青藤碱可有效抑制白细胞介素1β介导的髓核细胞凋亡

背景:椎间盘退变是导致脊柱退行性疾病的基础,然而目前尚无有效的治疗药物。目的:探讨青藤碱是否可以抑制白细胞介素1β诱导的髓核细胞凋亡及其分子机制。方法:采用胰酶联合Ⅱ型胶原酶消化法体外培养大鼠髓核细胞,并绘制细胞生长曲线,采用CCK-8法筛选合适的青藤碱药物浓度。将髓核细胞分为对照组、青藤碱组、白细胞介素1β组、青藤碱+白细胞介素1β组、锌原卟啉(血红素氧合酶1抑制剂)组、锌原卟啉+青藤碱组、锌原卟啉+白细胞介素1β组、青藤碱+锌原卟啉+白细胞介素1β组。分别检测各组髓核细胞增殖活性、活性氧含量、凋亡率及血红素氧合酶1的表达情况。结果与结论:①体外培养的大鼠髓核细胞呈现多角形、三角形、短楔形等形态,其呈现“S”型曲线生长,接种第1-3天生长缓慢,第4-6天生长迅速,第七八天生长速度缓慢,进入“平台期”,细胞数量不再增加;②当青藤碱的浓度≤80μmol/L时,髓核细胞的增殖活性不会受到显著影响(P>0.05);③白细胞介素1β可以显著降低髓核细胞的增殖活性,增加活性氧含量,导致细胞凋亡(P<0.01);④当采用青藤碱干预后,不仅可以促进血红素氧合酶1的表达(P<0.05),而且可以抑制白细胞介素1β诱导的髓核细胞增殖活性降低、活性氧含量和凋亡率增加(P<0.05),其作用可被锌原卟啉逆转(P<0.01)。

青藤碱调节CXCR4-STAT3轴对卵巢癌A2780细胞增殖、迁移和血管生成拟态的影响

目的:探讨青藤碱(Sinomenine)对卵巢癌细胞增殖、迁移和血管生成拟态的影响及作用机制。方法:使用不同浓度(0、0.25、0.50、1.0、2.0、4.0、8.0 mmol/L)的青藤碱分别处理A2780细胞24、48 h, CCK-8法检测细胞存活率。将A2780细胞随机分为对照(Control)组、CXCR4激活剂基质细胞衍生因子-1(SDF-1)(SDF-1,100 ng/mL)组、CXCR4抑制剂普乐沙福(Plerixafor, 500 ng/mL)组、青藤碱(Sinomenine, 1.0 mmol/L)组、Sinomenine+SDF-1(1.0 mmol/L Sinomenine+100 ng/mL SDF-1)组,分别检测A2780细胞增殖、迁移与侵袭,体外血管生成拟态形成实验检测青藤碱对血管生成拟态的影响,Western blot法检测血管内皮生长因子(VEGF)、上皮细胞激酶(EphA2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、MMP-2、CXC趋化因子受体4(CXCR4)、信号转导与转录激活因子3(STAT3)、磷酸化STAT3(p-STAT3)蛋白表达。结果:青藤碱可有效抑制A2780细胞增殖,且呈浓度依赖性;青藤碱可显著抑制A2780细胞迁移、侵袭及血管生成拟态形成,并下调血管生成拟态标志蛋白VEGF、EphA2、MMP-9、MMP-2表达,抑制CXCR4、p-STAT3表达(P<0.05),青藤碱的这一抑制作用可被CXCR4激活剂减弱。结论:青藤碱可能通过抑制CXCR4-STAT3轴,抑制卵巢癌细胞增殖、迁移、侵袭及血管生成拟态形成。

