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7株水产品来源的霍乱弧菌的全基因组特征分析
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作者 王伟杰 刘海霞 +2 位作者 岳航羽 赵韬然 张眉眉 《食品安全质量检测学报》 CAS 2024年第19期314-320,共7页
目的了解7株水产品来源的霍乱弧菌污染情况、血清分型、毒力基因和全基因组的遗传特征。方法对2023年采集自辽宁省餐饮环节和流通环节的鱼类、腹足类、虾类和双壳类等共163份水产样品,进行霍乱弧菌的检测,对分离菌株进行血清分型、毒力... 目的了解7株水产品来源的霍乱弧菌污染情况、血清分型、毒力基因和全基因组的遗传特征。方法对2023年采集自辽宁省餐饮环节和流通环节的鱼类、腹足类、虾类和双壳类等共163份水产样品,进行霍乱弧菌的检测,对分离菌株进行血清分型、毒力基因检测和全基因组测序分析。结果163份样品中共检出7株霍乱弧菌,检出率为4.3%,其中6株菌为非O1/O139群,1株为O1群稻叶血清型,所有分离株均不携带ctxAB基因,7株菌的基因组序列长度为3853887~4164351 bp,GC含量为47.07%~47.76%,编码序列数量为3370~3732个,串联重复序列数量为55~73个,基因岛的数量为4~11个。7个分离株包含588~603个毒力相关基因,携带耐药基因的数量为263~286个。7株霍乱弧菌共有2863个共有的基因家族,O1群稻叶血清型菌株含有104个特有基因家族,同源单拷贝基因构建进化树共分为两个簇,其中第一簇中包含2个分离株,且高度同源,第二簇中包含其他5株菌株。结论7个霍乱分离株携带多种毒力相关基因和耐药基因,O1群稻叶血清型分离株各基因序列来源复杂,决定了其对环境的适应性。通过本研究了解霍乱弧菌的基因组特征,为食品安全风险评估、基因组组分和功能研究提供数据支持。 展开更多
关键词 霍乱弧菌 毒力基因 血清型 全基因组测序
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肝门部胆管癌术后非O1/非O139群霍乱弧菌血流感染1例并文献复习
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作者 王洁 张瑜 +1 位作者 李苹苹 帖彦清 《中国感染与化疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期271-276,共6页
目的了解非O1/非O139群霍乱弧菌感染的流行病学特征、临床表现、诊断及治疗,以期提高对该病的认识。方法对1例非O1/非O139群霍乱弧菌血流感染患者的临床表现、实验室检查、治疗及转归进行回顾性分析﹐并以“非O1/非O139群霍乱弧菌”和... 目的了解非O1/非O139群霍乱弧菌感染的流行病学特征、临床表现、诊断及治疗,以期提高对该病的认识。方法对1例非O1/非O139群霍乱弧菌血流感染患者的临床表现、实验室检查、治疗及转归进行回顾性分析﹐并以“非O1/非O139群霍乱弧菌”和“血流感染”为主题词,检索万方、维普和中国知网数据库,以“non-O1/non-O139 Vibrio cholerae”和“bloodstream infection”为主题词检索PubMed数据库,获取国内外报道的病例,复习非O1/非O139群霍乱弧菌血流感染的临床特征及诊疗方法。结果该例69岁男性患者肝门部胆管癌术后6个月,腹胀、发热、无腹泻,血培养检测出霍乱弧菌,经质谱、VITEK 2XL和16S rRNA基因鉴定均为霍乱弧菌,血清学确认为非O1/非O139群。使用哌拉西林抗感染治疗10 d后﹐患者康复出院。通过文献复习发现26例非O1/非O139群霍乱弧菌血流感染患者大多数有慢性肝炎、肝硬化等消化道基础疾病﹐主要症状为急性腹泻、腹胀腹痛、发热、恶心、呕吐等。菌株对多种抗菌药物敏感,予抗感染及对症治疗后80.77%患者好转出院,15.38%死亡,主要因感染性休克引起的多器官衰竭而死亡。结论非O1/非O139群霍乱弧菌血流感染好发于免疫功能低下者,尤其是慢性肝炎、肝硬化、恶性肿瘤、糖尿病患者,及时血培养检查和准确鉴定对其诊断非常重要。早期应用敏感抗生素治疗预后相对较好。 展开更多
关键词 非O1/非O139群霍乱弧菌 肝硬化 血流感染
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2012—2023年梧州市水产品和水体中O1/O139群霍乱弧菌监测结果分析
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作者 林静梅 冼桂江 《热带病与寄生虫学》 CAS 2024年第1期23-26,36,共5页
