结肠癌转移相关基因1、磷酸化需肌醇酶1蛋白在鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤组织中的表达及其与临床分期的关系

目的:探讨结肠癌转移相关基因1(MACC1)、磷酸化需肌醇酶1蛋白(p-IRE1)在鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤组织中的表达及其与临床分期的关系。方法:选取80例鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤患者作为研究对象,所有患者均行外科手术治疗,在手术过程中取患者鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤组织进行病理诊断,依照不同分期将所有患者分为四组,即T_(1)组(n=18),T_(2)组(n=23),T_(3)组(n=25)和T_(4)组(n=14),另选取20例同期体检的健康志愿者鼻腔黏膜组织作为对照组。对比五组受检者鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤组织和鼻腔黏膜组织MACC1和p-IRE1表达水平,并分析鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤临床分期与MACC1和p-IRE1的相关性。随后对所有鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤患者进行3年随访,将患者分为预后良好组(n=56)和预后不良组(n=24),对比两组患者临床一般情况与MACC1和p-IRE1表达水平,并应用Logistic回归分析鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤组织中MACC1和p-IRE1表达对患者的预后预测价值。结果:不同临床分期患者MACC1和p-IRE1组织表达水平对比差异有统计学意义(均P>0.05),T_(4)组明显高于T_(3)组、T_(2)组、T_(1)组和对照组(均P<0.05);Spearman相关分析结果显示MACC1和p-IRE1与鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤临床分期呈正相关(r=0.423、0.539,均P<0.05);预后良好组与预后不良组患者性别、年龄、是否初发情况对比无统计学差异(均P>0.05),两组患者临床分期、组织分化程度、MACC1和p-IRE1阳性情况对比有统计学差异(均P<0.05);Logistic回归分析表明:MACC1和p-IRE1为鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤的预后独立因素(均P<0.05)。结论:鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤组织中MACC1和p-IRE1阳性表达率明显高于健康鼻腔黏膜组织,且MACC1和p-IRE1表达水平与鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤的临床分期呈正相关。另外,可通过MACC1和p-IRE1阳性表达来预测鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤患者的预后情况,且MACC1和p-IRE1为鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤的预后独立因素。

内质网应激通路需肌醇酶1α/X盒结合蛋白1在中性粒细胞弹力蛋白酶诱导的气道黏液分泌中的作用

目的·探讨内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)反应在中性粒细胞弹力蛋白酶(neutrophil elastase,NE)诱导人气道上皮细胞黏蛋白5AC(mucin 5AC,MUC5AC)分泌中的作用及机制。方法·培养人气道上皮细胞HBE16,分别给予活性氧(reactive oxygen species,ROS)抑制剂N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)、ERS抑制剂4-苯基丁酸(4-phenylbutyrate,4-PBA)预处理,或分别转染需肌醇酶1α(inositol-requiring kinase 1α,IRE-1α)小干扰RNA(siRNA)、X盒结合蛋白1(X-boxbinding protein 1,XBP-1)siRNA,再予以NE刺激;同时设单纯NE组和空白对照组。试剂盒检测ROS的生成水平;Westernblotting检测干预后ERS相关信号分子葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)、磷酸化蛋白激酶R样内质网激酶(phosphorylated protein kinase R-like endoplasmic reticulum kinase,pPERK)、活化转录因子6(activating transcription factor 6,ATF6)、磷酸化IRE-1α(pIRE-1α)及XBP-1蛋白表达量的变化;实时荧光定量PCR检测剪切的XBP-1(XBP-1s)mRNA水平;ELISA和免疫荧光检测MUC5AC在各组细胞中的蛋白表达情况。结果·与空白对照组相比,NE刺激24 h后细胞ROS含量增加,GRP78、ATF6、pPERK及pIRE-1α蛋白水平均显著升高(均P<0.05),XBP-1s mRNA及蛋白表达也明显增加(均P<0.05),同时MUC5AC蛋白表达增加(均P<0.05);NAC及4-PBA预处理后均使上述ERS相关蛋白表达较单纯NE组降低(均P<0.05),MUC5AC蛋白水平降低(均P<0.05);转染IRE-1αsiRNA或XBP-1 siRNA,细胞中MUC5AC蛋白表达也较单纯NE组明显降低,同时XBP-1s mRNA及蛋白表达也有明显下降(均P<0.05)。结论·NE通过产生ROS引起ERS反应,诱导MUC5AC蛋白表达及分泌增加,ERS通路IRE-1α/XBP-1在其中发挥着一定的作用。

