组胆固醇、甘油三酯[分别为（1．48±0．65）mmol／L、（1．70±1．58）mmol／L]比较，全方组[分别为（0．78±0．134）mmol／L、（0．56_＋0．14）mmol／L]、雷芪组[分别为（0．70±0．13）mmol／L、（0．65±0．12）mmol／L]、雷甘组[分别为（0．97±0．33）mmol／L、（0．66±0．18）mmol／L]均降低∽均〈0．0）。与雷公藤组尿素氮、肌酐[分别为（14．20±2．12）mmol／L、（78．10±6．14）~mol／L]比较，全方组[分别为（7．59_＋0．78）mmol／L、（39．60±8．33）rtrnol／L]、雷甘组[分别为（9．48±0．82）mmol／L、（38．30_＋7．89）mnol／L]、雷金组[分别为（9．71±1．33）mmol／L、（41．40±6．45）rtmol／L]、雷归组[分别为（8．30±1．12）mmol／L、（36．90±6．15）μmol／L]均降低，差异有统计学意义（P均〈0．05）。雷公藤不同配伍组的肾脏组织形态学、超微结构改变轻于肾病模型组。结论全方组、雷芪组、雷甘组有增效作用；全方组、雷甘组、雷金组、雷归组可减低雷公藤对肾脏的毒性。