目的了解O1/O139群霍乱弧菌在梧州市水产品和水体中的污染状况,为防控工作提供科学依据。方法2012—2023年每年5—10月,对梧州市各农贸市场和超市的水产品和养殖池水随机采样,并定点采集易受污染的池塘水、江河水。对采集的样本进行霍... 目的了解O1/O139群霍乱弧菌在梧州市水产品和水体中的污染状况,为防控工作提供科学依据。方法2012—2023年每年5—10月,对梧州市各农贸市场和超市的水产品和养殖池水随机采样,并定点采集易受污染的池塘水、江河水。对采集的样本进行霍乱弧菌分离培养、生化鉴定、血清学分型和毒力基因检测。结果2012—2023年梧州市共监测水产品和水体4844份,共检出O1/O139群霍乱弧菌53份,总检出率为1.09%。其中水产品监测3020份,检出率为1.42%(43/3020),水体监测1824份,检出率为0.55%(10/1824),水产品和水体检出率差异有统计学意义(χ^(2)=8.056,P<0.05)。不同月份的水产品霍乱弧菌检出率差异有统计学意义(χ^(2)=16.053,P<0.05),其中9月的检出率较高(3.54%,12/339),7月的检出率较低(0.68%,4/588)。不同类型水产品和水体的霍乱弧菌检出率差异均有统计学意义(χ^(2)=82.308、15.752,P均<0.05);水产品中蛙类检出率较高(10.27%,23/224),水体中养殖池水检出率较高(2.43%,7/288)。检出的53株菌株中,O1群小川型22株,O1群稻叶型24株,O139群7株;霍乱毒素(cholera toxin,CT)毒力基因均为阴性。结论梧州市水产品和水体均存在霍乱弧菌污染,应进一步加强监测工作力度,及时掌握霍乱弧菌的污染状况,严防霍乱疫情发生。 展开更多
关键词 霍乱弧菌 水产品 水体 监测 梧州市
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一株克氏原螯虾病原——霍乱弧菌的分离鉴定
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作者 鹿豪洁 李凯 +2 位作者 吕锦贤 王永杰 杨明树 《安徽农业大学学报》 CAS CSCD 2024年第3期441-449,共9页
从尾扇边缘溃烂的克氏原螯虾中分离到一株优势菌LK-18,并对该菌株进行种属鉴定和致病性分析。通过菌落形态观察、16S rRNA测序、血清型分析及基因特性鉴定对细菌的类别进行初步判断,并采用浸泡感染、肌肉注射和腹腔注射等方式进行人工... 从尾扇边缘溃烂的克氏原螯虾中分离到一株优势菌LK-18,并对该菌株进行种属鉴定和致病性分析。通过菌落形态观察、16S rRNA测序、血清型分析及基因特性鉴定对细菌的类别进行初步判断,并采用浸泡感染、肌肉注射和腹腔注射等方式进行人工感染实验对细菌的致病性进行评估。经16S rRNA测序分析和4个管家基因(atp A、pyr H、rec A、gyr B)串联分析,该菌株最终被鉴定并命名为VibriocholeraeLK-18。V. choleraeLK-18经PCR鉴定不属于O1和O139血清型,但含hly毒力基因和几丁质分解相关的几丁质酶(chitinase,Chi)基因。人工感染实验虽未能重现烂尾症状,但从克氏原螯虾烂尾组织中分离的V. choleraeLK-18具有致病性,能够引起克氏原螯虾的死亡。研究结果表明霍乱弧菌LK-18是一种致病菌,不仅扩大了非O1/O139群霍乱弧菌的感染宿主范围,同时预警霍乱弧菌有导致克氏原螯虾养殖业暴发疾病的可能,因此要提前做好该疾病的预防工作,从而避免霍乱弧菌感染带来的损失。 展开更多
关键词 克氏原螯虾 致病菌 霍乱弧菌(vibrio cholerae) 分离鉴定
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2008-2022年福建省O1群霍乱弧菌人源株基因组特征研究
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作者 柯自立 张小玄 +5 位作者 徐海滨 高亚东 罗朝晨 黄梦颖 邱玉锋 杨劲松 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期708-715,共8页
