青刺果抗氧化肽的分离纯化、结构鉴定及其分子对接解析

采用超滤、强阴离子交换层析法分离并纯化青刺果蛋白酶解物,以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除率为评价指标,筛选具有较好抗氧化活性的肽组分。通过L C-MS/MS鉴定肽序列,结合生物信息学方法分析其理化特性,并进一步利用红外光谱、分子对接技术解析其二级结构特征及与Keap1蛋白的对接位点。研究结果表明,分离得到的4个组分中F-1组分具有更好的抗氧化活性,其DPPH自由基清除率达到27.67%。选择活性更高,且分子质量小于1 kDa的肽组分,测定得到的3条肽(TALDVPPPR、TLSDAGVGGL和DLINGGKDA)的DPPH自由基清除率,其IC 50值分别为0.43、0.83、0.51 mg/mL,其中TALDVPPPR的抗氧化活性相对较高。二级结构分析结果表明,3条抗氧化肽均由α-螺旋、β-折叠和β-转角构成,其中TALDVPPPR的α-螺旋含量相对较低,使其更易与自由基结合。分子对接结果显示,TALDVPPPR、TLSDAGVGGL、DLINGGKDA以氢键和疏水作用与Keap1蛋白紧密结合,释放Nrf2进入细胞核,并激活一系列具有抗氧化和细胞保护作用的蛋白质表达,即激活Keap 1-Nrf2/ARE通路而发挥抗氧化作用。因此,TALDVPPPR、TLSDAGVGGL、DLINGGKDA可作为新型抗氧化剂,研究旨在为青刺果功能性肽的开发利用提供理论参考。

青刺果抗菌肽组分的分离及其稳定性分析

旨在高值化利用青刺果榨油后副产物青刺果粕中的蛋白质,以青刺果粕为原料,提取青刺果蛋白并制备蛋白酶解物,采用活菌吸附法联合反相高效液相色谱(RP-HPLC)从蛋白酶解物中筛选出抗菌肽组分,评价其抑菌活性,并对抑菌活性最好的组分进行稳定性分析。结果表明:筛选出的3个抗菌肽组分(F1、F2和F3)中,F2组分抑菌活性最好,当其质量浓度为10 mg/mL时对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌活性分别达到45.5%和39.1%;抗菌肽组分F2抑菌活性随温度升高和盐溶液浓度增加均降低,最适pH为6.0,在酸性环境中极不稳定,对酸性蛋白酶、碱性蛋白酶、胃蛋白酶和胰蛋白酶的耐受性均较差,对中性蛋白酶耐受性较好。综上,青刺果粕中的蛋白酶解物具有抑菌活性,具有开发青刺果抗菌肽的潜力。

青刺果ACE抑制肽的分离纯化、结构鉴定及其体外活性评价

以具有血管紧张素转化酶(ACE)抑制活性的青刺果蛋白酶解物为研究对象,采用超滤、强阴离子交换层析分离纯化ACE抑制肽,液相色谱-串联质谱鉴定其肽序列。采用傅里叶红外光谱、酶反应抑制剂动力学、MTT试验和分子对接技术解析其二级结构特征、体外活性以及与ACE的结合机制。结果表明,分子质量<3 ku的超滤组分活性较好(IC50=0.380 mg/mL),离子交换层析后以F-a组分活性最好(IC50=0.159 mg/mL)。质谱鉴定出4条肽序列,通过生物信息学分析确定肽PGDVF为潜在的ACE抑制肽[IC50=(0.56±0.1)mmol/L]。二级结构分析表明PGDVF由α-螺旋(20.28%)、β-折叠(6.21%)、β-转角(31.55%)和无规则卷曲(41.85%)构成,其抑制模型为非竞争性抑制,肽质量浓度小于1 mg/mL时,对HepG2细胞无毒性。分子对接显示PGDVF可通过氢键、疏水作用与ACE紧密结合,从而有效抑制ACE活性。研究结果可为青刺果降压肽的开发利用提供参考。