结肠癌转移相关基因1、磷酸化需肌醇酶1蛋白在鼻咽癌组织中表达及与其临床病理特征、放疗敏感度及预后的关系

目的探讨结肠癌转移相关基因1(MACC1)、磷酸化需肌醇酶1(p-IRE1)蛋白在鼻咽癌组织中的表达情况及与鼻咽癌临床病理特征、放疗敏感度及预后的关系,为寻求个体化治疗提供依据。方法选取2016年1月至2018年12月在南阳市中心医院行根治性调强放疗的鼻咽癌病人癌组织标本62例为鼻咽癌组,同时选取同期20例健康人鼻咽部黏膜组织标本作为正常对照组,应用免疫组化法分别检测组织中MACC1、p-IRE1蛋白的表达情况,分析其与鼻咽癌病人临床病理特征、放疗敏感度及预后的关系,以及鼻咽癌组织中MACC1、p-IRE1蛋白阳性表达的相关性。结果鼻咽癌组织标本MACC1、p-IRE1蛋白阳性表达率均明显高于正常鼻咽部黏膜组织标本,均差异有统计学意义(70.97%比15.00%,66.13%比10.00%,P<0.05)。鼻咽癌组织MACC1、p-IRE1蛋白阳性表达与TNM临床分期和分化程度密切相关(P<0.05),鼻咽癌组织MACC1、p-IRE1蛋白阳性表达者放疗敏感度均明显低于阴性表达者,差异有统计学意义(P<0.05)。鼻咽癌组织MACC1及p-IRE1蛋白阳性表达呈显著正相关(χ^(2)=12.18,P<0.001,列联系数=0.405)。放疗后随访期间有12例(19.35%)出现局部复发,14例(22.58%)出现远处转移;死亡24例(38.71%),均死于局部复发或远处转移。鼻咽癌病人放疗后死亡与TNM临床分期、分化程度及鼻咽癌组织MACC1、p-IRE1蛋白表达情况密切相关(P<0.05)。多因素COX回归分析结果显示,TNM临床分期、鼻咽癌组织MACC1、p-IRE1蛋白阳性表达是鼻咽癌病人放疗后死亡的独立危险因素(P<0.05)。结论鼻咽癌病人MACC1及p-IRE1蛋白检测可能有助于鼻咽癌病人临床分期、病理分化程度以及放疗敏感度的判断,其阳性表达是鼻咽癌预后的独立危险因素,可能成为鼻咽癌基因治疗的新靶点。

需肌醇酶1(IRE1)激活NLRP3炎性体在动脉粥样硬化中的作用

动脉粥样硬化(AS)是缺血性心脑血管疾病的主要病理基础,炎症反应在疾病进程中发挥重要影响。内质网应激(ERS)下游传感蛋白需肌醇酶1(IRE1)可以通过多条途径激活含pyrin结构域NOD样受体家族3(NLRP3)炎性体,二者与AS发生发展关系密切。涉及相关信号通路的关键蛋白p38丝裂原激活蛋白激酶(p38MAPK)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、核因子κB(NF-κB)、X盒结合蛋白1(XBP1)、NADPH氧化酶(NOX)、硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)等与AS之间均有关联,提示ERS刺激下IRE1参与活化NLRP3炎性体是AS的可能发病机制。我们总结了IRE1激活NLRP3炎性体的分子机制及相关信号通路的节点蛋白在AS中的作用,以期为研究AS发病机制和防治策略提供新思路。

