蛋白酪氨酸磷酸酶非受体型11对人类果蝇相关基因钾通道的调控作用

目的由人类果蝇相关基因(Human ether-a-go-go-related gene,HERG)编码的钾通道电流的改变可引起长QT综合征,HERG钾通道受到蛋白酪氨酸激酶和磷酸酶的调节,且蛋白酪氨酸磷酸酶非受体型12(protein tyrosine phosphatase non-receptor type 12,PTPN12)具有负性调控HERG钾通道的作用。文中旨在探讨PTPN11对HERG钾通道电生理特性的影响。方法应用PCR技术,构建携带pc DNA3.1-PTPN11-EGFP的质粒;利用脂质体Lipofectamine2000,将各质粒转染进入HEK293细胞;应用膜片钳技术,分别检测对照组(pc DNA3.0-HERG-EGFP单独转染HEK293细胞)、PTPN11过表达组(pc DNA3.0-HERG与pc DNA3.1-PTPN11-EGFP共转染HEK293细胞)以及抑制剂组(pc DNA3.0-HERG与pc DNA3.1-PTPN11-EGFP共转染HEK293细胞基础上加入蛋白酪氨酸磷酸酶抑制剂正钒酸钠)的HERG钾通道的脉冲电流最大电流密度、尾电流最大电流密度及去激活时间常数Tau等。结果成功构建了pc DNA3.1-PTPN11-EGFP质粒。在荧光显微镜下可观察到各组中带有增强型绿色荧光蛋白的质粒表达。膜片钳检测发现,PTPN11过表达组的脉冲电流最大电流密度[(31.85±5.54)p A/p F]、尾电流最大电流密度[(73.82±11.31)p A/p F]较对照组[(45.92±3.18)、(108.43±7.98)p A/p F]均降低(P<0.05);而抑制剂组脉冲电流、尾电流最大电流密度[(48.08±4.32)、(120.06±8.02)p A/p F]较对照组与PTPN11过表达组均明显增大(P<0.05)。PTPN11过表达组去激活时间常数Tau[(622.16±46.49)ms]较对照组[(440.70±49.49)ms]明显升高(P<0.05)。结论 PTPN11对心脏HERG钾通道的电流具有负性调控作用,而酪氨酸磷酸酶抑制剂能逆转PTPN11过表达的HERG钾通道电流的减小,这一发现为应用HERG钾通道的某些调控酶作为治疗长QT综合征的治疗思路提供了一定的理论基础。

非受体型蛋白酪氨酸磷酸酶2与核因子-κB在糖尿病牙周炎牙周组织破坏中的作用研究

目的观察糖尿病牙周炎条件下小鼠牙周组织中非受体型蛋白酪氨酸磷酸酶2(PTPN2)、核因子-κB(NF-κB)的表达与牙周组织破坏的关系。方法将4周龄健康雄性C57BL/6J小鼠随机分为正常对照组(N组)、单纯牙周炎组(P组)及糖尿病牙周炎组(DP组),每组6只。采用口内接种牙龈卟啉单胞菌法在P组建立牙周炎模型,采用腹腔注射链脲佐菌素结合高脂高糖食物与口内接种牙龈卟啉单胞菌法在DP组建立糖尿病牙周炎模型。各组动物于P、DP组末次细菌接种4周后处死,通过体视显微镜观察牙槽骨形态和附着丧失面积,采用苏木精-伊红(HE)染色法观察牙周附着丧失的高度,免疫组织化学法检测牙周组织中PTPN2与NF-κB的表达强度。结果 P、DP组牙槽骨的附着丧失面积和牙周附着丧失高度均高于N组(P<0.05),PTPN2的表达量低于N组(P<0.05),而NF-κB的表达量则高于N组(P<0.01)。结论在糖尿病牙周炎的发生发展过程中,NF-κB可能有促进作用,而PTPN2可能有抑制作用;PTPN2的表达减少可能导致NF-κB表达增强而加重牙周组织破坏。

