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肝细胞DEP结构域蛋白5/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物1信号轴在非酒精性脂肪肝形成中的作用
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作者 徐琳 熊熙文 +3 位作者 李遵 黄蓉 麻红辉 马洁 《解剖学报》 CAS CSCD 2024年第3期295-301,共7页
目的建立肝细胞Dishevelled/Egl-10/pleckstrin(DEP)结构域蛋白5(DEPDC5)基因(Depdc5)肝细胞特异性敲除小鼠高脂喂养模型,探讨DEPDC5/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物1(mTORC1)信号轴对非酒精性脂肪肝的调控。方法构建肝细胞特异性敲除Dep... 目的建立肝细胞Dishevelled/Egl-10/pleckstrin(DEP)结构域蛋白5(DEPDC5)基因(Depdc5)肝细胞特异性敲除小鼠高脂喂养模型,探讨DEPDC5/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物1(mTORC1)信号轴对非酒精性脂肪肝的调控。方法构建肝细胞特异性敲除Depdc5^(flox/flox)模型;Alb-Cre小鼠(LKO),Depdc5^(flox/flox)小鼠(Loxp)作为对照。32只2~3月龄雄性小鼠随机分为高脂LKO组、高脂Loxp对照组、高脂+雷帕霉素LKO组及高脂+雷帕霉素Loxp对照组,每组8只。检测肝脏血清生物化学指标、脂质含量、蛋白、mRNA及病理切片,采用GraphPad Prism 8软件进行统计学分析。结果高脂喂养导致LoxP小鼠肝脏脂肪变性,LKO小鼠肝脏脂肪变性减轻但合并出现肝损伤;雷帕霉素抑制了Depdc5敲除引起的mTORC1通路激活,显著改善Loxp小鼠肝脏脂肪变性,并改善LKO小鼠的肝损伤。结论Depdc5基因敲除能够保护高脂喂养小鼠肝脏脂肪变性,雷帕霉素可以改善DEPDC5缺失诱发的肝损伤。 展开更多
关键词 Dishevelled/Egl-10/pleckstrin结构域蛋白5 哺乳动物雷帕霉素蛋白 高脂饮食 雷帕霉素 非酒精性脂肪肝 免疫印迹法 小鼠
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橘皮素通过腺苷酸活化蛋白激酶/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路调控细胞自噬促进大鼠腹主动脉瘤发生发展的机制
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作者 王大鹏 冯玉婧 +3 位作者 张硕 任庆帅 裴建军 赵长全 《中国医药》 2024年第3期351-355,共5页
目的探讨橘皮素通过腺苷酸激活蛋白激酶(AMPK)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路调控细胞自噬促进大鼠腹主动脉瘤(AAA)发生发展的机制。方法选取无特定病原体级SD雌性大鼠45只,其中20只大鼠皮下埋植0.9%氯化钠注射液缓释泵(对照组)... 目的探讨橘皮素通过腺苷酸激活蛋白激酶(AMPK)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路调控细胞自噬促进大鼠腹主动脉瘤(AAA)发生发展的机制。方法选取无特定病原体级SD雌性大鼠45只,其中20只大鼠皮下埋植0.9%氯化钠注射液缓释泵(对照组),剩余25只大鼠皮下埋植血管紧张素Ⅱ缓释泵(AAA组)构建AAA模型。造模过程中AAA组大鼠死亡5只,共20只造模成功。对照组予0.9%氯化钠注射液灌胃,AAA组予橘皮素灌胃1次/d,持续7 d。观察大鼠主动脉血管平滑肌细胞活力、细胞凋亡率、细胞迁移率,比较2组细胞蛋白水平、自噬细胞基因表达量、细胞因子水平及AMPK/mTOR信号通路表达量。结果AAA组细胞活力高于对照组,细胞凋亡率、细胞迁移率均低于对照组(均P<0.05);β-连环蛋白、B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)相关X蛋白水平均低于对照组,细胞周期蛋白D1、Bcl-2水平均高于对照组(均P<0.05);Beclin1、Atg4b、Bnip3、Vps34、LC3基因表达量均低于对照组(均P=0.001);白细胞介素6、正常T淋巴细胞表达和分泌的细胞因子、转化生长因子β、胰岛素样生长因子1、单核细胞趋化蛋白1水平均低于对照组(均P<0.05);AMPK、mTOR表达量均高于对照组[(1.61±0.35)比(1.10±0.21)、(2.11±0.14)比(1.13±0.06)](均P=0.001)。结论橘皮素对AAA大鼠细胞蛋白水平、自噬细胞水平及转化生长因子水平有调节作用,其作用机制可能与AMPK/mTOR信号通路调控相关。 展开更多
关键词 腹主动脉瘤 腺苷酸活化蛋白激酶/哺乳动物雷帕霉素蛋白信号通路 橘皮素
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鳖甲煎丸对肝癌大鼠黏着斑激酶/雷帕霉素靶蛋白通路的影响 被引量:1
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作者 李杳瑶 刘华 +4 位作者 孙铜林 伍静 孟小莎 伍梦思 苏联军 《陕西中医》 CAS 2024年第3期308-312,共5页