需肌醇酶1α及受其调控的依赖性衰减(IRE1α-RIDD)在免疫调节及自身免疫性疾病中的研究进展

内质网(ER)是蛋白质合成、折叠和修饰以及脂质合成和钙离子储存的重要细胞器。ER功能失调导致错误折叠或未折叠蛋白质在ER管腔中的积累,触发未折叠蛋白反应(UPR),需肌醇酶1α(IRE1α)是UPR分支中最保守的信号通路,切割编码转录因子XBP1的mRNA,导致XBP1剪接和激活。IRE1还通过受调控的IRE1依赖性衰减(RIDD)切割相关的mRNA或微小RNA(miRNA)。已有研究证明IRE1α-RIDD途径与免疫反应相关,但其信号级联与免疫协调的机制仍然不清楚,我们总结了IRE1α-RIDD对免疫细胞分化、成熟和免疫反应中细胞因子的表达等在免疫反应中的作用以及参与自身免疫性疾病的分子机制。

需肌醇酶1介导的内质网应激通路参与高氧所致早产大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡

目的探讨需肌醇酶1(IRE1)介导的内质网应激通路与高氧暴露肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)凋亡的关系。方法原代培养早产大鼠AECⅡ,随机分为空气组和高氧组,建立高氧细胞损伤模型。在24、48及72h收集细胞,倒置相差显微镜观察细胞形态变化;AnnexinV/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡;RT-PCR及Westernblot分别检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、IRE1、X盒结合蛋白1(XBP1)及C/EBP同源蛋白(CHOP)m RNA及蛋白表达;免疫荧光检测CHOP表达。结果随着给氧时间延长,高氧组AECⅡ伸展呈不规则形,出现空泡样改变;高氧组AECⅡ凋亡率与同时间点空气组比较明显增加(P<0.05);随着氧暴露时间延长,高氧组GRP78、IRE1、XBP1及CHOPm RNA及蛋白表达升高,且较同时间点空气组明显上升(P<0.05);高氧组CHOP荧光强度高于同时间点空气组。高氧组CHOP蛋白表达与AECⅡ凋亡率、IRE1及XBP1蛋白表达呈显著正相关(r=0.97、0.85、0.88,均P<0.05)。结论高氧所致AECⅡ凋亡可能是通过激活IRE1-XBP1-CHOP通路来实现。

肠缺血再灌注损伤大鼠肠黏膜需肌醇酶1a、肿瘤坏死因子受体相关因子2的表达与意义

目的 通过建立大鼠小肠缺血再灌注损伤（IIRI）模型，探讨肠组织需肌醇酶1仪（IREIot）与肿瘤坏死因子受体相关因子2（TRAF2）的表达及意义。方法雄性SD大鼠50只，按随机数字表法分为假手术组（sham组，例数=10）和肠缺血再灌注组（I／R组，例数=40）。sham组仅开腹、关腹；I／R组给予阻断肠系膜上动脉血流30min，恢复再灌注2h、6h、12h、24h分为4个亚组，依据每个亚组存活数量取8只统计。光镜下观察HE染色小肠组织病理学改变，细胞凋亡原位检测法（TUNEL法）检测小肠黏膜上皮细胞凋亡指数（AI），酶联免疫吸附法（ELISA法）检测小肠组织TNF-a及血浆小肠脂肪酸结合蛋白（I-FABP）的水平，Westernblot法检测小肠组织内质网应激（ERS）蛋白IREld、磷酸化IREloc（P—IREld）、TRAF2的表达。结果1．光镜示MR组各亚组较sham组小肠损伤明显，6h组损伤最重。2．MR组肠组织TNF-a[sham组：（16．41±4．44）ng／L，2h组：（79．71±8．20）ng／L，6h组：（131．70±11．59）ng／L，12h组：（94．23±7．66）ng／L，24h组：（69．78±9．58）ng／L]、小肠黏膜上皮细胞AI[sham组：（3．93±0．77）％，2h组：（16．24±1．97）％，6h组：（42．19±2．40）％，12h组：（37．79±2．34）％，24h组：（10．38±1．46）％]及I-FABP水平[sham组：（0．65±0．10）×10^3ng／L，2h组：（1．47±0．10）×10^3ng／L，6h组：（2．36±0．17）×10^3ng／L，12h组：（37．79±2．34）×10^3ng／L，24h组：（1．41±0．09）×10^3g／L]较sham组显著升高（F=231．462、149．032、162．491，P均〈0．01）。3．L／R组各亚组中p-IRE1a／IRE1d、TRAF2的表达较sham组均明显升高（F=40．473、59．59，P均〈0．01），再灌注2h表达升高，6～12h维持较高表达，24h表达明显下调，且p-IRE1a／IRE1a值的改变与TRAF2在各组中的表达变化趋势一致。结论IIRI诱发ERS，激活IRE1a，上调TRAF2的表达；IRE1／TRAF2介导ERS可能参与了IIRI的炎性反应与细胞凋亡过程，增加肠道通透性。

