青鱼生长QTL紧密连锁分子标记与生长性状的关联分析

研究对前期建立的青鱼(Mylopharyngodon piceus)家系高密度遗传连锁图谱及体长QTL的定位结果进行深入分析,在10号连锁群上识别到与体长相关的QTL区域,存在2个与体长强烈相关的紧密连锁SNP位点。研究利用特异性标记判定青鱼遗传性别,对SNP位点侧翼序列PCR扩增子进行sanger测序。得到准确的SNP位点基因型信息后,研究对紧密连锁SNP位点不同基因型与邗江青鱼群体生长性状进行了细致的关联分析。结果表明,在563尾邗江青鱼群体中,雌鱼290尾,雄鱼273尾,雌雄比约为1.06:1。遗传分析显示,SNP_(7957)G>C和SNP_(9802)T>A有效等位基因数(N_(e))分别为1.754和1.399,观测杂合度(H_(o))分别为0.384和0.266,期望杂合度(H_(e))分别为0.430和0.285,多态信息含量分别(PIC)为0.508和0.378。相比雄鱼,雌鱼生长速度更快,但是变异系数更高,说明雌鱼生长性状离散程度更大。SNP_(7957)G>C和SNP_(9802)T>A不同基因型在群体体长性状中存在显著差异。SNP_(7957)G>C位点的GG基因型在雄鱼体长性状中具有显著优势(P<0.05),SNP_(7957)G>C和SNP_(9802)T>A单标记其他基因型与生长性状之间存在差异,但未达到统计学差异。在SNP位点不同基因型构建的二倍型中,雌雄个体表现出一定的生长差异,D8(GGTA)在生长方面具有显著优势(P<0.05),具有一定育种价值。研究结果可为选育快速生长青鱼新品种提供分子标记,为未来青鱼遗传改良和分子标记辅助育种策略提供科学依据。

基于重组酶介导等温扩增-CRISPR/Cas12a的青鱼物种快速鉴定研究

目的 建立一种快速、特异、灵敏地鉴定青鱼物种的方法。方法 以青鱼线粒体16SrRNA基因的保守序列设计特异性crRNA,并根据crRNA设计重组酶介导等温扩增(recombinase-mediatedisothermal amplification,RAA)引物;建立青鱼的RAA-CRISPR/Cas12a快速鉴定方法,并对该方法的检测时间进行优化;同时,评估该方法的特异性和灵敏度,并对青鱼及其近缘物种的市售样品进行检测。结果 该方法仅需25 min完成检测;对青鱼物种的鉴定表现出显著的特异性,并对其近缘物种如草鱼、赤眼鳟、鳡鱼、倒刺鲃的检测结果均呈阴性;方法灵敏度为1.0×10-3ng/μL(以基因组DNA计);与DNA条形码技术相比,该方法在市售样品的检测结果上表现一致。结论 建立了青鱼物种的RAA-CRISPR/Cas12a现场快速检测方法,该方法具备快速、特异、灵敏的特点,为水产市场或野外环境中快速检测青鱼物种提供了技术手段。