目的了解福建省O1群霍乱弧菌人源株基因组特征,为深入开展霍乱分子流行病学研究提供依据。方法收集2008-2022年福建省霍乱病例和带菌者来源O1群霍乱弧菌16株,肉汤稀释法检测抗生素最小抑菌浓度(MIC)。运用二代测序技术得到全基因组序列... 目的了解福建省O1群霍乱弧菌人源株基因组特征,为深入开展霍乱分子流行病学研究提供依据。方法收集2008-2022年福建省霍乱病例和带菌者来源O1群霍乱弧菌16株,肉汤稀释法检测抗生素最小抑菌浓度(MIC)。运用二代测序技术得到全基因组序列;利用snippy、Roary、Prokka等开源软件及NCBI、BacWGSTdb等在线分析网站进行核心基因组多位点序列分型(cgMLST)、核心基因组单核苷酸多态性分析(cgSNP)、毒力基因和耐药基因预测、泛基因组多样性的分析。结果福建省霍乱弧菌分为5个ST(sequence type)型别,其中新发现的ST182和ST1480型是当前我国优势克隆群ST75型的进化分支,并与2010年和2013年的台湾株高度同源。产毒株和非产毒株均不同程度地携带各种毒力因子并发生变异;预测出7大类13个耐药基因,其中黏菌素类、四环素类耐药基因携带情况与耐药表型一致。泛基因组学分析发现霍乱弧菌拥有1个开放的泛基因组,Roary聚类分析表现出比cgMLST更高的分辨率。结论福建省O1群霍乱弧菌人源株的基因组结构和功能具有多态性,新发的ST1480型克隆群具有流行潜力,需加强对此类菌株的监测。 展开更多
关键词 霍乱弧菌 全基因组测序 生物信息学分析 核心基因组多位点序列分型 泛基因组
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非O1/O139群霍乱弧菌致肝硬化失代偿期患者血流感染1例
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作者 李红森 赵越 张妮 《中国感染控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期527-529,共3页
患者,男性,58岁,乙型肝炎后肝硬化失代偿期、2型糖尿病12年,近1个月再发腹胀、水肿,尿少入院。住院期间患者寒战、发热,取血标本进行培养,选用头孢哌酮/舒巴坦经验性抗感染治疗。确诊非O1/O139霍乱弧菌引起的血流感染,药敏试验提示头孢... 患者,男性,58岁,乙型肝炎后肝硬化失代偿期、2型糖尿病12年,近1个月再发腹胀、水肿,尿少入院。住院期间患者寒战、发热,取血标本进行培养,选用头孢哌酮/舒巴坦经验性抗感染治疗。确诊非O1/O139霍乱弧菌引起的血流感染,药敏试验提示头孢哌酮/舒巴坦敏感后,继续使用当前药物,头孢哌酮/舒巴坦由3 g q12h改为3 g q8h治疗。10 d后患者无发热,血培养和粪便霍乱弧菌培养阴性,好转出院。 展开更多
关键词 肝硬化 非O1群 非O139群 霍乱弧菌 败血症
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2株公园湖水源非O1/O139群霍乱弧菌的分离鉴定和致病性分析
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作者 廖佳玮 施霁桢 +4 位作者 李金鑫 任志浩 张越 谭丽琼 苏敬良 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2024年第7期49-57,共9页
近年来,非O1/O139群霍乱弧菌(NOVC)引起人和动物感染时有报道。本试验于2021年3月—2022年4月连续采集圆明园遗址公园湖水样本进行细菌分离培养,经16S rRNA序列分析和溶血性检测对分离株进行鉴定,并通过细胞毒性试验和小鼠感染试验对分... 近年来,非O1/O139群霍乱弧菌(NOVC)引起人和动物感染时有报道。本试验于2021年3月—2022年4月连续采集圆明园遗址公园湖水样本进行细菌分离培养,经16S rRNA序列分析和溶血性检测对分离株进行鉴定,并通过细胞毒性试验和小鼠感染试验对分离株的致病性进行检测;采用PCR方法对分离株的毒力相关基因ctxA、ctxB、tcpA、hlyA、rtxA、rtxC和chxA进行检测;通过系统发育进化分析对分离株的chxA基因全长进行分析;通过药敏试验对分离株的药物敏感性进行检测。结果显示,共分离鉴定出2株NOVC,NOVC分离株在血琼脂培养基上生长呈现明显的溶血现象;经过滤除菌的细菌培养液上清有溶细胞作用,对体外培养的Vero细胞具有极强的毒性作用,可引起细胞萎缩和脱落;分离株培养物和培养液上清经腹腔注射均可致死小鼠,对小鼠的半数致死量(LD_(50))为10^(7.23)CFU。PCR检测结果显示,分离株hlyA、rtxA、rtxC和chxA基因呈阳性,提示细菌的致病性可能与毒力因子的表达相关。对chxA基因的全长分析结果显示,2株分离株均可编码II型ChxA毒素,其催化域与I型毒素高度同源,但在相应区域缺失1段5个氨基酸片段(^(619)AIAKE^(623))。药敏试验结果显示,2株分离株均对环丙沙星、恩诺沙星和阿米卡星敏感,均对复方新诺明耐药。结果表明,公园水源性NOVC分离株携带多种毒力相关基因,产生溶血素等溶细胞毒素,可致死小鼠,对抗菌药呈多重耐药,对水生动物和环境的公共卫生具有潜在的威胁。 展开更多
关键词 非O1/O139群霍乱弧菌 致病性 毒力基因 ChxA毒素
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水产品中副溶血弧菌、溶藻弧菌和霍乱弧菌三重PCR检测方法的建立
