江苏省海门市猪A型口蹄疫非免疫抗体调查与分析

近年来,我国部分地区连续发生多起猪A型口蹄疫疫情,给畜牧业健康发展带来了隐患。针对当前猪A型口蹄疫防控形势,在海门市选择了部分规模猪场、种畜场、屠宰场,采集种猪、仔猪、育肥猪的血清,开展A型口蹄疫非免疫抗体调查。结果显示:调查猪群中猪A型口蹄疫非免疫抗体均呈阴性,调查猪群中未发现猪A型口蹄疫疫情。

羊驼非免疫重链单域抗体库的构建和鉴定

本研究旨在通过构建羊驼非免疫重链单域抗体库,完成抗体库多样性的鉴定,为进一步筛选抗原特异性重链抗体奠定基础。我们从未经免疫的羊驼外周血中分离外周血单个核细胞(PBMC),抽提RNA后,用RT-PCR方法特异性扩增羊驼重链抗体可变区(VHH)片段;并采用两步连接方法将重链抗体可变区片段与噬菌粒载体pCANTAB5E连接获得重组子,多次电转感受态大肠杆菌TG1后获得VHH抗体基因库;并采用稀释计数法测定抗体库库容量,随机挑取克隆测序验证抗体库多样性。结果显示,我们所构建的羊驼非免疫重链单域抗体库的库容量为1.5×109,随机克隆测序验证多样性良好,独立克隆所占比例为80%,并显示出和人源抗体较高的同源性。上述结果表明,我们已经成功构建获得大容量的羊驼非免疫重链单域抗体库,为进一步筛选抗原特异性重链抗体奠定基础。