目的:探讨鳖甲煎丸对肝癌模型大鼠肝组织病理特征及FAK/mTORC1通路的影响。方法:HepG2(1×10^(7))细胞注射于大鼠右腋皮下,建立肝癌模型,分为模型组、5-氟尿嘧啶组、鳖甲煎丸低剂量组、鳖甲煎丸高剂量组,另设正常组。各药物组给予... 目的:探讨鳖甲煎丸对肝癌模型大鼠肝组织病理特征及FAK/mTORC1通路的影响。方法:HepG2(1×10^(7))细胞注射于大鼠右腋皮下,建立肝癌模型,分为模型组、5-氟尿嘧啶组、鳖甲煎丸低剂量组、鳖甲煎丸高剂量组,另设正常组。各药物组给予相应药物灌胃,持续给药4周,正常组、模型组给予等体积的0.9%氯化钠溶液。实验结束后,测定肝癌组织重量、肝癌组织体积、肝癌组织抑瘤率、肝癌FAK、mTORC1水平、肝癌VEGFR-2、VEGF、IL-4、IL-8、TNF-α蛋白水平。结果:与正常组比较,模型组肝癌组织重量、肝癌组织体积、肝癌组织抑瘤率、VEGFR-2、VEGF、IL-4、IL-8、TNF-α蛋白、肝癌FAK、mTORC1 mRNA和蛋白表达升高(均P<0.05)。与模型组比较,5-氟尿嘧啶组、鳖甲煎丸低剂量组、鳖甲煎丸高剂量组肝癌组织重量、肝癌组织体积、肝癌组织抑瘤率、VEGFR-2、VEGF、IL-4、IL-8、TNF-α蛋白、肝癌FAK、mTORC1 mRNA和蛋白表达降低(均P<0.05)。鳖甲煎丸高剂量组肝癌组织重量、肝癌组织体积、肝癌组织抑瘤率、VEGFR-2、VEGF、IL-4、IL-8、TNF-α蛋白、肝癌FAK、mTORC1 mRNA和蛋白表达低于鳖甲煎丸低剂量组(均P<0.05)。结论:鳖甲煎丸对大鼠肝癌具有明显抑制作用,能减轻大鼠肝癌所致的病理损伤,其机制可能与鳖甲煎丸抑制肝癌FAK、mTORC1表达,诱导肝癌细胞凋亡,降低炎症反应有关。 展开更多
关键词 肝癌 鳖甲煎丸 斑激酶 雷帕霉素蛋白 肝癌组织重量 抑瘤率
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替米沙坦通过磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路抑制硬化性胃癌细胞增殖
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作者 柏希慧 刘诗雨 孙媛媛 《中国医药》 2024年第6期842-846,共5页
目的研究替米沙坦对硬化性胃癌(SGC)细胞增殖的影响,并探讨其作用机制。方法常规培养胃癌细胞MKN1和SGC细胞HSC45。采用细胞计数盒8实验检测替米沙坦对MKN1和HSC45增殖能力的影响;流式细胞仪检测替米沙坦对HSC45凋亡和细胞周期的影响;... 目的研究替米沙坦对硬化性胃癌(SGC)细胞增殖的影响,并探讨其作用机制。方法常规培养胃癌细胞MKN1和SGC细胞HSC45。采用细胞计数盒8实验检测替米沙坦对MKN1和HSC45增殖能力的影响;流式细胞仪检测替米沙坦对HSC45凋亡和细胞周期的影响;蛋白质印迹法检测激活替米沙坦对HSC45自噬和磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路相关蛋白表达的影响;采用PI3K/AKT/mTOR信号通路激活剂SC79和替米沙坦共同处理HSC45,分别检测激活PI3K/AKT/mTOR信号通路后,替米沙坦对HSC45增殖、凋亡、自噬和细胞周期的影响。结果替米沙坦呈浓度和时间依赖性抑制MKN1和HSC45细胞增殖(均P<0.001),且对HSC45细胞增殖抑制效果更为显著(P<0.05)。替米沙坦组HSC45早期凋亡率、LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达量、G_(0)/G_(1)期细胞周期比例均高于对照组[(26.2±2.6)%比(1.3±0.4)%、(1.02±0.09)比(0.29±0.04)、(53.4±3.4)%比(38.1±2.9)%],磷酸化PI3K、磷酸化AKT和磷酸化mTOR蛋白表达均低于对照组(均P<0.05)。替米沙坦组和替米沙坦+SC79组HSC45细胞增殖抑制率、细胞凋亡率、LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达及G_(0)/G_(1)期细胞比例均高于对照组,但替米沙坦+SC79组均低于替米沙坦组(均P<0.05)。结论替米沙坦下调PI3K/AKT/mTOR信号通路,促进SGC细胞凋亡、自噬和周期阻滞,进而抑制SGC细胞增殖能力。 展开更多
关键词 替米沙坦 硬化性胃癌 磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素蛋白信号通路 增殖
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肠道菌群通过去乙酰化酶3激活单磷酸腺苷活化的蛋白激酶/雷帕霉素信号通路对脓毒症心肌炎和心肌细胞线粒体损伤的影响 被引量:2
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作者 林爽 翟京宇 罗彬 《临床内科杂志》 CAS 2024年第4期278-281,共4页
