105株肺炎链球菌青霉素敏感性测定及耐药性研究

目的肺炎链球茵对青霉素敏感性测定及耐药性分析；方法对青霉素敏感性的测定，采用苯唑西林纸片扩散法作初筛，抑茵环直径≥20mm，判断为对青霉素敏感，抑茵环直径≤19mm，再进一步用Etest法检测MIC来确定是否青霉素耐药；结果纸片扩散法42．9％(45／105)的肺炎链球茵抑茵环直径≥20mm，判定为青霉素敏感，Etest法35．2％(37／105)的肺炎链球茵对青霉素耐药。青霉素敏感茵株对头孢类抗茵药物普遍敏感，但对红霉素、氯霉素有较强的耐药性，尚未发现对万古霉素耐药的菌株；结论本地区PNSP的发生率占35．2％，这类菌株所致感染应避免选用青霉素类抗茵药。可首选第三代头孢，严重感染者可选用万古霉素其治疗效果较理想。

浙江地区青霉素耐药肺炎链球菌PBPs基因及氨基酸序列研究

为阐明浙江地区青霉素耐药肺炎链球菌(PRSP)的青霉素结合蛋白(PBPs)的基因和氨基酸序列的变异特点,对温州医学院自2000年11月～2004年1月收集的26份肺炎链球菌进行分离、鉴定及青霉素药敏实验,并对每株链球菌的PBP1A、PBP2B、PBP2X基因进行PCR扩增和直接测序,通过序列比对与生物信息学分析.结果表明,研究中的PBP1A的主要突变位点是保守基序KTG之后的4个连续氨基酸替换Thr574Ala、Ser575Thr、Gln576Gly、Phe577Tyr和保守序列STMK内的氨基酸替换Thr371Ser;PBP2B的主要突变位点是保守序列SSN之后的氨基酸替换Thr451Ala;PBP2X的主要突变位点是保守基序STMK内的氨基酸替换Thr338Ala.以上突变类型以及菌株的青霉素耐药水平与文献报道相符.研究检测的PRSP的PBPs基因中暂未发现本地区特有的(新的)基因突变,也未检测出文献报道的某些与青霉素抗性相关的氨基酸替换.

临床肺炎链球菌常见序列型青霉素耐药性的流行病学研究

从菌种的水平研究和阐述临床分离的肺炎链球菌青霉素耐药机制存在一定的局限。为探讨以序列型（Sequence type,ST）为基础研究肺炎链球菌青霉素耐药机制的可行性,本研究分析了1997~2014年间北京常见STs肺炎链球菌488株和2015年重庆酉阳县、四川中江县常见STs菌株88株的青霉素最低抑菌浓度（Minimun inhibitory concentration,MIC）的分布及年份分布。结果显示北京分离株中除了ST342外,属于某一种ST的所有分离株的青霉素MIC值具有一定分布范围,或者〈0.25 mg/L,或者≥0.25 mg/L。青霉素MIC〈0.25 mg/L的分离株多分布于2001年以前,此年份后≥0.25 mg/L的分离株出现,并逐渐成为主要种群。但这个年份分布规律对于某一种ST并不明显,某一种ST在最初发现的几个年份中就具有不同青霉素MIC水平的分离株。重庆酉阳县和四川中江县常见STs型青霉素MIC分布于0.25~2.0 mg/L（≥0.25 mg/L）,包括ST271、ST320和ST81。本研究从流行病学角度揭示了肺炎链球菌临床分离株常见STs的青霉素MIC值分布规律,支持以STs为基础研究其青霉素耐药机制。

