病毒和非典型细菌在哮喘发病机理中的作用

哮喘是一种多相的疾病，仅在美国就有超过12，000，000人患病。虽然哮喘的临床表现很好鉴别，但它的发病机理却不易确定。病毒和非典型细菌例如肺炎支原体和肺炎衣原体在哮喘发病中的作用是有争议的。有证据显示在哮喘的发病和进展中有感染性因素存在。另一方面。

非高渗透压培养基培养细菌L型的研究

本文用青霉素在高渗透压的L型培养基上,诱导金黄色葡萄球菌和白喉杆菌形成L型后,直接种入无血清亦无渗透压保护剂的非高渗透压培养基中,传代培养和观察其形态、培养及代谢特性。结果表明,金黄色葡萄球菌L型和白喉杆菌L型在非高渗透压培养基中,传代培养后,不能在高渗透压的L型培养基上生长形成菌落。和丧失了对多种糖发酵的能力。

非结核分枝杆菌病诊治六十年

人类发现非结核杆菌(nontuberculous mycobacteria,NTM)病已有60多年,对其诊治水平不断提高。20世纪90年代,通过随机对照多中心研究,发现大环内酯为核心的方案对鸟分枝杆菌复合群疾病有较好疗效。几乎同一时期,以分子生物学为基础的菌种鉴定取代了生化实验为基础的菌种鉴定,使医疗机构广泛开展NTM病的诊治成为可能。近年,该领域也出现较多进步,如实现了临床标本分枝杆菌的快速菌种鉴定,发现再感染是NTM病治疗失败的重要原因,以及发现阿米卡星脂质体用于鸟分枝杆菌复合群肺病的价值。基于结核病诊治的经验,未来的NTM诊治要不断探索核心药物敏感性快速诊断方法,实现短疗程的NTM病治疗新方案。

非结核分枝杆菌与其他呼吸道病原微生物合并感染的研究进展

随着人口老龄化程度逐年上升,结构性肺病患者不断增多,非结核分枝杆菌肺病(non-tuberculous mycobacteria pulmonary disease,NTM-PD)的发病率呈现增高趋势。大多数NTM-PD患者发病时已存在基础肺病,常同时合并感染多种病原微生物,进一步增加了NTM病诊治和疗效判定的难度,合并感染成为导致NTM-PD治疗成功率低和复发率高的重要原因之一。作者通过检索相关文献,对NTM合并感染的研究进展进行综述,以丰富临床工作者对NTM-PD患者肺部合并感染的认识,研究临床干预策略。