J型针刀联合青藤碱治疗骶髂关节炎的临床疗效观察

目的探究J型针刀联合青藤碱治疗骶髂关节炎患者的临床疗效。方法将医院2022年5月至2023年12月收治的40例骶髂关节炎患者按照随机数字表法分为观察组和对照组,各20例。观察组采用J型针刀联合青藤碱治疗,对照组给予双氯芬酸钠片治疗,两组均连续治疗16 d。比较两组临床疗效、视觉模拟评分法(VAS)、Oswestry功能障碍指数(ODI)、巴氏强直性脊柱炎功能指数(BASFI)评分、症状积分及不良反应发生情况。结果观察组治疗总有效率高于对照组(P<0.05);治疗后两组VAS、ODI、BASFI评分均低于治疗前(P<0.05),但组间比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗后两组症状积分均低于治疗前(P<0.05),且观察组关节活动障碍度、晨僵及症状总积分均低于对照组(P<0.05);两组均未见严重不良反应。结论J型针刀联合青藤碱和口服双氯芬酸钠片均对骶髂关节炎治疗有效,J型针刀联合青藤碱治疗效果更佳,在改善关节活动度、提高患者生活质量方面更具有优势。

青藤碱及其制剂治疗类风湿性关节炎的研究进展

类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种自身免疫障碍性疾病,发病率高,好发于中年女性,严重影响患者的运动能力。目前,关乎其发病机制尚未完全明确,现有的治疗方案也仅停留在延缓病情、改善关节功能为目标。青藤碱是青风藤中的一种有效成分,具有抗炎、镇痛、免疫抑制、抗肿瘤等多种药理活性,其在治疗类风湿性关节炎方面颇有成效,主要通过缓解炎症、抑制滑膜增生、减轻骨破坏等途径,且联合用药的效果更佳。目前,市面上也出现了许多有关青藤碱的复方制剂,比如:除痹活络方、秦息痛片等,均表现出良好的抗RA作用,且不良反应较小。因此,基于青藤碱抗RA的相关研究,对青藤碱治疗类风湿性关节炎的作用机制及其复方制剂研究进行综述,以期为其以后的开发利用提供参考依据。

青藤碱通过调控SPHK2/MCL1通路诱导线粒体依赖性细胞凋亡改善急性淋巴细胞白血病

目的探讨青藤碱(SIN)通过调控鞘氨醇激酶2(SPHK2)/髓细胞白血病1(MCL1)通路调节线粒体依赖性细胞凋亡对急性淋巴细胞白血病(ALL)进展的影响。方法使用不同浓度SIN处理ALL细胞系(Jurkat)。CCK8检测细胞活力,流式细胞术检测凋亡,DCFH-DA探针检测细胞内活性氧(ROS)水平,JC-1试剂盒检测线粒体膜电位(MMP)。网络药理学分析SIN治疗ALL的靶点。构建SPHK2过表达模型,验证SIN在ALL中作用的机制。建立异种移植瘤模型,评估SIN对Jurkat细胞在体内生长的影响。结果与对照组相比,SIN显著抑制ALL细胞增殖,并诱导细胞凋亡(P<0.05)。不同浓度SIN处理Jurkat细胞后,细胞内ROS的水平上调且MMP下调(P<0.05)。网络药理学分析显示SPHK2是SIN治疗ALL的核心靶点,实验验证结果表明SIN处理抑制SPHK2和MCL1的表达(P<0.05)。过表达SPHK2减弱SIN在ALL中的抑癌作用(P<0.05)。体内研究显示,SIN治疗抑制肿瘤的生长,并上调cleaved Caspase-3的表达(P<0.05)。结论SIN通过抑制SPHK2/MCL1通路诱导线粒体依赖性细胞凋亡从而抑制ALL进展。

