非嗜酸性粒细胞哮喘诊治进展

哮喘是全球最常见的慢性呼吸系统疾病之一,非嗜酸性粒细胞哮喘(non-eosinophilic asthma,NEA)是哮喘的一种特殊表型,其气道炎症的特征是细胞浸润以中性粒细胞为主,缺乏嗜酸性粒细胞。NEA发病与环境及宿主因素均有关,例如职业暴露、环境污染、吸烟、感染和肥胖,上述风险因素单独或联合作用可以激活特定的细胞和分子途径,导致NEA发生。NEA的临床特征是对标准哮喘治疗的反应不佳,尤其是对吸入性皮质类固醇,导致疾病更严重和难以控制的哮喘。虽然NEA不是最普遍的哮喘表型,但重度哮喘患者中NEA比例高,其重要性不容忽视。本文就近年来NEA的流行病学现状、致病因素、发病机制和治疗现状作一综述。

新型抗嗜酸性粒细胞药物在哮喘中应用的研究进展

哮喘是当今世界上常见的慢性非传染性疾病之一,其特征是可变的气体阻塞,引起呼吸困难和喘息。嗜酸性粒细胞性气道炎症通常被视为慢性气道病变最具影响力的可诊断特点。在过去的十几年里,已研制了多种针对这种特征的单克隆抗体,主要包括抗白细胞介素5(IL-5)或IL-5受体α(美泊利珠单抗、瑞利珠单抗和贝那利珠单抗)、IL-13(来瑞组单抗和曲罗芦单抗)、IL-4受体α(度普利尤单抗)、免疫球蛋白E(奥马珠单抗)和抗胸腺基质淋巴生成素(特泽鲁单抗)的单克隆抗体。本文从哮喘的发病机制、新型抗嗜酸性粒细胞药物在哮喘治疗中的进展等方面进行综述。

血清嗜酸性粒细胞趋化因子、肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-17与儿童支气管哮喘预后的关系研究

目的探讨血清嗜酸性粒细胞趋化因子(CCL11)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-17(IL-17)与儿童支气管哮喘预后的关系。方法选取2020年8月—2022年8月在江苏大学附属医院儿科就诊的支气管哮喘患儿113例为观察组,另选取该院健康体检儿童50例为对照组;根据儿童哮喘控制测试(C-ACT)评分将观察组患儿分为预后不良组(C-ACT<20分)30例和预后良好组(C-ACT≥20分)83例。比较观察组与对照组的血清CCL11、TNF-α和IL-17水平;比较预后不良组和预后良好组患儿血清CCL11、TNF-α和IL-17水平;采用Spearman法分析儿童支气管哮喘血清CCL11、TNF-α和IL-17水平与C-ACT评分的相关性;采用多因素一般Logistic回归模型分析儿童支气管哮喘预后不良的危险因素。绘制受试者工作特征(ROC)曲线评估血清CCL11、TNF-α和IL-17对儿童支气管哮喘预后的预测效能。结果观察组患儿血清CCL11、TNF-α和IL-17水平均高于对照组(P<0.05);预后良好组患儿血清CCL11、TNF-α和IL-17水平均低于预后不良组(P<0.05)。Spearman相关性分析显示,支气管哮喘患儿血清CCL11、TNF-α和IL-17水平与C-ACT评分呈负相关(P<0.05)。多因素一般Logistic回归分析结果显示,血清CCL1水平高[O^R=17.711(95%CI:1.882,166.646)]、TNF-α水平高[O^R=13.998(95%CI:1.305,150.111)]和IL-17水平高[O^R=36.576(95%CI:1.264,1058.187)]均为儿童支气管哮喘预后不良的危险因素(P<0.05)。CCL11截断值为4.23 pg/mL时,预测儿童支气管哮喘预后不良的敏感性为93.3%(95%CI:0.768,0.983),特异性为90.4%(95%CI:0.819,0.957);TNF-α截断值为0.99μg/L时,预测儿童支气管哮喘预后不良的敏感性为90.0%(95%CI:0.735,0.979),特异性为84.3%(95%CI:0.747,0.914);IL-17截断值为68.31 pg/mL时,预测儿童支气管哮喘预后不良的敏感性为93.3%(95%CI:0.768,0.983),特异性为90.4%(95%CI:0.819,0.957);三者联合预测儿童支气管哮喘预后不良的敏感性为96.7%(95%CI:0.828,0.999),特异性为98.8%(95%CI:0.935,1.000)。结论支气管哮喘患儿血清CCL11、TNF-α和IL-17水平较高,与C-ACT评分呈负相关;预后不良与CCL11、TNF-α和IL-17水平升高有关;CCL11、TNF-α和IL-17联合预测哮喘预后效能较高。

