牛百叶中检出O_(139)群霍乱孤菌

目的:全国霍乱疫情以聚集性为主,菌型(群)单一,血清学分型全部为O139群霍乱孤菌。霍乱孤菌监测选择外环境水体监测、食品监测、水产品监测和腹泻病人监测。卫生部对其它标本也做了具体的监测要求。作者在小崔各庄李××家中销售牛内脏的冷库内采集货架棉拭子涂抹样品3份,牛百叶4份。在1号牛百叶中检出O139群霍乱孤菌。牛也是霍乱孤菌的带菌宿主之一。

含氯消毒剂对医院污水、河水中霍乱弧菌杀灭效果研究

目的 :指导被霍乱弧菌污染水体的现场消毒。方法 :采用霍乱弧菌模拟污染医院污水和河水 ,用含氯消毒剂消毒处理。结果 :医院污水中 El- tor弧菌杀灭最佳消毒浓度为有效氯 10 0 m g/ L ,作用时间 1小时 ;河水中 El- tor弧菌杀灭最佳消毒浓度为有效氯 2 0 m g/ L ,作用时间 1小时。结论 :提示在扑疫现场消毒工作中 ,选择含氯消毒剂的灭菌浓度和作用时间时 。

O139群霍乱弧菌β-内酰胺酶相关耐药基因检测及分析

目的:通过检测分析2004年至2005年21株O139群霍乱弧菌临床分离株对β-内酰胺类抗生素耐药情况和菌株β-内酰胺酶相关耐药基因携带情况,探讨产生耐β-内酰胺类抗生素的分子生物学机制。方法:K-B纸片扩散法药物敏感实验检测细菌耐抗菌药物情况,PCR方法扩增CARB-2、TEM、OXA、VEB和SHV型β-内酰胺酶相关耐药基因,同时用PCR方法检测1型整合子结构。结果:21株O139群霍乱弧菌均对氨苄西林和羧苄西林等耐药,而对头孢噻肟等敏感,PCR均检出TEM-1耐药基因,检出率达100%。未检出CARB-2、OXA、VEB和SHV等基因。测序分析证明该耐药基因与AF397075有高度同源性。PCR定位实验表明该耐药基因不存在于1型整合子内。三相水解实验证明这种耐药为β-内酰胺酶引起。结论:从O139群霍乱弧菌中检出β-内酰胺酶相关TEM-1耐药基因,介导对氨苄西林和羧苄西林等的耐药。

霍乱弧菌ctxB基因真核重组质粒的构建及表达

目的构建霍乱孤菌ctxB基因真核表达重组质粒,并在NIH3T3细胞中进行表达。方法用限制性核酸内切酶从重组质粒pET32a-ctxB上切下ctxB基因,导入真核表达载体pcDNA3·1(+),重组子经限制性酶切分析、PCR鉴定正确后,命名为pcDNA3·1-ctxB。用脂质体法将重组质粒pcDNA3·1-ctxB转染NIH3T3细胞,采用免疫荧光法对pcDNA3·1-ctxB的瞬时表达产物进行鉴定。结果约380bp的ctxB被克隆到pcDNA3·1(+)真核表达载体中,经测序无误后,用阳离子脂质体转染的方法,检测到重组质粒pcDNA3·1-ctxB在NIH3T3细胞的胞浆和胞膜上得到了表达。结论ctxB真核表达的成功构建及表达为进一步从分子水平研究霍乱肠毒素B亚单位的免疫原性及其作为佐剂的应用价值提供研究基础。

LAMP方法检测霍乱弧菌的研究

目的建立一种快速检测霍乱弧菌的方法。方法利用霍乱弧菌的hlyA基因设计特异性引物,建立LAMP检测方法,以及优化反应体系,并进行LAMP的特异性和灵敏度实验,同时与普通PCR和荧光定量PCR进行比较。结果成功建立霍乱弧菌的LAMP检测方法,得到最优的反应体系,在特异性实验中,霍乱弧菌均呈阳性,而副溶血弧菌、溶藻弧菌、最小弧菌、1梅氏弧菌等均为阴性;在灵敏度实验中,霍乱弧菌的最低检测限为6.2pg/tube,是普通PCR的1000倍,比荧光定量PCR低一个数量级。结论LAMP方法具有很高的特异性和灵敏度,可用于霍乱弧菌的检测。

RTFQ-PCR法和胶体金免疫层析法快速检测霍乱弧菌

目的寻求简便、可靠的快速检测霍乱弧菌的方法,以提高霍乱实验室确诊的时效性。方法采用实时荧光定量PCR法和胶体金免疫层析法对珠海市外环境水体、水产品264份标本进行霍乱弧菌快速检测,并与国标方法进行比较。结果264份标本中按国标方法培养和标准诊断血清检测霍乱弧菌12株,阳性率为4.55%;实时荧光定量PCR法检测阳性8份,一致性为0.9924、灵敏度为100%、特异度为99.22%;胶体金免疫层析法检测阳性10份,一致性为0.9848、灵敏度为80.00%、特异度为99.21%。结论两法操作快速,结果准确,一致性好,特异性强、敏感性高,适用于筛查。胶体金免疫层析法稍逊于实时荧光定量PCR法。但两法均不能鉴定菌型,也出现漏检,所以作为疾病的诊断,应以培养法为标准。

水产品中霍乱弧菌检测结果报道

霍乱是由霍乱弧菌感染机体所致的一种甲类传染病，对外环境标本进行常规监测是霍乱防治工作的重要组成部分。但霍乱弧菌常规监测阳性结果可能性极低，常规培养分离鉴定法工作量大，检测中检验人员容易出现侥幸心理，从而可能因为漏检，造成严重的后果。为了提高常规监测中霍乱弧菌的检出率，减少漏检的可能性，我们根据实验室现有条件，将常规细菌分离鉴定法、荧光定量PCR检测法和胶体金免疫层析试验法，进行霍乱弧菌检测，现将检测情况，报告如下：

一种用于检测外环境低浓度霍乱弧菌的新方法

为了有效地消灭与预防霍乱疾病的发生,对外环境进行定期的霍乱弧菌检测十分必要。目前对外环境检测分离培养获得霍乱弧菌菌株的检测方法仍然是微生物检验领域的＂金标准＂。研究表明,因各种细菌之间存在相互拮抗等现象,会直接影响到对目的菌的检出。

霍乱疫源监测

霍乱疫源监测,是及时发现疫源和消灭疫源的重要手段,本文就如何做好该项工作,提高检出率,作了初步分析。