青藤碱调节GSK3β/Nrf2/HO-1及NF-κB信号通路对帕金森病小鼠的神经保护作用

目的基于GSK3β/Nrf2/HO-1及NF-κB信号通路探讨青藤碱(Sinomenine,SIN)对帕金森病(Parkinson’s disease,PD)小鼠的干预作用及机制。方法将C57BL/6小鼠,随机分为6组:正常组、模型组、阳性药组(左旋多巴,75 mg·kg^(-1))及青藤碱低、中、高剂量组(20、40、80 mg·kg^(-1)),每组8只。腹腔注射20 mg·kg^(-1)1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP),每天1次,共造模5 d。在注射MPTP后1 h进行灌胃给药,每天1次,共12 d。在给药第11天对小鼠进行爬杆实验,第12天进行转棒实验,测试小鼠行为学变化。采用ELISA法检测血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6含量;RT-qPCR法检测脑组织中TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA表达水平;Western Blot法检测脑组织中TH、Nrf2、HO-1、p-GSK3β、GSK3β、p-IκB、IκB、p-NF-κB、NF-κB蛋白表达水平。结果与正常组比较,模型组小鼠的自动转身潜伏期(T-turn)明显延长(P<0.05),掉落次数显著增多(P<0.001);脑组织中TH蛋白表达水平显著降低(P<0.01),IL-1β、TNF-α、IL-6 mRNA表达水平显著升高(P<0.001);血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平明显升高(P<0.05,P<0.01);脑组织中p-GSK3β/GSK3β、Nrf2、HO-1蛋白表达水平显著降低(P<0.05,P<0.001),p-IκB/IκB、p-NF-κB/NF-κB蛋白表达比值显著升高(P<0.001)。与模型组比较,青藤碱中、高剂量组小鼠的T-turn明显缩短(P<0.05,P<0.001),掉落潜伏期明显延长(P<0.05,P<0.01),掉落次数显著减少(P<0.001),脑组织中TH蛋白表达水平显著升高(P<0.01,P<0.001),血清TNF-α水平明显降低(P<0.05);各给药组小鼠脑组织中IL-1β、TNF-α、IL-6 mRNA表达水平均显著降低(P<0.001),血清IL-1β、IL-6水平显著降低(P<0.01,P<0.001),脑组织中p-GSK3β/GSK3β、Nrf2、HO-1蛋白表达水平显著升高(P<0.05,P<0.01,P<0.001),p-IκB/IκB、p-NF-κB/NF-κB蛋白表达比值显著降低(P<0.001)。结论青藤碱可通过调节帕金森病小鼠脑内GSK3β/Nrf2/HO-1和NF-κB通路,增强抗氧化应激能力和抑制神经炎症,从而发挥神经保护作用。

青藤碱治疗痛风性关节炎的药理研究进展

青藤碱是从药材青风藤的根和茎分离出的生物碱类有效活性成分,青风藤和青藤碱均广泛用于痛风性关节炎等炎性关节炎的治疗。本文主要阐述近年来青藤碱发挥抗炎镇痛药理作用的机制,青藤碱通过调控环氧合酶2(COX-2)的表达抑制炎症因子的分泌、调控核苷酸结合寡聚结构域样受体蛋白3(NALP3)的表达抑制促炎因子的分泌、调控Toll样受体(TLR)/抑制核转录因子(NF-κB)信号通路抑制炎症反应以及调控丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路抑制炎症因子的表达和抑制炎症反应等多种途径发挥抗炎药理作用,通过调控钙-钙调蛋白依赖性蛋白激酶2α(CaMK2α)-酸敏感离子通道3(ASIC3)-NLRP3信号通路、p38 MAPK信号通路及非受体酪氨酸激酶2(JAK2)/信号转导子和转录激活子3(STAT3)信号通路发挥镇痛药理作用。本文就近年青藤碱治疗痛风性关节炎的药理研究进行综述,以期为青藤碱治疗痛风性关节炎的作用机制研究和临床应用提供参考。

青藤碱在JNK/c-Jun信号通路中对LPS诱导的肺上皮细胞凋亡和自噬的影响

目的:探究青藤碱(SIN)通过JNK/c-Jun信号通路对LPS诱导的肺上皮细胞凋亡和自噬的影响。方法:培养肺上皮细胞MLE-12,通过CCK-8检测SIN的毒性。流式细胞术检测细胞凋亡,免疫荧光检测自噬体形成数量,Western blot检测细胞中凋亡、自噬以及JNK/c-Jun信号通路相关蛋白表达水平。结果:LPS造模后,细胞凋亡率和自噬体数量升高,Cleaved caspase-3、Bax和Beclin-1蛋白水平及LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、p-JNK/JNK和p-c-Jun/c-Jun均升高(P<0.05);Bcl-2、P62蛋白水平均降低(P<0.05)。SIN处理可明显改善LPS对细胞凋亡和自噬的影响,以及对JNK/c-Jun信号通路的调控(P<0.05)。细胞自噬抑制剂3-MA或JNK激动剂ANISO处理均可部分逆转SIN对LPS诱导的肺上皮细胞的保护作用(P<0.05)。结论:SIN可通过调控JNK/c-Jun信号通路相关蛋白提高细胞自噬,保护被LPS损伤的肺上皮细胞。

