人工栽培青阳参化学成分及抗抑郁活性研究

对人工栽培青阳参药材进行了化学成分研究,分离得到5个化合物（1-5）,其中1-2为青阳参苷甲和青阳参苷乙,3-5为新化合物,分别命名为青阳参苷A,青阳参苷B和青阳参苷C.栽培品种来源的青阳参总苷有显著抗抑郁作用.

UHPLC-QTOF-MS联合网络药理学及分子对接探讨青阳参总苷治疗社会挫败的物质基础及作用机制

目的运用UHPLC-QTOF-MS和网络药理学-分子对接技术,探讨青阳参总苷治疗社会挫败的物质基础和潜在的作用机制。方法首先,采用UHPLC-QTOF-MS鉴定青阳参总苷化学成分。其次,运用Pubchem下载青阳参总苷化学成分2D结构后,利用Swiss Target Prediction数据库预测其靶点;从TTD、GeneCards、CTD数据库获取社会挫败相关治疗靶点;通过Venny平台获取两者的交集靶点;采用Cytoscape构建“药物-活性成分-靶点-疾病”网络;运用String数据库构建蛋白互作(PPI)网络后,结合Cytoscape分析得交集靶点排名;使用DAVID数据库对交集靶点进行基因本体(GO)功能注释和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。利用AutoDock vina软件进行分子对接验证。最后,构建社会挫败小鼠模型,采用ELISA法检测小鼠血清5-羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)含量,HE染色观察小鼠海马组织神经细胞病理变化。结果从青阳参总苷共鉴定152个化学成分。预测及筛选得到丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(AKT1)、单胺氧化酶A(MAOA)、多巴胺受体D3(DRD3)等26个青阳参总苷治疗社会挫败潜在作用靶点,对应85个青阳参总苷活性成分;富集分析得到45个GO注释条目(P<0.01)、11条KEGG信号通路。分子对接发现青阳参苷元、白桦脂酸、绿原酸等20个活性成分与AKT1、DRD4、DRD2、DRD3等10个核心靶蛋白均可自发结合。动物实验表明,与正常对照组相比,模型对照组小鼠血清中5-HT、DA含量均明显降低(P<0.05);小鼠海马组织神经细胞排列疏松,有明显的细胞丢失。与模型对照组相比,青阳参总苷各剂量组小鼠血清中5-HT、DA含量均显著升高(P<0.05,P<0.01);青阳参总苷中、高剂量组小鼠海马组织神经细胞间隙减小,且排列较为整齐。结论青阳参总苷对社会挫败具有治疗作用。主要药效物质为青阳参苷元、白桦脂酸、绿原酸等,可通过多靶点、多通路发挥抗社会挫败作用。

青阳参皂苷超声提取工艺的研究

目的确定乙醇溶液为溶剂对青阳参皂苷元的提取参数。方法采用超声处理法并对超声功率、时间、醇浓度、料液比、提取次数和溶液酸度等因素进行优化。结果提取参数确定为:超声波功率400 W,时间40 min,乙醇浓度50%,料液比1∶10,提取次数1,酸度0.005 mol.L-1HCl。结论该方法可用于青阳参皂苷的提取。

高效液相色谱法测定青阳参片中青阳参皂苷元的含量

目的:应用高效液相色谱法测定青阳参片中青阳参皂苷元的含量。方法:采用 Diamonsil C_(18)色谱柱(4.6mm×150 mm,5μm),乙腈-0.4%磷酸溶液(24:76)为流动相;流速1 mL·min^(-1);检测波长为259 nm。结果:青阳参皂苷元在0.22～4.40μg范围内呈现出良好的线性关系,r=0.9999(n=7)。精密度试验 RSD 为0.18%。稳定性试验说明本品在9 h 内测定。重复性试验 RSD 为1.2%,同收率试验平均回收率为97.3%(n=9)。结论:方法学研究说明,本文方法达到质量标准制订的要求,可作为质量控制的方法。

青阳参总皂苷大孔树脂分离纯化工艺研究

目的探索建立青阳参中总皂苷大孔树指分离纯化工艺。方法以青阳参为原料,研究大孔树脂分离纯青阳参总皂苷工艺中树脂型号、树脂吸附及洗脱参数。结果树脂选型为DM130,其对青阳参皀苷静态吸附容量为11.2 mg.ml-1;树脂径高比为1∶6;150 ml.h-1恒速洗脱;分别用1倍柱体积水和30%乙醇洗脱去杂;3倍柱体积95%乙醇富集洗脱。所得提取物中青阳参总皂苷含量达71%,产品得率为2.44%。结论该方法可方便有效地分离纯化青阳参中皂苷类化合物。

