大豆磷酸烯醇式丙酮酸磷酸酯酶研究 Ⅲ、非专一性酸性磷酸酯酶的纯化与特性

从大豆叶片中分离能水解磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)的酸性磷酸酯酶,通过硫酸胺分部(20%～50%饱和度)沉淀、DEAE纤维素层析、刀豆球蛋白琼脂糖凝胶亲和层析将酶纯化了422.47倍,活性达78.16U/mg蛋白。该酶对PEP专一性不强,Km为1.09mmol/L(PEP),最适pH5.8,在pH4.8～7.0范围内及60℃以下较稳定,水解PEP的活性被Mg2+、Mn2+激活,F、Cu2+、Zn2+、PO43、MoO42及3磷酸甘油酸(3PGA)、三磷酸腺苷ATP等代谢物抑制,受异柠檬酸等有机酸影响较小。

水解酶的非专一性催化在有机合成中的应用

介绍了水解酶非专一性催化的机理,对水解酶的非专一性催化在单元、两步和一锅三组分的有机反应中,特别是加成反应、Aldol反应和Knoevenagel反应中的研究与应用进行了总结和概述.

从“非专一性”角度看《牡丹亭》“杜柳爱情”

爱情是《牡丹亭》最为人们称道的主题,但杜丽娘和柳梦梅之间的爱情却长期缺乏一种“专一性”。通过对杜柳爱情“非专一性”的分析,以及对“情”之内涵的再解读,可以发现《牡丹亭》重点刻画的对象并非通常认为的爱情本身,而是促使爱情产生和形成的原因。这一点是正确理解《牡丹亭》的节点所在,由此可避免许多将《牡丹亭》视为一单纯爱情故事的误读,对理解其内涵和价值大有裨益。

壳聚糖酶解的研究

低聚水溶性壳聚糖具有许多独特的生理活性。本文对壳聚糖酶解制备低聚水溶性壳聚糖的研究进展进行了介绍 。

绿狐尾藻区域适应性与生态竞争力研究

绿狐尾藻(Myriophyllum elatinoides)湿地具有高效去除水体中有机物和氮磷的功能,其生物质产量高并可以作为优质畜禽饲料,是实现农业面源污染治理与氮磷污染物资源化利用有机结合的可靠途径,但对其生长适应性和生态竞争力尚缺乏研究。本研究依托我国亚热带(南方)和温带(华北)地区的11个中国科学院野外试验站开展了系列试验。结果表明:绿狐尾藻在中国亚热带地区可以良好生长并顺利越冬,但在中国北方温带地区则不能自然越冬;风浪、水深、蓝藻爆发以及香蒲(Typha orientalis)、莲(Nelumbo nucifera)、双穗雀稗(Paspalum distichum)、辣蓼(Polygonum hydropiper)、水竹叶(Murdannia triquetra)等本土水生植物竞争等多种因素均会对绿狐尾藻的正常生长产生显著抑制作用;绿狐尾藻存在非专一性天敌,主要包括斜纹夜蛾(Spodoptera litura)、造桥虫(Anomis flava)等食叶性昆虫,其主要爆发期在夏季7—8月的高温阶段。因此,从生长适应性、群落竞争力、天敌危害等方面来看,初步认为绿狐尾藻在我国大陆地区大范围自然扩张的可能性十分有限。

水解酶在二乙基锌与芳香醛加成反应中的应用(英文)

报道了水解酶催化二乙基锌与芳香醛的加成反应,对反应条件进行了优化.在最适条件(嗜热酯酶APE1547为酶源,反应温度40oC,氯仿为溶剂,4-Cl-苯甲醛为底物)下,加成反应生成的光学活性醇产率最高达78%,ee值最高可达56%.通过实验结果和分子动力学分析对可能的反应机理进行了推测.本研究进一步拓展了酶的非专一性.

Sn-2位富含棕榈酸甘油三酯的酶法制备研究

以棕榈硬脂为原料,以非专一性脂肪酶Novozym 435作催化剂,将棕榈酸作为酰基供体与棕榈硬脂进行酸解反应,制备Sn-2位富含棕榈酸的甘油三酯,为下一步制备母乳脂肪替代油脂提供原料。首先,通过单因素实验确定了各因素的范围,再应用Box-Behnken中心组合实验设计建立二次多项数学模型,进行响应面分析。结果表明,当棕榈酸与棕榈硬脂质量比1.09∶1,反应时间9.9h,反应温度54.7℃,加酶量21.9%时,反应所得甘油三酯中Sn-2位棕榈酸可达到60.59%,可满足下一步制备母乳脂肪替代油脂的要求。