非受体蛋白质酪氨酸磷酸酶14在胆管癌组织的表达及临床意义

目的检测非受体蛋白质酪氨酸磷酸酶14(PTPN14)蛋白在胆管癌组织中的表达,探讨PTPN14与胆管癌临床病理特征间的关系,并分析PTPN14的表达与胆管癌患者预后的关系。方法用免疫组织化学染色检测胆管癌组织及癌旁组织中PTPN14蛋白的表达;利用统计学分析软件分析PTPN14蛋白与胆管癌患者临床病理特征之间的关系;利用生存分析曲线分析PTPN14蛋白与胆管癌患者术后5年生存率的关系。结果 PTPN14蛋白在胆管癌组织中的阳性表达率为49.1%,在癌旁组织中的阳性表达率为75.4%;PTPN14蛋白的表达与胆管癌临床分期及分化程度密切相关,与胆管癌患者性别、年龄无显著相关性;PTPN14蛋白阳性表达的胆管癌患者术后5年生存率显著高于阴性表达的患者。结论 PTPN14在胆管癌组织低表达,且PTPN14低表达与胆管癌的良性临床病理特征及总体生存率呈负相关。

蛋白酪氨酸磷酸酶非受体型12负性调控心脏HERG钾通道电流

目的研究蛋白酪氨酸磷酸酶非受体型12(PTPN12)对心脏HERG钾通道电流的调控作用。方法(1)质粒构建和基因转染:PCR技术构建各种质粒,应用脂质体将各种质粒转染HEK293细胞,经G418筛选获得稳定表达的细胞株;(2)应用抗PTPN12抗体进行Western blotting分析检测PTPN12的表达;(3)细胞电生理检测:应用膜片钳技术检测单独表达HERG组(HEK293/HERG细胞)、PTPN12过度表达组(将pCDNA3.1-PTPN12-RFP转染HEK293/HERG细胞)、PAO处理组(PTPN12/HERG组基础上加入抑制剂PAO)、herg突变组(将pCDNA3.1-PTPN12-RFP转染HEK293/HERGY327A-Y700A-Y845A细胞株)的HERG钾通道电流。结果(1)成功构建herg突变质粒和pCDNA3.1-PTPN12-RFP质粒,并获得稳定表达的细胞株;(2)共转染pCDNA3.1-PTPN12-RFP质粒的HEK293/HERG细胞在荧光显微镜下可观察到PTPN12-RFP在细胞中的表达,Western blotting可检测到PTPN12的表达;(3)PTPN12过度表达组脉冲电流密度明显低于对照组(P<0.01),PAO处理组和herg突变组电流密度明显高于PTPN12/HERG组(P<0.01)。结论 PTPN12对心脏HERG钾通道电流具有明显负性调控作用,其可能机制是PTPN12减弱了HERG钾通道酪氨酸磷酸化程度。这一发现有助于更深刻理解HERG钾通道调控机制和长QT综合征发病机制。