目的探讨正常肠道粪菌移植(FMT)对脓毒症心肌炎和心肌细胞线粒体损伤的改善作用与机制。方法将40只SD大鼠随机分为盲肠结扎穿孔术(CLP)建立的脓毒症模型组(CLP组)、假手术对照组(sham组)、FMT治疗组(CLP+FMT组)及FMT联合去乙酰化酶3(SIR... 目的探讨正常肠道粪菌移植(FMT)对脓毒症心肌炎和心肌细胞线粒体损伤的改善作用与机制。方法将40只SD大鼠随机分为盲肠结扎穿孔术(CLP)建立的脓毒症模型组(CLP组)、假手术对照组(sham组)、FMT治疗组(CLP+FMT组)及FMT联合去乙酰化酶3(SIRT3)抑制剂(3-TYP)治疗组(CLP+FMT+3-TYP组),每组各10只。采用HE染色观察大鼠心肌组织的病理变化,采用ELISA检测大鼠血液中IL-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α的表达水平,采用Western blot检测大鼠心肌组织中IL-1β、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、去乙酰化酶3(SIRT3)、单磷酸腺苷活化的蛋白激酶(AMPK)、磷酸化AMPK(p-AMPK)、雷帕霉素(mTOR)及p-mTOR表达水平,采用透射电镜观察大鼠心肌细胞线粒体形态,采用流式细胞术分析大鼠心肌细胞的线粒体膜电位变化。结果与sham组比较,CLP组、CLP+FMT组、CLP+FMT+3-TYP组心肌组织SIRT3和p-mTOR表达水平均显著降低,而心肌组织p-AMPK和血液中IL-1β、IL-6及TNF-α的表达水平均显著增加;与CLP组比较,CLP+FMT组心肌组织SIRT3和p-mTOR的表达水平均显著增加,而心肌组织p-AMPK和血液中IL-1β、IL-6及TNF-α的表达水平均显著降低;与CLP+FMT组比较,CLP+FMT+3-TYP组心肌组织SIRT3和p-mTOR的表达水平均显著降低,而心肌组织中p-AMPK和血液中IL-1β、IL-6及TNF-α的表达水平均显著增加;与sham组比较,CLP组线粒体膜电位的红/绿荧光强度比值显著下降;与CLP组比较,CLP+FMT组线粒体膜电位的红/绿荧光强度比值显著增加;与CLP+FMT组比较,CLP+FMT+3-TYP组线粒体膜电位的红/绿荧光强度比值显著下降(P<0.05)。结论肠道菌群通过SIRT3激活AMPK/mTOR信号通路对脓毒症心肌炎和心肌细胞线粒体损伤均有改善作用。 展开更多
关键词 肠道粪菌移植 脓毒症心肌炎 线粒体损伤 去乙酰化酶3 单磷酸腺苷活化的蛋白激酶/雷帕霉素信号通路
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雷帕霉素靶蛋白途径对植物生长发育及抗病防御的影响
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作者 李丽林 施满容 +2 位作者 钟幼雄 王欣 梅韶玲 《农村科学实验》 2024年第18期79-81,共3页
在真核生物领域,雷帕霉素靶蛋白的结构和功能展现了显著的保守性。其在植物体内作为信号与代谢网络的核心调节因子,对多种信号(包括营养、生长因子、能量、病原体等环境因子)作出响应,协调细胞的生长发育与抗病防御过程。该文深入探讨... 在真核生物领域,雷帕霉素靶蛋白的结构和功能展现了显著的保守性。其在植物体内作为信号与代谢网络的核心调节因子,对多种信号(包括营养、生长因子、能量、病原体等环境因子)作出响应,协调细胞的生长发育与抗病防御过程。该文深入探讨了植物TOR途径在胚胎发育、幼苗生长、叶片扩展、开花、衰老等生命周期各阶段及抗病防御过程中所发挥的调控作用。该研究成果不仅对于植物TOR途径未来的研究方向及其在农业生产中的应用具有重要的理论与实践价值,同时也为寻找新型植物抗性基因、实施新的抗病策略及培育优质高产作物提供了关键的参考依据。 展开更多
关键词 雷帕霉素蛋白 生长发育 抗病防御 调控作用
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雷帕霉素靶蛋白的蛋白信号通路及其与代谢性疾病相关性 被引量:8
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作者 高阳 田树旭 +5 位作者 常小丽 付建平 周敏 胡悦 陈思娇 宋今丹 《医学研究生学报》 CAS 2010年第2期196-201,共6页
雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamyoin,mTOR)是进化上高度保守的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,属于磷脂酰肌醇3-激酶相关激酶(plosphatidylinositol 3-kinase-related kinase,PIKK)蛋白质家族的成员。mTOR作为细胞生长的核心因子,与... 雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamyoin,mTOR)是进化上高度保守的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,属于磷脂酰肌醇3-激酶相关激酶(plosphatidylinositol 3-kinase-related kinase,PIKK)蛋白质家族的成员。mTOR作为细胞生长的核心因子,与不同的蛋白质结合时表现出不同的生理功能,参与基因转录、蛋白质翻译起始、核糖体生物合成、细胞周期调控、DNA损伤修复、重组和端粒酶长度的维持等。PIKK家族激酶的功能异常会导致多种代谢性疾病。通过对不同的mTOR相关蛋白信号转导机制的研究,进一步探讨代谢综合征的发病机制,并为相关治疗提供分子靶标。 展开更多
关键词 雷帕霉素蛋白 信号转导 肥胖 糖尿病