温度及氧气对青刺果油贮藏品质的影响

为研究青刺果油的贮藏稳定性,本文以丽江青刺果油为原料,通过感官评定以及酸价和过氧化值的测定,研究温度、氧气对青刺果油贮藏品质的影响。结果表明:贮藏10个月时,低温(4℃)密封贮藏的青刺果油感官评分最高,酸价和过氧化值最低。低温一定程度地延缓了青刺果油酸价和过氧化值的上升,且温度对过氧化值的影响程度明显大于对酸价的影响;氧气的接触明显加速了青刺果油酸价和过氧化值的上升。低温密封保藏能显著提高青刺果油的贮藏稳定性,延长货架期。

青贮刺梨果渣替代青贮玉米对育肥湖羊生长性能与肌肉品质的影响

为了探究利用青贮刺梨果渣替代青贮玉米育肥湖羊的可行性,采用单因素随机区组试验设计,选取36只年龄接近、初始体重为(37.23±3.15)kg的育肥湖羊(公母各半)作为试验动物,分为2个试验组:对照组、试验组,每个组18只羊,分为3个重复,每个重复6只羊。检测项目及方法:(1)生长性能、称重和计算法;(2)肌肉品质,按照国标操作流程检测;(3)经济效益,市场调研和计算法。结果:(1)两组间始重、末重、净增重、日增重、料重比差异均不显著(P>0.05)。(2)试验组肌肉蛋白较对照组升高了11.95%,差异显著(P<0.05);肌肉初水、吸附水及脂肪等指标差异不显著(P>0.05)。(3)试验组饲料成本较对照组显著降低了15.19%(P<0.05);虽然两组间其余各项经济效益指标差异均不显著(P>0.05),但是试验组毛利润在数值上较对照组提高了9.93%。结论:日粮中10%青贮刺梨果渣具备替代10%青贮玉米的可行性,有利于提高育肥湖羊肌肉品质,降低饲养成本,提升养殖效益,具备适量替代可行性。

青刺果药理活性研究进展

青刺果(Prinsepia utilis Royle),学名总花扁核木,可食用,也可药用,在中国的纳西族、白族、彝族、摩梭族等少数民族中已有上千年的使用历史。近20年来,对青刺果果实、枝叶、花等部位的提取物药理活性的研究已有较多报道。文章从抗菌、降低血糖和改善糖尿病并发症、调节血脂、免疫调节、抗炎、抗氧化等方面对青刺果的药理活性研究成果进行了总结。青刺果药理作用较为丰富,具有广阔的开发前景,但其药理活性的物质基础并不明确,还有待进一步研究。

宽谱强脉冲光(BBL)联合盐酸米诺环素和含青刺果油屏障修复霜治疗玫瑰痤疮

目的:评价综合疗法(联合盐酸米诺环素、宽谱强脉冲光和含青刺果油屏障修复霜)治疗玫瑰痤疮的临床有效性和安全性。方法:回顾性分析2021年1月-2021年6月就诊于上海交通大学医学院附属第九人民医院皮肤科门诊,主要表现为红斑、丘疹和毛细血管扩张的玫瑰痤疮患者20例。给予患者口服盐酸米诺环素50 mg,2次/日,连续4周;联合宽谱强脉冲光(Broad band light,BBL)治疗,1次/月,共3次;同时给予患者含青刺果油皮肤屏障修复剂进行日常护肤。治疗3个月后随访1个月,评估治疗有效性和安全性。结果:治疗后,患者治疗有效率为95%,持久性红斑、毛细血管扩张、丘疹和脓疱的治疗评均分较治疗前明显降低(P<0.05)。所有患者治疗期间均未出现严重不良反应。结论:针对以持久性红斑、毛细血管扩张、丘疹和脓疱为主要表现的玫瑰痤疮,盐酸米诺环素、BBL联合含青刺果油屏障修复霜的综合疗法安全有效。