民族药材青阳参对照品的制备及质量标准提高研究

目的:建立青阳参苷甲对照品的制备方法和含量测定,为质量标准的提高提供参考。方法:采用植物化学方法制备青阳参苷甲作为对照品,采用质谱、核磁共振等光谱法鉴定对照品的结构,采用面积归一化法测定了对照品含量,并建立高效液相色谱法测定青阳参及同属药材白前、白薇和徐长卿中青阳参苷甲的含量。采用Waters X Select C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-水溶液(43∶57),流速1.0 m L·min^(-1);检测波长223 nm;柱温30℃;进样量10μL。结果:经过鉴定分离的青阳参苷甲纯度大于98%,可作为质量研究用对照品。青阳参苷甲质量浓度在5.62~224.8μg·mL^(-1)(r=0.9998,n=6)范围内线性关系良好,方法的平均回收率(n=6)为97.7%(RSD=1.4%)。白前、白薇和徐长卿中未检出青阳参苷甲,青阳参中青阳参苷甲含量在0.015%~0.070%。结论:青阳参苷甲是青阳参的特征成分,可作为该药材的定量指标。本文所建立的高效液相色谱法可作为青阳参药材质量标准中的含量测定方法。

HPLC法测定民族药材青阳参中青阳参苷乙的含量

目的：建立反相高效液相法测定民族药材青阳参中青阳参苷乙的含量。方法：采用YMC-Pack ODS-A C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,流动相为乙腈-水（53∶47）,检测波长223 nm,流速为1.0 m L·min-1,柱温为30℃。结果：青阳参苷乙在20.16～1008μg·m L-1范围内线性关系良好,该方法的精密度、稳定性、重复性、加样回收率试验RSD均小于2%,平均加样回收率为97.14%。结论：该方法准确、简便、灵敏度高,可作为青阳参药材的含量测定方法。

青阳参乙酸乙酯萃取部位的化学成分

从青阳参(Cynanchum otophyllum Schneid.)醇提取物的乙酸乙酯萃取部位分离出14个化合物,通过波谱方法和理化性质分别鉴定为青阳参苷甲(1),青阳参苷乙(2),2,5-二羟基苯乙酮(3),2,5-二羟基苯甲酸甲酯(4),香草醛(5),阿江榄仁酸(6),山橘脂酸(7),告达亭3-O-β-D-吡喃加拿大麻糖基-(1→4)-β-D-吡喃夹竹桃糖基-(1→4)-β-D-吡喃加拿大麻糖基-(1→4)-β-D-吡喃加拿大麻糖苷(8),本波苷元(9),告达亭3-O-β-D-葡萄吡喃糖基-(1→4)-β-D-夹竹桃吡喃糖基-(1→4)-β-D-加拿大麻吡喃糖基-(1→4)-β-D-加拿大麻吡喃糖苷(10),青阳参苷元3-O-β-D-夹竹桃吡喃糖基-(1→4)-β-D-加拿大麻吡喃糖基-(1→4)-β-D-洋地黄毒吡喃糖苷(11),凯德苷元3-O-β-D-加拿大麻吡喃糖苷(12),青阳参苷元3-O-β-D-加拿大麻吡喃糖基-(1→4)-β-D-洋地黄毒吡喃糖苷(13),凯德苷元3-O-β-D-夹竹桃吡喃糖基-(1→4)-β-D-加拿大麻吡喃糖基-(1→4)-β-D-加拿大麻吡喃糖苷(14)。其中化合物6和7为首次从鹅绒藤属中分离得到,化合物3～5、8～14为首次从该植物中分离得到。

光照和温度对青阳参种子萌发的影响

目的：初步了解青阳参（Cynanchum otophyllum Schneid．）种子的形态以及温度和光照对其种子萌发的影响。方法：采集野生种子，观察其种子外观形态，检测其种子大小、千粒重、萌发指数及萌发率，考察不同温度、光照对其种子萌发率的影响。结果：青阳参种子不是需光种子，无光休眠现象；种子萌发的适宜温度范围为14～36℃，最适温度为25℃，3d开始萌发，5～10d萌发完全，萌发率可达97．5％，温度的升高或降低都会导致青阳参种子萌发率降低。结论：光照和黑暗对青阳参种子萌发的影响无显著差异，适宜的温度条件是青阳参种子萌发能否成功的关键，为青阳参的生长发育和栽培生产提供一定的科学依据。

青阳参对点燃癫痫大鼠脑内c-fos、c-jun基因表达的影响

目的 :探讨青阳参抗痫作用的分子生物学机制。方法 :大鼠杏仁核快速点燃癫痫模型 ,应用免疫组化技术观察青阳参对点燃癫痫大鼠脑内c fos、c jun基因表达的影响。 结果 :杏仁核点燃癫痫大鼠脑内c fos、c jun基因表达明显增强 ,青阳参能明显阻断其表达 ,阳性细胞数量明显减少。结论 :青阳参的抗痫作用机制可能与降低脑内c fos、c jun基因表达有关。

