青龙衣醇提物对人白血病K562细胞的基因芯片表达的影响

目的:了解青龙衣醇提物对人白血病K562细胞的基因芯片表达的影响,在基因水平探讨青龙衣醇提物抑制K562细胞增殖的作用机制。方法:制备青龙衣醇提物,在37℃恒温、5%CO2培养K562细胞。采用浓度为0.1、0.5、2.5、12.5、62.5 mg/m L的青龙衣醇提物分别处理K562细胞;采用倒置显微镜与荧光显微镜观察处理后K562细胞的形态改变,并采用流式细胞仪检测K562细胞周期。提取细胞的总RNA,生成c DNA,构建基因芯片,并检测基因表达的结果。结果:经过12.5 mg/m L青龙衣醇提物处理后,通过流式细胞仪测定细胞周期:G1期细胞占23.8%,S期占59.9%,G2期占16.3%;而对照组的细胞周期:G1期占22.9%,S期占72.4%,G2期占4.7%;经青龙衣醇提物处理的细胞中,G2期的细胞比例上升,S期细胞比例下降。管家基因为β-actin,构建的基因芯片的特异性、均一性与重复性均良好。表达上调的基因有chk1;下调的基因有cyclin B1、cyclin E1、cyclin D1、cdk4、cdk2、E2F1、PCNA、VEGF、DNA-TopoⅠ、DNA-PK、jnk和mcl-1。结论:青龙衣醇提物通过调控与细胞周期、血管生成、细胞凋亡有关的基因表达,抑制K562细胞的细胞周期进程,从而表现出抗肿瘤作用。