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作者 周茜 方林芳 +2 位作者 李凤霞 陈清森 胡元庆 《中国食品添加剂》 CAS 2024年第4期262-270,共9页
为实现水产食品中多种弧菌同步快速检测,拟建立一种同时检测副溶血弧菌、溶藻弧菌和霍乱弧菌的三重PCR快速检测方法。根据副溶血弧菌的bla CARB-17基因、溶藻弧菌的gyrB基因和霍乱弧菌的toxR基因设计特异性引物。针对3种弧菌分别建立单... 为实现水产食品中多种弧菌同步快速检测,拟建立一种同时检测副溶血弧菌、溶藻弧菌和霍乱弧菌的三重PCR快速检测方法。根据副溶血弧菌的bla CARB-17基因、溶藻弧菌的gyrB基因和霍乱弧菌的toxR基因设计特异性引物。针对3种弧菌分别建立单重PCR体系并优化各项主要反应参数,确定最佳退火温度。然后建立多重PCR体系并优化其反应参数,分析三重PCR的特异性和灵敏度;并验证其实效性。结果表明:三重PCR的最佳退火温度为60℃,能同时扩增出副溶血弧菌bla CARB-17基因的230 bp片段、溶藻弧菌gyrB基因的337 bp片段,霍乱弧菌toxR基因的130 bp片段,灵敏度分别为0.583 ng/μL、0.394 ng/μL、0.866 ng/μL。该三重PCR检测方法可以从实际样品中快速特异地检出三种弧菌,具有较好的特异性,较高的灵敏度,为实际生产中检测水产食品中的弧菌污染提供参考。 展开更多
关键词 副溶血弧菌 溶藻弧菌 霍乱弧菌 多重PCR 快速检测
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非O1群非O139群霍乱弧菌血流感染的诊疗及防控2例报告
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作者 马天驰 白露 +3 位作者 解柔刚 周柯 孙菲 田克勇 《中国感染控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期687-691,共5页
目的对2例血流感染患者血培养标本分离的弧菌属进行鉴定和药敏试验,分析非O1群非O139群霍乱弧菌(NOVC)的微生物学特性,为霍乱弧菌感染的诊断和防控提供依据。方法通过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)、API细菌生化反应... 目的对2例血流感染患者血培养标本分离的弧菌属进行鉴定和药敏试验,分析非O1群非O139群霍乱弧菌(NOVC)的微生物学特性,为霍乱弧菌感染的诊断和防控提供依据。方法通过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)、API细菌生化反应鉴定卡、VITEK 2 Compact鉴定仪和16S rRNA基因测序鉴定2株弧菌分离株,并进行血清学分型、毒力基因分子检测和耐药表型检测。结果2株菌株均鉴定为霍乱弧菌,血清学试验确定为NOVC,毒力基因ctx AB检测阴性;药敏试验显示1株菌对氨苄西林、阿奇霉素、多西环素和氯霉素敏感,对四环素和复方磺胺甲唑耐药,另一菌株对所有检测抗菌药物均敏感。结论NOVC所致的血流感染在中国少有报道,完善血培养标本分离霍乱弧菌的准确鉴定、分型和耐药表型检测,对诊断、治疗和防控霍乱弧菌感染具有重要价值。 展开更多
关键词 非O1群非O139群霍乱弧菌 血流感染 血清学分型 抗菌药物敏感性 感染防控
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霍乱弧菌溶血素共调节蛋白(Hcp)的原核表达、纯化及多克隆抗体制备
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作者 蔡远凤 贾城壹 王光丽 《现代检验医学杂志》 CAS 2024年第5期189-192,204,共5页
目的原核表达、纯化霍乱弧菌溶血素共调节蛋白(hemolysin coregulatory protein,Hcp),并制备其多克隆抗体。方法PCR扩增霍乱弧菌Hcp基因并克隆入pET28a载体中构建重组表达载体;将重组载体pET28a-hcp转化E.coil BL21(DE3)中,进行表达条... 目的原核表达、纯化霍乱弧菌溶血素共调节蛋白(hemolysin coregulatory protein,Hcp),并制备其多克隆抗体。方法PCR扩增霍乱弧菌Hcp基因并克隆入pET28a载体中构建重组表达载体;将重组载体pET28a-hcp转化E.coil BL21(DE3)中,进行表达条件优化及表达形式鉴定。获取可溶性Hcp蛋白行Ni-NTA柱纯化,纯化的Hcp蛋白免疫BALB/c小鼠以制备多克隆抗体,并用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗体效价,以评估其免疫原性。