中药露蜂房蛋白对人红白血病K562细胞增殖的影响

目的研究中药露蜂房蛋白(NVP)抗白血病的作用,为中药露蜂房治疗白血病和开发新的抗白血病药物提供实验和理论依据。方法采用细胞培养和透射电子显微镜技术,观察NVP对人红白血病细胞(K562细胞)的生长抑制作用和形态结构的影响;运用免疫组织化学方法和图像分析系统,研究NVP对K562细胞凋亡相关信号转导蛋白NF-κBp65、-βcatenin及iNOS表达的影响。结果1.NVP处理组K562细胞生长饱和密度降低,表示细胞增殖减弱。2.透射电镜下发现,NVP处理组K562细胞呈典型的凋亡形态学改变。3.免疫组织化学和图像分析系统测定光密度值(A值)显示,NVP处理组K562细胞中NF-κBp65、-βcatenin细胞核内转导减少,iNOS表达减弱。结论NVP有明显抑制K562细胞增殖的作用,其作用机制可能通过调节凋亡相关信号传导因子NF-κBp65、-βcatenin及iNOS的表达,从而诱导白血病细胞凋亡。

露蜂房蛋白抑制大鼠支气管平滑肌细胞体外增殖的可能机制

目的观察露蜂房蛋白[NVP(1)]对大鼠支气管平滑肌细胞增殖的抑制作用及其可能机制。方法用原代细胞培养、MTT法、流式细胞术和免疫印迹法检测细胞增殖。结果6.4×10-3g/L的NVP(1)明显抑制支气管平滑肌细胞增殖,并且阻断在细胞周期的G1期(对照组G1期为64.6%,NVP(1)处理组为90.5%)。NVP(1)能增强细胞周期蛋白激酶抑制剂(P21)蛋白的表达,降低细胞周期蛋白激酶(cdk2)蛋白的表达。结论NVP(1)阻断支气管平滑肌细胞增殖于细胞周期的G1期。

中药露蜂房蛋白对白血病患者免疫功能影响的研究

目的研究中药露蜂房蛋白对白血病患者免疫功能的影响,探讨露蜂房蛋白治疗白血病的免疫学机制,为开发新的抗白血病药物和临床应用提供实验和理论依据。方法分离急性白血病患者骨髓单个核细胞,采用细胞培养技术、免疫组织化学方法和图像分析系统,研究露蜂房蛋白对急性白血病患者(AL)骨髓中T细胞亚群和NK细胞的作用。结果免疫组化显示,露蜂房蛋白能提高AL患者骨髓中CD3+T细胞、CD4+T细胞、NK细胞数量,CD4/CD8值升高。图像分析系统检测免疫组化阳性细胞的光密度值(OD),结果CD3、CD4、CD16表达增强,CD8表达减弱,经统计学处理,差异有显著性(<0.05)。结论中药露蜂房蛋白能调整AL患者骨髓T细胞亚群的分布和促进NK细胞的表达。

露蜂房纯化蛋白对白血病细胞形态学影响的研究

目的观察中药露蜂房纯化蛋白Ⅱ(nidus vespae protein-Ⅱ,NVP-Ⅱ)对人早幼粒白血病细胞株HL-60和急性髓系白血病(AML)患者骨髓单个核细胞(BMMNC)形态学的影响。方法采用体外细胞培养,加入不同浓度NVP-Ⅱ作用于HL-60细胞和AML患者BMMNC,培养72 h后,生长曲线法测定NVP-Ⅱ对白血病细胞增殖的影响,倒置显微镜下观察细胞生长状况,并收集细胞常规制备超薄切片,透射电子显微镜下观察HL-60细胞和AML患者BMMNC的超微结构。结果光镜下NVP-Ⅱ处理组白血病细胞数量明显减少,并出现细胞碎片;透射电镜下,NVP-Ⅱ处理组白血病细胞出现核固缩,染色质浓缩边集,呈新月状、块状或碎裂为质膜包绕的团块,形成凋亡小体;线粒体基质深染,出现空泡样变。结论NVP-Ⅱ有明显诱导白血病细胞凋亡的作用,并呈现典型的细胞凋亡形态学改变。

露蜂房纯化蛋白对人早幼粒白血病HL-60细胞的生长抑制作用

目的研究中药露蜂房纯化蛋白(nidus vespae protein-Ⅱ,NVP-Ⅱ)对人早幼粒白血病HL-60细胞的生长抑制作用。方法采用NVP-Ⅱ在体外作用于HL-60细胞,经光镜、电镜、荧光显微镜观察形态学变化,TdT缺口末端标记(TUNEL)技术检测NVP-Ⅱ对HL-60细胞增殖、凋亡的影响。结果①光镜下观察到,与生理盐水对照组比较,NVP-Ⅱ处理组HL-60细胞数量减少,胞质内颗粒增多。②透射电镜下发现,NVP-Ⅱ处理组HL-60细胞核染色质靠核膜边集,呈块状或半月形;有的细胞核固缩、断裂为质膜包绕的碎块,有凋亡小体出现。③荧光显微镜下观察到,NVP-Ⅱ处理组HL-60细胞核染色质高度凝聚,致密浓染,或裂解呈碎块状,边缘光滑清晰,呈现典型的凋亡形态特征。④TUNEL检测见阳性细胞核深染,NVP-Ⅱ处理组与生理盐水处理组比较,凋亡细胞明显增多(P<0.05)。结论NVP-Ⅱ可抑制HL-60细胞增殖并诱导其凋亡。