D-最优混料设计制备青藤碱微乳及其药效学初步考察

目的优化青藤碱微乳的制备工艺,进行初步药效学评价。方法建立青藤碱的HPLC含量测定方法,通过溶解度实验及伪三元相图等初步筛选青藤碱微乳处方,利用D-最优混料实验设计法以粒径和载药量为考察指标进行青藤碱微乳处方优化,并对其粒径、载药量及稳定性等进行评价;采用体外透皮实验考察经皮吸收情况,进行耳肿胀实验评价抗炎药效。结果以甲醇∶0.1%磷酸(40∶60)为流动相,检测波长为262 nm测定青藤碱含量,方法适用性好;获得微乳最佳处方为蓖麻油占比7.0%,PEG40氢化蓖麻油/无水乙醇为混合乳化剂占比69.0%,最佳Km值为3∶1,蒸馏水占比24.0%;制得微乳平均粒径18.76 nm,PDI为0.072,载药量5.225%;1.0%青藤碱微乳12 h累积渗透量为1.2234μg·cm^(-2),稳态渗透速率为0.0649μg·cm^(-2)·h^(-1),均优于青藤碱溶液;高浓度的青藤碱微乳对小鼠耳肿胀抑制率为65.07%,与阳性药地塞米松效果相近。结论制得青藤碱微乳工艺稳定,载药量高,透皮吸收及抗炎效果较好,为青藤碱经皮给药制剂开发提供参考。

青藤碱联合索拉非尼对肝癌 HepG2细胞增殖、迁移及凋亡的影响

目的探究青藤碱与索拉非尼联合应用对肝癌HepG2细胞生物学功能的协同抑制作用,并对其潜在的相关分子机制进行初步探讨。方法通过MTT、平板克隆、细胞划痕、Transwell及Hoechst 33342/PI双染实验分别评价2种药物单独及联合应用后对HepG2细胞增殖、迁移及凋亡能力的影响;通过ROS试剂盒分别检测HepG2细胞经各组药物处理后ROS表达的变化,利用分子对接技术预测青藤碱与索拉非尼抗肝癌主要作用靶点结合的潜力,通过Western blot实验检测联合给药组VEGFR2、STAT3、p-STAT3蛋白表达水平的变化以进行验证,并检测下游MMP2、MMP9、BCL-2、BAX、Cleaved-Caspase3的蛋白表达水平。结果青藤碱、索拉非尼均可显著抑制HepG2细胞存活率(P<0.05),并且呈现时间及剂量依赖性;MTT、平板克隆、细胞划痕、Transwell及Hoechst 33342/PI双染实验结果表明两药联合应用可以对HepG2细胞分别产生协同抑制增殖、迁移及促进细胞凋亡的作用;联合用药组较单药给药组显著增强ROS的表达;分子对接及Western blot结果表明联合用药组较单药组可以显著抑制VEGFR2、p-STAT3的表达水平,并降低迁移关键蛋白MMP2、MMP9的表达水平、上调BAX/BCL-2比值及Cleaved-Caspase 3的表达(P<0.05)。结论青藤碱与索拉非尼联合使用在体外能够协同抑制肝癌HepG2细胞增殖、迁移并诱导细胞凋亡,其机制可能与下调VEGFR2/STAT3通路及通路下游相关分子有关。

