霉茶缓释片的高效液相色谱指纹图谱的研究

目的建立霉茶缓释片的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,更有效地监控其质量。方法采用梯度洗脱法,对霉茶缓释片进行HPLC测定,检测波长292 nm,流动相为乙腈-0.2%磷酸线性梯度洗脱对霉茶缓释片中总黄酮进行指纹图谱测定。采用中国药典委员会推荐的中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件(版本:2004A)进行比较计算。结果通过软件的比较,霉茶缓释片的指纹图谱相似度均大于0.90,建立霉茶缓释片中总黄酮的共有指纹图谱。结论所建立的方法可作为霉茶缓释片的指纹图谱,有助于霉茶缓释片的质量控制。

霉茶缓释片对肾性高血压大鼠血压及活性物质的影响

目的:探讨霉茶缓释片对肾性高血压大鼠(RHR)血压及其活性物质的影响。方法:应用二肾一夹法制作肾性高血压模型,给RHR灌服不同剂量的霉茶缓释片(180、90、45mg·kg-1.d-1)7周,尾袖法测量清醒大鼠尾动脉收缩压,放射免疫法检测RHR血浆和心肌中活性物质的含量。结果:霉茶缓释片降压效果良好,且能降低RHR血浆中血管紧张素II(AngII)和内皮素(ET)、升高一氧化氮(NO)的水平。结论:霉茶缓释片能有效降低血压,且对肾性高血压大鼠的心脏重塑有一定的防治和逆转作用。

霉茶化学成分的研究

目的:研究霉茶的化学成分。方法:用色谱法和光谱分析法分离和鉴定其化学成分。结果:分离并鉴定了3个化合物,分别为蛇葡萄素(Ⅰ),杨梅素(Ⅱ),杨梅苷(Ⅲ)。结论:化合物Ⅱ、Ⅲ为首次从该植物中得到。

霉茶化学成分研究(Ⅱ)

目的:研究霉茶的化学成分。方法:用色谱法和光谱分析法分离和鉴定其化学成分。结果:分离得到了7个化合物,分别为β-谷甾醇(Ⅰ)、齐墩果酸(Ⅱ)、槲皮素(Ⅲ)、花旗松素(Ⅳ)、儿茶素(Ⅴ)、槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷(Ⅵ)、没食子酸(Ⅶ)。结论:7个化合物均为首次从该植物中得到。

霉茶的性状和显微鉴别

本文对霉茶原植物大叶蛇葡萄(Ampelopsis megalophylla Diels et Gilg)的形态和根、茎、叶组织的显微特征以及主要药用部位叶的粉末显微特征等方面进行了鉴定研究,为湖北民间中药霉茶的鉴别和开发利用提供了一定的科学依据。

霉茶总黄酮对自发性高血压大鼠心脏的保护作用及机制研究

目的:观察霉茶总黄酮对自发性高血压大鼠(SHR)心脏的保护作用,并探讨其作用机制。方法:将50只SHR按体质量随机分为模型组、复方罗布麻片组(阳性药物,50 mg/kg)和霉茶总黄酮低、中、高剂量组(90、180、360 mg/kg),每组10只。各给药组大鼠ig相应药物,模型组大鼠ig等体积蒸馏水,每天2次,连续7周。测定大鼠血压并计算大鼠心脏指数;采用苏木精-伊红染色法观察心脏组织形态结构变化;采用实时荧光定量聚合酶链式反应法检测心脏组织中血管紧张素转化酶(ACE)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和醛固酮合成酶(CYP11B2)m RNA的表达。结果:霉茶总黄酮可明显降低SHR血压(P<0.01),改善SHR心脏组织细胞形态不规则、固缩和组织纤维增生等炎性病变,降低SHR心脏组织中ACE、AngⅡ、CYP11B2 m RNA的表达水平(P<0.05或P<0.01)。结论:霉茶总黄酮对SHR心脏有一定的保护作用,其机制可能与下调心脏组织中ACE、AngⅡ和CYP11B2 m RNA表达有关。

霉茶黄酮对大鼠离体胸主动脉环的影响

用离体大鼠胸主动脉血管环为研究对象,经生物信号采集系统采集并分析血管环张力变化,观察霉茶总黄酮、二氢杨梅素、杨梅素对静息血管的影响以及它们对去甲肾上腺素(NA)所致的缩血管反应的影响。研究发现霉茶总黄酮、二氢杨梅素、杨梅素均可浓度依赖性增加血管环静息张力;霉茶总黄酮能使NA缩血管的量-效曲线非平行右移并降低其效能(Emax);二氢杨梅素、二氢杨梅素与杨梅素的混合物有与霉茶总黄酮相似的效应;二氢杨梅素与杨梅素合用使NA收缩血管的Emax降低,明显强于二者单独使用;当二氢杨梅素与杨梅素浓度比为10∶1时,拮抗NA缩血管的效应最佳。结果显示霉茶总黄酮对静息血管有剂量依赖性收缩作用但能明显拮抗NA缩血管效应,二氢杨梅素与杨梅素对NA诱导血管收缩反应有协同增效作用且最佳协同比例为10∶1。