2021—2023年武汉地区非结核分枝杆菌肺病患者特征分析

目的:对武汉地区呼吸道非结核分枝杆菌(NTM)的分离与耐药情况,以及确诊为NTM肺病患者的临床特征进行分析,为疾病的防治提供参考。方法:采用回顾性研究方法,搜集2021年3月至2023年10月于武汉市肺科医院就诊的疑似肺部分枝杆菌感染住院患者作为研究对象,共计8619例。研究对象年龄均≥15岁,呼吸道样本(包括痰、诱导痰、支气管肺泡灌洗液)分枝杆菌病原学(分枝杆菌培养)阳性和(或)菌种鉴定为NTM。收集所有研究对象的病史、临床特征、影像学表现、临床诊断及治疗等资料。对NTM菌株分离情况、人口学特征及耐药情况进行统计;将确诊为NTM肺病患者,按胞内分枝杆菌(胞内组)、脓肿分枝杆菌(脓肿组)及堪萨斯分枝杆菌感染(堪萨斯组)分为三组,比较各组研究对象的基本情况、临床症状、影像学表现、基础疾病及合并肺部疾病等方面的情况。结果:8619例研究对象中有629例的临床分离菌株鉴定为NTM菌株,NTM分离率为7.30%。共分离653株NTM菌株,主要菌种包括胞内分枝杆菌398株(60.95%)、脓肿分枝杆菌138株(21.13%)、鸟分枝杆菌41株(6.28%)、堪萨斯分枝杆菌41株(6.28%)。确诊为NTM肺病的510例患者中,女性297例(58.24%),主要临床症状为咳嗽(71.96%,367/510)、咳痰(51.76%,264/510)、咯血(26.67%,136/510);影像学表现主要为斑片影(61.57%,314/510)、结节影(65.49%,334/510)、支气管扩张影(79.02%,403/510)、空洞影(40.98%,209/510);基础疾病主要为贫血(24.12%,123/510)和低蛋白血症(24.90%,127/510);合并肺部疾病主要有肺气肿肺大疱(18.63%,95/510)、慢性阻塞性肺疾病(17.84%,91/510)。三组NTM肺病为胞内组332例、脓肿组115例、堪萨斯组35例。胞内组、脓肿组、堪萨斯组女性分别占55.12%(183/332)、75.65%(87/115)、17.14%(6/35),差异有统计学意义(χ^(2)=39.534,P<0.001);胞内组、脓肿组、堪萨斯组平均年龄分别为(63.60±10.67)岁、(60.60±10.26)岁、(53.30±13.20)岁,差异有统计学意义(F=15.724,P<0.001);胞内组、脓肿组、堪萨斯组吸烟者占比[分别为23.19%(77/332)、12.17%(14/115)、42.86%(15/35);χ^(2)=15.623,P<0.001]、饮酒者占比[分别为10.54%(35/332)、4.35%(5/115)、22.86%(8/35);χ^(2)=10.079,P=0.006]差异均有统计学意义。胞内组、脓肿组、堪萨斯组的支气管扩张影发生率[分别为78.31%(260/332)、90.43%(104/115)、54.29%(19/35);χ^(2)=22.345,P<0.001]、空洞影发生率[分别为42.77%(142/332)、29.57%(34/115)、68.57%(24/35);χ^(2)=17.534,P<0.001]差异均有统计学意义。胞内组、脓肿组、堪萨斯组慢性阻塞性肺病发病率[分别为18.67%(62/332)、15.65%(18/115)、37.14%(13/35);χ^(2)=8.222,P=0.016]、肺曲霉病发病率[分别为6.93%(23/332)、1.74%(2/115)、11.43%(4/35);χ^(2)=7.016,P=0.030]差异均有统计学意义。鸟分枝杆菌和胞内分枝杆菌对克拉霉素、阿米卡星、利奈唑胺耐药率分别为0、0、23.53%(4/17)和3.14%(5/159)、6.92%(11/159)、13.21%(21/159);堪萨斯分枝杆菌对克拉霉素、阿米卡星、利奈唑胺、莫西沙星、利福平及利福布汀耐药率均为0,对环丙沙星耐药率为43.75%(7/16);脓肿分枝杆菌对克拉霉素、阿米卡星、利奈唑胺、头孢西丁耐药率分别为7.02%(4/57)、1.75%(1/57)、43.86%(25/57)、8.77%(5/57)。结论:武汉地区疑似肺部分枝杆菌感染住院患者呼吸道分离NTM菌种主要以胞内分枝杆菌、脓肿分枝杆菌和堪萨斯分枝杆菌为主;除堪萨斯分枝杆菌外,其他NTM对常用抗结核药物均有较高耐药率;胞内分枝杆菌肺病、脓肿分枝杆菌肺病和堪萨斯分枝杆菌肺病患者性别分布、影像学表现及合并症均存在一定的差异。

