高效液相色谱法同时测定人血浆中霉酚酸及其葡糖苷酸

目的： 建立霉酚酸（MPA）及其葡糖苷酸（MPAG）血药浓度测定方法。方法：采用高效液相色谱（HPLC）－二极管阵列检测器测定血药浓度，检测波长 254nm。血样加乙腈沉淀蛋白。色谱柱：Hypersil ODS2（200 min×4.6 mm，5 μm）；流动相:A相为25％CH3CN＋75％0．02 mol／L KH2PO4．（pH 3．0）,B相为 70％CH3CN＋30％0．02 mol／L K2HPO4（pH6．5），梯度洗脱；流速：1．0ml／min。结果：MPA、MPAG血药浓度线性范围分别为1．0～50μg／ml（r=0．9994，n=6）和2．5～100μg／ml（r=0．9995，n=7），MPA、MPAG血浆最低检测浓度分别为 0．5 μg/ml和 1．0 μg／ml，高、中、低 3种浓度 MPA平均回收率分别为（95．75±2．31）％、（104．10±1．91）％和（98．11±4．24）％，MPAG则分别为（97．37±1．43）％、（101．10±5．41）％和（105．44±7．59）％。结论：本研究为MPA和MPAG的药代动力学研究及血药浓度监测提供了一种测定方法。

HPLC法同时测定人血浆中霉酚酸与霉酚酸葡糖苷酸的浓度

目的:建立以高效液相色谱法同时测定人血浆中霉酚酸(MPA)与霉酚酸葡糖苷酸(MPAG)浓度的方法。方法:色谱柱为LunaC18,流动相为(20mmol·L-1磷酸二氢钾+40mmol·L-1四丁基溴化铵(pH5·5))-乙腈=73:27,流速为1·6mL·min-1,MPA与MPAG采用二极管阵列检测器和荧光检测器串联检测,MPAG检测波长为250nm,MPA荧光检测波长为316nm(激发波长)、430nm(发射波长),柱温为38℃,其中血样加乙腈沉淀蛋白后进样10μL。结果:MPA、MPAG检测浓度分别在0·2～20(r=0·9993)、1～100(r=0·9999)μg·mL-1范围内与峰面积积分值呈良好线性关系,最低检测限分别为0·05、0·1μg·mL-1;平均回收率分别为95·54%、100·22%;MPA日内、日间RSD均<6%,MPAG日内、日间RSD均<4%。结论:本方法快捷、简便、灵敏,可用于测定人血浆中MPA与MPAG的浓度。

HPLC法同时测定人尿液中霉酚酸及其代谢物葡糖苷酸结合物的浓度

目的用HPLC测定人尿液中霉酚酸(MPA)及其代谢物葡糖苷酸结合物(MPAG)的浓度。方法分析柱为Zorbax Eclipse XDB-C8(150 mm×4．6mm,5μm);流动相为甲醇-0．1％三氟乙酸溶液(55:45,V／V);尿稀释5倍后直接进样。MPAG采用紫外检测,检测波长为250nm;MPA采用柱后添加0．2 mol·L-1 NaOH溶液进行荧光检测,荧光激发波长325 nm,发射波长435 nm。结果MPA和MPAG的线性范围分别为0．1-50 mg·L-1和10-500 mg·L-1,MPA、MPAG日内和日间RSD均<10％。结论此法能简便、灵敏、准确地测定人体尿液中MPA与MPAG的浓度,可用于临床药动学研究和治疗药物浓度监测。

有限取样法估算中国肝移植患者服用霉酚酸钠肠溶片后霉酚酸及其代谢物的体内暴露量

目的建立预测肝移植受者口服霉酚酸钠肠溶片(EC-MPS)后霉酚酸(MPA),以及MPA代谢物(MPAG、Ac MPAG)的体内暴露量的有限取样法(LSS)模型。方法 34例接受EC-MPS+他克莫司+泼尼松三联免疫抑制治疗的中国肝移植受者,共采集49例次术后21 d内患者口服EC-MPS前即刻及服药后0.5、1、1.5、2、2.5、3、4、8、12 h全血标本,采用LC-MS/MS法测定血浆中MPA及MPAG、Ac MPAG浓度。采用多元线性回归分析法,获得包括1~4个浓度估算MPA AUC的LSS模型,计算预测误差,Bland-Altman分析法用于评价预测值和实测值的一致性,并采用bootstrap法对初选模型进行内部验证。同时,评估采用LSS法预测MPAG和Ac MPAG体内暴露的效果。结果最佳有限取样法有三点法(2、3和8 h)和四点法(1.5、2.5、3和6 h),对应的MPA预测模型为:MPA AUC_(0→12h)=7.22+0.54×ρ2+2.32×ρ3+5.74×ρ8(R^2=0.79),AUC_(0→12h)=10.78+1.13×ρ1.5+0.50×ρ2.5+1.37×ρ3+3.32×ρ6(R^2=0.84);对应的MPAG和Ac MPAG模型R^2均>0.90。结论对于采用EC-MPS+他克莫司+泼尼松三联免疫抑制方案治疗的肝移植受者,在服药后2、3和8 h或者1.5、2.5、3和6 h进行有限取样法监测血浆MPA及其代谢物浓度,能够估算EC-MPS给药后MPA、MPAG、Ac MPAG的AUC_(0→12h)值,可用于预测患者给药后MPA及其代谢物体内暴露。