雷蘑胞外粗多糖对小鼠运动能力的影响

目的:研究雷蘑胞外粗多糖的抗疲劳作用;方法:从雷蘑(Clitocybe Gigantean)AS 5.105深层发酵的滤液中分离得到胞外粗多糖(Crude Extracellular Polysaccharide,CEP),以KM系小鼠为实验模型,以血乳酸(Blood Lactic Acid,BLA)、血尿素氮(Blood Urea Nitrogen,BUN)、肝糖原(Hepatic Glycogen)含量为评价指标,分高、中、低3个剂量组喂养28天后进行抗疲劳实验;结果:胞外粗多糖3个剂量组对小鼠体质量无明显影响(P>0.05),中、高剂量组能明显延长小鼠负重游泳时间(P<0.05),降低运动时血尿素氮水平(P<0.01),提高肝糖原含量(P<0.01),对小鼠运动后血乳酸升高有明显的抑制作用(P<0.05),能促进运动后血乳酸的消除,且存在剂量依赖效应;结论:雷蘑胞外粗多糖具有抗疲劳和促进运动恢复的作用。

雷蘑胞外多糖分离提取工艺优化研究

优化了雷蘑(Clitocybe gigantean)AS 5.105深层发酵胞外多糖的分离提取工艺条件,以醇沉物脱蛋白后的纯多糖为研究对象,胞外多糖得率EPGR(Exopolysaccharide gain rate)和脱蛋白率DPR(Deproteinized rate)为评价指标,采用Mixture design和3因素3水平Box-Behnken统计学实验设计方法,确定了胞外多糖得率及Sevag法脱蛋白的最优条件。结果表明,在乙醇终浓度为77.5%～84.2%、醇沉温度为4.2℃～1.3℃时,于18.1h～24h内胞外多糖得率92.79%;在氯仿、正丁醇和透析液分别为34%、12%和54%的配比条件下,脱蛋白率预测值为98.64%。通过对脱蛋白率模型方程求解可知,脱蛋白次数、每次脱蛋白时间以及脱蛋白温度分别为8次、23.85min和14.27℃时,脱蛋白率最大可达96.99%。

雷蘑胞外多糖对荷瘤小鼠肿瘤的抑制作用

从雷蘑(Clitocybe gigantean)AS 5.105深层发酵的滤液中分离得到胞外粗多糖CEP,以KM系S180荷瘤小白鼠为试验模型,用免疫器官重量法,进行高、中、低剂量CEP的腹腔注射试验。结果表明,CEP能明显提高小白鼠的免疫功能,具有较高的抑瘤活性,并与剂量呈显著相关性;高剂量组与对照组相比较,小白鼠胸腺指数和脾脏指数均有显著增加(P<0.05);与低剂量组相比较,脾脏指数有显著增加(P<0.05)。

雷蘑液态发酵工艺响应面法优化研究

在雷蘑(Clitocybegigantean)AS5.105液态发酵培养基优化的基础上,采用Plackett-Burman设计(Plackett-BurmanDesign,P-B)对影响雷蘑发酵胞外多糖的内在和外在因素进行了筛选,所选取的6个相关因素为:初始pH,培养温度,发酵时间,装液量,接种量,床转速。在此基础上,再采用响应曲面法(ResponseSurfaceMethodology,RSM)对影响雷蘑发酵胞外多糖的关键影响因素培养温度,发酵时间和装液量的最佳水平范围作了进一步的研究与探讨,通过对二次多项回归方程求解得知,在上述自变量分别为培养温度27.05℃、发酵时间6.92d和装液量93.90ml时,胞外多糖产量的最大预测值为103.58mg/100ml。

雷蘑深层发酵胞外多糖含量测定方法的确定

从雷蘑(ClitocybeGigantean)AS5.105深层发酵的滤液中分离得到胞外多糖(CGP),用苯酚-硫酸分光光度法在室温下测定胞外多糖含量,测定波长490nm,在5.00—40μg·mL-1范围内吸光度与被测物含量呈良好的线性关系,相关系数r=0.9957,方法的回收率在97.8%—104.6%之间。测定结果表明,雷蘑在出发培养基深层发酵过程中合成了胞外多糖,含量为0.54mg·mL-1。

雷蘑液体发酵工艺优化研究

在雷蘑液体发酵培养基优化的基础上,研究了适于雷蘑深层发酵的初始pH值、接种量、装液量、发酵温度和时间及摇床转速对菌丝生长和胞外多糖产量的影响。并通过L16(45)正交试验对发酵工艺进行了优化,结果表明:在初始pH值6.5,接种量10%,装液量100ml/500 ml,培养温度28℃,培养时间9 d,转速140 r/min的发酵条件下,所得胞外多糖量为93.61 mg/100 ml。

雷蘑胞外多糖抗肿瘤活性研究

从雷蘑AS 5.105深层发酵的滤液中分离得到胞外粗多糖CGP,以KM系S180荷瘤小白鼠为实验模型,用免疫器官重量法,进行高、中、低剂量CGP的腹腔注射实验。结果表明,CGP具有较高的抑瘤活性,并与剂量呈显著相关性;高剂量组与对照组相比较,小白鼠胸腺指数和脾脏指数均有显著增加,P<0.05;与低剂量组相比较,脾脏指数有显著增加,P<0.05。表明CGP能明显提高小白鼠的免疫功能。

雷蘑菌丝体及其培养方法和用途

该发明专利涉及一种雷蘑菌丝体及其培养方法，包括该雷蘑菌丝体在制备抑制肝癌癌细胞或抑制白血病癌细胞药物中的应用。