菜籽粕替代鱼粉对青鱼生长、抗氧化能力和肠道健康的影响

本试验旨在研究菜籽粕替代鱼粉对青鱼(Mylopharyngodon piceus)生长、抗氧化能力和肠道健康的影响。用菜籽粕分别替代基础饲料中0(对照组)、10%(10%组)、20%(20%组)、30%(30%组)、40%(40%组)和50%(50%组)的鱼粉,配制6种等氮等脂的试验饲料,饲喂初始体重为(6.73±0.70)g的青鱼8周。每种试验饲料投喂4个养殖桶,每桶放养35尾鱼。结果显示:1)对照组、10%组和20%组增重率和特定生长率无显著差异(P>0.05),30%、40%和50%组的增重率和特定生长率显著低于对照组和10%组(P<0.05)。随着菜籽粕替代鱼粉比例的增加,肥满度、肝体比和肠体比呈现下降的趋势,饲料系数呈现先下降后上升的趋势,50%组的饲料系数显著高于对照组、10%组和20%组(P<0.05)。2)各组全鱼的水分和粗灰分含量无显著差异(P>0.05);随着菜籽粕替代鱼粉比例的增加,全鱼的粗蛋白质和粗脂肪含量呈现下降的趋势,40%和50%组全鱼的粗蛋白质和粗脂肪含量显著低于对照组(P<0.05)。各组肌肉的水分、粗脂肪和粗灰分含量无显著差异(P>0.05);30%组、40%组和50%组肌肉的粗蛋白质含量显著低于对照组(P<0.05)。3)各组干物质和粗脂肪表观消化率无显著差异(P>0.05),20%组、30%组、40%组和50%组粗蛋白质表观消化率显著低于对照组(P<0.05)。当饲料中菜籽粕替代鱼粉比例超过10%时,肠道胰蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶活性均显著下降(P<0.05)。4)血清总抗氧化能力和超氧化物歧化酶活性随着菜籽粕替代鱼粉比例的增加呈下降趋势,但各组间无显著差异(P>0.05)。当菜籽粕替代鱼粉比例高于20%时,血清过氧化氢酶活性显著降低(P<0.05),血清丙二醛含量显著升高(P<0.05)。5)当菜籽粕替代鱼粉比例超过10%时,肠绒毛长度、宽度和肌层厚度显著下降(P<0.05)。在门水平上,青鱼肠道菌群中的优势菌门为变形菌门、拟杆菌门和放线菌门;在属水平上,青鱼肠道菌群中的优势菌属为金黄杆菌属、无色杆菌属和气单胞菌属。菜籽粕替代20%和50%的鱼粉提高了青鱼肠道菌群中变形菌门和气单胞菌属的相对丰度。综上所述,青鱼饲料中菜籽粕替代鱼粉的比例以不超过20%为宜,此时不会对青鱼的生长和抗氧化能力产生明显的负面影响。

高比例植物蛋白对青鱼幼鱼生长、消化、肝功能及血清生化指标的影响

试验旨在研究高比例植物蛋白饲料对青鱼幼鱼生长性能、消化酶活性、肝脏功能及血清生化指标的影响。试验采用豆粕分别替代0、5%、10%、15%、20%的鱼粉蛋白(分别记为FM20组、FM15组、FM10组、FM5组、SBM组)。选取800尾青鱼随机分成5组,每组4个重复,每个重复40尾。试验期56 d。结果表明:SBM组的增重率和特定生长率显著低于FM20组(P<0.05),脏体指数和肝体指数显著低于FM20组、FM15组、FM10组(P<0.05)。SBM组的肝胰腺胰蛋白酶活性最高,FM20组的肠道胰蛋白酶活性最高,不同组织中胰蛋白酶和胃蛋白酶活性的变化趋势相似,肠道淀粉酶活力高于肝胰腺,而脂肪酶活力低于肝胰腺。SBM组的血清及肝脏谷草转氨酶和谷丙转氨酶活性均显著高于其他各组(P<0.05)。研究表明,饲料中使用适量的植物蛋白对青鱼幼鱼的生长、消化、肝功能及生化指标无负面影响,建议鱼粉的最低添加量为5%。

不同植物蛋白源替代鱼粉对青鱼生长及免疫的影响

该试验聚焦青鱼的饲料创新方法,通过应用不同植物蛋白源替代鱼粉对青鱼生长性能、全鱼和肌肉化学成分组成、肠道及肝胰脏酶活的影响。将豆粕SBM、菜粕RSM、棉粕CSM、花生粕PM分别替代试验饲料中10%的鱼粉FM(CP,67%),配制成5组等氮等能的试验饲料,分别记为FM、SBM、RSM、CSM、PM。以鱼粉、豆粕、菜粕、棉粕、花生粕为主要蛋白源按相同成分含量配制成粗蛋白(39.34%)、粗脂肪(6.81%)的青鱼配合饲料,并以此为对照组进行试验。研究结果表明,豆粕相较于其他植物蛋白源更适合加入饲料,用豆粕替代试验饲料中<10%的鱼粉较为理想。