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EC9706和Eca109细胞中雷帕霉素靶蛋白信号通路激活状态观察 被引量:11
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作者 侯桂琴 范天黎 +4 位作者 鲁照明 刘兰琦 许培荣 薛乐勋 王建人 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2007年第2期223-225,共3页
目的:观察低分化的食管鳞癌细胞EC9706和高分化的食管鳞癌细胞Eca109中雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号转导通路的激活状态。方法:采用细胞免疫组织化学方法检测EC9706和Eca109细胞中mTOR及其下游靶分子p70S6K的表达和定位,并采用RT-PCR和West... 目的:观察低分化的食管鳞癌细胞EC9706和高分化的食管鳞癌细胞Eca109中雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号转导通路的激活状态。方法:采用细胞免疫组织化学方法检测EC9706和Eca109细胞中mTOR及其下游靶分子p70S6K的表达和定位,并采用RT-PCR和Westernblot方法分别从mRNA及蛋白水平检测此通路的活性。结果:在2种细胞中mTOR均有表达,且在EC9706细胞中的表达水平高于Eca109(P<0.05);EC9706细胞中mTOR下游靶点的磷酸化水平高于Eca109细胞(P<0.05)。结论:在2种食管鳞癌细胞中,mTOR信号通路均特异性激活;但激活状态与细胞的分化程度有关,细胞分化程度低者通路的激活水平较高。 展开更多
关键词 食管癌 雷帕霉素蛋白 p70S6激酶 EC9706细胞 ECA109细胞
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脊髓哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路参与大鼠外周神经损伤诱发的痛觉过敏 被引量:5
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作者 杨文茜 郭曲练 +3 位作者 程智刚 王云姣 白念岳 贺正华 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期377-385,共9页
目的:探讨哺乳动物雷帕霉素(rapamycin,RAPA)靶蛋白(mammalian target of RAPA,m TOR)信号通路是否通过激活脊髓背角星形胶质细胞参与外周神经损伤诱发的大鼠痛觉过敏。方法:取健康雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠30只,随机分为6组(n=5):1 d... 目的:探讨哺乳动物雷帕霉素(rapamycin,RAPA)靶蛋白(mammalian target of RAPA,m TOR)信号通路是否通过激活脊髓背角星形胶质细胞参与外周神经损伤诱发的大鼠痛觉过敏。方法:取健康雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠30只,随机分为6组(n=5):1 d组(D1组)、4 d组(D4组)、7 d组(D7组)、14 d组(D14组)、正常组、假手术组。其中D1,D4,D7,D14组建立坐骨神经慢性压榨损伤(chronic constriction injury,CCI)模型,Normal组不做处理,Sham组仅暴露坐骨神经。于CCI术后第1,4,7,14天分别测定各组大鼠左后肢机械缩足阈值(paw withdrawal mechanical threshold,PWMT)和热缩足潜伏期(paw withdrawal thermal latency,PWTL)。D1,D4,D7,D14组分别于CCI术后第1,4,7,14天,假手术组和正常组于相应第14天采集腰段脊髓。采用免疫组织化学法观察m TOR在大鼠脊髓的分布,采用real-time PCR和蛋白质印迹法检测CCI大鼠腰段脊髓m TOR mRNA和蛋白的表达。另取雄性SD大鼠30只,完成鞘内置管后,随机分为6组(n=5):空白组、CCI组、早给药组(CCI+early RAPA组)、早溶剂组[CCI+early二甲基亚砜(dimethylsulfoxide,DMSO)组]、晚给药组(CCI+later RAPA组)、晚溶剂组(CCI+later DMSO组)。空白组不建立CCI模型也不给药;CCI组建立左后肢CCI模型;CCI+early RAPA组于CCI术后4 h开始鞘内注射1%RAPA 10μL,连续给药3 d;CCI+early DMSO组于CCI术后4 h开始鞘内注射同浓度等体积溶剂4%DMSO 10μL作为对照;CCI+later RAPA组于CCI术后第7天开始鞘内注射1%RAPA 10μL,连续给药3 d;CCI+later DMSO组于CCI术后第7天开始鞘内注射同浓度等体积溶剂DMSO10μL作为对照。各组于鞘内置管前后以及CCI术后隔天测定痛阈。于CCI术后第14天取腰段脊髓,免疫组织化学检测脊髓背角胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)的表达。