再以Western blot法分析抗体对霍乱弧菌Hcp蛋白的特异性识别。结果重组载体pET28a-hcp的酶切片段与预期相符,测序结果与GenBank数据库中hcp基因序列一致,成功构建pET28a-hcp重组质粒,重组质粒经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达相对分子量为28kD的目的蛋白;经Ni-NTA柱纯化后获得较纯的Hcp蛋白,免疫小鼠可获得效价为1∶512000的抗Hcp多克隆抗体(anti-Hcp);Western blot鉴定结果显示anti-Hcp具有识别霍乱弧菌Hcp蛋白的特异性。结论成功获得可溶形式表达的Hcp蛋白,免疫小鼠后获得高效价的抗Hcp多克隆抗体,为后续研究Hcp蛋白在非O1/非O139群霍乱弧菌T6SS致病过程中的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 非O1/非O139群霍乱弧菌 溶血素共调节蛋白 原核表达 多克隆抗体
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台湾泥鳅腐皮病霍乱弧菌的分离与鉴定
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作者 杨宁 姜芳燕 +4 位作者 陈攀 马军 陈燕 曹柳 侯兴蓉 《海南热带海洋学院学报》 2024年第2期18-24,共7页
为研究台湾泥鳅(Paramisgumus dabryanus ssp.)腐皮病的病原,对其腐皮等病变部位进行细菌分离纯化,获得1株优势菌株,命名为P1,利用革兰氏染色观察其形态特征,利用PCR扩增技术、16S rRNA基因测序,得到病原菌的序列,用MEGA软件构建系统进... 为研究台湾泥鳅(Paramisgumus dabryanus ssp.)腐皮病的病原,对其腐皮等病变部位进行细菌分离纯化,获得1株优势菌株,命名为P1,利用革兰氏染色观察其形态特征,利用PCR扩增技术、16S rRNA基因测序,得到病原菌的序列,用MEGA软件构建系统进化树,再结合生理生化分析结果鉴定菌种名称。结果发现:革兰氏染色阴性,弧形,两端钝圆;菌体长1~1.5μm,宽度1~1.2μm,有菌丝和鞭毛,16S rRNA基因1 395 bp。建立系统进化树后发现,P1与霍乱弧菌处于同一分支;生理生化实验结果与霍乱弧菌一致,从而鉴定该菌株为霍乱弧菌(Vibrio cholerae)。药敏实验结果表明,该分离菌株对头孢哌酮、卡那霉菌、万古霉素等10种抗生素高度敏感;对四环素中度敏感;对呋喃唑酮、复方新诺明、克林霉素等17种抗生素耐药。实验结果为台湾泥鳅腐皮病的病原鉴定与药物防治提供参考。 展开更多
关键词 台湾泥鳅 腐皮病 霍乱弧菌 分离 鉴定
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脉冲场凝胶电泳结合PCR技术在霍乱弧菌研究中的应用
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作者 张丽萍 吴文勇 《福建轻纺》 2024年第5期23-27,共5页
脉冲场凝胶电泳(PFGE,Pulse Field Gel Electrophoresis)结合PCR(Polymerase Chain Reaction)技术在病原微生物检测中得到越来越广泛的应用,并且逐步成为“金标准”。霍乱弧菌是人类霍乱的病原体,可存在于水产品中,其引发的食源性霍乱... 脉冲场凝胶电泳(PFGE,Pulse Field Gel Electrophoresis)结合PCR(Polymerase Chain Reaction)技术在病原微生物检测中得到越来越广泛的应用,并且逐步成为“金标准”。霍乱弧菌是人类霍乱的病原体,可存在于水产品中,其引发的食源性霍乱暴发已是全球公共卫生问题之一,通过采用脉冲场凝胶电泳结合PCR技术,将为霍乱弧菌导致的疫情防控提供更加准确可靠的手段。为了对PFGE结合PCR技术在霍乱弧菌检测领域的应用提供参考,文章对PFGE结合PCR技术在霍乱弧菌的分子鉴定、分子分型和耐药性研究等方面进行了总结,并对其在霍乱弧菌株间竞争作用的新研究方向进行展望。 展开更多
关键词 脉冲场凝胶电泳 PCR技术 霍乱弧菌
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泥鳅(Misgurnus anguillicaudatus)病原霍乱弧菌(Vibrio cholerae)的表型与分子鉴定 被引量:26
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作者 邴旭文 阎斌伦 +2 位作者 张晓君 秦蕾 毕可然 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期692-698,共7页