预制青鱼干脂肪酶法脱脂工艺研究

为降低预制青鱼干鱼肉的腥味,改善青鱼干的口感,本研究采用碱性脂肪酶对青鱼干进行脱脂,通过响应面法获得最优工艺,并研究酶法工艺对青鱼干的影响。结果表明,pH值8.8、酶浓度27.6 U·mL^(-1)、料液比1∶2.9时的脱脂效率最高,鱼肉含脂率为5.29%;与皂化脱脂相比,脂肪酶法的脱脂效果更好,青鱼干的营养成分损失少,色泽亮黄,并且能够维持青鱼干独特的滋味。本试验结果为制备健康、营养的预制青鱼干提供了理论依据。

三丁酸甘油酯对青鱼生长性能、免疫性能和消化性能的影响

文章旨在研究三丁酸甘油酯对青鱼生长性能、免疫性能和消化性能的影响。试验选择360尾初体质量为(12.47±0.69)g的青鱼幼鱼,随机分为4组,每组3个重复,每个重复30尾。4组青鱼幼鱼分别投喂添加0、500、1000、2000 mg/kg三丁酸甘油酯的等氮等脂试验饲料,试验为期8周。结果表明,饲料中添加1000和2000 mg/kg的三丁酸甘油酯显著提高青鱼的终末体重,显著降低饲料系数(P<0.05);添加量为2000 mg/kg时显著提升青鱼的肝体比。免疫性能方面,饲料中添加500 mg/kg三丁酸甘油酯可显著提高青鱼的超氧化物歧化酶含量(P<0.05);饲料中添加1000和2000 mg/kg三丁酸甘油酯可显著提高青鱼的溶菌酶和C3含量(P<0.05),饲料中添加三丁酸甘油酯对青鱼组织中碱性磷酸酶和C4无显著影响(P>0.05)。在消化性能方面,饲料中添加500 mg/kg三丁酸甘油酯可显著提高青鱼的超氧化物歧化酶含量(P<0.05);饲料中添加1000和2000 mg/kg三丁酸甘油酯显著提高青鱼的溶菌酶含量和C3含量(P<0.05),饲料中添加三丁酸甘油酯对青鱼组织中碱性磷酸酶和C4无显著影响(P>0.05)。总之,在青鱼饲料中添加一定比例的三丁酸甘油酯可有效提升青鱼生长性能,增强青鱼的免疫性能,促进青鱼的消化性能。在本试验条件下,三丁酸甘油酯最适添加量为1000 mg/kg。

不同温度下冻藏对青鱼品质的影响研究

为研究不同温度下冻藏对青鱼品质的影响,本研究将新鲜青鱼在-18、-30、-60、-80℃下冻藏,分别取冻藏后0、7、15、30、60、90 d样品测定盐溶性蛋白含量、钙ATP酶(Ca^(2+)-ATPase)活性、总巯基含量、表面疏水性,并结合质构、色差、十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺(SDS-PAGE)凝胶电泳、电镜观察,分析4个温度梯度下冻藏青鱼品质的变化。结果表明,随着冻藏时间的延长,4组青鱼鱼肉的品质均出现下降,以30 d内检测指标的变化较为突出,说明冻藏1月的青鱼可食用价值发生改变。相同冻藏时间下,-80℃组冻藏青鱼的各项指标均优于其余3组,-60℃组品质次之,-18与-30℃组品质无明显差异,说明超低温可降低青鱼组织蛋白质的变性速率,更好地保持鱼肉品质。本研究可为研发青鱼冻藏新方式及辅助存储技术提供理论依据。