结果:m TOR免疫组织化学阳性颗粒广泛分布于正常脊髓神经元胞浆中;D14组大鼠术后第1,4,7,14天的PWMT与其基础值比较明显降低,术后第4,7,14天的PWTL与其基础值比较明显降低(P<0.05或P<0.01);与正常组比较,CCI组(D1,D4,D7和D14组)大鼠腰段脊髓m TOR的mRNA和蛋白表达显著增加(P<0.05或P<0.01);与CCI+early DMSO组相同时间点比较,CCI+early RAPA组CCI术后第4,6,8,10,12,14天的PWMT和PWTL均升高(P<0.05或P<0.01);与CCI+later DMSO组相同时间点比较,CCI+later RAPA组CCI术后第8,10,12,14天的PWMT和PWTL均升高(P<0.05或P<0.01);CCI+early RAPA组与CCI+early DMSO组、CCI+later RAPA组与CCI+later DMSO组相比较,CCI大鼠术侧腰段脊髓背角GFAP免疫组织化学阳性面积与吸光度值均下降(均P<0.05或P<0.01)。结论:脊髓m TOR信号通路可能通过脊髓背角星形胶质细胞活化参与外周神经损伤诱发的痛觉过敏。 展开更多
关键词 哺乳动物雷帕霉素蛋白 神经病理性疼痛 慢性压迫性损伤 雷帕霉素 脊髓背角 星形胶质细胞
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腺苷酸活化蛋白激酶/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路介导能量和必需氨基酸调控乳蛋白合成 被引量:2
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作者 王珊珊 王加启 +2 位作者 高海娜 闫素梅 郑楠 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期2342-2348,共7页
乳蛋白合成是以必需氨基酸为底物的耗能过程。腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)是AMPK信号通路的重要分子;可通过感受细胞能量状态的方式来维持能量平衡,从而为乳蛋白合成提供充足的能量。哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)是AMPK信号通路重要的... 乳蛋白合成是以必需氨基酸为底物的耗能过程。腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)是AMPK信号通路的重要分子;可通过感受细胞能量状态的方式来维持能量平衡,从而为乳蛋白合成提供充足的能量。哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)是AMPK信号通路重要的下游靶点;必需氨基酸主要以m TOR介导的信号通路调控乳蛋白合成。本文主要综述了能量和必需氨基酸通过AMPK/m TOR信号通路对乳蛋白合成调控的研究进展,旨在进一步阐明能量和必需氨基酸对乳蛋白合成调控的作用机理。 展开更多
关键词 腺苷酸活化蛋白激酶 雷帕霉素蛋白 必需氨基酸 能量 蛋白
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雷帕霉素靶蛋白信号通路在食管癌细胞系中激活状态的研究 被引量:3
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作者 侯桂琴 鲁照明 +5 位作者 穆欣 刘洪涛 刘兰琦 许培荣 薛乐勋 王建人 《中国肿瘤》 CAS 2007年第4期260-262,共3页
[目的]研究雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号传导通路在食管鳞癌细胞系EC9706和Eca109中的激活状态。[方法]采用细胞免疫组化检测mTOR及其下游靶分子(p70S6K)在两细胞系中的表达,并采用RT-PCR和Westernblot方法分别从mRNA水平及蛋白水平测定此... [目的]研究雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号传导通路在食管鳞癌细胞系EC9706和Eca109中的激活状态。[方法]采用细胞免疫组化检测mTOR及其下游靶分子(p70S6K)在两细胞系中的表达,并采用RT-PCR和Westernblot方法分别从mRNA水平及蛋白水平测定此通路的活性。[结果]mTOR在两种细胞系中均有表达,且在EC9706中的表达水平明显高于Eca109,mTOR下游靶点(p706S6K)的磷酸化水平也是EC9706明显高。[结论]mTOR信号通路在两种细胞系中都是特异性激活。激活状态与细胞的分化程度有关,细胞分化程度越低,通路的激活水平越高。 展开更多
关键词 食管肿瘤 雷帕霉素蛋白 p70S6激酶 细胞株
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罗哌卡因对骨肉瘤细胞增殖、侵袭及雷帕霉素靶蛋白/缺氧诱导因子1α信号通路的影响 被引量:2
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作者 张素冰 高辉 +1 位作者 赵滨滨 张丹琦 《陕西医学杂志》 CAS 2023年第6期666-670,共5页