基于BACTEC MGIT 960培养的结核分枝杆菌与非结核分枝杆菌混合感染检测方法的研究

目的:探讨结核分枝杆菌复合群(Mycobacterium tuberculosis complex,MTBC)和非结核分枝杆菌(nontuberculous mycobacteria,NTM)混合感染的检测方法,为临床诊治混合感染提供参考依据。方法:使用脓肿分枝杆菌、鸟分枝杆菌、胞内分枝杆菌3种NTM和MTBC标准菌株(H37Rv)各制备3种不同初始浓度(10^(-2)mg/ml、10^(-4)mg/ml和10^(-6)mg/ml)的菌液,将每个浓度的NTM与MTBC采用9种不同比例(NTM标准菌株与H37Rv按照1∶99、5∶95、10∶90、20∶80、50∶50、80∶20、90∶10、95∶5和99∶1)混合制成81种混合感染标本。3种感染模型分别为脓肿分枝杆菌和H37Rv、鸟分枝杆菌和H37Rv、胞内分枝杆菌和H37Rv。经BACTEC MGIT 960培养,采用MPB64抗原检测、对硝基苯甲酸(PNB)生长试验、荧光PCR熔解曲线法和恒温扩增实时荧光法4种方法对培养液进行检测。结果:3种混合感染模型的81份标本均在34 d内报告阳性。其中,MPB64抗原检测阳性3份(3.7%,3/81);PNB生长试验阳性78份(96.3%,78/81);荧光PCR熔解曲线法仅检出相应的NTM 64份(79.0%,64/81),仅检出MTBC 3份(3.7%,3/81),同时检出相应的NTM和MTBC 14份(17.3%,14/81);恒温扩增实时荧光法检出MTBC 67份(82.7%,67/81)。结论:临床标本经BACTEC MGIT 960培养,仪器报告阳性后,用MPB64抗原检测和PNB生长试验初判,若有NTM生长,建议采用分子生物学方法鉴定NTM,同时用单一检测MTBC核酸的方法对培养液进行检测,以免MTBC漏检。

细菌L型对化学因素敏感性研究

本文研究了伤寒沙门氏菌、葡萄球菌及白喉棒状杆菌L型对化学消毒剂、细菌生长抑制剂、酸和碱的敏感性,并与其亲代细菌型作了比较。结果表明:细菌L型对表面活性剂、酚剂、重金属盐、脱水剂、卤素及氧化剂的敏感性明显(P<0.05)或不明显(P>0.05)增加,伤寒沙门氏菌L型对龙胆紫、玫瑰色酸、胆盐及酸的敏感性增高,葡萄球菌及白喉棒状杆菌L型对龙胆紫、玫瑰色酸、胆盐及酸的敏感性降低,伤寒沙门氏菌及白喉棒状杆菌L型对碱敏感性降低。

从医院使用的新洁尔灭溶液中分离出细菌L型的报告

本文报道,作者采用高渗和等渗牛肉汤试管及平板培养法,从某医院正在使用的新洁尔灭器械浸泡液中分离出4株细菌L型,其中金黄色葡萄球菌L型1株,表皮葡萄球菌L型2株,类白喉杆菌L型1株。上述细菌经形态观察,细胞壁染色,返祖鉴定等一系列细菌L型鉴定程序;并通过电镜观察,菌体细胞图像分析。其结果均提示,细菌L型与原菌之间存在明显差异。作者认为,新洁尔灭器械浸泡液,消毒灭菌的不彻底性,是造成术后感染的重要因素。

广州市非结核分枝杆菌临床分离株菌种鉴定及药物敏感性试验结果分析

目的对广州市非结核分枝杆菌(NTM)临床分离株进行菌种鉴定与药物敏感性试验(简称“药敏试验”).为临床诊断和治疗NTM病提供依据。方法从2016年广州市胸科医院行分枝杆菌分离培养的1250份标本中搜集培养阳性的717株临床分离株.采用水溶性对硝基苯甲酸(PNB)和嗟吩-2-竣酸W(TCH)对其进行培养.以鉴别MTB与NTM.通过多靶位基因聚合酶链反应(PCR)测序.对PNB和TC'H培养确定为NTM的菌株进一步行菌种鉴定.并采用最低抑菌浓度法(MIC)检测98株NTM对18种抗结核药物的耐药性。结果717株分枝杆菌中,检出106株NTM菌株,检出率为14.4%;其中103株传代成功.传代率为97. 2%(103/106)。经NTM菌种鉴定?按照构成比高低依次为脓肿分枝杆菌[34.0%(35/103)]、胞内分枝杆菌[25. 2%(26/103)]、马赛分枝杆菌[20. 4%(21/103)]、鸟分枝杆菌[9. 7%(10/103)]、堪萨斯分枝杆菌[5. 8%(6/103)],偶发分枝杆菌[1.9%(2/103)],以及1株缓黄分枝杆菌、1株猪分枝杆菌和1株阿加普尔分枝杆菌[均占0.9%(1/103)]。98株NTM菌株的药敏试验结果显示,敏感者前3位依次为阿米卡星[93. 9%(92/98)]、克拉霉素[91. 8%(90/98)]和阿奇霉素[71. 4%(70/98)].耐药者前3位依次为利福平[89. 8%(88/98刀、左氧氟沙星[83. 7%(82/98)]和亚胺培南[77. 6%(76/98)]。并且NTM不同菌种对部分药物的耐药性存在种间差异。结论广州市NTM的检出率高于我国其他地区.流行的菌种以脓肿分枝杆菌和胞内分枝杆菌为主;克拉霉素和阿米卡星是临床治疗NTM患者的优选抗生素?应重视对利福平和左氧氟沙星的耐药性。