青鱼Mylopharyngodon piceus(Richardson)味觉器官的分布与功能之间关系的研究

青鱼Ｍｙｌｏｐｈａｒｙｎｇｏｄｏｎｐｉｃｅｕｓ（Ｒｉｃｈａｒｄｓｏｎ）是我国淡水养殖业中的“四大家鱼”之一（也是我国特产），它生活在水的中下层并以螺蛳、蚬、蚌等为主要食物．因此它的味觉器官味蕾的分布、数量、结构与功能，和生活在水的中上层并以浮游植物和浮游动物为主要饵料的鲢、鳙的滤食器官的结构与功能有所不同．主要报道青鱼味觉器官的分布与功能之间关系的研究结果．

三角鲂（Megalobrama terminalis）精子与青鱼（Mylopharyngodon piceus）卵子的受精细胞学研究

以青鱼(Mylopharyngodon piccus)为母本和三角鲂(Megalobrama terminalis)为父本的杂交虽是不同亚科的远缘杂交，但有正常的受精细胞学程序和常规的细胞分裂(卵裂)方式。这些实验结果，为开展鱼类远缘杂交提供了受精生物学的理论基础；同时还证实鱼类远缘杂交的异种精子不仅有激活卵子的作用，而且参与了遗传物质的组成，使父本的性状能够在杂种后代表现出来。实践证明，鱼类遗传育种可以通过远缘杂交的途径获得杂种优势。青鲂杂种一代既具有母本青鱼的性状，也兼有父本三角鲂的特征，通过养殖试验已在渔业生产中取得成效(拟另文发表)。

青鱼(Mylopharyngodon piceus)新发病病原类志贺邻单胞菌(Plesiomonas shigelloides)的分离鉴定

为研究青鱼暴发性死亡原因,从病症典型青鱼(Mylopharyngodon piceus)肌肉、肝脏和肾脏处进行细菌接种,分离获得一株细菌(HZ2015),对其进行了形态观察、生化特性检测和16S r RNA序列分析,通过动物回归实验、毒力检测和药敏试验了解其对青鱼的致病性、毒力及药物敏感性。所得菌株为类志贺邻单胞菌(Plesiomonas shigelloides),动物回归实验能复制出类似症状,且能从体内再次分离到该菌株;分离株对小鼠的半数致死量(LD50)为106.6 CFU;对头孢呋辛、头孢哌酮、庆大霉素、卡那霉素、复达欣高度敏感。研究表明,菌株HZ2015为青鱼体表溃烂病病原,本研究系类志贺邻单胞菌致青鱼体表溃烂病的首次报道。

槲皮素对高脂饲料饲养青鱼生长性能、抗氧化能力、脂代谢和肠道菌群的影响

本试验旨在研究槲皮素对高脂饲料饲养青鱼生长性能、抗氧化能力、脂代谢和肠道菌群的影响。试验选取540尾初体质量为(10.57±0.41)g的青鱼幼鱼,随机分为6组,每组3个重复,每个重复30尾鱼。6组青鱼分别饲喂正常脂肪饲料(NFD组,5%粗脂肪)、高脂饲料(HFD组,15%粗脂肪)以及分别在高脂饲料中添加300、600、900和1200 mg/kg槲皮素的饲料。试验期8周。结果表明:1)与NFD组相比,高脂饲料降低青鱼生长性能,造成机体氧化应激损伤、脂质代谢紊乱、肝脏和肠道组织病理学异常以及肠道菌群失调。2)与HFD组相比,高脂饲料中添加600和900 mg/kg槲皮素显著提高青鱼增重率(WGR)、特定生长率(SGR)和存活率(SR)(P<0.05),显著降低饲料系数(FCR)、肝体指数(HSI)和肥满度(CF)(P<0.05)。通过折线模型拟合得出,当高脂饲料中槲皮素添加量为597.13 mg/kg时,青鱼可获得最大WGR。3)与HFD组相比,高脂饲料中添加600 mg/kg槲皮素显著提高青鱼肝脏过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)和谷胱甘肽还原酶(GR)活性以及总抗氧化能力(T-AOC)(P<0.05),而且槲皮素添加组肝脏丙二醛(MDA)含量均显著降低(P<0.05)。4)与HFD组相比,高脂饲料中添加900 mg/kg槲皮素显著降低青鱼血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和游离脂肪酸(NEFA)含量(P<0.05)。5)与HFD组相比,高脂饲料中添加600~1200 mg/kg槲皮素可改善高脂诱导引起的肝细胞空泡化、细胞核溶解或消失等病理症状,同时显著提高肠道绒毛高度(P<0.05)。6)与HFD组相比,高脂饲料中添加600~900 mg/kg槲皮素可提高肠道菌群的alpha多样性,但各组间无显著差异(P>0.05)。在门和属水平上,高脂饲料中添加槲皮素提高了有益菌门(属)厚壁菌门(Firmicutes)、拟杆菌门(Bacteroidetes)、乳球菌属(Lactococcus)和红杆菌属(Rhodobacter)的相对丰度,降低了有害或潜在有害菌门(属)变形菌门(Proteobacteria)、不动杆菌属(Acinetobacter)、邻单孢菌属(Plesiomonas)和气单胞菌属(Aeromonas)的相对丰度,但各组间无显著差异(P>0.05)。肠道菌群功能预测结果显示,高脂饲料中添加适量槲皮素可提高脂代谢等有关代谢类功能的通路丰度。综上可知,在高脂饲料中添加600~900 mg/kg槲皮素可促进青鱼幼鱼生长,增强机体抗氧化能力,促进脂代谢,降低鱼体脂肪的过度沉积,改善肠道菌群组成。