蛋白酪氨酸磷酸酶非受体型12与心脏HERG钾通道相互作用

目的鉴定HERG钾通道的相互作用蛋白,并进一步研究该相互作用蛋白对HERG钾通道的功能调控。方法 (1)应用酵母双杂交技术,构建含有HERG氨基末端的诱饵载体,将转染有诱饵载体的酵母菌AH109与预转染有人类cDNA文库的Y187酵母菌进行双杂交,初步筛选出HERG的相互作用蛋白;(2)应用免疫共沉淀技术进一步验证酵母双杂交所筛选蛋白与HERG之间的相互作用;(3)GSTpull-down分析:应用GST-HERGT-NT融合蛋白和谷光苷肽-琼脂糖4B小球从大鼠心肌裂解物中沉淀蛋白质,应用抗PTPN12抗体对沉淀物进行WesternBlot分析;(4)免疫荧光组织化学分析:应用抗PTPN12和抗HERG的抗体和荧光标记二抗显示PTPN12及HERG的亚细胞定位,应用激光共聚焦显微镜观察。结果 (1)酵母双杂交筛选发现蛋白酪氨酸磷酸酶非受体型12(Proteintyrosinephosphatasenonreceptortype12,PTPN12)与HERG氨基末端存在相互作用;(2)免疫共沉淀分析发现抗HERG的抗体能够沉淀HERG和PTPN12复合物;(3)GSTpull-down分析发现GST-HERG-NT能够将PTPN12沉淀,而GST蛋白则不能沉淀PTPN12;(4)免疫荧光组织化学分析发现PTPN12和HERG两个蛋白共定位的地方主要出现在细胞膜。结论 PTPN12与HERG氨基末端相互作用,这一发现将有助于更加透彻地理解HERG通道特性多样性的分子基础和LQTS的发病机理。

蛋白酪氨酸磷酸酶非受体型22基因rs2488457位点多态性与溃疡性结肠炎的相关性

目的:本实验探讨蛋白酪氨酸磷酸酶非受体型22基因(protein tyrosine phosphatase nonreceptor type22,PTPN22)启动子区-1123G/C及外显子10区+788G/A多态性与湖北汉族溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的相关性,研究UC患者肠黏膜PTPN22mRNA表达.方法:收集165例UC患者和300名健康对照者,采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测PTPN22基因-1123G/C和+788G/A位点多态性.实时定量PCR方法测定肠黏膜PTPN22mRNA表达.结果:UC患者PTPN22基因-1123G/C位点"CC+CG"基因型和C等位基因频率显著高于正常对照组(66.7%vs53.3%,P=0.005,OR=1.75,95%CI:1.18-2.60;41.5%vs33.5%,P=0.015,OR=1.41,95%CI:1.07-1.86),且与广泛性结肠炎相关(P=0.029).与缓解期UC患者比,活动期UC患者肠黏膜PTPN22mRNA的水平显著增高(P=0.005).UC患者PTPN22基因-1123G/C基因型与肠黏膜PTPN22mRNA的水平无关.UC组+788G/A基因型频率与对照组比,差异无统计学意义.结论:PTPN22基因启动子区-1123G/C位点C等位基因频率与湖北汉族UC相关,活动期UC患者肠黏膜PTPN22mRNA水平增高,提示PTPN22基因在UC遗传免疫发病机制中可能起重要作用.

高水平蛋白酪氨酸磷酸酶非受体型22．6mRNA的表达在克罗恩病中的临床意义

目的：检测蛋白酪氨酸磷酸酶非受体型22（PTPN22）基因选择性剪切亚型PTPN22．6 mRNA 在克罗恩病（CD）患者外周血单核细胞（PBMCs）中的表达水平，研究 PTPN22．6 mRNA 表达状况与 C 反应蛋白（CRP）和红细胞沉降率（ESR）的关系及其临床意义。方法采用实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）方法分析50例 CD 患者和35例对照组 PBMCs 中PTPN22．6 mRNA 表达。分别采用速率散射比浊法和全自动红细胞沉降系统分析仪测定 CRP 和ESR 水平。结果与对照组比较，CD 患者 PBMCs 中 PTPN22．6 mRNA 的表达量升高（P ＜0．05）。活动期 CD 患者 PBMCs 中 PTPN22．6 mRNA的表达量显著高于缓解期 CD 患者（P ＜0．05）。CD 患者 PBMCs 中 PTPN22．6 mRNA 表达量与 CRP 和 ESR 浓度呈正相关（r ＝0．356，P ＜0．01；r ＝0．512， P ＜0．01）。疾病行为与 CD 患者PBMCs中 PTPN22．6 mRNA 表达水平相关，梗阻型 CD 患者 PBMCs中 PTPN22．6 mRNA 表达量显著高于非狭窄非穿透型和穿透型 CD 患者（P ＜0．05）。结论CD 患者 PBMCs 中 PTPN22．6 mRNA 表达水平升高，高水平 PTPN22．6 mRNA 的表达不仅与梗阻型疾病行为和疾病活动状态相关，而且与 CRP 和 ESR 呈正相关，提示 PTPN22．6可能在 CD 免疫学发病中起重要作用。