鼻咽癌癌组织中CD133、丝裂原活化蛋白激酶4、需肌醇酶1蛋白表达与放疗预后的相关性研究

目的分析鼻咽癌癌组织中CD133、丝裂原活化蛋白激酶4(MKK4)、需肌醇酶1(p-IRE1)蛋白表达与放疗预后的相关性,以期为临床诊治鼻咽癌及评估预后提供信息。方法将2012年5月-2013年12月于本院开展放疗治疗的94例鼻咽癌患者作为观察对象,经SP免疫组化法对鼻咽癌患者癌组织内CD133、MKK4、p-IRE1蛋白表达情况进行分析,并给予患者放射治疗;探讨癌组织中CD133、MKK4、p-IRE1蛋白表达和鼻咽癌临床特征、放疗预后相关性。结果鼻咽癌癌组织内CD133、MKK4、p-IRE1蛋白的阳性表达率分别为68. 1%、75. 5%、67. 0%;35例患者呈CD133低表达,59例患者呈CD133高表达;38例患者呈MKK4低表达,56例患者呈MKK4高表达;69例患者呈p-IRE1低表达,25例患者呈p-IRE1高表达;Logistic回归分析发现:癌组织内CD133、MKK4、p-IRE1蛋白阳性表达与鼻咽癌临床TNM分期、淋巴结转移存在相关性(P <0. 05);鼻咽癌癌组织内CD133、MKK4、p-IRE1蛋白低表达患者放疗后5年总生存率均高于CD133、MKK4、p-IRE1蛋白高表达患者(P <0. 05)。结论 CD133、MKK4蛋白于鼻咽癌的癌组织内均呈高表达,p-IRE1蛋白于鼻咽癌的癌组织内呈低表达;同时,癌组织内CD133、MKK4、p-IRE1蛋白表达和鼻咽癌临床分期、淋巴结转移及放疗预后关系密切,可作临床诊治鼻咽癌及评估预后的重要指标。

p-IRE1、β-catenin及XIAP在鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤临床诊断及预后评估中的意义

目的探讨磷酸化需肌醇酶1蛋白(p-IRE1)、β-连环素(β-catenin)及X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)在鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤(SNIP)中的表达及其在临床诊断和预后评估中的意义。方法选取2017年1月至2022年1月平顶山市第一人民医院收治的SNIP患者102例为SNIP组;另选取本院同时间段因鼻中隔偏曲对侧下鼻甲代偿性肥大而行下鼻甲黏膜部分切除术的患者99例,经病理确诊为正常鼻腔黏膜组织(设为对照组)。比较两组组织中p-IRE1、β-catenin及XIAP的表达强度情况;102例SNIP患者出院后,行2年门诊复查随访,比较SNIP组不同预后情况患者一般资料及p-IRE1、β-catenin及XIAP阳性表达;采用多元Logistic回归模型分析影响SNIP患者预后的危险因素。结果两组间p-IRE1、β-catenin及XIAP表达强度比较,差异具有统计学意义(P<0.05);且SNIP组p-IRE1、β-catenin及XIAP阳性率高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。据随访统计,预后良好组81例,预后不良好组21例。两组性别、年龄比较,差异无统计学意义(P>0.05);两组Krouse临床分期、病理分化程度、p-IRE1、β-catenin及XIAP阳性表达比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。多元Logistic回归模型结果显示,Krouse临床分期为T_3期-T_4期、病理分化程度伴恶变SNIP、p-IRE1、β-catenin及XIAP表达为阳性均是影响SNIP患者的预后不良的危险因素(P<0.05)。结论在SNIP组织中,p-IRE1、β-catenin及XIAP的表达强度及阳性表达率均显著高于正常鼻腔黏膜组织;通过检测上述指标阳性表达,可以预测SNIP预后情况,有利于SNIP后续治疗。