富硒壶瓶碎米荠对青鱼幼鱼生长、生理生化、硒代谢、抗氧化及先天免疫的影响

为探究富硒壶瓶碎米荠(Cardamine hupingshanensis)对青鱼(Mylopharyngodon piceus)幼鱼生长、血清生理生化、肝脏硒代谢、抗氧化能力和先天免疫指标的影响,选取360尾初始体重为(5.51±0.02)g的青鱼幼鱼随机分配至4个实验组中,每组3个重复。在基础饲料中添加富硒壶瓶碎米荠的量为0、0.5、1.0和2.0 g/kg(硒的实际含量分别为0.04、0.43、0.75和1.57 mg/kg),同时添加矿物质混合物(无硒添加)和维生素混合物,配置成4种等氮等能的青鱼幼鱼试验饲料,养殖周期为60d。结果显示:饲料中添加0.5和1.0 g/kg富硒壶瓶碎米荠时,鱼体增重率(WG),特定生长率(SGR)较对照组和过量组(2.0 g/kg)显著升高,饲料系数(FCR)显著降低(P<0.05)。当饲料中富硒壶瓶碎米荠添加量为0.5—1.0 g/kg时,血清中的甘油三酯(TG)、总胆固醇(TCH)和白蛋白(ALB)含量呈上升趋势,而葡萄糖(GLU)含量显著下降(P<0.05)。饲料中添加0.5—1.0 g/kg富硒壶瓶碎米荠时可显著提高肝脏核因子E2相关因子2(Nrf2)、Mn超氧化物歧化酶(Mn-SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶1(GPX1)和谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)相关基因表达量,同时显著提高肝脏中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性、总抗氧化能力(T-AOC)和还原型谷胱甘肽(GSH)的含量(P<0.05)。肝脏中硒代半胱氨酸裂解酶(SCLY)、硒磷酸合成酶1(SPS1)、15 kD硒蛋白(SEP15)、硒蛋白T2(SEPT2)、硒蛋白H(SEPH)和硒蛋白P(SEPP)相关基因表达量在饲料中富硒壶瓶碎米荠添加量为1.0 g/kg时较对照组显著升高(P<0.05)。此外,饲料中添加0.5—1.0 g/kg富硒壶瓶碎米荠可显著提高肝脏表达抗菌肽2b(Leap2b)、铁调素(HEPC)、溶菌酶(LYZ)和补体C3(C3)相关基因表达量(P<0.05)。由此可见,在饲料中添加0.5—1.0 g/kg富硒壶瓶碎米荠可以促进青鱼幼鱼生长,增加鱼体的蛋白沉积,促进机体硒代谢,提高肝脏抗氧化和先天免疫能力。