四种细菌L型的形态定量分析

用抗生素或臭氧的方法诱导出四种细菌和Ｌ型后，用图像分析技术定量检测Ｌ型多形性，表面积、最大直径、周长、等效圆直径和形状因子，并作比较分析。四种细菌Ｌ型及Ｌ型中的巨形体在上述５项形态学参数指标上除形状因子外均较细菌型明显增大，而形状因子参数明显小于细菌型。细菌Ｌ型之间在形态学指标上的差异有显著性（ｐ＜０．０５）。形态定量分析能准确客观地反映形态定性观察的结果以及细菌Ｌ型的形态变异程度，为细菌Ｌ型的形态定量分析提供依据。

细菌L型和一些肠道杆菌的电动力学研究

用电泳法研究了细菌Ｌ型及其亲代细菌型和一些肠道杆菌的电动力学特征。伤寒杆菌Ｌ型和葡萄球菌Ｃｏｗａｎ株Ｌ型的等电点与其亲代细菌型不同；普通大肠杆菌、普通变形杆菌的等电点与革兰氏阳性菌相似；白喉杆菌Ｌ型和葡萄球菌Ｗｏｏｄ株Ｌ型的等电点与其亲代细菌型无显著差异。电泳可使结晶紫染色的细菌脱去结晶紫，亦可使染色后经乙醇处理的普通大肠杆菌和伤寒杆菌脱色并在电场作用下泳动，但不能使染色后经乙醇处理的葡萄球菌脱色或泳动，痢疾杆菌、伤寒杆菌和肠道致病性大肠杆菌的等电点不同于普通大肠杆菌和普通变形杆菌；在一定ｐＨ范围内，电泳可将其分开。电泳电流具有杀菌作用，细菌Ｌ型和细菌型对电泳电流的敏感性无差异。电泳电流的杀菌作用与电压高低成正比，与缓冲液的ｐＨ值无明显关系。

细菌L型与宿主内环境的相互作用

细菌L型是指细菌在某些不利因素的作用下发生变异而形成的细胞壁缺陷型。细菌L型可用青霉素等作用细胞壁的诱导剂在体外诱导形成,但也可发生在动物和人体内。近年许多报导证明细菌L型与败血症、迁延性感染和慢性炎症性疾患有较密切的关系。

细菌L型败血症(附12例报告)

细菌L型是指细菌失去部分或全部细胞壁的一种细胞壁缺陷形态。许多细菌在体内外各种因素作用下都可能形成细菌L型,此型在临床感染性疾患中广泛存在。本院16例血细菌培养阴性又进行L型培养12例阳性(75%),其中金黄色葡萄球菌L型最多(75%)。细菌L型败血症,其临床症状、体征及实验室检查均不典型,治疗需较长吋间,反复调整用药才能治愈。

L型细菌的诱导、培养、返祖及临床应用——883增菌培养基的研制及使用

本文对L型细菌的诱导、培养、返祖及临床应用方面进行研究,并用自制的L型细菌培养基(883培养基)在66份血、尿标本及51例前列腺液标本中培养出L型细菌分别为29.4％,30.7％及52.9％,与Kagan氏、857、863培养基对比效果基本相同。

慢性前列腺炎与细菌L型

本文用自行研制的883L型增菌培养基对51例次慢性前列腺炎患者的前列腺液作L型培养,结果检出L型细菌27例,占52.9％,经返祖和药物敏感性测定,证明本组L型细菌特性与其他来源的L型细菌基本相符,提示慢性前列腺炎的病因、病理机制可能与细菌L型的感染相关。