肺炎链球菌青霉素MIC与PBP变异的关系

目的探讨肺炎链球菌(Sp)青霉素抗生素最小抑菌质量浓度(MIC)与青霉素结合蛋白(PBP)1A、2B和2X变异的关系。方法用MIC法对51株Sp进行青霉素药敏试验,并提取每株Sp的DNA,分别对其PBP1A、PBP2B中编码青霉素结合区域进行PCR扩增然后测序,并用软件进行序列比对,分析PBP1A、2B保守序列的氨基酸置换。结果在所有MIC≤1 mg/L的青霉素敏感Sp(PSSP)中均未发现PBP1A突变,而在MIC>1 mg/L时多数菌株出现Thr574-(Asn)、Ser575-Thr、Gln576-Gly(、Phe)577-(Tyr)4个连续残基的置换变异和Thr371-Ser的置换。PBP2B在所有MIC≤1 mg/L的PSSP中均未发生任何突变;而当MIC分别大于1 mg/L和2 mg/L时,均出现445Thr-Ala和Glu338-Gly。结论 PBP1A、PBP2B基因突变分别可导致其表达的PBP1A、PBP2B结构异常,与青霉素(包括其他β内酰胺类抗生素)亲和力下降,继而青霉素耐药。

呼吸道感染婴幼儿肺炎链球菌的耐药性及青霉素结合蛋白基因突变分析

目的分析呼吸道感染婴幼儿肺炎链球菌的耐药性及青霉素结合蛋白基因(PBPs)突变情况。方法收集呼吸道感染婴幼儿痰或咽拭子标本中分离出的24株肺炎链球菌,进行菌株鉴定和药敏试验。对筛选出的耐青霉素肺炎链球菌行耐药性分析,并提取菌株DNA后分析PBPs基因突变情况。结果 24株肺炎链球菌中,青霉素不敏感菌株有13株,占54.2%;13株青霉素不敏感菌株对对氨苄西林、阿莫西林/克拉维酸和头孢呋辛不敏感率较高,分别为100%、76.9%和76.9%;对头孢噻肟、头孢曲松和头孢吡肟的不敏感率较低,分别为46.2%、38.5%和30.8%;对美罗培南和万古霉素的不敏感率最低,分别为15.4%和0。13株青霉素不敏感菌株未发现pbp1a基因突变菌株,5株存在pbp2b基因突变,占38.5%。结论青霉素不敏感肺炎链球菌存在对多种抗生素耐药情况,而pbp2b基因突变可能是导致肺炎链球菌耐药的重要原因,应加强肺炎链球菌耐药性及PBP基因突变监测。

江苏省南京地区耐青霉素肺炎链球菌快速诊断方法初步探讨

目的探讨本地区临床分离的肺炎链球菌青霉素耐药性的快速诊断方法。方法2005-2007年，共搜集130株肺炎链球菌临床分离株和50株健康定殖株，采用optoehin纸片和胆汁溶菌试验鉴定，测定最低抑菌浓度（MIC），提取基因组DNA，PCR法测定其青霉素耐药性。结果本地区健康定殖株均对青霉素敏感，临床分离株青霉素敏感率、中介率、耐药率分别为25．4％、23．1％和51．5％，儿童组耐药率65．6％而成人组耐药率11．8％。PCR法用于耐药性检测时，在青霉素敏感株中，最佳诊断标准为pbp2B、2X阳性，pbplA阴性，敏感性、特异性分别为94．2％、96．8％；而在青霉素不敏感株中，最佳诊断标准为pbp2X阴性，敏感性、特异性分别为97-8％、89．9％，该法用于诊断中介株和耐药株敏感性较差，分别为26．1％、72．7％。用于检测的最低菌量为2-20CFU。结论PCR法检测时间明显短于传统药敏方法，且能够较好地区分出青霉素敏感株和耐药株，但不能理想地鉴定出中介株。

肺炎链球菌中青霉素结合蛋白PBP3的功能与结构研究进展

PBP3作为肺炎链球菌唯一的D,D羧肽酶,能够从肽聚糖五肽上移除最后一个末端D-Ala,导致转肽反应中供体不可用,因此控制了肽聚糖的网状交联水平,在细胞分裂和生长中起重要作用。文中对PBP3的功能与结构进行了综述,为今后PBP3的深入研究与应用提供了基础资料。