褪黑素对青鱼生长、非特异性免疫、抗氧化能力、肠道消化酶活性以及肝脏胰岛素样生长因子Ⅰ和热休克蛋白70 mRNA表达的影响

本研究旨在探讨饲料中添加褪黑素对青鱼生长、非特异性免疫、抗氧化能力、肠道消化酶活性以及肝脏胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)和热休克蛋白70(HSP70)mRNA表达的影响。试验选取525尾初始体质量为(6.44±0.17)g的青鱼幼鱼,随机分成5个组,分别饲喂在基础饲料中添加0(对照组)、5、10、15和20 mg/kg褪黑素的5种饲料,每组3个重复,每个重复35尾鱼。试验期8周。结果表明:1)与对照组相比,饲料中添加10~20 mg/kg褪黑素可显著提高青鱼增重率(WGR)和特定生长率(SGR)(P<0.05),显著降低饲料系数(FCR)(P<0.05),但对存活率、肝体指数、内脏指数和肥满度无显著影响(P>0.05);通过折线模型推测,当饲料中褪黑素添加量为9.28 mg/kg时,青鱼幼鱼将获得最大WGR。2)与对照组相比,饲料中添加10和15 mg/kg褪黑素可显著提高青鱼血清总蛋白(TP)和补体3(C3)含量以及溶菌酶(LSZ)和碱性磷酸酶(ALP)活性(P<0.05),并显著降低青鱼感染嗜水气单胞菌后的累积死亡率(P<0.05);而饲料中添加15 mg/kg褪黑素则可显著提高血清补体4(C4)含量(P<0.05),显著降低血清谷丙转氨酶(ALT)活性(P<0.05);饲料中添加褪黑素对血清谷草转氨酶(AST)活性无显著影响(P>0.05)。3)与对照组相比,饲料中添加10和15 mg/kg褪黑素可显著提高青鱼肝脏超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性、还原型谷胱甘肽(GSH)含量以及总抗氧化能力(T-AOC)(P<0.05),且饲料中添加10 mg/kg褪黑素还可显著提高肝脏过氧化氢酶(CAT)活性(P<0.05),但饲料中添加褪黑素对肝脏谷胱甘肽还原酶(GR)活性无显著影响(P>0.05)。4)与对照组相比,饲料中添加10 mg/kg褪黑素可显著提高青鱼肠道胰蛋白酶活性(P<0.05),饲料中添加褪黑素对肠道淀粉酶和脂肪酶活性无显著影响(P>0.05)。5)青鱼肝脏IGF-Ⅰ和HSP70mRNA表达水平随饲料中褪黑素添加量的增加而呈先升高后降低的变化趋势,当饲料中褪黑素添加量为10 mg/kg时,这2种基因的mRNA表达水平达到最高。由此可见,当饲料中添加适量褪黑素时可促进青鱼幼鱼的生长,提高其非特异性免疫力和抗氧化能力,并增强肠道胰蛋白酶活性;当饲料中褪黑素添加量为9.28 mg/kg时,体质量为6.41~34.83 g的青鱼幼鱼可获得最大WGR。

不同pH和离子强度条件下青鱼(Mylopharyngodon piceus)肌浆蛋白IgG/IgE结合能力的变化

该文以青鱼为研究对象,研究肌浆蛋白在不同p H和离子强度条件下,Ig G/Ig E结合能力及结构的变化。通过间接酶联免疫吸附测定(indirect-enzyme linked immunosorbent assay,间接ELISA)、十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecylsulphate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)和免疫印迹试验测定肌浆蛋白Ig G/Ig E结合能力的变化,并结合二级结构变化、表面疏水性变化和内源荧光值变化所反映的蛋白结构改变来分析其变化机理。结果表明,p H从4. 0升高到7. 0会小幅度降低肌浆蛋白Ig G/Ig E结合能力,二级结构中α-螺旋增加而不规则卷曲减少,表面疏水性大幅减小且色氨酸疏水基向极性环境暴露。离子强度从0增加到1. 0则不会对Ig G/Ig E结合能力产生显著影响。由此可知,肌浆蛋白Ig G/Ig E结合能力变化与其构象表位有关,初步判断主要由二级结构的改变引起,但仍需要进一步研究。