酪氨酸蛋白磷酸酶非受体6型蛋白对胶质瘤干细胞成瘤的影响

目的通过研究酪氨酸蛋白磷酸酶非受体6型蛋白(PTPN6)在胶质瘤干细胞(GSC)成瘤方面发挥的作用,探索新的肿瘤治疗相关标志物或治疗靶点,从而为临床胶质瘤的靶向治疗提供依据。方法利用Sun Brain数据库的数据,对PTPN6在正常脑组织和多形性胶质母细胞瘤(GBM)组织中的表达水平进行分析,比较二者表达水平的差异,并利用TCGAGBMLGG数据库比较不同级别胶质瘤组织中PTPN6表达水平的差异;根据TCGA-GBM数据库以及Rembrandt数据库的数据进一步分析PTPN6表达水平的高低与脑胶质瘤患者预后之间的关联。通过低氧培养条件对GSC及其分化后的肿瘤细胞进行培养,对比分化前和分化后的GSC细胞中PTPN6表达水平的差异;在GSC中敲低PTPN6,观察敲低后对肿瘤球形成的影响;利用免疫荧光技术检测GSC中PTPN6的细胞定位。结果PTPN6基因在GBM组织中的表达水平(mRNA)要高于正常脑组织(P<0.01);PTPN6 mRNA表达水平随胶质瘤恶性程度的增高而升高(Ⅲ级与Ⅱ级比较,P<0.05;Ⅳ级与Ⅱ级比较,P<0.01;Ⅳ级与Ⅲ级比较,P<0.01);PTPN6 mRNA高表达患者的生存期显著低于低表达患者(P<0.01)。低氧培养的GSC中PTPN6表达水平明显提高,并且增加水平与低氧时间呈正相关;在GSC中敲低PTPN6显著抑制了肿瘤球的形成;PTPN6在GSC中定位于细胞核。结论PTPN6在GSC中的高表达是胶质瘤细胞生长的一个相关因素,提示高水平PTPN6有利于GSC成瘤。

妊娠期糖尿病患者胎盘组织胰岛素受体底物1、蛋白酪氨酸磷酸酶1B表达及意义

目的探讨妊娠期糖尿病(GDM)患者胎盘组织胰岛素受体底物1(IRS-1)、蛋白酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B)表达及意义。方法选择GDM孕妇49例(GDM组),正常足月妊娠孕妇50例(正常组)。两组均于孕24~28周检测空腹胰岛素(FINS)、空腹血糖(FPG),采用胰岛素稳态模型评估法(HOMA)计算胰岛素抵抗指数(HOMAIR)、胰岛β细胞功能(HOMA-β%)、胰岛素敏感指数(HOMA-ISI);两组分娩后取胎盘组织,采用免疫组化ABC法检测胎盘组织IRS-1、PTP 1B。结果 GDM组FPG、FINS、HOMA-IR均高于正常组(P均<0.01),HOMA-ISI、HOMA-β%均低于正常组(P均<0.01)。正常组胎盘组织IRS-1阳性表达率为100%,GDM组为63.26%,两组比较P<0.01。正常组胎盘组织PTP 1B阳性表达率为56.00%,GDM组为91.83%,两组比较P<0.01。GDM患者胎盘组织PTP 1B与IRS-1表达呈负相关(r=-4.85,P<0.01);IRS-1与HOMA-IR呈负相关(r=-0.552,P<0.01),与HOMA-β%和HOMA-ISI无相关性(P>均0.05);PTP 1B与HOMA-IR呈正相关(r=0.563,P<0.01),与HOMA-β%和HOMA-ISI无相关性(P>均0.05)。结论 GDM患者胎盘组织IRS-1表达降低,PTP 1B表达升高,且均与HOMA-IR相关;胰岛素信号传导系统中信号蛋白表达异常可能与GDM发病有关。