青刺果油组合物的抗氧化及保湿活性研究

寻找青刺果油组合物来提高产品抗氧化能力及保湿活性。将青刺果油组合物应用于产品中,通过DPPH自由基清除率以及失水率的测定,研究其抗氧化能力及保湿活性。结果表明,在干燥环境下青刺果油组合物样品随时间增加,保湿率逐渐降低,但每个时间段内其保湿率均高于对照样品(青刺果油含量0.11%);与对照样品相比,添加了虾青素、橙皮素的青刺果油样品对DPPH自由基清除能力较强;将虾青素和橙皮素组合后,提取组合物浓度在50%时DPPH自由基清除能力也可达到90%左右。研究初步验证了青刺果油组合物具有较强的自由基清除能力和保湿性能,为拓展青刺资源的综合利用供了初步的应用研究。

果酸换肤联合外用含马齿苋提取物和青刺果油护肤品治疗轻中度寻常痤疮

目的:探究果酸换肤联合外用主含马齿苋提取物和青刺果油护肤品治疗轻、中度寻常痤疮的临床疗效。方法:将轻、中度寻常痤疮患者随机分为对照组(果酸换肤治疗)、观察组(果酸换肤治疗联合外用主含马齿苋提取物和青刺果油护肤品),每组60例。比较两组患者临床疗效、角质层含水量和经表皮水分流失量(Transepidermal water loss,TEWL)。结果:治疗12周后,观察组总有效率为93.33%高于对照组总有效率78.33%(P<0.05)。治疗6周、12周后观察组患者的角质含水量均高于对照组(P<0.05),且与治疗前相比,治疗6周、12周后,观察组患者的角质含水量均升高(P<0.05)。治疗6周、12周后,观察组患者的TEWL均低于对照组(P<0.05);与治疗前相比,观察组在治疗6周、12周后TEWL均降低(P<0.05)。结论:果酸换肤联合主含马齿苋提取物和青刺果油护肤品治疗面部轻、中度寻常痤疮疗效显著,同时可增加皮肤含水量,降低经表皮水分流失量,使用安全感良好。

野生生境青刺果根际土壤细菌群落结构多样性分析

探究在野生环境条件下,青刺果根际与非根际土壤细菌群落组成及多样性特征,为发展青刺果产业、优化青刺果植物生长状态及微生物资源开发利用提供理论依据。以生长在野生环境条件下,青刺果根际与非根际土壤为材料,通过HiSeq平台高通量双末端测序获得根际与非根际土壤内生细菌16S rRNA基因V3~V4区域序列,对其根际与非根际土壤细菌群落结构组成进行生物信息学分析。结果表明,青刺果根际与非根际土壤细菌主要由110个属组成,归属于11个门。相对丰度较高的门是Proteobacteria(变形菌门),其次是Acidobacteria(酸杆菌门)、Actinobacteria(放线菌门)。在纲分类水平上,根际土壤细菌特有的菌纲为Deinococci(异常球菌纲)、Elusimicrobia、Fibrobacteria(纤维杆菌纲)。非根际土壤细菌特有的菌纲为Negativicutes(厌氧菌纲)。在属分类水平上,酸杆菌亚属(Acidobacterium)总丰度最高,为优势属;丰度大于1%的根际、非根际土壤细菌分别有9个属和11个属。通过LEfSe聚类树分析,青刺果根际与非根际土壤细菌起到重要作用的微生物类群biomaker在丰度上存在显著差异。基于基因功能预测显示,青刺果根际与非根际土壤细菌群落主要涉及碳水化合物代谢、萜类化合物和聚酮类化合物代谢、细胞运动、氨基酸代谢和信号转导机制等27个二级功能,均表现出功能上的多样性和丰富性。通过对青刺果根际与非根际土壤细菌群落结构组成分析,明确了生长在野生环境下的青刺果植株,其土壤细菌群落多样性丰富,群落组成间存在共性与差异性;同时发现青刺果潜在食品安全风险。

