大鼠坐骨神经慢性压迫损伤后脊髓感觉神经元发生非凋亡性细胞程序性死亡

目的:观察大鼠坐骨神经慢性压迫损伤后脊髓背角感觉神经元是否发生非凋亡性细胞程序性死亡(paraptosis)。方法:成年雄性SD大鼠20只,随机分为正常组,手术组。手术组建立慢性压迫性损伤(CCI)模型,又分为术后3d、7d、14d组。实验动物以4%多聚甲醛PBS液灌注内固定,取与坐骨神经相应的腰4～腰6节段脊髓,于2.5%戊二醛中固定,透射电镜观察左侧脊髓背角浅层神经元超微结构并摄片。结果:电镜下,术后3d组腰4～腰6节段脊髓左侧背角浅层神经元形态学典型变化为:细胞肿胀,胞膜完整,胞浆内大量空泡,核结构基本正常,符合paraptosis形式程序性细胞死亡表现;7d和14d组神经元形态变化:细胞皱缩、密度增大,核带增多及染色质浓聚贴附于核膜,符合凋亡表现。结论:坐骨神经损伤3d腰4～腰6节段脊髓背角浅层神经元发生了parapto-sis形式程序性细胞死亡。

Paraptosis——一种新的细胞死亡方式

人们一直认为细胞死亡有两种方式—细胞坏死和凋亡。但最新研究表明还存在一种非凋亡性细胞程序性死亡 ,命名为paraptosis。Paraptosis在形态学上与凋亡不同 ,不具有凋亡的典型特征 ,即缺少染色质的新月形凝集和凋亡小体。它是以胞浆空泡的形成为特征 ,在整个过程中胞浆和胞核密度增加 ,线粒体肿胀 ,但细胞膜和细胞器仍保持完整 ;无“阶梯状DNA区带” ,ISEL ,TUNEL标记为阴性。paraptosis过程中有RNA及蛋白质合成 ,并为caspase非依赖性的。目前已知 paraptosis与许多生理和病理现象相关。

蓝舌病毒湖北株致人肝癌Hep-3B细胞和人肺腺癌A549细胞死亡机制的研究

目的探讨蓝舌病毒湖北株(BTV-HbC3)致人肝癌Hep-3B和人肺腺癌A549细胞死亡的方式及其作用机制。方法观察细胞感染BTV-HbC3的病变效应;原位末端标记(TUNEL)法检测细胞感染BTV-HbC3是否出现凋亡;激光打描共聚焦显微镜检测荧光标记的细胞核及内质网变化;萤光照度仪检测病毒诱导细胞caspase-3/7、caspase-8和caspase-9的活性变化。结果BTV-HbC3感染Hep-3B细胞后有明显的病变效应,大量细胞凋亡,细胞核染色质边聚,内质网大量空泡形成,caspase- 3/7活性升高,caspase-8和caspase-9未升高;BTV-HbC3感染A549细胞后有明显病变效应,仅见零星凋亡细胞,内质网有空泡形成,细胞核未见染色质边聚,caspase-3/7和caspase-9活性升高,caspase-8未升高。结论BTV-HbC3主要通过细胞内内质网途径诱导Hep-3B细胞凋亡而发挥其抑瘤作用,而对人肺腺癌的抑瘤作用则是通过诱导A549细胞的非凋亡性程序性死亡来实现的。