青藤碱作用于糖酵解关键酶对结直肠癌细胞凋亡的影响

目的探讨青藤碱促进结直肠癌细胞凋亡与糖酵解的相关性以及机制。方法根据不同处理方式,分为对照组、青藤碱处理组、过表达对照组、HXK2过表达组、敲低对照组、HXK2敲低组、对照细胞组、HXK2敲除细胞组等。通过流式细胞仪和酶标仪分别检测结直肠癌细胞的凋亡率和糖酵解水平(2-脱氧-D-葡萄糖摄取水平和乳酸产生水平)。经实时荧光定量PCR和免疫印迹分别检测HXK2的mRNA和蛋白表达水平。经Pearson相关系数分析青藤碱处理后细胞凋亡与糖酵解的相关性。结果与对照组相比,青藤碱处理组结直肠癌细胞凋亡水平上升([14.06±1.09)vs(62.29±4.07),t=19.81,P<0.05]、2-DG摄取水平([544.46±32.06)vs(46.34±2.47),t=7.71,P<0.05]和乳酸产生水平均下降([14.29±1.34)vs(1.20±0.04),t=8.60,P<0.05]。经Pearson相关系数检测发现,青藤碱所致的细胞凋亡水平与2-DG摄取水平和乳酸产生水平具有一定相关性。过表达HXK2能够回补25μmol·L^(-1)青藤碱的抑制乳酸产生水平效应([1.66±0.47)vs(15.44±1.14),t=14.27,P<0.05],但当青藤碱过量后HXK2过表达组的乳酸产生水平下降([13.66±0.39)vs(1.41±0.11),t=8.22,P<0.05]。相比于过表达对照组,过表达HXK2组结直肠癌细胞的凋亡水平下降([15.19±1.03)vs(8.44±0.09),t=7.68,P<0.05]。相比于敲低对照组,敲低HXK2组结直肠癌细胞的凋亡水平上升([14.88±1.10)vs(65.83±2.20),t=6.36,P<0.05]。构建HXK2敲除HT29细胞系后,青藤碱不影响HXK2敲除HT29细胞系的凋亡水平;在HXK2敲除细胞系中过表达HXK2野生型时,青藤碱能够提高细胞凋亡水平([10.71±1.21)vs(67.89±4.31),t=11.29,P<0.05]。结论青藤碱通过抑制HXK2的功能以减少糖酵解代谢,促进结直肠癌细胞的凋亡。

青藤碱对小鼠非酒精性脂肪性肝炎的改善作用及机制

目的 探究青藤碱(Sin)对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的改善作用及潜在机制。方法 以雄性C57BL/6J小鼠为对象,将其随机分为标准饲料(SCD)组、高脂饲料(HFD)组、Sin低剂量组(Sin-L组,50 mg/kg)、Sin高剂量组(Sin-H组,100 mg/kg),每组6只。SCD组小鼠以SCD正常喂养,其余组小鼠均以HFD连续饲养24周以复制NASH模型;于17周起,各药物组小鼠分别灌胃相应药液,每天1次,连续8周。末次给药后,称定各组小鼠体重、肝脏质量并计算肝脏指数;检测其肝组织中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)含量和血清中天冬氨酸转移酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-18含量;观察其肝细胞脂肪变性、肝纤维化,并定位肝脏脂滴;检测其IL-18、IL-1β mRNA和炎症相关蛋白[IL-1β、剪切的IL-1β(cleaved-IL-1β)]、纤维化相关蛋白[Ⅰ型胶原蛋白(Col-Ⅰ)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、结缔组织生长因子(CTGF)]、通路相关蛋白[腺苷一磷酸活化的蛋白激酶(AMPK)、磷酸化AMPK(p-AMPK)、Yes相关蛋白(YAP)、磷酸化YAP(p-YAP)]的表达情况。以人肝癌细胞HepG2为对象,将其分为对照组、油酸(OA)组、Sin 50μmol/L组、Sin 100μmol/L组、OA+Sin 50μmol/L组和OA+Sin 100μmol/L组,处理24 h后,观察其脂滴蓄积情况,并检测其通路相关蛋白的表达情况。结果 与HFD组比较,Sin各剂量组小鼠的肝细胞脂肪变性、纤维化病变和脂滴蓄积均有所缓解;其体重,肝脏质量,肝脏指数(Sin-L组除外),血清AST、ALT、IL-1β、IL-18含量,肝组织中TG、TC含量,IL-1β、IL-18 mRNA的表达水平,以及cleaved-IL-1β蛋白和纤维化相关蛋白的表达水平均显著降低(P<0.01);肝组织中IL-1β蛋白的表达水平和AMPK、YAP蛋白的磷酸化水平均显著升高(P<0.01)。与OA组比较,OA+Sin各浓度组细胞的脂滴蓄积均明显减少,AMPK、YAP蛋白的磷酸化水平均显著升高(P<0.05)。结论 Sin可改善NASH小鼠肝组织的炎症反应、脂质沉积和纤维化,其机制可能与激活AMPK信号通路、促进YAP蛋白磷酸化相关。