尖锐湿疣组织中蛋白酪氨酸磷酸酶-1和表皮生长因子受体的表达

目的:探讨蛋白酪氨酸磷酸酶-1(SHP-1)和表皮生长因子受体(EGFR)在尖锐湿疣组织中的表达及意义。方法:采用免疫组化SP法检测30例尖锐湿疣患者组织和20例正常人包皮组织中SHP-1和EGFR的表达。结果:①尖锐湿疣组织中SHP-1的阳性表达率与正常对照组相比差异无统计学意义(P>0.05);但阳性表达强度显著低于正常对照组(P<0.01);②尖锐湿疣组织中EGFR的阳性表达强度显著高于正常对照组(P<0.01);③尖锐湿疣组织中SHP-1和EGFR的表达呈负相关。结论:SHP-1和EGFR在尖锐湿疣组织中异常表达,可能与尖锐湿疣细胞的过度增殖有关。

蛋白酪氨酸磷酸酶受体D（PTPRD）在食管鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨蛋白酪氨酸磷酸酶受体（PTPRD）基因表达与食管鳞状细胞癌（ESCC）患者临床病理特征及预后的关系。方法应用免疫组织化学SP染色法分析236例ESCC标本中PTPRD基因产物表达情况和定位，收集所有患者的临床病理资料并进行了术后5年随访用于统计分析。结果统计分析显示PTPRD在ESCC组织中的表达明显低于在正常食管鳞状上皮中的表达（22．0％VS57．2％，P=0．000）。而且PTPRD的表达与分化程度、浸润深度和有淋巴结转移有关。PTPRD的表达强度在分化好的组高于分化差的组（P=0．013），在浸润浅的组高于浸润深的组（P=0．025），在无淋巴结转移组高于有淋巴结转移组（P=0．019）。PTPRD的表达强度与性别、年龄无关（P=0．170，0．787）。随访资料生存分析显示PTPRD表达强的患者预后较好。结论PTPRD与ESCC的发生发展和预后密切相关，可能是ESCC发生相关的新的潜在的抑癌基因，其表达水平可作为估计临床预后的一个可能参考指标。

蛋白酪氨酸磷酸酶H型受体的生物学功能及其在肿瘤中的研究进展

蛋白酪氨酸磷酸酶H型受体(protein tyrosine phosphatase H receptor,PTPRH)基因是一种编码胃癌相关蛋白的基因,通过翻译后COOH-末端区域的酪氨酸磷酸化修饰发挥其生物学功能。PTPRH在多种肿瘤中呈异常表达,其生物学功能与肿瘤的发生、发展及预后密切相关。

