霞草苷Ⅱ通过PI3K/AKT和ERK/MAPK通路下调CXCR4表达抑制DU145细胞侵袭

目的观察霞草苷Ⅱ(OldhamianosideⅡ)对前列腺癌DU145细胞侵袭性的影响,检测器官特异性转移相关蛋白CXC趋化因子受体4(CXC-chemokine receptor 4,CXCR4)表达的变化,并探讨其可能作用通路。方法 应用细胞划痕实验,观察霞草苷Ⅱ对DU145细胞迁移的影响;Transwell小室法,观察霞草苷Ⅱ对DU145细胞体外侵袭性的影响;免疫细胞化学方法观察DU145细胞CXCR4表达变化;Western blot检测CXCR4表达及AKT、ERK1/2的磷酸化水平。结果 细胞划痕实验显示,1 mg/L霞草苷Ⅱ处理的DU145细胞和对照组比较,细胞迁移明显减慢;体外侵袭实验结果显示,基质细胞衍生因子(stromal cell-derived factor-1,SDF-1)可明显增加DU145细胞的穿膜数量,霞草苷Ⅱ可抑制SDF-1诱导的DU145细胞侵袭;免疫细胞化学结果显示,经霞草苷Ⅱ处理后CXCR4表达下调;Western blot结果表明,霞草苷Ⅱ下调CXCR4表达,降低AKT、ERK1/2的磷酸化水平。结论 霞草苷Ⅱ通过PI3K/AKT和ERK/MAPK通路下调CXCR4表达,影响SDF-1/CXCR4反应轴,进而抑制细胞的迁移和侵袭。

霞草苷对人结肠癌HT-29细胞生长和凋亡的影响

目的观察霞草苷对人结肠癌HT-29细胞凋亡的影响及其可能机制。方法用MTT法和流式细胞技术检测浓度为5,10,20,40μmol·L-1霞草苷对HT-29细胞生长、凋亡的影响;用实时荧光定量RT-PCR检测细胞Caspase-3、Bax的mRNA水平。结果霞草苷对HT-29细胞的生长有明显的增殖抑制作用,呈浓度和时间依赖性,细胞凋亡率明显增高。Caspase-3和Bax的mRNA表达量逐渐增加,呈明显的浓度依赖性。结论霞草苷能诱导体外培养的人结肠癌HT-29细胞凋亡,上调Bax表达,活化Caspase-3可能是霞草苷诱导HT-29细胞凋亡的机制之一。

霞草苷Ⅱ对前列腺癌细胞侵袭力的影响

目的观察霞草苷Ⅱ对前列腺癌DU-145细胞侵袭力的影响，并探讨其可能的作用机制。方法前列腺癌DU-145细胞经霞草苷Ⅱ处理后，用四甲基偶氮唑蓝法检测其生长与增殖的变化；细胞侵袭小室法观察其体外侵袭能力的变化；免疫细胞化学方法研究其基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、CXC趋化因子受体4（CXCR4）的表达变化。结果经霞草苷Ⅱ处理后，DU-145细胞的增殖受抑制；体外侵袭实验结果显示，对照组每100倍视野穿过的细胞数平均为180．3个±14．6个，而0．25、0．5、1μg/ml霞草苷Ⅱ作用24h后，每100倍视野穿过的细胞数分别为100．4个±1．5个、80．2个±2．7个和60．1个±5．3个，比对照组明显减少，（P〈0．05）；免疫细胞化学显示，经霞草苷Ⅱ处理后，MMP-2表达下调，CXCR4表达下调。结论霞草苷Ⅱ抑制DU-145细胞侵袭力的作用可能与其下调MMP-2的表达有关；霞草苷Ⅱ可能通过下调DU-145细胞CXCR4的表达从而抑制癌细胞向骨转移。

霞草皂苷对A549细胞和小鼠Lewis肺癌的抑制作用

利用MTT法和流式细胞技术分析霞草皂苷对A549肺癌细胞生长及凋亡的影响;建立小鼠Lewis肺癌模型,观察霞草皂苷对Lewis肺癌的抑制作用,探讨其抗癌机制。结果表明:霞草皂苷对A549细胞株有显著的生长抑制作用,呈一定的量效依赖性,IC50为0.19 mg/L;霞草皂苷3个剂量组干预的小鼠肿瘤的质量及2个剂量组的肺系数明显低于阴性对照组(p<0.01),免疫组化结果显示霞草皂苷各剂量组血管内皮生长因子(VEGF)和突变型P53基因表达明显低于阴性对照组(p<0.05)。霞草皂苷抑制肺癌生长机制可能和VEGF及P53基因有关。

霞草总苷对S_(180)和H_(22)实体瘤的抑制作用

目的:研究霞草总苷对小鼠S180肉瘤和H22肝癌的体内抑瘤作用。方法:每只小鼠腋窝皮下接种S180肉瘤和H22肝癌细胞悬液0.2 ml,24 h后每天给予腹腔注射不同剂量霞草总苷,分别连续给药10 d。末次给药24 h后处死动物,解剖瘤块并称重,计算抑瘤率,并与对照组比较。结果:实验结果表明,腹腔注射7.5 mg/kg、10.0 mg/kg霞草总苷对小鼠S180肉瘤和H22肝癌具有明显的抑制作用,抑瘤率分别为32.8%、51.1%和42.3%、45.8%。与阴性对照组比较均具有统计学意义。虽然抑瘤率不及阳性对照组,但不良反应轻。结论:霞草总苷在体内具有抑制小鼠S180肉瘤和H22肝癌实体肿瘤的作用,且不良反应小。

霞草中三萜化合物的分离与结构鉴定

目的为开发利用霞草Gyp soph ila oldham iana根部资源,并从中寻找新的天然活性成分。方法利用多种柱色谱技术进行分离纯化,根据理化性质和现代波谱技术并辅以化学方法进行结构鉴定。结果从霞草根部甲醇提取物的正丁醇部分和醋酸乙酯部分分得3个五环三萜化合物,分别鉴定为:齐墩果酸(o leano lic ac id,Ⅰ)、co llinsogen in(Ⅱ)、3-O--βD-xy lopyranosy l-(1→3)-[-βD-ga lactopyranosy l-(1→2)]--βD-g lucuronopyranosy l gypso-gen in(Ⅲ)。结论化合物Ⅲ为新化合物,命名为霞草苷Ⅰ(o ldham ianos ideⅠ);化合物Ⅰ和Ⅱ均为首次从该植物中分得。