超声引导下针刀神经触激术联合青藤碱注射液介入治疗梨状肌综合征的效果

目的 探讨超声引导下针刀神经触激术联合青藤碱注射液介入治疗对梨状肌综合征(PS)患者的效果。方法 将符合标准的30例PS患者随机分为对照组和联合组,对照组接受塞来昔布胶囊、甲钴胺片联合祖师麻片治疗,联合组接受超声引导下针刀神经触激术联合青藤碱注射液介入治疗。比较两组疼痛程度、腰背肌功能、疼痛相关神经因子水平。结果 治疗后5、10 d,两组视觉模拟量表评分均下降,且联合组低于对照组(P<0.05);治疗后5、10 d,两组日本骨科协会评估治疗分数各维度评分均上升,且联合组高于对照组(P<0.05);两组5-羟色胺和前列腺素E2表达均降低,且联合组低于对照组(P<0.05)。结论 应用超声引导下针刀神经触激术联合青藤碱注射液介入治疗可降低PS患者疼痛,减少疼痛相关因子的释放,提高腰背肌功能。

小针刀疗法配合青藤碱注射液治疗肩周炎的临床研究

本研究评估肩周炎患者实施小针刀疗法与青藤碱注射液联合治疗的应用效果。方法 本研究项目于2022年2月起至2023年2月止,在我院对肩周炎病患进行了一项研究,共收录病例74例。通过随机数字表的方法,将患者分为两个治疗小组,每组各37例,分别定名为实验组和对照组。对照组接受了小针刀的对照治疗,而实验组则采用了小针刀治疗配合青藤碱注射液的联合疗法。本研究主要比较了两组在治疗前后肩关节活动范围以及相关的评估得分。结果 在治疗前,两组患者的肩关节活动度对比,P值大于0.05,表明两组间并无显著性差异。治疗后,实验组患者在肩关节前屈、外展及外旋的活动度上均高于对照组,相关统计学检验的P值小于0.05,这一结果明确表明了两组之间存在显著差异。在治疗前,两组患者的相关评分对比,P值大于0.05,说明两组在治疗前的评分上差异并不显著。而治疗后,实验组患者的肩关节功能评分有所提高,疼痛评分则低于对照组,这些差异的统计学意义也通过P值小于0.05得到了验证,再次证实了两组之间的显著性差异。结论 肩周炎患者实施小针刀疗法与青藤碱注射液联合治疗效果显著。

青藤碱对骨关节炎软骨细胞增殖和炎症的影响

目的:明确青藤碱对OA软骨细胞增殖和炎症的影响并探究其作用机制。方法:采用10ng/mL白介素1β(IL-1β)诱导软骨细胞建立骨关节炎软骨细胞损伤模型,加入不同浓度的青藤碱处理细胞;采用CCK-8检测细胞增殖能力;采用ELISA检测IL-6、TNF-α的水平;采用Western blot检测IL-6、TNF-α、Wnt和β-catenin蛋白的表达量;采用qRT-PCR检测IL-6、TNF-α、Wnt和β-catenin表达量。结果:不同浓度青藤碱均可逆转IL-1β诱导导致的软骨细胞增殖活性下降(P<0.05),但组间比较无明显差异(P>0.05);不同浓度青藤碱还可下调IL-6、TNF-α炎症因子水平,低、高浓度青藤碱下调更显著(P<0.05),但低、高浓度组间比较无明显差异(P>0.05);低浓度青藤碱可降低软骨细胞中IL-6、TNF-α的蛋白和基因表达水平,还可下调Wnt和β-catenin蛋白和基因表达,差异有统计学意义(P<0.05);但中、高浓度青藤碱无明显降低IL-6、TNF-α、Wnt和β-catenin的蛋白和基因表达,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:低浓度青藤碱可促进软骨细胞增殖并抑制OA软骨细胞的炎症,部分可能与调控Wnt/β-catenin信号通路有关。