目的:探究罗哌卡因对骨肉瘤细胞增殖、侵袭及雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/缺氧诱导因子1α(HIF-1α)信号通路的影响。方法:将MG63细胞分为对照组、罗哌卡因低浓度组、罗哌卡因中浓度组、罗哌卡因高浓度组。采用平板克隆法测定MG63细胞平板克隆... 目的:探究罗哌卡因对骨肉瘤细胞增殖、侵袭及雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/缺氧诱导因子1α(HIF-1α)信号通路的影响。方法:将MG63细胞分为对照组、罗哌卡因低浓度组、罗哌卡因中浓度组、罗哌卡因高浓度组。采用平板克隆法测定MG63细胞平板克隆率,采用免疫组化法测定MG63细胞Ki-67表达,采用Transwell法测定MG63细胞侵袭、迁移能力,采用Western blot法测定MG63细胞基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9、mTOR、HIF-1α蛋白表达。结果:与对照组比较,罗哌卡因低、中、高浓度组MG63细胞克隆形成率、Ki-67阳性率、侵袭细胞数、迁移细胞数以及MMP-2、MMP-9、mTOR、HIF-1α蛋白表达降低(均P<0.05)。与罗哌卡因低浓度组比较,罗哌卡因中、高浓度组MG63细胞克隆形成率、Ki-67阳性率、侵袭细胞数、迁移细胞数以及MMP-2、MMP-9、mTOR、HIF-1α蛋白表达降低(均P<0.05)。与罗哌卡因中浓度组比较,罗哌卡因高浓度组MG63细胞克隆形成率、Ki-67阳性率、侵袭细胞数、迁移细胞数以及MMP-2、MMP-9、mTOR、HIF-1α蛋白表达降低(均P<0.05)。结论:罗哌卡因可抑制MG63细胞增殖、侵袭、迁移,并可抑制mTOR/HIF-1α通路的激活。 展开更多
关键词 骨肉瘤 罗哌卡因 增殖 侵袭 雷帕霉素蛋白 缺氧诱导因子1Α
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雷帕霉素靶蛋白信号通路的组成及对树突状细胞功能的调节 被引量:1
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作者 闵彦 牛爱军 +2 位作者 王开森 孙晓 胡成进 《中国医药导报》 CAS 2014年第14期165-168,共4页
雷帕霉素靶蛋白(mTOR)是一种进化保守的丝氨酸/苏氨酸激酶,在细胞对生长因子,氨基酸及能量变化等外界信息反应的过程中起到重要作用。树突状细胞(DCs)是专职抗原递呈细胞,可以启动特异性免疫应答。近年来,mTOR对DCs分化、功能调节的研... 雷帕霉素靶蛋白(mTOR)是一种进化保守的丝氨酸/苏氨酸激酶,在细胞对生长因子,氨基酸及能量变化等外界信息反应的过程中起到重要作用。树突状细胞(DCs)是专职抗原递呈细胞,可以启动特异性免疫应答。近年来,mTOR对DCs分化、功能调节的研究逐渐增多。有些研究认为,mTOR对DCs的作用是激活性或促进性的,但在另外一些研究中,这种作用是抑制性的。所以,本文对近年来关于mTOR通路对DCs的调节作用作一综述。 展开更多
关键词 雷帕霉素蛋白 树突状细胞 免疫调节
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雷帕霉素靶蛋白信号转导在调节肌肉体积中的作用 被引量:1
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作者 黄江林 徐飞 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期1277-1280,共4页
背景:虽然抗阻训练在康复训练中广泛应用,但其调节生长发育和萎缩状态下肌肉再生的信号转导通路迄今仍未阐明,近期有证据表明雷帕霉素靶蛋白通路在此方面具有一定作用。目的:回顾分析雷帕霉素靶蛋白与雷帕霉素靶蛋白通路及抗阻训练中雷... 背景:虽然抗阻训练在康复训练中广泛应用,但其调节生长发育和萎缩状态下肌肉再生的信号转导通路迄今仍未阐明,近期有证据表明雷帕霉素靶蛋白通路在此方面具有一定作用。目的:回顾分析雷帕霉素靶蛋白与雷帕霉素靶蛋白通路及抗阻训练中雷帕霉素靶蛋白信号转导通路调节肌肉体积的重要作用。方法:由第一作者检索1985/2008 PubMed数据库有关雷帕霉素靶蛋白研究起源、介导通路上下游蛋白及与抗阻运动相关的生理效应等方面的文献。结果与结论:蛋白激酶B/雷帕霉素靶蛋白信号通路可通过增加蛋白质合成而调节肌肉生长,但需要指出的是,虽然雷帕霉素靶蛋白及其下游通路的活化对功能性超负荷后的肌肉生长具有重要作用,但肌肉萎缩后的再生长也可能取决于雷帕霉素靶蛋白之外的其他通路。未来的研究需要进一步探讨雷帕霉素靶蛋白通路调节正常和萎缩肌肉中负荷诱导肌纤维生长的作用,细胞生长与营养、生长因子和细胞能量等信号与机械负荷过程中雷帕霉素靶蛋白活性调节的相关程度,以及将外部信号翻译成肌肉体积变化的关键信号转导通路。 展开更多
关键词 雷帕霉素蛋白 信号转导 抗阻训练 肌肉体积 分子机制
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雷帕霉素靶蛋白信号通路与心肌缺血再灌注损伤 被引量:1
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作者 宋蕊 楚天舒 孙林 《心血管病学进展》 CAS 2013年第2期244-246,共3页
哺乳动物雷帕霉素靶蛋白主要调控细胞的生存、生长与增殖等过程,是细胞生存的重要信号通路。近年来,有学者发现,雷帕霉素靶蛋白在缺血性疾病中发挥着重要作用,可能是调控缺血再灌注损伤的重要信号通路。现就雷帕霉素靶蛋白在心肌缺血再... 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白主要调控细胞的生存、生长与增殖等过程,是细胞生存的重要信号通路。近年来,有学者发现,雷帕霉素靶蛋白在缺血性疾病中发挥着重要作用,可能是调控缺血再灌注损伤的重要信号通路。现就雷帕霉素靶蛋白在心肌缺血再灌注损伤中的作用做一综述。 展开更多