高效液相色谱法测定霉茶成分及其对血管紧张肽转化酶的抑制作用

目的利用高效液相色谱法测定霉茶成分对血管紧张肽转化酶(ACE)的抑制作用。方法以马尿酰-组氨酰-亮氨酸(HHL)为反应底物,经ACE催化生成的马尿酸为测定指标,分别考察霉茶总黄酮、二氢杨梅素、杨梅素对ACE的抑制作用。采用Welchrom C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为水(含0.1%甲酸,0.1%三乙胺)∶乙腈(含0.1%甲酸,0.1%三乙胺)=78∶22,柱温30℃,流速1.0 m L·min^(-1),检测波长228 nm,进样量10μL。结果马尿酸在0.05~5.00μg范围内其进样量与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 9),霉茶总黄酮、二氢杨梅素对ACE抑制率>75%。结论经该法检测,霉茶总黄酮、二氢杨梅素对ACE均有较强抑制作用。该方法简单、灵敏、重复性好,可用于ACE抑制药的体外活性筛选。

霉茶总黄酮提取物对自发性高血压大鼠胸主动脉重构的影响

目的研究霉茶总黄酮提取物对自发性高血压大鼠(SHR)胸主动脉重构的影响及其机制。方法将SHR随机分为模型组,总黄酮提取物低剂量组(90 mg·kg-1)、中剂量组(180 mg·kg-1)、高剂量组(360 mg·kg-1)和复方罗布麻片组(50 mg·kg-1)。每日给药2次,连续7周,末次给药前禁食12h,末次给药后1 h,处死大鼠,取胸主动脉。部分胸主动脉做病理组织学检查,部分胸主动脉测定其组织ACE、AngⅡ、C-myc、Bcl-2、P27KIP1基因的表达。结果霉茶总黄酮提取物中、高剂量能明显降低血管中膜厚度与管腔内径比值,霉茶总黄酮提取物能下调血管组织中ACE、AngⅡ、C-myc、Bcl-2m RNA表达,同时上调P27KIP1基因表达。结论霉茶总黄酮提取物能抑制SHR的血管重构,其机制与调节RAS系统相关基因及VSMCs增殖相关基因有关。

壳聚糖用于霉茶醇提液澄清效果的考察

目的:探讨壳聚糖絮凝法用于霉茶醇提液澄清的可行性。方法:壳聚糖用于霉茶醇提液的澄清,通过对总固型物、总黄酮含量的测定,对壳聚糖的用量及澄清工艺进行了优选。结果:壳聚糖絮凝法能使药液澄清,并可以较好的保留有效成分,总黄酮的转移率达到90.51%。优选的壳聚糖澄清工艺为:100g霉茶,提取液浓缩至生药质量与浓缩液体积比为1∶6,于60℃搅拌下加入0.25%的壳聚糖醋酸溶液,加入壳聚糖的量为0.65g,静置12h,滤过。结论:壳聚糖絮凝法能用于霉茶醇提液的澄清,利于进一步纯化制备霉茶总黄酮提取物。

霉茶不同提取部位对肾性高血压大鼠降压作用的实验研究

目的观察霉茶各提取部位对肾性高血压大鼠的降压作用。方法建立改良的二肾一夹高血压大鼠模型(G-2K1C)。48只Wistar大鼠随机分为6组,即模型组、乙醇提取物组、石油醚部位组、乙酸乙酯部位组、水部位组和复方罗布麻片Ⅰ组。采用收缩压及舒张压两个指标进行考察。结果乙醇提取物组和乙酸乙酯部位组与模型组比较差异具有统计学意义(P<0.01),表明乙醇提取物组、乙酸乙酯部位组具有明显的降压作用;与复方罗布麻片Ⅰ组比较差异无统计学意义,表明其降压效果与阳性药物复方罗布麻片Ⅰ无明显差异。结论从霉茶分离得到的乙醇提取物组、乙酸乙酯部位组具有明显的降压作用,为该药在我省西部民间长期用于治疗原发性高血压及头昏目胀等症提供了一定的实验依据。

不同采收时间霉茶黄酮类HPLC指纹图谱的研究

目的:建立不同采收时间霉茶黄酮类成分的HPLC指纹图谱,控制其采收质量。方法:采用梯度洗脱法,对霉茶药材进行HPLC测定,流动相为乙腈-0.2%磷酸线性梯度洗脱,检测波长为292nm;记录时间:120m in。采用中华人民共和国药典委员会出版的中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件(版本:2004A)进行比较计算。结果:运用梯度洗脱能很好的分离霉茶的各种成分,通过软件的比较,霉茶的指纹图谱相似度均大于0.90。结论:该方法可用于建立不同采收时间霉茶药材中黄酮类成分的指纹图谱。