青刺果多糖对糖尿病小鼠血糖、血脂含量的影响

目的研究青刺果多糖对四氧嘧啶诱导糖尿病小鼠的血糖、血脂等血液生化指标的影响。方法腹腔一次性注射四氧嘧啶复制模型。造模成功后,将实验动物分为模型组(生理盐水)、青刺果多糖治疗组(300 mg/kg)、阿卡波糖阳性药物治疗组(20 mg/kg)和正常对照组(生理盐水)。每组小鼠于给药后2周末、4周末分别测定空腹12h血糖、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇、丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶、尿素氮和总胆固醇的含量及小鼠体重。结果2周末,青刺果多糖治疗组和阳性药物治疗组与模型组相比,血糖、丙氨酸转氨酶均显著降低(P<0.05),甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇、天冬氨酸转氨酶、尿素氮和总胆固醇均无差异,体重明显升高(P<0.05);4周末,青刺果多糖治疗组和阳性药物对照组与模型组相比,血糖、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇、天冬氨酸转氨酶、尿素氮均显著降低(P<0.05),丙氨酸转氨酶则极显著降低(P<0.01),对总胆固醇的影响无显著差异,体重逐渐增加接近正常。结论青刺果多糖具有降低糖尿病小鼠血糖水平,调节血脂紊乱和保护肝肾的功能。

青刺果乙醇提取物对桃子的保鲜效果

用青刺果乙醇提取液对桃子进行涂膜和涂布保鲜试验 ,测定了贮藏期间桃子的Vc、糖度、酸度、失重率等。结果表明 :用青刺果乙醇提取液涂布保鲜桃子效果良好 ,在室温下 ,桃子能保持较好的新鲜度 ,生理变化推迟 。

丽江产野生青刺果油营养成分分析

目的:综合研究云南丽江地区野生青刺果油的营养成分和功效。方法:采用国内外公认的标准方法进行常规理化、卫生指标及氨基酸、脂肪酸、无机元素等营养成分分析及评价。结果:青刺果油的特性常数为水分及挥发物0.03%、折光指数1.4716(n20)、相对密度0.9260(d2020)、碘值45.91(以I计)、皂化值0.02%、酸价0.17mgKOH/g,过氧化值1.20mmol/g,属于非干性油脂;营养指标为17种氨基酸总量为46.97%,其中含有7种人体必需氨基酸(异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、苏氨酸、缬氨酸),为13.2%,占氨基酸总量的28.1%;富含VA(3.257mg/100g)、VD(1.745 mg/100g)、VE(8.736mg/100g)、VK(0.293mg/100g)、β-胡萝卜素(1.234mg/100g)等;13种矿物质微量元素含量最高的是K,为9.8mg/kg;脂肪酸13种,其中不饱和脂肪酸含量占78.35%,以油酸和亚油酸为主,含量均为38%,饱和脂肪酸、单不饱合脂肪酸和多不饱和脂肪酸组成比例接近于0.7:1:1,油脂营养结构合理,各项指标均符合部分国家食用大豆油标准(GB/T 1535—2003;Codex-Stan 210)。结论:丽江产野生青刺果油属于适合人类食用的天然功能性营养油。

青刺果不同部位水提取液的抑菌效果

采用60℃水浴12h、煮沸10min、20min3种方式,分别提取青刺果果实、根、茎与叶4个部位中的水溶性成分对8种常见致病菌和食品腐败菌的抑菌作用。结果表明:果实和根在上述3种提取方式下所得的水提液,当浓度达到0.25g/ml时,均显示不同程度的抑菌作用,果实提取液的抑菌效果明显比根的好;该浓度下,60℃水浴12h处理、煮沸20min的抑菌作用显著强于煮沸10min;提取时间延长可提高抑菌效果;果实经这3种方式处理所得的提取液,最小抑菌浓度为0.125g/ml。

青刺果的植物学特性及其人工栽培技术

从形态特征、生长习性、分布状况及其生境,种子的自然变异等论述了青刺果的植物学特性;又从采种育苗、造林技术、促进实生幼林早实早丰技术等方面,记述了青刺果的人工栽培技术,为建立青刺果人工原料基地提供了技术支持。

青刺果多糖对鸡红细胞免疫及外周血淋巴细胞免疫功能的影响

[目的]观察饲喂青刺果多糖对鸡红细胞及外周血淋巴细胞免疫功能的影响。[方法]分别对7日龄鸡饲喂400和800 mg/kg的青刺果多糖,同时设对照组。分别在21和28日龄时颈静脉采血,进行T淋巴细胞ANAE阳性率、红细胞玫瑰花环率、红细胞免疫复合物花环率和T淋巴细胞玫瑰花环总花环率的测定。[结果]青刺果多糖400 mg/kg剂量组的T淋巴细胞ANAE阳性率在各日龄均在0.01水平上极显著高于对照组;红细胞免疫复合物花环率在21日龄时,在0.05水平上显著高于对照组;T淋巴细胞花环率与对照组相比差异不显著,但数值有所升高。[结论]青刺果多糖能明显影响鸡的红细胞免疫及外周血淋巴细胞免疫功能,可作为免疫增强剂并加以应用。