从江苏连云港某养殖场养殖死亡的泥鳅肝脏、血液及腹水中分离出大量优势生长的细菌,人工感染试验证明其对泥鳅具有很强的致病性。采用表观分类学及分子生物学方法,对分离菌进行了形态特征、理化特性、胞外酶活性及溶血活性等生物学性状... 从江苏连云港某养殖场养殖死亡的泥鳅肝脏、血液及腹水中分离出大量优势生长的细菌,人工感染试验证明其对泥鳅具有很强的致病性。采用表观分类学及分子生物学方法,对分离菌进行了形态特征、理化特性、胞外酶活性及溶血活性等生物学性状检验;用PCR方法同时扩增其16SrRNA和gyrB基因,分析了16SrRNA和gyrB两种基因序列的同源性,并构建了系统发生树,通过基因序列分析,比较了两种基因在相似细菌的检测和鉴定能力;基于16SrRNA和gyrB基因的系统发育学分析表明分离菌(LD081008B-1)所扩增的16SrRNA和gyrB基因序列均与GenBank数据库中霍乱弧菌具有较高的相似性,且gyrB基因用于细菌种间鉴定更具优越性;16SrRNA基因序列长度为1446bp(GenBank登录号:GQ205447),gyrB基因序列长度为1207bp(GenBank登录号:GQ205452);根据分离菌的表型特征及分子特征,判定病原菌为弧菌属(VibrioPacini1854)的霍乱弧菌(Vibriocholerae)。胞外酶活性及溶血活性检测表明分离菌均具有蛋白酶、卵磷脂酶、淀粉酶、明胶酶及DNA酶活性,在含7%家兔脱纤血液营养琼脂培养基上呈β型溶血。分离菌的耐药谱测定结果显示,除对供试49种抗菌药物中的杆菌肽耐药外,对其它48种药物敏感或高度敏感。 展开更多
关键词 泥鳅 霍乱弧菌 生物学特性 16S RRNA基因 gyrB基因
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泥鳅(Misgurnus anguillicaudatus)病原霍乱弧菌(Vibrio cholerae)PCR与LAMP检测方法的比较研究 被引量:6
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作者 张晓君 白雪松 +3 位作者 毕可然 许加涛 秦蕾 阎斌伦 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期209-214,共6页
采用分子生物学方法,以霍乱弧菌lolB为靶基因设计特异性引物,进行了霍乱弧菌的PCR和环介导等温核酸扩增(Loop-mediatedisothermal amplification,LAMP)检测技术研究,并对它们的特异性、灵敏性和实际应用进行了比较。结果表明,所建立的PC... 采用分子生物学方法,以霍乱弧菌lolB为靶基因设计特异性引物,进行了霍乱弧菌的PCR和环介导等温核酸扩增(Loop-mediatedisothermal amplification,LAMP)检测技术研究,并对它们的特异性、灵敏性和实际应用进行了比较。结果表明,所建立的PCR检测霍乱弧菌的方法最低检测限为4.0×103CFU/ml;LAMP检测方法在65℃下恒温扩增60min,检测限为4.0×101CFU/ml,反应产物加入荧光染料SYBRGreenI后反应液呈现明显的绿色;以温和气单胞菌、副溶血弧菌、鳗弧菌及美人鱼弧菌为对照菌株,检测结果均为阴性;霍乱弧菌人工染菌的8种水产品进行PCR及LAMP检测,结果均为阳性,而未染菌组均为阴性;PCR及LAMP检测霍乱弧菌的方法均具有灵敏度较高、特异性强等优点,且LAMP检测霍乱弧菌的方法灵敏度是PCR方法的100倍,更适合于养殖现场检测的推广使用。 展开更多
关键词 霍乱弧菌 PCR LAMP 特异性 灵敏性
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霍乱弧菌(Vibrio cholerae)的细胞形态研究——活的非可培养状态细胞 被引量:23
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作者 徐怀恕 黄备 +2 位作者 祁自忠 王祥红 纪伟尚 《青岛海洋大学学报(自然科学版)》 CSCD 1997年第2期187-190,共4页
使用透射电镜和萤光抗体染色,对处于可培养和活的非可培养状态的霍乱弧菌进行了细胞形态结构比较研究。结果表明:处于非可培养状态的霍乱菌细胞,体积明显地缩小,形态由弧形变成了球形,我们共观察了382个非可培养状态的细胞,发... 使用透射电镜和萤光抗体染色,对处于可培养和活的非可培养状态的霍乱弧菌进行了细胞形态结构比较研究。结果表明:处于非可培养状态的霍乱菌细胞,体积明显地缩小,形态由弧形变成了球形,我们共观察了382个非可培养状态的细胞,发现它们的细胞壁都是完整的,即不是细菌-L型。 展开更多