霉茶总黄酮在大鼠体内的药代动力学

目的研究霉茶总黄酮在大鼠体内的药代动力学。方法以蛇葡萄素为指标,高效液相色谱法(HPLC)测定给药后大鼠血清中蛇葡萄素的浓度。结果大鼠灌胃0.5 h后血清中即可检测出蛇葡萄素,霉茶总黄酮在大鼠体内呈一室模型分布,且药物在高、中、低剂量时的药物浓度变化比较一致。结论HPLC法适用于测定大鼠体内霉茶总黄酮血药浓度,总黄酮在大鼠体内吸收很快,浓度对药物的体内代谢行为没有明显影响。

不同提取方法对霉茶中总黄酮含量的影响

目的优选霉茶提取工艺,并比较水提和醇提工艺。方法选用L9(34)正交表优选提取条件,以紫外分光光度法测定总黄酮的含量。结果水提最佳工艺总黄酮含量为17.13%,醇提最佳工艺总黄酮含量为25.06%。结论醇提工艺优于水提工艺,最佳工艺为9倍量的70%乙醇,提取3次,每次1 h。

RP-HPLC法测定霉茶中蛇葡萄素的含量

目的:测定霉茶中蛇葡萄素的含量.方法:采用RP-HPLC法测定,色谱柱为Zorbax SB-C18不锈钢柱(250mm×4.6mm,5μm).流动相为甲醇-水-磷酸(35:65:0.2),检测波长为292nm.结果:蛇葡萄素在0.104～0.936μg范围内呈良好的线性关系(r=0.9999),平均回收率100.5%.结论:本方法准确可靠,适合于霉茶中蛇葡萄素的含量测定.

霉茶总黄酮提取物HPLC指纹图谱的研究

目的建立霉茶总黄酮提取物的HPLC指纹图谱,更有效地监控其质量。方法采用梯度洗脱法,对霉茶总黄酮提取物进行HPLC测定,流动相为乙腈-0.2%磷酸线性梯度洗脱,检测波长为292nm,记录时间为120m in。采用中国药典委员会出版的中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件(版本:2004A)进行比较计算。结果运用梯度洗脱能分离霉茶总黄酮提取物的各种成分,通过相似度评价比较,霉茶总黄酮提取物的指纹图谱相似度均大于0.90。结论此法可作为霉茶总黄酮提取物的指纹图谱,有助于霉茶总黄酮提取物的质量控制。

霉茶缓释片对肾性高血压大鼠血压的影响及其机理研究

目的:研究不同剂量霉茶缓释片对肾性高血压大鼠的血压、血浆及心肌组织中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的含量的影响。方法:以两肾一夹丝线缩窄法建立大鼠肾性高血压模型,给予不同剂量的霉茶缓释片观察其疗效;测定各组大鼠血压,同时以放射免疫法测定血浆及心肌组织中AngⅡ含量。结果:霉茶缓释片高剂量组用药7W后大鼠血压有明显改善,血压较用药前有显著降低(P<0.05)。与模型组相比,霉茶缓释片高、中、低剂量组均可使肾性高血压大鼠血浆及心肌组织中AngⅡ含量显著降低,而血浆及心肌组织中肾素水平差异无显著性。结论:霉茶缓释片对肾性高血压大鼠有明显治疗作用,可缓解AngII诱发的血压增高,推测其降压机制可能主要是通过影响RAAS使大鼠血压降低。

反相高效液相色谱法测定霉茶及其原植物中杨梅素的含量

目的测定霉茶中杨梅素的含量。方法采用RP-HPLC法测定,色谱柱为Zorbax SB-C18不锈钢柱(250mm×4.6mm,5μm)。流动相为乙腈-水-磷酸(20∶80∶0.2),检测波长为254nm。结果杨梅素在0.118-0.59μg范围内呈良好的线性关系(r=0.9999),平均回收率为101.10%(n=6)。结论该方法准确可靠,适合于霉茶中杨梅素的含量测定。

霉茶蛋白对原发性高血压大鼠心脏的影响

目的观察霉茶蛋白对原发性高血压大鼠(SHR)心脏的保护作用,并探讨其作用机制。方法将40只SHR随机分为模型对照组(纯化水)、霉茶蛋白小剂量组(70 mg·kg^(-1))、霉茶蛋白大剂量组(140 mg·kg^(-1))和复方罗布麻片组(50 mg·kg^(-1)),每组10只。大鼠每天灌胃2次,连续7周,隔周测量血压。末次给药后1 h,颈总动脉取血,剥离心脏组织,计算心脏指数;取部分组织行病理组织学检查;检测血清一氧化氮(NO)、内皮素(ET-1)含量以及组织血管紧张素转化酶(ACE)和血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的m RNA表达水平。结果霉茶蛋白可明显降低SHR血压,对大鼠的心脏指数影响不明显,对大鼠心脏组织具有一定保护作用。与模型对照组比较,霉茶蛋白大、小剂量组NO含量明显增加,ET-1含量降低(P<0.01);与模型对照组比较,霉茶蛋白大剂量组心脏ACE、AngⅡ、CYP11B2 m RNA表达量明显降低(P<0.01)。结论霉茶蛋白可降低SHR血压,改善心脏组织病理改变,其作用机制可能与增加血清NO含量、降低血清ET-1含量、下调心脏组织ACE和AngⅡm RNA表达有关。