SIRT1增强青光眼小梁网细胞DSBs修复能力及抗细胞衰老的研究

目的研究Ⅲ类组蛋白去乙酰化酶SIRT1与青光眼小梁网细胞(GTM)DNA双链损伤(DSBs)修复能力及细胞衰老之间的关系。方法首先通过RT-PCR和Western blot检测正常小梁网细胞(HTM)与GTM之间SIRT1表达的差异;然后将HTM、GTM细胞分别分为4组,白藜芦醇组(0.5μmol/L Res干预24h)、SIRT1-ShRNA组(构建成功的SIRT1干扰质粒转染细胞)、microRNA34a组(构建成功的microRNA34a表达质粒转染细胞)以及Control组,通过Western blot检测各组细胞中SIRT1表达水平的差异;SA-β-Gal衰老染色检测连续生长10h、32h、3d、6d后各组细胞的衰老变化;中性彗星电泳检测经1.33mol/L H2O2液处理0h、2h时各组细胞中DNA双链损伤情况;Western blot检测1.33mol/L H2O2液处理0h、1h、2h后,各组细胞中γ-H2AX表达的变化情况。结果 HTM及GTM细胞中均存在SIRT1的表达,且HTM中的表达要高于GTM;HTM、GTM细胞各组内比较发现,SIRT1蛋白的表达水平呈Res组>Control组>microRNA34a组>SIRT1-ShRNA组趋势;SA-β-Gal衰老染色则发现在相同时间点,GTM细胞的衰老程度均高于HTM细胞,而在同一类细胞中,SIRT1-ShRNA组细胞最先表现出衰老,且随着时间的延长,其衰老程度也最为严重,Res干预细胞24h后,能明显延缓细胞衰老。中性彗星电泳检测表明经氧化剂处理后,GTM组双链DNA的损伤情况比HTM组严重,并呈现出SIRT1-ShRNA组>microRNA34a组>Control组>Res组的趋势,γ-H2AX表达量的检测结果与中性彗星电泳的结果一致。结论 SIRT1表达活性的下调可能是诱发青光眼的因素之一;Res能显著增强HTM细胞中SIRT1的表达活性,上调的SIRT1能促进HTM细胞DNA双链损伤修复的能力,维持细胞基因组的稳定性,进而减缓细胞的衰老。

青光眼小梁网切除术后角膜后弹力层脱离一例

患者女,67岁.以双眼急性闭角型青光眼（慢性期）为诊断收入院.入院全身体检未见明显异常.眼部检查：右眼视力0.1,左眼视力0.3,眼压：右眼15 mmHg（1 mmHg=0.133kPa）,左眼14 mmHg,双眼睑未见明显异常,结膜无充血,角膜光滑、透明,前房浅,周边前房＜ 1/3CT,瞳孔正圆,直径约2.5 mm,对光反应迟钝,虹膜膨隆,晶状体灰白色混浊.双眼房角镜检查：右眼上方及颞侧窄Ⅲ,下方及鼻侧窄Ⅳ;左眼颞侧窄Ⅱ,其余方向均为窄Ⅲ.双眼角膜厚度：右眼544μm,左眼568μm.双眼眼轴长度：右眼21.11 mm,左眼21.12 mm.双眼前房深度：右眼1.96 mm,左眼1.91 mm.双眼晶状体厚度：右眼5.26 mm,左眼5.18 mm.左眼角膜内皮计数：2 868/mm2,六角细胞59％（667/1 131）.