酪氨酸磷酸酶蛋白受体σ在成年大鼠视皮层可塑性再激活过程中的作用

背景研究表明硫酸软骨素蛋白多糖（CSPGs）是促进视皮层可塑性终止的关键因子，而最新发现酪氨酸磷酸酶蛋白受体盯（PTPa）是CSPGs发挥抑制性作用的受体，但PTPσ及其下游分子是否参与成年大鼠视皮层可塑性的再激活尚不明确。目的观察成年大鼠视皮层可塑性再激活后PTPσ、神经元周围网络（PNNs）及其下游分子N—cadherin和B—catenin的表达变化。方法选择健康SPF级LongEvans大鼠54只，按出生后周龄分为出生后1、3、5、7、9周组，各组分别有6、6、6、24、12只大鼠，其中出生后7周组12只大鼠双眼上下睑缝合14d建立视皮层可塑性再激活模型。采用免疫组织化学法观察视皮层中PTPσ、PNNs的表达情况，采用实时荧光定量PCR（real—timeQ—PCR）法分别观察PTPσ、N—cadherin和B—cateninmRNA随大鼠发育以及成年大鼠视皮层可塑性再激活后的表达变化。结果出生后9周组大鼠视皮层PTPcrmRNA的表达量明显高于正常出生后7周组和同龄双眼形觉剥夺组大鼠，差异均有统计学意义（t=1．965、3．526，P〈0．01）。大鼠视皮层中PTPσ的阳性表达定位于细胞膜、细胞质及轴突，出生后9周组大鼠视皮层Ⅱ-Ⅲ层、Ⅳ层及V～Ⅵ层PTPσ阳性细胞密度明显高于正常出生后7周组大鼠（t=24．593、23．444、13．556，P〈0．01）及双眼形觉剥夺组大鼠，差异均有统计学意义（t=44．111、43．000、16．556，P〈0．01）。出生后9周组大鼠视皮层Ⅳ层、V～Ⅵ层PNNs阳性细胞密度值较出生后7周组明显增加，差异均有统计学意义（t=1．926，P〈0．01；t=1．370，P〈0．05），而Ⅱ～Ⅲ层PNNs阳性细胞密度值比较差异无统计学意义（t=0．889，P〉0．05）。双眼形觉剥夺组大鼠视皮层Ⅱ-Ⅲ层、Ⅳ层PNNs阳性细胞密度较出生后9周组大鼠明显下降，差异均有统计学意义（t=2．556、4．185，P〈0．01），但V～Ⅵ层的PNNs阳性细胞密度值差异无统计学意义（t=1．037，P〉0．05）。与出生后1周组大鼠比较，出生后3、5、7、9周组大鼠视皮层组织中的N—cadherinmRNA表达量明显降低，差异均有统计学意义（t=28．932、28．988、27．083、28．908，P〈0．01），出生后7周组大鼠N—cadherinmRNA表达量升高，与出生后3、5、9周组比较差异均有统计学意义（t=1．848、1．904、1．825，P〈0．01）。出生后9周组和同龄双眼形觉剥夺组比较，N—cadherinmRNA表达差异无统计学意义（t=0．072，P〉0．05）。出生后1周组大鼠视皮层β—cateninmRNA表达明显高于其他各组，差异均有统计学意义（t=3．918、3．534、2．645、4．652，P〈0．01），双眼形觉剥夺组B—cateninmRNA表达量较出生后9周组明显升高，差异有统计学意义（t=0．570，P〈0．01）。结论PTP盯、PNNs及其下游通路分子β—catenin参与了成年大鼠视皮层可塑性再激活的过程。

蛋白酪氨酸磷酸酶非受体型6对心脏HERG钾通道的调控作用

目的旨在阐明蛋白酪氨酸磷酸酶非受体型6(tyrosine protein phosphatase non-receptor type 6,PTPN6)是否对心脏HERG钾通道电流具有调控的作用。方法聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)技术构建pcDNA3.1-PTPN6-EGFP质粒;应用脂质体Lipofectamine2000将各种质粒转染进入HEK293细胞;应用膜片钳技术分别检测对照组(pcDNA3.0-HERG单独转染HEK293细胞)、PTPN6过度表达组(pcDNA3.0-HERG和pcDNA3.1-PTPN6-EGFP共转染HEK293细胞)以及抑制剂组(pcDNA3.0-HERG和pcDNA3.1-PTPN6-EGFP共转染HEK293细胞,并加入蛋白酪氨酸磷酸酶抑制剂正钒酸钠)的HERG钾通道的脉冲电流最大电流密度、尾电流最大电流密度以及去激活时间常数Tau等。结果成功构建了pcDNA3.1-PTPN6-EGFP质粒,测序结果表明基因序列正确,荧光显微镜下可观察到HEK293细胞中绿色荧光蛋白表达;全细胞膜片钳电生理检测发现,PTPN6过度表达组的脉冲电流最大电流密度[(36.42±2.76)pA/pF]、尾电流最大电流密[(84.73±7.18)pA/pF]均较对照组[(45.92±3.18)pA/pF、(108.43±7.98)pA/pF]显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);而抑制剂组脉冲电流最大电流密度、尾电流最大电流密度[(47.10±2.96)pA/pF、(110.52±7.87)pA/pF]均较PTPN6过度表达组明显增大,差异有统计学意义(P<0.05);PTPN6过度表达组失活时间常数Tau[(785.59±90.05)ms]较对照组[(440.7±49.49)ms]明显延长,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 PTPN6过度表达能使HERG钾通道的电流密度降低,且这一作用能被酪氨酸磷酸酶抑制剂逆转,提示PTPN6能通过催化HERG钾通道去磷酸化而发挥负性调控HERG钾通道电流的作用。