青藤碱对骨关节炎的治疗作用及机制探讨

目的探讨青藤碱(SIN)对兔骨关节炎(OA)模型的治疗作用及机制。方法采用随机数字表法将15只体重在2.5~3.0 kg的普通级健康成年新西兰兔分为对照组、骨关节模型组(OA组)、青藤碱治疗组(SIN)组,每组5只。对照组应用生理盐水关节腔注射,OA组、SIN组分别用4%木瓜蛋白酶注射液和0.03 mol/L的L-半胱氨酸(2∶1)混合溶液以0.1 ml/kg关节腔内注射,分别于第1、4、7天共注射3次。造模2周后兔膝关节出现肿胀,活动障碍,造模成功。OA造模成功后SIN组给予盐酸SIN缓释片30 mg/(kg·d)灌胃,连续用药15 d,OA组、对照组不予特殊处理。4周后抽取兔血分别检测血清白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α),基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、MMP-13、Ⅱ型胶原(Collagen-Ⅱ)、软骨低聚物基质蛋白(COMP)水平,并行关节病理解剖学观察。取各组兔软骨组织行免疫组织化学检测软骨组织Collagen-Ⅱ、聚蛋白多糖及衰老相关基因p21、p53蛋白表达水平。结果4周后OA组血清中IL-1β、TNF-α、MMP-1、MMP-13、Collagen-Ⅱ、COMP水平高于对照组(P<0.05);SIN组IL-1β、TNF-α、MMP-1、MMP-13、Collagen-Ⅱ、COMP水平低于OA组(P<0.05)。大体标本观察显示:对照组关节正常,OA组关节腔有中等量关节积液,滑膜充血水肿,关节软骨面毛糙,而SIN组关节腔积液少,滑膜充血改善。镜下显示:与对照组比较,OA组兔膝关节软骨关节面不光滑,软骨明显变薄,滑膜大量炎症细胞浸润,滑膜增生、水肿明显;SIN组滑膜炎症细胞浸润及水肿、软骨损伤均较OA组减轻。免疫组织化学检测显示:OA组p21、p53表达水平高于对照组(P<0.05),SIN组p21、p53表达低于OA组(P<0.05)。聚蛋白多糖表达结果显示:OA组较对照组下降,SIN组较OA组表达增加。各组Ⅱ型胶原蛋白表达比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论SIN对OA有治疗作用,与抑制炎症因子及MMP分泌相关,并抑制软骨细胞衰老,为SIN用于OA治疗提供理论依据。