关键词 霍乱弧菌 培养状态 细胞形态 L-型 芽孢
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抗水产病原非O1/O139霍乱弧菌的中草药筛选及抑菌效果分析 被引量:2
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作者 陈圳 钱且奇 +5 位作者 李志鹏 徐静雯 张紫瑞 姜群 张晓君 高晓建 《水产学杂志》 CAS 北大核心 2023年第2期43-47,59,共6页
为筛选能有效抑制水产病原非O1/O139霍乱弧菌(non-O1/O139 Vibrio cholerae)生长的中草药,本研究通过水煎法获得黄柏、五倍子等23味中草药的提取物,采用琼脂打孔法测定其对非O1/O139霍乱弧菌的抑制作用,并用试管二倍稀释法测定了抑制效... 为筛选能有效抑制水产病原非O1/O139霍乱弧菌(non-O1/O139 Vibrio cholerae)生长的中草药,本研究通过水煎法获得黄柏、五倍子等23味中草药的提取物,采用琼脂打孔法测定其对非O1/O139霍乱弧菌的抑制作用,并用试管二倍稀释法测定了抑制效果较强的8种中草药对非O1/O139霍乱弧菌的最小抑菌浓度(Minimum Inhibitory Concentration,MIC)和最小杀菌浓度(Minimum Bactericidal Concentration,MBC)。结果表明:五倍子、白芍、黄柏、诃子、山楂、石榴皮、地榆、木瓜等8种草药对非O1/O139霍乱弧菌具有较强的抑制作用,其中非O1/O139霍乱弧菌对五倍子、白芍和黄柏高度敏感,其抑菌圈直径分别为(19.92±1.24)mm、(19.50±0.74)mm和(18.92±2.12)mm。五倍子抑菌和杀菌作用最强,MIC和MBC均为7.81 mg/mL,其次是白芍,MIC为15.63 mg/mL,MBC为31.25 mg/mL。本研究为中草药防治由非O1/O139霍乱弧菌引起的水产动物疾病提供了理论参考。 展开更多
关键词 中草药 非O1/O139霍乱弧菌 抑菌效果 最小抑菌浓度(MIC) 最小杀菌浓度(MBC)
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基于核酸适配体的SYBR Green I qPCR法检测鳗弧菌(Vibrio anguillarum)
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作者 谭英 赵玲敏 +5 位作者 翁齐彪 黄力行 鄢庆枇 黄将远 白月 郑江 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期942-950,共9页
鳗弧菌(Vibrio anguillarum)可感染鲈鱼、鳗鲡等多种水产养殖动物,是水产养殖中的重要病原菌,对其进行快速检测是病害防控的基础。利用鳗弧菌与其核酸适配体间较强的亲和特异性,通过核酸适配体来识别、结合鳗弧菌,然后以结合的核酸适配... 鳗弧菌(Vibrio anguillarum)可感染鲈鱼、鳗鲡等多种水产养殖动物,是水产养殖中的重要病原菌,对其进行快速检测是病害防控的基础。利用鳗弧菌与其核酸适配体间较强的亲和特异性,通过核酸适配体来识别、结合鳗弧菌,然后以结合的核酸适配体为模板,进行SYBR Green I实时荧光定量PCR(qPCR)扩增,通过Ct值来定量检测鳗弧菌的浓度,从而建立了鳗弧菌的适配体-qPCR定量检测方法。从特异性、标准曲线、灵敏度、重复性和应用效果对该方法进行分析,表明该方法具有很强的特异性,能特异性地扩增鳗弧菌,且对哈维氏弧菌、溶藻弧菌、变形假单胞菌、大肠杆菌、嗜水气单胞菌和迟钝爱德华氏菌均无扩增;在10^(3)~10^(11) CFU/L的检测范围内有较好的线性关系,可用于鳗弧菌的定量检测;同时,该方法有较高的灵敏度和稳定性,其最低检测限为10^(3) CFU/L,组内和组间变异系数分别小于0.17%和1.98%;最后采用该方法对鱼体组织样品进行了应用检测,证明了该方法具有较好的可行性和应用性,可用于水产品或食品中鳗弧菌的定量检测。 展开更多
关键词 弧菌 核酸适配体 实时荧光定量PCR 检测限
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2例非O1群/O139群霍乱弧菌血流感染病例分析 被引量:1
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作者 刘敏 文良军 +3 位作者 薛维军 刘轶芳 刘娟 方鹏 《系统医学》 2023年第22期57-59,67,共4页