蛋白酪氨酸磷酸酶受体J在非小细胞肺癌中的研究进展

非小细胞肺癌(NSCLC)是肺癌的常见类型,随着现代医学技术的发展,癌症的诊断和治疗已进入“精准医学”的发展阶段,然而肺癌患者5年生存率依然很低。蛋白酪氨酸磷酸化参与肿瘤发生发展过程,蛋白酪氨酸磷酸酶受体J(PTPRJ)作为酪氨酸磷酸酶家族中的一员,通过对蛋白的去磷酸化作用抑制NSCLC发病的多种机制,包括抑制肿瘤细胞的增殖、迁移、调控肿瘤发生的上游信号通路等,是新的肿瘤抑制因子。同时,在临床上,PTPRJ具有独立预测NSCLC患者死亡风险的能力,与患者肿瘤分期和临床特征相关,是NSCLC预后评估和治疗的新工具。

蛋白酪氨酸磷酸酶在非小细胞肺癌组织中的表达及与吸烟指数的关系

目的探讨蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及与吸烟指数的关系。方法我院收治的NSCLC患者60例(病例组),同期在我院健康体检者60例(健康对照组),同期我院治疗的肺部良性疾病患者60例(肺部良性疾病组),采用Western印迹法检测各组组织中PTP水平。采用调查表对患者吸烟量进行调查,根据吸烟指数将病例组分为A组(23例)、B组(20例)、C组(17例),比较三组PTP相对表达量及吸烟指数,分析病例组PTP相对表达量与吸烟指数相关性。结果三组间PTP相对表达量及吸烟指数比较,差异均有统计学意义(P<0.05);吸烟指数与PTP相对表达量呈明显正相关关系(rs=0.786,P<0.05)。结论 PTP在NSCLC中高表达,且与吸烟指数明显正相关,临床可以通过检测PTP了解患者病情,通过控制吸烟量降低发病风险或者减轻病情。

脂肪非典型钙黏蛋白4及O型蛋白酪氨酸磷酸酶受体与胃癌预后的关系研究

目的分析脂肪非典型钙黏蛋白4(FAT4)及O型蛋白酪氨酸磷酸酶受体(PTPRO)与胃癌预后的关系。方法收集112例胃癌患者的胃癌组织及正常胃组织(距肿瘤≥5 cm),对比不同组织中FAT4及PTPRO表达情况,分析影响胃癌预后的危险因素。结果正常胃组织中FAT4及PTPRO阳性表达率均高于胃癌组织,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。预后良好与预后不良患者TNM分期、分化程度、淋巴结转移情况、FAT4表达情况、PTPRO表达情况比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。非条件多因素Logistic回归模型分析显示,TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期、分化程度为低分化、淋巴结转移、FAT4阴性、PTPRO阴性均是胃癌患者预后不良的独立危险因素(P﹤0.05)。结论FAT4、PTPRO在胃癌组织中表达下调,为影响预后的独立危险因素,与预后密切相关。