12例非结核分枝杆菌性脊柱炎手术治疗患者临床特征及治疗转归

目的:分析非结核分枝杆菌(non-tuberculous mycobacterial,NTM)性脊柱炎手术治疗患者临床特征,以提高临床诊治水平。方法:采用回顾性研究方法,参照入组标准收集并分析2023年1月至2024年9月首都医科大学附属北京胸科医院、青海省第四人民医院、哈尔滨医科大学附属哈尔滨市胸科医院骨科收治的12例经手术治疗的NTM性脊柱炎患者临床资料,包括患者人口学特征、临床症状及体征、病变部位、入院前诊断及治疗、入院后实验室检查、影像学检查、药物治疗方案、手术治疗方式及预后和随访情况。结果:12例NTM性脊柱炎患者均有1种或多种基础疾病或致免疫力低下的疾病;从发病到确诊的病程范围为12~24个月,其中,外院行抗结核治疗1年及以上者8例、6~9个月者4例。3例患者行MGIT 960液体培养,仅1例患者后续行TB-DNA检测;5例患者行NGS检测;2例患者行病理DNA诊断;2例患者行NGS+病理DNA定性。最终菌种鉴定到8种NTM,以鸟分枝杆菌复合群、胞内分枝杆菌和脓肿分枝杆菌复合群为主。术前抗NTM治疗6周者7例,8周者4例,仅1例合并肺部感染者治疗4周。4例首次手术患者,其中3例行单纯后路手术、1例因骨质破坏严重行单纯前路手术;8例再次手术患者,其中5例行前后路联合手术、1例行单纯前路手术、2例行窦道切除术,但有3例术后行3期手术或单纯窦道切除术。术后继续术前抗NTM方案治疗及康复训练8~12个月,随访2年后8例痊愈、4例有窦道或残腔(其中1例经7次手术后放弃治疗)。结论:NTM性脊柱炎多有明确职业接触史,感染菌种丰富,多因缺乏菌种鉴定而导致长期误诊误治,病程迁延,病理和分子生物学检测可明确诊断。手术治疗是病程迁延、脊柱损害严重患者的主要治疗手段,治愈率约为70%,再手术风险高,故应术前明确致病菌、精准诊断,并及时进行足量且有针对性的抗NTM治疗,以降低患者术后发生窦道及脓肿加重的风险,保证术后良好结局。

涂片阳性/Xpert阴性结果早期预测临床标本中存在非结核分枝杆菌的可靠性

目的:评估涂片阳性/Xpert阴性结果用于早期预测临床标本中存在非结核分枝杆菌(non-tuberculous mycobacteria,NTM)的可靠性。方法:回顾性分析河南省胸科医院2019年1月至2024年4月新发肺部疾病就诊且涂片显微镜检查报告阳性结果的患者和分离培养鉴定出NTM的患者的实验室检查资料。分析涂片阳性/Xpert阴性结果作为患者分离鉴定出NTM预测指标的准确性。对研究期间培养鉴定为NTM的患者,分析其获得涂片阳性/Xpert阴性结果的比例,了解此预测指标的敏感度;分析涂片阳性的结核病患者中出现Xpert检测阴性结果的比例,了解预测指标的特异度。结果:在纳入的涂片阳性患者中,8.22%(202/2458)的患者同期开展的Xpert检测结果为阴性。在148例涂片阳性/Xpert阴性结果且具有同期培养鉴定结果的患者中,138例(93.24%)培养鉴定出NTM,表明涂片阳性/Xpert阴性结果早期预测临床标本中存在NTM具有良好的准确性。增加γ-干扰素释放试验阴性结果的附加条件后,预测的准确性达到100.00%(73/73),但预测敏感度大幅降低(37.61%,44/117)。在分离鉴定为NTM病的患者中,涂片阳性/Xpert阴性结果预测NTM存在的敏感度为39.78%(109/274),而在涂阳结核病患者中,该指标的特异度为99.56%(2256/2266)。结论:在疑似结核病患者中,涂片阳性/Xpert阴性结果是一项早期、可靠的NTM分离预测指标。