浓缩甜酒曲降解壳聚糖的研究

对非专一性混合酶浓缩甜酒曲降解壳聚糖进行了研究,探讨了温度、底物浓度、pH值和酶解时间等对浓缩甜酒曲降解壳聚糖的影响.结果表明,脱乙酰度为90%的壳聚糖较易被浓缩甜酒曲水解,其水解反应的最适温度为50℃、pH值为3.6,低速摇床振荡对水解有利,在壳聚糖水解初期,溶液黏度迅速下降,80 min后水解速率逐渐减慢,至110 min后溶液黏度下降已很缓慢,酶解液的黏度随壳聚糖及浓缩甜酒曲浓度的增加而增大,当糖酶比为10∶1时,水解2 h时,溶液黏均相对分子质量μ≈2.492×103,水解2 h后酶解液黏度变化不大.

α-糜蛋白酶催化合成二吡咯甲烷衍生物

以α-糜蛋白酶为生物催化剂,以体积分数40%的乙醇水溶液为反应介质,50℃下,通过吡咯与醛的串联反应,合成了一系列二吡咯甲烷衍生物。当对硝基苯甲醛1 mmol,吡咯4 mmol,α-糜蛋白酶20 mg,该反应在50℃时反应3 h即可完成,具有较好的底物适应性,且产率最高可达69%,也无需氮气保护。

飞蝗解毒酶系活力测定方法

飞蝗Locusta migratoria是重要的农业害虫,代谢抗性是飞蝗主要的农药抗性机制之一。与代谢抗性相关的解毒酶系主要有:非专一性酯酶系(Non-specficesterases,ESTs)、谷胱甘肽S-转移酶系(Glutathione S-transferases,GSTs)和细胞色素P450单加氧酶系(Cytochrome P450 monooxygenases,P450s),解毒酶系活力的测定是研究飞蝗农药代谢机制的重要途径。本文详细介绍了飞蝗解毒酶系的测定方法,为蝗虫及其他昆虫解毒酶系的测定提供参考。

碱性蛋白酶催化合成喹唑啉酮衍生物（英文）

以碱性蛋白酶为生物催化剂,通过二羰基化合物和邻氨基苯甲酰胺间的缩合反应合成了喹唑啉酮类衍生物.乙醇作为环保型溶剂,可以减少反应对环境的影响.碱性蛋白酶具有催化活性高,环保,来源广泛,操作简单等优点.本方法仅使用2000 U碱性蛋白酶作为催化剂,即可获得各种喹唑啉酮衍生物,且具有良好至优异的产率.

α-糜蛋白酶催化合成β-脲基巴豆酸酯

β-脲基巴豆酸酯是合成6-甲基嘧啶二酮衍生物及3,4-二氢嘧啶二酮衍生物的重要中间体,在生物制药中有着广泛的应用.由于酶具有绿色、安全、高效的催化特性,采用α-糜蛋白酶为生物催化剂,以N,N-二甲基甲酰胺为反应介质,37℃条件下,通过1,3-二羰基化合物和脲的缩合反应,合成了一系列β-脲基巴豆酸酯类化合物.

二化螟dsRNA降解酶基因的克隆与表达分析

为解析二化螟Chilo suppressalis体内参与降解双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)的关键核酸酶的功能,克隆二化螟不同的非专一性核酸酶(non-specific nuclease,NUC)基因,并对这些基因进行生物信息学分析和组织定量表达分析,同时对dsRNA降解酶(dsRNA degrading nuclease,dsRNase)活力的组织分布进行研究。结果显示,共克隆获得5个NUC基因,其中有4个编码dsRNase亚家族基因(CsdsRNase1~CsdsRNase4)和1个编码Endonuclease G亚家族基因(CsEndoG)。5个NUC基因的开放阅读框核苷酸序列长度范围为828~1338 bp,编码275~445个氨基酸残基,其分子量大小为31.68~49.57 kD,预测等电点为5.48~9.42。CsdsRNase1和CsdsRNase2含有信号肽序列,两者相似度极高,且与家蚕Bombyx mori和斜纹夜蛾Spodoptera litura中具有dsRNA降解酶活力的dsRNase同源聚类;CsdsRNase1和CsdsRNase2均在二化螟中肠中高表达,这与中肠组织超高的dsRNA降解酶活力分布模式一致,表明这2个基因可能是中肠参与降解dsRNA的关键核酸基因。二化螟体内存在多条dsRNase基因序列,尤其是中肠中高表达的CsdsRNase1和CsdsRNase2可影响二化螟体内dsRNA的稳定性,从而影响RNA干扰效率。