青鳉干扰素的克隆与表达分析

干扰素(interferons,IFNs)是一类能够诱导细胞进入抗病毒状态的分泌蛋白,是脊椎动物抵抗病毒入侵的第一道屏障。本实验以青鳉(Oryzias latipes)为实验材料,通过polyⅠ:C诱导处理,克隆得到一个Ⅰ型干扰素c DNA序列,命名为Ol IFNβ。Ol IFNβ基因含有4个外显子和3个内含子,具有典型的Ⅰ型干扰素的结构特点,如含有2个半胱氨酸残基和m RNA非稳定序列。氨基酸序列比对分析显示,Ol IFNβ与三刺鱼IFN1同源性最高,达54%。系统进化树分析表明,Ol IFNβ与三刺鱼干扰素的亲缘关系最近,且和其它鱼类Ⅰ型干扰素聚成一个分支。荧光定量PCR分析表明,Ol IFNβ表达具有时间和组织特异性。PolyⅠ:C诱导处理后,随着处理时间的延长Ol IFNβ表达量逐渐上调,6 h后达到最高,随后逐渐下调。其中脾脏变化最为显著,鳃和肠次之。本研究显示,Ol IFNβ在青鳉先天免疫应答过程中起重要作用,为将来进一步探索Ol IFNβ的功能提供了帮助。