半巢式PCR和PCR-RFLP法诊断耐青霉素肺炎链球菌的比较

目的评价半巢式PCR和PCR-RFLP法用于诊断肺炎链球菌青霉素耐药性的价值。方法收集130株肺炎链球菌临床分离株和50株健康人定植株,琼脂稀释法测定青霉素最低抑菌浓度(MIC),半巢式PCR、PCR-RFLP法测定对青霉素耐药性。结果健康人定植株均对青霉素敏感,临床分离株青霉素敏感率、中介率、耐药率分别为25.4%、23.1%和51.5%;当MIC为0.25～0.5μg/ml时,半巢式PCR法检测青霉素耐药性的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为86.7%、98.6%、86.7%和98.6%;当MIC≥1μg/ml时,对应值分别为96.2%、97.6%、97.4%和96.4%。而PCR-RFLP法诊断中介株的敏感性仅34.2%;诊断耐药株的阳性预测值仅67.5%。结论半巢式PCR法优于PCR-RFLP法,可用于对耐青霉素肺炎链球菌的快速检测;PCR-RFLP敏感性不高,可用于分子流行病学分析。

由1例肺炎链球菌脓毒血症浅识耐青霉素肺炎链球菌

肺炎链球菌是呼吸道常见病原菌,随着抗生素的广泛使用,耐青霉素肺炎链球菌逐渐在增加。本文通过对1例肺炎链球菌脓毒血症的诊治经过及相关文献的复习,探讨耐青霉素肺炎链球菌的临床特点及诊治要点。

肺炎链球菌β-内酰胺类抗生素最小抑菌质量浓度与青霉素结合蛋白1A和2B变异的关系

目的探讨肺炎链球菌(Sp)β-内酰胺类抗生素最小抑菌质量浓度(MIC)与青霉素结合蛋白(PBP)1A和2B变异的关系。方法对55株Sp用E-test法进行7种β-内酰胺类抗生素进行药敏试验,并提取每株Sp的DNA,分别对其青霉素结合蛋白基因(pbp)1a和pbp2b中编码青霉素结合区域(PBD)进行套式PCR扩增和直接测序,并用Clustalx软件进行序列比对,分析PBP1A和PBP2BPBD保守序列的氨基酸置换。结果青霉素敏感株4株中发现PBP2B保守序列SSN后苏氨酸(Thr)445→丙氨酸(Ala),Thr451→Ala和谷氨酸(Glu)481→甘氨酸(Gly)置换,其余6株PSSP未发现PBP1A和PBP2B保守序列氨基酸置换。4株青霉素中介株(PISP)(MIC0.19～0.38mg/L)PBP2BThr445→Ala,Thr451→Ala和Glu481→Gly置换,其中1株发现PBP2B保守序列SVVK后第431-432位点处脯氨酸(Pro)的插入,余3株存在谷氨酰胺(Gln)432→亮氨酸(Leu)置换。另16株PISP(MIC0.5～1.0mg/L)在此基础上出现PBP1ASRN后Pro432→Thr,STMK中Thr371→丝氨酸(Ser)/Ala和KTG附近的短镶嵌序列Thr574→天冬氨酸(ASn)Ser575→Thr,Gln576→Gly,苯丙氨酸(Phe)577→酪氨酸(Tyr)置换,且后二种变异存在于所有青霉素和头孢类中介和耐药株中。20/25株青霉素耐药株存在PBP2B保守序列KTG附近Ala624→Gly,包含Ala624→GlySp组青霉素、头孢呋新、阿莫西林等抗生素平均MIC值明显高于不包含这一置换的Sp组。在青霉素MIC≥0.5mg/L的菌株中均同时存在PBP1A和PBP2B的变异。结论β-内酰胺类抗生素对肺炎链球菌临床分离株MIC值与PBP1A和PBP2B编码青霉素结合活性区域的保守序列中或附近的氨基酸置换有关。

儿童耐青霉素肺炎链球菌感染的治疗

肺炎链球菌性疾病是导致5岁以下儿童死亡的首位原因,已经成为世界性的重要的公共卫生问题。近年研究发现,青霉素不敏感的肺炎链球菌的检出率呈上升趋势。本文综述肺炎链球菌性疾病的临床表现、诊断以及其抗菌药物的选择。