蛋白酪氨酸磷酸酶非受体型23在肝细胞癌组织中的表达及其与TACE治疗疗效的关系

【目的】探讨蛋白酪氨酸磷酸酶非受体型23(PTPN23)在肝细胞癌(HCC)组织中的表达及其与经肝动脉化疗栓塞术(TACE)治疗疗效的关系。【方法】选择在两院接受救治的102例HCC患者作为研究对象,用蛋白质免疫印迹法检测HCC组织中PTPN23蛋白表达水平,用实体瘤疗效评价标准的修订标准(mRECIST)评价TACE治疗疗效。分析HCC组织中PTPN23水平与TACE治疗疗效的关系。【结果】102例HCC患者经TACE治疗后18例(17.65%)完全缓解,33例(32.35%)部分缓解,21例(20.59%)疾病稳定,30例(29.41%)疾病进展。治疗无效组(30例)患者PTPN23蛋白水平为0.80±0.18,明显低于治疗有效组(72例)的1.07±0.23,且差异有统计学意义(P<0.05)。PTPN23评价TACE治疗疗效的ROC曲线下面积、敏感度和特异度分别为0.819、70.00%和79.17%。多因素Logistic回归分析结果显示,肿瘤直径≥5cm、PTPN23<0.90是TACE治疗疗效的独立危险因素(P<0.05)。【结论】检测HCC组织中PTPN23表达水平有助于判断TACE治疗疗效,HCC组织中PTPN23表达水平低是影响TACE治疗疗效的独立危险因素。

非特异性抑制脊髓蛋白酪氨酸磷酸酶的活性对炎性疼痛的影响及其机制

目的研究脊髓蛋白酪氨酸磷酸酶(protein tyrosine phosphatases,PTPs)在炎性疼痛中的作用及其机制。方法昆明种♂小鼠,左后足底皮下注射完全弗氏佐剂(CFA),建立炎性疼痛动物模型;24 h后,鞘内给予PTPs抑制剂正钒酸钠(sodium orthovanadate,Na3VO4),观察对缩足阈值的影响;免疫印迹法检测正钒酸钠对损伤侧脊髓背角NMDA受体NR2B亚基第1472位酪氨酸(NR2B-Y1472)磷酸化水平的影响。结果鞘内注射正钒酸钠50、100和200 ng,虽然不影响正常动物的痛阈,但却能够剂量依赖性地缓解CFA诱发的机械性痛觉超敏,给药后30 min,炎性疼痛小鼠的缩足阈值从(0.24±0.07)g分别升高至(0.17±0.06)g(P>0.05,n=4)、(1.07±0.51)g(P<0.05,n=4)和(1.38±0.47)g(P<0.05,n=4);同时,CFA诱发的脊髓NR2B-Y1472的磷酸化也被正钒酸钠100 ng所完全阻断。结论 PTPs抑制剂正钒酸钠,通过降低脊髓NR2B的酪氨酸磷酸化,逆转炎性疼痛动物的NMDA受体功能亢进,产生明显的镇痛作用。

胰岛素受体底物和酪氨酸磷酸酶在2型糖尿病大鼠肌肉组织中的蛋白表达及其意义

目的研究2型糖尿病对胰岛素产生抵抗的分子机制。方法用Western杂交检测2型糖尿病模型(OLETF大鼠)肌肉组织内IRS-1及SH-PTP2的蛋白表达水平,并以同种属的Wistar大鼠做比较。结果OLETF糖尿病大鼠的空腹和餐后血糖水平较对照组明显增高(P<0.05);Western杂交显示OLETF大鼠肌肉组织内IRS-1蛋白表达较对照组减少(P<0.05);而SH-PTP2的蛋白表达则较对照组增加(P<0.05)。结论IRS-1及SH-PTP2蛋白表达的异常改变,可能是引起2型糖尿病产生胰岛素抵抗的分子机制之一。