鼻咽癌p-IRE1蛋白表达与放射治疗预后的关系

目的探讨磷酸化需肌醇酶1(p-IRE1)蛋白在鼻咽癌组织中的表达及其与放射治疗预后的相关性。方法选取2010年1月至2011年12月在我院首次行根治性调强放射治疗的鼻咽癌患者53例,免疫组化SP法检测鼻咽癌组织中p-IRE1蛋白表达水平,观察鼻咽癌患者放射治疗后生存期,分析p-IRE1蛋白表达水平与鼻咽癌患者临床病理特征、预后的关系。结果 53例鼻咽癌组织中p-IRE1阳性表达36例(67.9%),高表达14例(26.4%);p-IRE1蛋白表达水平与淋巴分期相关(P=0.033);多因素分析显示p-IRE1蛋白表达水平(P=0.026)、是否联合化疗(P=0.020)是鼻咽癌放射治疗的独立预后因素,p-IRE1高表达鼻咽癌患者放射治疗后死亡风险是低表达组的2.979倍。结论 p-IRE1蛋白可成为预测鼻咽癌放射治疗预后的新指标。

内质网应激中IRE1级联反应对动脉粥样硬化的作用

1概述内质网（endoplasmic reticulum,ER）蛋白质折叠在生理上是至关重要的,它的破坏导致内质网应激（endoplasmic reticulum stress,ERS）触发动脉粥样硬化（atherosclerosis,AS）发生发展。未折叠蛋白反应（unfolded protein response,UPR）是目前研究最为透彻的ERS信号通路,

酵母双杂交系统筛选IRE1相互作用的蛋白质

目的：寻找与需肌醇酶1（IRE1）相互作用的蛋白质,研究该基因的功能及其在肝细胞凋亡中的作用.方法：采用酵母双杂交方法,分别以hIRE1α（人IRE1α）N端段1-465位氨基酸及C端段468-977位氨基酸为诱饵,与人睾丸cDNA文库质粒先后转化AH109酵母菌株,经三重/四重营养缺陷培养基及X-α-GAL半乳糖苷酶试验筛选,将PCR鉴定为阳性的酵母质粒转入大肠杆菌,提取质粒并测序,进行生物信息学分析.最后通过酵母回转杂交实验对获得的相互作用加以验证.结果：成功构建诱饵质粒pGBKT7-IRE1N及pGBKT7-IRE1C,并在酵母中正确表达融合蛋白,自激活检测及毒性检测均为阴性.分别筛选出8个及15个与IRE1相互作用的蛋白质;通过回转实验验证,确定了能与IRE1C端段相互作用的基因SHISA5,其编码产物为SCOTIN,是P53相关定位于内质网的凋亡诱导蛋白.结论：SCOTIN与IRE1的相互作用提示内质网应激诱导的凋亡与P53通路有关.