青藤碱配伍芍药苷协同增效抗胶原诱导性关节炎作用机制研究

目的探讨青藤碱配伍芍药苷抗胶原诱导性关节炎(collagen induced arthritis,CIA)药效作用及其机制。方法将60只雌性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、甲氨蝶呤组(1 mg/kg)、青藤碱组(50 mg/kg)、芍药苷组(120 mg/kg)和青藤碱(50 mg/kg)配伍芍药苷(120 mg/kg)组(青芍配伍组),每组10只。除正常组外,其余大鼠尾根部皮内多点注射牛Ⅱ型胶原/非完全弗氏佐剂乳剂建立CIA模型。正常组和模型组大鼠灌胃等体积蒸馏水,用药组灌胃相应药物,连续30 d。造模后,每3天检测大鼠后足肿胀容积、关节炎指数评分及体质量;治疗结束后,CT检测大鼠关节骨破坏情况;HE染色观察踝关节病理变化;ELISA法检测血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)含量;Western blot法检测关节骨组织基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)和基质金属蛋白酶抑制因子-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)的表达水平。结果与正常组相比,模型组大鼠足肿胀容积、关节炎指数评分明显增加(P<0.01),体质量降低(P<0.01),足趾各关节骨侵蚀严重,关节腔隙狭窄甚至消失,血清TNF-α、IL-1β及关节骨组织MMP-2、MMP-9、TIMP-1蛋白表达均增高(P<0.01)。与模型组比较,甲氨蝶呤组、青藤碱组、芍药苷组和青芍配伍组大鼠足肿胀容积及关节炎指数评分均降低(P<0.01),体质量增加(P<0.01),骨破坏程度均明显减轻,血清TNF-α、IL-1β水平及关节骨组织MMP-2、MMP-9、TIMP-1蛋白表达均降低(P<0.01)。与青藤碱组或芍药苷组比较,青芍配伍组大鼠足肿胀容积及关节炎指数评分降低(P<0.01),体质量增加(P<0.01),骨破坏程度减轻,TNF-α、IL-1β水平及关节骨组织MMP-2、MMP-9、TIMP-1蛋白表达降低(P<0.01)。结论青藤碱配伍芍药苷对CIA具有较强的治疗作用,在一定程度上比单用青藤碱或芍药苷的抗关节炎效果明显。其机制可能与抑制TNF-α、IL-1β表达,降低关节骨组织MMP-2、MMP-9表达,同时促进TIMP-1表达有关。

青藤碱抗肿瘤作用机制研究现状

青藤碱是中药青风藤的主要活性成分。近年来,其抗肿瘤作用受到日益关注。通过综述近年来青藤碱抗肿瘤相关实验研究成果,总结青藤碱抗肿瘤作用的机制,如阻滞肿瘤细胞周期、干预细胞程序性死亡、抗肿瘤细胞侵袭及迁移、对肿瘤相关调节性非编码RNA的作用、协同增敏作用、调节肿瘤微环境等。为进一步青藤碱药理作用研究及临床应用提供理论依据。

青藤碱对阿霉素诱导的局灶节段肾小球硬化大鼠足细胞损伤的干预作用及机制分析

目的探讨青藤碱对阿霉素诱导的局灶节段肾小球硬化大鼠的干预作用及其机制。方法采用单侧肾切除术加两次尾静脉注射阿霉素建立局灶节段肾小球硬化模型。将大鼠随机分为正常组,模型组,青藤碱低、中、高剂量组和FK506组,干预4周。检测24 h尿蛋白、血生化、肾组织病理,免疫组化检测肾组织Podocin和TRPC6,Western blot检测Nephrin、Podocin和TRPC6表达,电镜观察肾小球微观结构。结果与正常组比较,模型组大鼠24 h尿蛋白量明显升高(P<0.05),血白蛋白明显减少(P<0.05)。经青藤碱低、中、高剂量干预后,24 h尿蛋白量呈剂量依赖性降低,血白蛋白呈剂量依赖性升高,FK506组24 h尿蛋白量亦显著下降,血白蛋白显著升高(P<0.05)。免疫组化和Western blot提示模型组肾组织Podocin、Nephrin表达显著下降,TRPC6表达显著升高,经青藤碱低、中、高剂量干预后,Podocin、Nephrin呈剂量依赖性升高,TRPC6呈剂量依赖性下降,FK506组Podocin、Nephrin表达亦显著升高,TRPC6表达下降(P<0.05)。模型组电镜下肾小球足突广泛融合,经青藤碱或FK506干预后,足细胞融合减轻。结论青藤碱可能通过下调TRPC6表达对足细胞损伤进行修复,进而减轻肾组织病理改变。

国产青藤属3种植物的考订

对国产青藤属3种植物作了补充和修订．报道短蕊青藤在广西和广东的新分布，大花青藤在四川的新分布；将小果青藤和柔毛青藤归入大花青藤，将绣毛青藤归入红花青藤。