关键词 雷帕霉素蛋白 信号通路 心肌缺血再灌注损伤
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雷帕霉素靶蛋白信号通路在结肠癌中研究进展 被引量:1
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作者 黄俊 陈幼祥 《南昌大学学报(医学版)》 CAS 2013年第2期101-104,106,共5页
哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(manmalian target of rapamyein,mTOR)是一种非典型的丝/苏氨酸蛋白激酶,也是一个重要的信号转导分子,参与细胞生长、增殖、分化以及细胞周期调控等多种生理病理过程。哺乳动物mTOR是磷脂酰肌醇3-激酶相... 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(manmalian target of rapamyein,mTOR)是一种非典型的丝/苏氨酸蛋白激酶,也是一个重要的信号转导分子,参与细胞生长、增殖、分化以及细胞周期调控等多种生理病理过程。哺乳动物mTOR是磷脂酰肌醇3-激酶相关激酶(phosphatidylinostitol 3-kinase-related kinase,PIKK)蛋白家族成员之一,在进化上高度保守,可广泛存在于从酵母至人类的多种生物中。在功能上,它可整合营养、能量及生长因子等多种细胞外信号,参与基因调控、蛋白质转录翻译、调控细胞周期进程、细胞运动及免疫应答等过程。 展开更多
关键词 雷帕霉素蛋白 信号通路 结肠癌 临床应用
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口腔鳞状细胞癌中自噬蛋白和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白的表达分析
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作者 张斐 高华 +2 位作者 翟兴华 苏明 阴旭斌 《中华老年口腔医学杂志》 2024年第5期269-274,共6页
目的比较口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)患者肿瘤及其临近组织的自噬相关蛋白和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)蛋白表达水平,并探讨自噬蛋白与m TOR通路蛋白表达的相关性。方法26例... 目的比较口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)患者肿瘤及其临近组织的自噬相关蛋白和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)蛋白表达水平,并探讨自噬蛋白与m TOR通路蛋白表达的相关性。方法26例肿瘤标本来源于首都医科大学附属北京口腔医院确诊为OSCC并行病灶切除手术的患者,将标本组织分为3组,其中肿瘤组为肿瘤中心区域组织,正常组为距肿瘤组织边缘2 cm的正常组织,两者之间的组织为交界组。采用免疫荧光实验和蛋白免疫印迹实验检测各组样本的自噬相关蛋白微管蛋白1轻链3(microtubule associated protein 1 light chain 3,LC3)Ⅱ和p62的表达水平,采用免疫组织化学染色方法和蛋白免疫印迹实验检测m TOR通路相关蛋白的表达水平,并通过Spermann相关性分析方法探讨自噬相关蛋白与m TOR通路相关蛋白表达水平的相关性。结果免疫荧光实验结果显示,肿瘤组和交界组LC3-Ⅱ和p62的表达水平均高于正常组。蛋白免疫印迹实验结果亦表明,肿瘤组和交界组中LC3-Ⅱ和p62的表达水平均高于正常组(P<0.001),而肿瘤组与交界组LC3-Ⅱ和p62的表达水平之间的差异并无统计学意义(P>0.05)。免疫组织化学结果显示,交界组和肿瘤组的m TOR、4E-BP1的表达及其磷酸化4E-BP1水平均高于正常组。蛋白免疫印迹实验结果表明,交界组m TOR和4E-BP1及其磷酸化水平最高,肿瘤组次之,正常组最低(P<0.01);而p70S6K及其磷酸化水平在各组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。Spermann相关性分析结果显示,LC3-Ⅱ与p62的表达水平在肿瘤组和交界组中均呈正相关(P<0.05),m TOR与LC3-Ⅱ和p62的表达水平在肿瘤组和交界组中均呈正相关(P<0.05)。结论OSCC患者的肿瘤中心区域和肿瘤与正常组织交界区域的m TOR通路活跃而自噬流过程受损,靶向抑制m TOR通路为OSCC患者的临床诊疗提供新的建议。 展开更多
关键词 口腔肿瘤 鳞状细胞 自噬相关蛋白 哺乳动物雷帕霉素蛋白 信号通路 机制
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腺嘌呤核苷酸活化蛋白激酶与哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号转导通路的相互作用 被引量:4
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作者 徐飞 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2011年第20期3775-3777,共3页