青阳参提取物成分分析(英文)

目的:了解青阳参(萝藦科)根茎中化合物的结构,寻找非甾类的新化合物和活性成分。方法:青阳参根茎的乙酸乙酯提取物用柱层析分离,得到的纯品用光谱方法确定结构,通过检索确认其是否为新发现的化合物,并进行初步的抗真菌实验。结果:分离得到7个组分,结构分别为:1-[4-甲氧基-3-(6-甲氧基-3-乙酰基苯基过氧)苯基]乙酮(1)、1-(3-羟基-7-乙酰基萘-2-基)乙酮(2)、1-(3,4-二羟基苯基)乙酮(3)、1-(2,4-二羟基苯基)乙酮(4)、1-[3-(3,6-二羟基-2-甲基苯甲酰基)-2,4-二羟基苯基]乙酮(白首乌二苯酮)(5)、N,N-二甲基乙胺(6)和2-氧代-2-苯基乙酸(7)。结论:组分1和2为新化合物,1有抗真菌活性。

青阳参的一个新C_(21)甾体苷(英文)

从萝藦科药用植物青阳参(CynanchumotophyllumSchneid)的乙酸乙酯提取物的酸水解液中,分离得到一个新的C21甾体苷类化合物,通过现代波谱技术,确定其结构为去乙酰藦萝苷元3-O-β-D-夹竹桃吡喃糖基-(1→4)-α-D-夹竹桃吡喃糖苷。

花粉和资源限制对青阳参坐果率的影响

以生长于自然种群的青阳参植株为材料进行补充授粉试验,以人工种植的青阳参植株为材料进行资源限制试验,探讨花粉和资源限制对青阳参坐果率的影响。结果表明：自花授粉、天然授粉和异株异花授粉植株的结实率分别为1.7%、2.25%和24%,花粉来源对青阳参坐果存在显著影响;补充施肥和不补充施肥植株的坐果率分别为5.12%和3.17%、去除0-80%的花其坐果率为3.28%-15.34%、叶片剪除0-100%其坐果率为3.22%-1.35%,资源限制对青阳参坐果率有显著影响。

从青阳参提取的新寡糖(英文)

目的:了解青阳参片中化合物的结构。方法:对青阳参(萝藦科)的乙酸乙酯提取物(即青阳参片)进行酸水解,用柱层析的方法分离水解产物,得到的纯化合物再用光谱方法测定结构。结果:分离得到4个新寡糖,结构被分别测定为:甲基2,6-二去氧-3-O-甲基-β-D-阿拉伯-己吡喃糖基-(1→4)-6-去氧-3-O-甲基-β-D-核-己吡喃糖基-(1→4)-6-去氧-3-O-甲基-α-L-核-己吡喃糖苷(1),甲基6-去氧-1,3-二-O-甲基-β-D-核-己糖基-(1→4)-2,6-二去氧-3-O-甲基-α-D-阿拉伯-己吡喃糖苷(2),甲基2,6-二去氧-3-O-甲基-β-D-阿拉伯-己吡喃糖基-(1→4)-6-去氧-3-O-甲基-α-L-核-己吡喃糖苷(3),和2,6-二去氧-3-O-甲基-β-D-阿拉伯-己吡喃糖基-(1→4)-2,6-二去氧-3-O-甲基-α-D-阿拉伯-己吡喃糖基-(1→4)-2,6-二去氧-3-O-甲基-β-D-来苏-己吡喃糖(4)。结论:青阳参片中的单糖残基为2-去氧己糖,残基间以1→4连接。

从青阳参提取的带7个糖残基的新C_(21)甾体苷(英文)

目的:了解青阳参片中化合物的结构。方法:对青阳参(萝藦科)根茎的乙酸乙酯提取物(即青阳参片),用柱层析的方法分离,得到的纯化合物再用光谱方法测定结构。结果:分离出2个新的C21甾体苷,每个都有7个单糖残基。结构被分别确定为:告达亭3-O-α-L-磁麻吡喃糖基-(1→4)-α-D-夹竹桃吡喃糖基-(1→4)-α-L-磁麻吡喃糖基-(1→4)-β-D-葡萄吡喃糖基-(1→4)-α-D-夹竹桃吡喃糖基-(1→4)-β-D-夹竹桃吡喃糖基-(1→4)-β-D-2-脱氧毛地黄吡喃糖苷(1);和告达亭3-O-β-D-磁麻吡喃糖基-(1→4)-α-D-夹竹桃吡喃糖基-(1→4)-α-L-磁麻吡喃糖基-(1→4)-β-D-葡萄吡喃糖基-(1→4)-β-D-夹竹桃吡喃糖基-(1→4)-β-D-磁麻吡喃糖基-(1→4)-β-D-2-脱氧毛地黄吡喃糖苷(2)。结论:青阳参片中的C21甾体苷1和2,由一个C21甾体苷元部分和一个3-OH取代的糖链组成,7个单糖残基组成此链,糖残基为2-去氧己糖和葡萄糖,糖间的所有连接为1→4连接。