国内外所报道非O1/非O139群霍乱弧菌(non-O1/non-O139 vibrio cholerae, NOVC)血流感染案例的患者基础疾病集中在肝脏疾病和血液系统疾病,但传染途径大多不明。本文通过回顾公安县两例肝病患者血流感染NOVC后的临床表现和不同转归,结合... 国内外所报道非O1/非O139群霍乱弧菌(non-O1/non-O139 vibrio cholerae, NOVC)血流感染案例的患者基础疾病集中在肝脏疾病和血液系统疾病,但传染途径大多不明。本文通过回顾公安县两例肝病患者血流感染NOVC后的临床表现和不同转归,结合流行病调查,探讨其血流感染的感染途径和预防措施。建议肝病患者发生腹泻、发热等症状时,应及时就医,临床医师应警惕此类患者的NOVC血流感染,重视血培养,尽早发现病原体,根据培养结果对症治疗,提高患者存活率。 展开更多
关键词 非O1群/O139群霍乱弧菌 血流感染 肝病患者
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非O1霍乱弧菌感染罗氏沼虾肝胰腺转录组分析
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作者 张紫瑞 朱鑫海 +4 位作者 张晓君 高晓建 孙永军 魏万胜 姜群 《水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期977-986,共10页
非O1霍乱弧菌是严重危害罗氏沼虾养殖生产的主要病原之一,为探究非O1霍乱弧菌感染罗氏沼虾引发的宿主免疫应答反应,采用接近半致死密度(1×10^(6)cfu/mL)的菌液对健康罗氏沼虾[体质量(7.22±0.46)g]进行人工感染,感染24 h取肝... 非O1霍乱弧菌是严重危害罗氏沼虾养殖生产的主要病原之一,为探究非O1霍乱弧菌感染罗氏沼虾引发的宿主免疫应答反应,采用接近半致死密度(1×10^(6)cfu/mL)的菌液对健康罗氏沼虾[体质量(7.22±0.46)g]进行人工感染,感染24 h取肝胰腺组织样本,基于Illumina Hiseq 2000测序平台开展罗氏沼虾感染个体与未感染个体肝胰腺组织的转录组测序。结果显示,所得序列经质控、组装后获得85794个单基因,平均长度1208 bp。与对照组相比,感染组共发现3236个差异表达基因,其中上调基因1745个,下调基因1491个,根据注释信息对差异表达基因进行筛选,获得16个免疫相关基因,其中C型凝集素3、丝氨酸蛋白酶抑制因子1等9个免疫基因表达量显著上升,血蓝蛋白、消道夫受体B等7个免疫基因表达量显著下降。对差异表达基因进行GO富集分析发现,免疫系统过程、抗氧化活性和对刺激的反应等与免疫相关的条目被显著富集;差异表达基因经KEGG富集分析显示,非O1霍乱弧菌感染可诱导罗氏沼虾吞噬体、ECM-受体互作通路、霍乱弧菌感染通路、白细胞跨内皮迁移通路、NOD样受体信号通路等多个免疫通路被显著富集,推测上述基因和通路可能在罗氏沼虾应对非O1霍乱弧菌感染的防御机制中起重要作用。随机选取8个免疫相关差异表达基因进行实时荧光定量PCR分析,其结果与RNA-seq具有相似的表达趋势,表明转录组测序结果可靠。本试验可为揭示罗氏沼虾防御病原非O1霍乱弧菌感染的分子机制提供基础数据。 展开更多
关键词 罗氏沼虾 非O1霍乱弧菌 转录组 免疫 差异表达基因
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国内外食品卫生标准中霍乱弧菌限量比较分析 被引量:1
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作者 丁卫平 张士财 霍胜楠 《中国标准化》 2023年第18期160-164,179,共6页
由霍乱弧菌感染引起的霍乱病例在我国各地仍时有发生,以水产品为代表的食源性传播已成为霍乱弧菌的最主要传播方式。为减少由霍乱弧菌引起的食品感染事件的发生及为食品进出口企业与相关标准制定机构提供参考,更好地维护食品安全与经济... 由霍乱弧菌感染引起的霍乱病例在我国各地仍时有发生,以水产品为代表的食源性传播已成为霍乱弧菌的最主要传播方式。为减少由霍乱弧菌引起的食品感染事件的发生及为食品进出口企业与相关标准制定机构提供参考,更好地维护食品安全与经济发展,本文系统分析与比较了中国与其他国家/地区(国际组织)食品卫生标准中霍乱弧菌限量的异同。通过研究发现,包括中国在内的有些国家/地区(国际组织)基于国家(地区)整体食品安全风险评估未在食品卫生标准中对霍乱弧菌制定限量标准,英国、美国、加拿大、中国香港特别行政区与中国澳门特别行政区对霍乱弧菌则制定了较为严格的限量标准。对中国某些水产品消费量较大的地区来说,由霍乱弧菌带来的潜在食品安全风险仍然比较高,建议这些地区根据自己的实际情况,定期进行风险监测或制定针对霍乱弧菌的地方标准。 展开更多
关键词 食品 霍乱弧菌 食品卫生标准 限量 比较分析
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