需肌醇酶-1-c-Jun氨基末端激酶通路在周期性应力介导的成肌细胞凋亡中的作用

目的 观察在周期性应力介导成肌细胞凋亡中内质网应激需肌醇酶-1（IRE-1）-c-jun氨基端激酶（JNK）信号通路的作用.方法 以大鼠L6成肌细胞为实验对象,构建体外培养-力学刺激模型.应用应力加载装置分别加1、2、6、12、24 h的周期性张应力（拉伸变形率为15％,频率为10次循环/分）,对照组不加力（0 h）.Hochest 33258染色、膜联蛋白V（Annexin V）-异硫氰酸荧光素（FITC）/碘化丙锭（PI）流式细胞术分别检测凋亡细胞的数目及凋亡率;反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测内质网应激相关因子C/EBP同源蛋白（CHOP）、凋亡信号调节激酶-1（ASK-1）、肿瘤坏死因子受体相关因子2（TRAF2）和JNK mRNA的表达变化;加入IRE-1特异性抑制剂STF-083010,检测ASK-1、TRAF2和JNK mRNA的表达变化.结果 随应力加载时间的延长,凋亡细胞的数目、凋亡率呈一致上升趋势,且在24h达峰值[（14.34±0.77）个];CHOP、ASK-1、TRAF2mRNA表达量随着应力加载时间的延长逐渐上升,并在24 h达最高值,分别为4.19±1.76、3.46±0.84、3.78±1.38（P ＜0.05）,JNK mRNA的表达量在0～2h逐渐上升后逐渐下降,随后又逐渐上升在24 h达最高值（3.04±0.79,P＜0.05）;加入大鼠IRE-1特异性抑制剂STF-083010后,TRAF2、ASK-1表达量均明显减少（P＜0.05）.结论 周期性张应力可诱导成肌细胞的凋亡,凋亡率随着应力加载时间的延长而升高.CHOP、TRAF2、ASK-1、JNK mRNA的表达量升高,提示内质网相关的凋亡途径参与了应力介导的成肌细胞的凋亡.加入IRE-1抑制剂后,TRAF2、ASK-1、JNK mRNA表达量均明显降低,提示IRE-1-JNK通路参与了应力介导的成肌细胞凋亡.

内质网应激诱导细胞凋亡机制的研究进展

内质网应激在多种疾病的发病机制中起到关键作用,持续或强烈的内质网应激反应可诱导细胞凋亡,然而对内质网应激诱导细胞凋亡的机制尚不清楚。近几年的研究发现未折叠蛋白反应(unfolded protein response,UPR)通路既可促进细胞生存又可诱导细胞凋亡,与UPR的多条通路对蛋白翻译、过氧化物质产生、Bcl-2蛋白表达、钙离子浓度、microRNA表达及JNK通路等的精确调节有关。

淫羊藿总黄酮改善自然衰老大鼠睾丸支持细胞分泌功能衰退的作用

目的研究淫羊藿总黄酮(TFE)对衰老睾丸支持细胞(Sertoli细胞)分泌功能衰退的影响,并从肌醇需酶1α(IRE1α)/ X盒结合蛋白1(XBP1)信号通路探讨其分子机制。方法将36只SPF级18月龄SD雄性大鼠随机分为自然衰老组和TFE 10及40 mg·kg^-1组,每组12只;另取10只2月龄大鼠作为壮龄对照组。每天定时ig 给TFE 1次,每5 d间隔2 d再继续ig给药,给药共计4个月。计算睾丸指数;HE染色观察睾丸组织形态;实时定量PCR和Western 印迹法检测睾丸组织中胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)、骨形态形成蛋白 4(BMP4)及干细胞因子(SCF)mRNA 和蛋白表达水平;检测睾丸组织中磷酸化 IRE1α(p-IRE1α)和XBP1蛋白表达水平;免疫荧光法检测睾丸组织内Sertoli细胞数量和p-IRE1α定位。结果与壮龄对照组比较,自然衰老组大鼠睾丸指数显著降低(P<0.01);与自然衰老组相比,TFE 40 mg·kg^-1组睾丸指数显著升高(P<0.05)。HE结果显示,自然衰老组睾丸曲细精管的形态结构紊乱,部分生精细胞发生脱落;TFE给药组能改善睾丸曲细精管的形态结构。实时定量PCR结果显示,与壮龄对照组比较,自然衰老组Sertoli细胞分泌因子GDNF和SCF mRNA表达水平均显著下调(P<0.01);Western印迹结果显示,GDNF,BMP4和SCF蛋白显著下调(P<0.01)。与自然衰老组相比,TFE给药组分泌因子mRNA和蛋白表达水平均显著上调(P<0.05,P<0.01)。Western印迹结果显示,与壮龄对照组比较,自然衰老组睾丸组织中p-IRE1α和XBP1蛋白表达均显著下调(P<0.01);与自然衰老组相比,TFE给药组p-IRE1α和XBP1蛋白表达显著上调(P<0.01)。免疫荧光结果显示,壮龄对照组、自然衰老组和TFE给药组Sertoli细胞数量无显著差异。不仅在生精细胞胞质广泛表达,在Sertoli细胞胞质亦有表达。结论 TFE可显著改善自然衰老所致大鼠睾丸Sertoli细胞分泌功能衰退,其机制可能与调节IRE1α/XBP1信号通路有关。