耐青霉素肺炎链球菌研究进展

耐青霉素的肺炎链球菌的生理和传播 ,打破了传统治疗肺炎链球菌感染首选青霉素的方案。国内对耐药菌发生率的报道相差较大 。

比较青霉素G和左氧氟沙星对肺炎链球菌肺炎的疗效

目的比较青霉素G和左氧氟沙星对肺炎链球菌肺炎的疗效。方法 100例患者随机分成2组,平均每组50人。第一组给予青霉素G进行治疗,第二组给予左氧氟沙星进行治疗。观察两药的疗效。观察期共1.5个月。结果青霉素G和左氧氟沙星对肺炎链球菌肺炎的疗效相比,左氧氟沙星略优于青霉素G,差异具有统计学意义(χ2=3.82,P<0.05)。结论在我们的临床工作中,通过使用左氧氟沙星进行调理,能够更加有利于肺炎链球菌肺炎患者的康复,起到良好的效果。

青霉素与头孢曲松联用对肺炎链球菌体外抗菌效果研究

目的研究青霉素与头孢曲松钠对肺炎链球菌的联合抗菌效应。方法应用E-test法测定青霉素的最低抑菌浓度(MIC);采用棋盘稀释法,测定青霉素与头孢曲松联用对肺炎链球菌的体外抑菌效果,计算FIC指数。结果青霉素钠与头孢曲松联合应用后对中介及耐药菌株,其MIC明显减低,FIC≤0.5占15.4%;0.5<FIC≤1占84.6%;1<FIC≤2和FIC>2为0。对敏感菌则其MIC有不同程度的升高,FIC≤0.5和0.5<FIC≤1占0;1<FIC≤2占14.3%;FIC>2占85.7%。结论青霉素钠与头孢曲松联合应用对耐药及中介的肺炎链球菌以相加作用为主,而对敏感菌株则以拮抗作用为主。

耐青霉素和头孢菌素肺炎链球菌感染的治疗

肺炎链球菌是引起细菌性肺炎、脑膜炎及中耳炎的主要致病菌。世界各地耐药肺炎链球菌的普遍流行 ,导致很多抗菌药物治疗肺炎链球菌感染无效。近期许多青霉素和头孢菌素治疗肺炎链球菌的临床研究资料显示 :青霉素对肺炎链球菌的最低抑菌浓度 (MIC)可高达 4mg· L-1。本文就肺炎链球菌对β-内酰胺类抗生素耐药的机制、近期流行情况以及防治措施作一综述。

我院耐青霉素肺炎链球菌患儿治疗研究

目的 研究儿童耐青霉素肺炎链球菌治疗措施。方法 对耐青霉素肺炎链球菌感染患儿分不同感染类型,在青霉素治疗失败的情况下,改变治疗方法,使用不同的抗生素治疗模式进行治疗。结果 经过新的治疗方法,使用不同的抗生素治疗模式对耐青霉素肺炎链球菌感染患儿进行治疗,取得了良好的疗效。结论 耐青霉素肺炎链球菌感染患儿只要用药得当,是可以取得较为理想的治疗效果的。

甲磺酸左氧氟沙星对耐青霉素肺炎链球菌的体外抗菌活性

目的 观察甲磺酸左氧氟沙星对耐青霉素肺炎链球菌 (PRSP)的药敏及疗效。方法 对 6株临床分离的耐青霉素肺炎链球菌 ,采用E test方法 ,测定甲磺酸左氧氟沙星等 6种抗生素的抗菌活性。同时观察甲磺酸左氧氟沙星单药治疗PRSP临床疗效及不良反应。结果 6株PRSP均为低耐药菌株 ,对甲磺酸左氧氟沙星敏感。 6例患者经治疗后 ,5例痊愈 ,1例显效 ,无明显副反应发生。结论 甲磺酸左氧氟沙星可有效治疗耐青霉素肺炎链球菌性肺炎。