含1%青刺果油、10%马齿苋提取物的护肤品对糖皮质激素依赖性皮炎患者皮肤屏障恢复的临床观察

长期频繁使用中、强效糖皮质激素治疗面部皮肤病，甚至将糖皮质激素滥用于面部皮肤美容．可导致面部出现皮肤萎缩变薄、毛细血管扩张、色素减退（或色素沉着）、痤疮样皮炎、毳毛增多，伴有不同程度的瘙痒、灼热等症状。

青刺果多糖对糖尿病小鼠肝组织病理变化的影响

目的:观察青刺果多糖对四氧嘧啶诱导的糖尿病小鼠肝组织病理变化的影响,并探讨其对糖尿病小鼠肝脏保护作用。方法:腹腔一次性注射四氧嘧啶复制模型。造模成功后,将实验动物分为模型组、青刺果多糖治疗组、阳性药物治疗组。另设正常对照组。实验小鼠分别于给药2周末和4周末处死,取肝脏称重,测定肝脏脏器指数,然后固定于4%的多聚甲醛中,制作病理切片,HE染色,光镜下观察。结果:青刺果多糖治疗组和阳性药物治疗组可显著降低糖尿病小鼠的肝脏脏器指数(P<0.05)。病理组织观察:模型组小鼠肝细胞索排列紊乱;肝血窦增宽,肝细胞索间纤维细胞增生,肝细胞发生脂肪变性和局灶性坏死,坏死灶内大量炎性细胞浸润,中央静脉周围炎性细胞浸润。经青刺果多糖治疗后,肝细胞索状结构清晰,肝血窦基本正常,肝细胞索间增生的纤维细胞数量减少,肝细胞有轻微的颗粒变性。结论:青刺果多糖对糖尿病小鼠肝脏具有保护作用。

青刺果多糖对鸡血清抗体和血液生化指标的影响

[目的]探讨饲喂青刺果多糖对鸡血清抗体和血液生化指标的影响。[方法]分别采用400和800mg/kg的青刺果多糖饲喂7日龄鸡(设对照组),研究青刺果多糖对鸡血清抗体水平和血液生化指标的影响。[结果]与对照组相比,21日龄时青刺果多糖480mg/kg组中鸡IgM含量极显著增加;28日龄时IgG和IgM含量显著增加;各项血液生化指标与对照组相比均无显著差异。[结论]青刺果多糖能明显提高鸡的血清抗体含量,增强鸡的免疫力,可作为免疫增强剂。

含青刺果护肤品抗皮肤老化临床观察

目的:评价含青刺果提取物的医学护肤品(薇诺娜抗衰老系列产品)抗皮肤老化的临床疗效和安全性。方法:采用多中心、随机治疗、前后对照的临床试验方法。经医师临床诊断筛选出93名具有皮肤老化特征的受试者,选择薇诺娜驻颜紧肤防皱霜和薇诺娜驻颜紧肤祛皱眼霜均匀涂抹于面部,每日2次,连续使用3个月,并采用无创性皮肤测试仪在治疗前及治疗后30、60、90 d分别对受试者进行皮肤生理功能测试,对受试者皮肤老化改善程度及安全性进行评估。结果:使用面霜和眼霜90 d后,皮肤老化改善有效率分别为91%及95%,皮肤生理参数(含水量和油脂含量)亦有显著提高,用最小显著差异(LSD)t检验与30d组相比差异具有统计学意义。在90 d的观察期间,使用面霜的不良反应发生率为6%,使用眼霜的不良反应发生率为9%,多为一过性,且程度轻微。结论:含青刺果提取物的医学护肤品对改善皮肤老化具有较好的疗效,且安全性良好。