背景:腺嘌呤核苷酸活化蛋白激酶的下游靶分子哺乳动物雷帕霉素靶蛋白对细胞生长、分裂和蛋白质合成有重要意义。目的:综述腺嘌呤核苷酸活化蛋白激酶与哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号转导相互调节的最新研究进展,以期揭示腺嘌呤核苷酸活化... 背景:腺嘌呤核苷酸活化蛋白激酶的下游靶分子哺乳动物雷帕霉素靶蛋白对细胞生长、分裂和蛋白质合成有重要意义。目的:综述腺嘌呤核苷酸活化蛋白激酶与哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号转导相互调节的最新研究进展,以期揭示腺嘌呤核苷酸活化蛋白激酶和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号转导的交互作用对蛋白质合成的影响。方法:以"(mammalian target of rapamycin OR mTOR)AND(AMP activated protein kinase OR AMPK)AND signal transduction"为检索式,计算机检索PubMed数据库相关内容的文献,最终纳入30篇可反映腺嘌呤核苷酸活化蛋白激酶与哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号转导通路相互作用的文献,并进行归纳总结。结果与结论:腺嘌呤核苷酸活化蛋白激酶活化导致哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号转导减弱一定程度上抑制蛋白质合成,腺嘌呤核苷酸活化蛋白激酶通过多个位点磷酸化和活化而调节哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号转导。腺嘌呤核苷酸活化蛋白激酶磷酸化马铃薯球蛋白会抑制Akt,ERK1/ERK2和p90rsk等其他蛋白激酶的作用。明确腺嘌呤核苷酸活化蛋白激酶对哺乳动物雷帕霉素靶蛋白的调节过程所起的作用,对揭示腺嘌呤核苷酸活化蛋白激酶-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白途径调控能量代谢和蛋白合成方面有重要意义。 展开更多
关键词 腺嘌呤核苷酸活化蛋白激酶 哺乳动物雷帕霉素蛋白 磷酸化 蛋白 信号转导 组织工程
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胃癌组织中雷帕霉素靶蛋白/70 ku核糖体蛋白S6激酶信号通路的表达及临床意义 被引量:1
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作者 陈洪芳 单新芳 +1 位作者 韩红波 郭天华 《中国医药》 2014年第11期1632-1634,共3页
目的 分析雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、70 ku核糖体蛋白S6激酶(P70S6K)的表达水平与胃癌常见临床病理因素的关系.方法 采用逆转录聚合酶链反应技术,蛋白质印迹技术(Western-blot)检测32例胃癌患者癌组织、癌旁胃组织以及22例非胃癌患... 目的 分析雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、70 ku核糖体蛋白S6激酶(P70S6K)的表达水平与胃癌常见临床病理因素的关系.方法 采用逆转录聚合酶链反应技术,蛋白质印迹技术(Western-blot)检测32例胃癌患者癌组织、癌旁胃组织以及22例非胃癌患者胃组织中磷酸化雷帕霉素靶蛋白(mTOR)及磷酸化70 ku核酸体蛋白S6激酶(P70S6)K mRNA和蛋白水平的表达情况.结果 p-mTOR mRNA在胃癌组织中的表达水平(0.61±0.11)明显高于癌旁胃组织(0.43±0.10)及非胃癌胃组织(0.39 ±0.07),p-P70S6KmRNA在胃癌组织中的表达水平(0.63 ±0.13)亦明显高于癌旁胃组织(0.45 ±0.14)及非胃癌胃组织(0.44±0.15),差异均有统计学意义(均P<0.05);mTOR mRNA和P70S6K mRNA在胃癌组织中的表达呈正相关(r=0.521,P=0.033);Western-blot检测结果也证实p-mTOR及p-P70S6K在胃癌组织中的表达高于癌旁胃组织及非胃癌胃组织;mTOR及P70S6K mRNA在胃癌组织中的表达水平与病理分期、淋巴结转移等明显相关,而与肿瘤直径、性别等无明显关系.结论 mTOR/P70S6K信号通路在胃癌组织中过度表达可能是胃癌发生的重要机制之一. 展开更多
关键词 胃癌 雷帕霉素蛋白/70 ku核糖体蛋白S6激酶 逆转录聚合酶链反应
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哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号传导与恶性肿瘤的治疗 被引量:2
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作者 费世宏 曾甫清 《临床泌尿外科杂志》 2003年第8期500-502,共3页
关键词 哺乳动物雷帕霉素 蛋白 信号传导 恶性肿瘤 治疗
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