内质网应激在趋化素诱导成骨细胞代谢过程中的作用机制

观察趋化素诱导成骨细胞代谢过程中的影响,探讨内质网应激反应在此过程中的机制。将成骨细胞随机分组,给予不同浓度的趋化素(Chemerin)进行诱导,观察成骨细胞活力变化;ELISA法测定细胞趋化蛋白1(MCP-1)、E选择素(E-selection)变化;Western blot法检测成骨细胞黏附分子1(ICAM-1)、需肌醇跨膜激酶/核酸内切酶1(inositol-requiring transmembrane kinase/endonuclease 1,IRE1)、葡萄糖调节蛋白78(Glucose-regulated protein 78,GRP78)的表达情况。通过研究发现Chemerin对成骨细胞活力未见明显影响;与正常对照组相比,Chemerin呈浓度依赖性上调MCP-1、E-selection、ICAM-1等炎症因子的表达(P<0.05),上调内质网应激反应相关指标IRE1、GRP78的表达(P<0.05);其中,1×10-5mol/L组Chemerin作用最为显著。研究结果表明趋化素可诱导成骨细胞的凋亡过程,在成骨细胞的代谢中发挥重要作用,此过程可能和内质网应激反应相关。

中国汉族人群中IRE1α基因多态性与糖尿病前期风险的相关性研究

目的研究中国汉族人群中IRE1α基因多态性是否参与糖尿病前期的发病风险。方法本研究选取临床资料完整且无亲缘关系的汉族受试者共1448人。其中经标准口服葡萄糖耐量试验证实为糖尿病前期的患者共828例;无糖尿病的对照组620名。应用质谱法(Mass Array技术)对IRE1α4个单体型标记的单核苷酸多态性(Haplotype-tagging SNPs)进行检测,观察人群的基因型分布,分析基因变异性与糖尿病前期风险的相关性。结果 (1)IRE1α的4个SNPs在观察人群中均存在多态性,各SNP基因型频率分布符合Hardy-Weinberg平衡检验。(2)SNP rs880069等位基因频率在正常人群和糖尿病前期组间存在统计学差异。显性遗传模式下,SNP rs880069次要等位基因A携带者糖尿病前期的风险较非携带者升高[OR=1.284,95%CI(1.041～1.583),P=0.020],校正年龄、性别和BMI后差异仍然显著(OR’=1.246,P’=0.048)。(3)在对糖尿病前期发生风险的影响上,rs880069与年龄存在交互作用(交互作用P=0.012)。(4)SNP rs196940次要等位基因A携带者发生糖尿病前期的风险较非携带者升高(OR=1.248,P=0.038),按年龄分层分析发现,这种糖尿病前期风险的差异性主要表现在65岁以下的人群[OR=1.447(1.091～1.923),P=0.010],校正了性别和BMI后[OR’=1.414(1.060～1.887),P’=0.018]。(5)rs880069和rs196940基因型组合分析发现,风险基因型组合AX/AX携带者与非携带者相比,糖尿病前期的风险显著增高[OR=1.259,95%CI(1.021～1.552),P=0.021]。(6)当以年龄≥65岁或BMI≥25kg/m2或携带rs196940或rs880069风险等位基因为糖尿病前期的风险因素进行累积风险分析时发现,携带风险因素越多者糖尿病前期的风险越高。携带1个风险因素的人群发生糖尿病前期的风险约为不携带上述任何风险因素人群的2倍(OR=1.785,P=0.046),携带全部4个风险因素的人群与不携带风险因素的人群相比,发生糖尿病前期的风险增加约4倍(OR=4.60,P=0.004)。结论中国汉族人群中IRE1α基因多态性与糖尿病前期的风险相关。