青阳参组织培养及愈伤组织的成分分析(英文)

用青阳参 (Cynanchumotophyllum)的嫩枝和芽在MS + 2 .0mg/L 2 ,4_D + 0 .1mg/LKIN的培养基上诱导愈伤组织。通过不同的培养基和激素配比实验 ,发现 6,7_V + 2 .0mg/L 2 ,4_D + 0 .3mg/LKIN最适合愈伤组织的生长。但在 6,7_V + 1 .0mg/L 2 ,4_D + 0 .1mg/LKIN培养基中的愈伤组织次生代谢物含量最高。愈伤组织的生长周期为 2 7d ,但在 33d时次生代谢产物的含量最高。从愈伤组织中分离到 7个化合物 :⑴ 9,1 0 ,1 1_三羟基_十八碳_1 2 (Z)_烯酸甲酯 (methyl 9,1 0 ,1 1_trihydroxy_1 2_octadecenoate) ,( 2 )胡萝卜甙 (daucosterol) ,( 3) β 谷甾醇 ( β sitosterol) ,( 4 )华木酸 (betulinicacid) ,( 5 )齐端果酸 (oleanolicacid) ,( 6)棕榈酸 (hexadecanoicacid) ,( 7)十八碳_9_烯酸 ( 9_octadecenoicacid)。首次报道从植物愈伤组织中分离到多羟基十八碳烯酸 ,并讨论了化合物 ( 1 )

HPLC法测定民族药材青阳参中对羟基苯乙酮的含量

目的：建立反相高效液相法测定民族药材青阳参中对羟基苯乙酮的含量。方法：选用YMC-Pack ODS-A C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相：甲醇-水（35∶65）,检测波长275 nm,流速：1.0 ml·min-1,柱温：30℃。结果：对羟基苯乙酮在0.506~20.24μg·m L-1范围内线性关系良好,精密度、稳定性、重复性、加样回收率试验RSD均小于2%,平均加样回收率为97.38%。结论：该方法准确、简便、灵敏度高,可作为青阳参药材中对羟基苯乙酮的含量测定方法。

青阳参花粉活力测定方法比较

[目的]提高青阳参的坐果率。[方法]用解剖针小心将花粉块取下,并在解剖镜下将花粉块的膜剥开使其花粉粒散开置于载玻片上,用碘-碘化钾染色法(I2-KI)、氯化三苯四氮唑(TTC)染色法、醋酸洋红染色法和荧光素二醋酸酯(FDA)法对花粉生活力进行测定;花粉离体萌发法以整个花粉块为单位进行离体培养。[结果]:碘-碘化钾染色法(I2-KI)、氯化三苯四氮唑(TTC)染色法、醋酸洋红染色法、荧光素二醋酸酯(FDA)法的染色率均低于30.0%,而花粉离体萌发法测定的萌发率高达97.6%。[结论]花粉离体萌发法能对青阳参的花粉生活力进行有效的测定。

HPLC法测定民族药材青阳参中白首乌二苯酮的含量

目的:采用反相高效液相色谱法测定民族药材青阳参不同产地药材中白首乌二苯酮的含量。方法:采用安捷伦ZORBAX SB C18色谱柱(250 mm×4.6 mm;5μm),流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液(20︰80),流速为1.0 m L·min^(-1),检测波长280 nm,柱温25℃。结果:该方法准确、简便、可行,可作为青阳参药材的含量测定方法。结论:各产地青阳参中均含有白首乌二苯酮,但不同产地的青阳参中白首乌二苯酮的含量差别较大。

青阳参小孢子发生和雄配子体发育

利用常规石蜡制片技术、荧光显微技术、光镜细胞化学技术、电子显微镜技术对青阳参小孢子发生和雄配子体发育进行了详细观察。结果显示,小孢子孢原细胞起源于皮下组织并在两个地方分化;孢原细胞平周分裂形成初生壁层和初生造孢层,初生壁层细胞再经过平周分裂形成2层细胞,其中最内一层即为绒毡层,绒毡层为分泌型绒毡层,既为小孢子发育提供营养来源,又分泌分泌物形成包围花粉粒的膜;初生造孢层细胞直接行使小孢子母细胞的功能;成熟花粉粒中含有大量淀粉粒、蛋白质、内质网、叶绿体、脂体和大液泡;包围花粉粒的膜和花粉粒之间的膜含有蛋白质成分和脂类成分;小孢子细胞核分裂形成营养细胞和生殖细胞,营养细胞和生殖细胞间没有细胞板形成,生殖细胞呈透镜型、比营养细胞小。