发酵植物蛋白复配替代豆粕对青鱼生长、免疫、抗氧化及肠道菌群结构的影响

本试验研究发酵植物蛋白复配替代豆粕对青鱼生长、免疫、抗氧化及肠道菌群结构的影响。以不同比例(1∶1和2∶1)发酵棉籽粕和发酵菜籽粕分别替代基础饲料中0(对照组)、50%、75%的豆粕,配制5种等氮等能试验饲料,饲喂初始体重(6.04±0.18)g的青鱼,试验期8周。结果显示:各组之间生长性能、形体指标及体组成均无显著差异(P>0.05)。各组之间血清补体3、丙二醛、白蛋白含量以及溶菌酶活性均无显著差异(P>0.05)。50%替代组的血清补体4含量均显著高于其他各组(P<0.05),75%替代组的血清免疫球蛋白M含量均显著高于对照组(P<0.05)。各组之间肝胰腺超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、碱性磷酸酶活性和总抗氧化能力以及总胆固醇含量均无显著差异(P>0.05)。各组之间肠道α-淀粉酶和脂肪酶活性无显著差异(P>0.05),发酵棉籽粕和发酵菜籽粕以1∶1比例替代75%豆粕组的肠道胃蛋白酶活性显著高于对照组(P<0.05)。在门水平上,青鱼肠道微生物优势菌门为变形菌门(Proteobacteria)、厚壁菌门(Firmicutes)、梭杆菌门(Fusobacteria)和浮霉菌门(Planctomycetes);在属水平上,青鱼肠道微生物优势菌属为气单胞菌属(Aeromonas)、鲸杆菌属(Cetobacterium)、青枯菌属(Ralstonia)和邻单胞菌属(Plesiomonas)。各组之间肠道主要菌群的相对丰度均无显著差异(P>0.05)。综上所述,本试验条件下,高比例(75%)发酵植物蛋白替代豆粕没有造成青鱼肝胰腺的损伤以及肠道菌群结构的改变,甚至提高了血清部分免疫指标活性及肠道胃蛋白酶活性,且发酵棉籽粕和发酵菜籽粕的复配比例也不会对青鱼生长性能、形体指标、体组成、肝胰腺抗氧化指标和肠道菌群结构产生显著影响。

大容量自动投喂系统在青鱼池塘养殖中的应用

现代水产养殖业的发展正向着规模化、集约化、高效生态安全的方向发展。然而,目前水产养殖行业面临着养殖装备落后、水体污染逐年加重、养殖自动化和智能化管控水平低、劳动力不足等一系列问题。为促进渔业转型升级和生产方式转变,本研究开展大容量自动投喂系统在青鱼池塘养殖的研究。结果显示,自动投喂组池塘水中总氮、总磷、硝态氮、氨氮、亚硝态氮和化学需氧量在试验后期均低于人工投喂组。自动投喂组青鱼规格、产量、产值均高于人工投喂组,而饲料系数低于人工投喂组。自动投喂组每667 m^(2)人工成本比人工投喂组低2400元,平均总成本比人工投喂组高1032.2元,平均利润比人工投喂组高5631.5元。因此,与传统投喂方法相比,自动投喂更有利于池塘水质控制,提高饲料利用效率及生产效率,降低人力、饲料和环境成本,实现水产养殖投喂的精准化和智能化。