X盒结合蛋白-1在肿瘤中的作用研究进展

X盒结合蛋白-1是近年来发现的与肿瘤相关的蛋白,在多种肿瘤细胞中广泛表达,与肿瘤关系密切。本文就X盒结合蛋白-1的合成、功能和通路,X盒结合蛋白-1参与肿瘤细胞增殖、分化、侵袭转移,影响肿瘤细胞自噬与凋亡,参与肿瘤细胞对化疗药物的抵抗及其抑制剂等方面的研究进展作一综述。

外源性胰岛素对CPB致兔胰岛素抵抗时胰腺组织IRE1α-XBP1信号通路的影响

目的评价外源性胰岛素对体外循环(CPB)致兔胰岛素抵抗时胰腺组织肌醇需酶1α(IRE1α)-X-盒结合蛋白1(XBP1)信号通路的影响.方法选取健康成年新西兰大白兔40只,雌雄不拘,体重2.5~3.0 kg.采用随机数字表法分为4组(n=10):对照组(C组)、CPB组、胰岛素组(I组)和生理盐水对照组(NS组).CPB组建立CPB;I组从建立CPB开始至术后1d持续静脉输注胰岛素1.2 ml/h,根据血糖(维持7.2~8.3 mmol/L)调节胰岛素输注速率;NS组从建立CPB开始至术后1d持续静脉输注等容量生理盐水.分别于CPB前(T1)、主动脉开放后15 min(T2)、主动脉开放后30 min(T3)和主动脉开放后60 min(T4)时,取左股动脉血标本,分离血浆,采用氧化酶法检测血糖浓度,采用放免法检测胰高血糖素浓度,计算胰岛素抵抗指数;T4时处死大鼠,取胰腺组织,采用Wes-tern blot法检测IRE1α、XBP1、c-Jun氨基末端调节激酶(JNK)和caspase-12的表达水平,采用实时荧光定量PCR法测定IRE1α、XBP1、JNK和caspase-12的mRNA表达水平,HE染色观察病理学结果.结果与C组比较,CPB组、I组和NS组T2-4时血糖和胰高血糖素的浓度、胰岛素抵抗指数升高,T4时胰腺组织IRE1α、XBP1、JNK和caspase-12及其mRNA的表达上调(P<0.05).与CPB组和NS组比较,I组T2-4时血糖和胰高血糖素的浓度、胰岛素抵抗指数降低,T4时胰腺组织IRE1α、XBP1、JNK和caspase-12及其mRNA表达下调(P<0.05),胰腺组织病理学损伤减轻.CPB组和NS组上述各指标比较差异无统计学意义(P>0.05).结论外源性胰岛素减轻CPB致兔胰岛素抵抗的机制可能与抑制胰腺组织IRE1α-XBP1信号通路有关.

内质网应激及未折叠蛋白反应通路研究进展

目前，内质网应激（Endoplasmic reticulumstress，ERS）及未折叠蛋白反应（Unfolded protein response，UPR）通路是毒理学研究中的热点。当毒物进入机体后，将影响内质网等细胞器的结构和功能，从而干扰和破坏机体的内稳态，引起暂时性或持久性的病理反应，甚至危及生命。