青鱼ST251型高致病性嗜水气单胞菌的毒力及药物敏感性

为确定引起湖北省荆州市某养殖场青鱼(Mylopharyngodon piceus)出血病的病原和致病性,采用传统病原分离方法,从患病青鱼(体质量为1.0~1.5 kg)中分离到一株优势菌QAB5,对其形态特征、生理生化特性、16S rRNA基因序列、多序列位点分型(MLST)和胞外酶活性进行分析,并进行毒力基因检测、人工感染试验、生物被膜形成能力测定和药敏试验。结果表明:经生理生化分析和分子鉴定,分离菌株QAB5为嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila),且有较强的致病性,为ST251型,含有溶血活性、蛋白酶活性和脂肪酶活性,毒力基因型为aer+hly+ahp+ast+alt+act+;用菌株QAB5人工感染健康青鱼,患病青鱼出现反应迟钝、腹部出血、肛门红肿、肠道出血等与自然发病青鱼相似的症状;测定菌株QAB5的半致死浓度(LD 50)为4.4×106 CFU/mL,为高致病性的强毒株;菌株QAB5对卡那霉素、氯霉素等13种抗生素敏感,对氨苄西林、利福平等4种抗生素耐药;中药全蝎、乌梅和丁香对菌株QAB5有明显的体外抑制效果。研究表明,分离菌株QAB5为一株ST251型嗜水气单胞菌强毒株,是引起本次青鱼出血病的病原菌,推荐使用环丙沙星、四环素等高敏感抗菌药物,并结合生物被膜清除剂进行小剂量精准施治。

青鱼生态养殖池塘浮游生物群落结构初探

为了解水质综合调控措施下,秋季、春季青鱼生态养殖池塘中浮游生物群落结构特征与环境因子的关系,于2022年9—11月和2023年3—5月,对3口青鱼生态养殖池塘的浮游生物及水质理化指标进行监测。结果表明,在秋季,青鱼生态养殖池塘中,共检出浮游植物6门24属,共检出浮游动物21种。其中,原生动物6种、轮虫8种、枝角类1种、桡足类2种,浮游植物平均密度和生物量分别为3.76×10~8cells/L和6.72 mg/L,浮游动物平均密度和生物量分别为2.72×10~4ind./L和0.48 mg/L,优势种有卷曲纤维藻、小球藻、双头针杆藻、啮蚀隐藻、束丝藻、薄铃虫、拟铃壳虫、湖沼砂壳虫等;在春季,青鱼生态养殖池塘中,共检出浮游植物5门21属,共检出浮游动物7种。其中,原生动物1种、轮虫5种、枝角类1种、桡足类1种,浮游植物平均密度和生物量分别为3.69×10~8cells/L和6.41 mg/L,浮游动物平均密度和生物量分别为0.49×10~4ind./L和0.19 mg/L,优势种有小球藻、卷曲纤维藻、双头针杆藻、短小舟形藻、分歧锥囊藻、拟铃壳虫、长刺异尾轮虫等。

胆汁酸对青鱼生长性能、抗氧化、非特异性免疫及脂质代谢的影响

试验研究饲料中不同添加量的胆汁酸对青鱼生长性能、抗氧化、非特异性免疫及脂质代谢指标的影响。选取360尾初始体重(6.66±0.10)g的青鱼幼鱼,随机分为4组,每组3个重复,每个重复30尾。对照组、试验1组、试验2组和试验3组分别在基础饲料中添加0、100、200、300 mg/kg的胆汁酸。试验期80 d。结果表明,与对照组相比,试验2组和试验3组青鱼增重率和特定生长率显著提高(P<0.05),饲料系数显著降低(P<0.05);试验2组和试验3组青鱼血清中总抗氧化能力、谷胱甘肽还原酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性显著提高(P<0.05)。试验2组青鱼血清超氧化物歧化酶活性显著高于其他各组(P<0.05),试验3组青鱼血清丙二醛含量显著低于对照组(P<0.05)。饲料中添加胆汁酸可显著提高青鱼血清总蛋白和补体4的含量(P<0.05),试验2组和试验3组青鱼血清溶菌酶活性和补体3含量显著高于对照组(P<0.05);试验3组青鱼血清总胆固醇和甘油三酯含量显著低于对照组(P<0.05)。研究表明,饲料中添加200~300 mg/kg的胆汁酸可提高青鱼的生长性能,增强机体非特异性免疫及抗氧化能力,对脂质代谢也具有一定的调节作用。