嗜酸粒细胞型哮喘患儿外周血单个核细胞肿瘤坏死因子α诱导蛋白8样分子2 mRNA和M2巨噬细胞检测及意义

目的:检测嗜酸粒细胞型哮喘(EA)患儿外周血单个核细胞(PBMC)肿瘤坏死因子α诱导蛋白8样分子2(TIPE2)mRNA和M2巨噬细胞,并分析其意义。方法:回顾性收集EA患儿100例,根据糖皮质激素(ICS)治疗后2周内症状缓解情况,分为完全缓解组(78例)和部分缓解组(22例)。另选取体检健康儿童52例,设为对照组。比较三组临床资料[肺功能、血常规、呼出气一氧化氮(FeNO)]、TIPE2 mRNA、M2巨噬细胞占比、治疗前后免疫细胞[辅助性T细胞1(Th1)、辅助性T细胞2(Th2)]以及细胞因子[白细胞介素-2(IL-2)、γ-干扰素(IFN-γ)、IL-4、IL-13、精氨酸酶1(Arg-1)]。分析EA患儿预后的影响因素,并进行相关性分析。结果:完全缓解组和部分缓解组用力肺活量(FVC)、呼吸流量峰值(PEF)、第1秒用力呼气容积(FEV1)、嗜酸性粒细胞(EOS)、淋巴细胞(LYM)、白细胞(WBC)、FeNO与对照组比较差异有统计学意义(均P<0.05),但两组间上述指标比较差异无统计学意义(均P>0.05)。治疗前,完全缓解组与部分缓解组TIPE2 mRNA、M2巨噬细胞占比、M2/M1、IL-4、IL-13、IL-2、Arg-1高于对照组,Th1、Th1/Th2、IFN-γ低于对照组,且完全缓解组TIPE2 mRNA、M2巨噬细胞、Th1、IL-4、IL-13、Arg-1与部分缓解组比较差异有统计学意义(均P<0.05)。治疗后,完全缓解组和部分缓解组TIPE2 mRNA、M2巨噬细胞占比、M2/M1、IL-4、IL-13、IL-2、Arg-1降低,Th1、Th1/Th2、IFN-γ升高,且完全缓解组与部分缓解组比较差异有统计学意义(均P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,TIPE2 mRNA、M2巨噬细胞、IL-4、IL-13、Arg-1为EA患儿预后的影响因素(均P<0.05)。Pearson分析结果显示,M2巨噬细胞与IL-4、IL-13呈负相关,与TIPE2 mRNA、Arg-1呈正相关;TIPE2 mRNA与IL-4、IL-13的水平呈负相关(均P<0.05)。结论:EA患儿PBMC中TIPE2 mRNA与M2巨噬细胞呈高表达,均为影响预后的因素。

呼出气一氧化氮在嗜酸性粒细胞表型支气管哮喘患者的诊断及吸入糖皮质激素治疗效果评价中的价值

目的探讨呼出气一氧化氮(FeNO)在嗜酸性粒细胞(EOS)表型支气管哮喘的诊断及吸入糖皮质激素(ICS)治疗效果评价中的价值。方法选择2015年4月至2016年2月新乡医学院第一附属医院收治的支气管哮喘患者62例为哮喘组,另选择体检健康者62例为对照组。哮喘组患者根据诱导痰细胞计数分为EOS哮喘组(n=31)和非EOS哮喘组(n=31),其中EOS哮喘组根据疾病严重程度又分为轻度哮喘组(n=7)、中度哮喘组(n=13)和重度哮喘组(n=11)。哮喘组患者给予常规治疗(多索茶碱0.2 g静脉输液,每日2次;西替利嗪10 mg,每晚1次口服;孟鲁斯特10 mg,每晚1次口服;雾化吸入布地奈德2 mg和复方异丙托溴铵2.5 m L雾化溶液,每日2次),共7 d。分别于治疗前后检测患者的肺功能、哮喘控制测试(ACT)评分、FeNO水平及诱导痰EOS比例;对照组受试者检测FeNO水平。比较各组研究对象的FeNO水平及哮喘组患者的控制率,分析哮喘组FeNO水平与EOS比例的相关性。结果治疗前,对照组和哮喘组受试者FeNO水平分别为(9.57±6.61)、(30.23±8.91)ppb,对照组受试者FeNO水平显著低于哮喘组(t=7.414,P<0.05);EOS哮喘组和非EOS哮喘组患者FeNO水平分别为(59.62±29.04)、(18.20±11.33)ppb,非EOS哮喘组患者FeNO水平显著低于EOS哮喘组(t=6.568,P<0.05)。哮喘组患者的FeNO水平与EOS比例呈正相关(r=0.823,P<0.05)。非EOS哮喘组患者治疗前后FeNO水平比较差异无统计学意义(t=2.013,P>0.05)。EOS哮喘组患者治疗后FeNO水平低于治疗前(t=7.740,P<0.05);其中轻、中、重度哮喘组患者治疗后FeNO水平均低于治疗前(P<0.05)。EOS哮喘组患者的控制率为67.7%(21/31),高于非EOS哮喘组患者的22.6%(7/31)(χ~2=12.765,P<0.05)。轻、中、重度哮喘组患者的控制率分别为28.6%(2/7)、76.9%(10/13)、81.8%(9/11),轻度哮喘组患者的控制率低于中、重度哮喘组(χ~2=6.418、7.103,P<0.05);中度哮喘组与重度哮喘组患者的控制率比较差异无统计学意义(χ~2=0.087,P>0.05)。结论 FeNO水平能反映EOS支气管哮喘患者气道炎症程度,可用于EOS表型支气管哮喘的诊断,对EOS支气管哮喘患者ICS治疗效果评价有一定临床价值。

呼出气一氧化氮、外周血嗜酸性粒细胞及血清总IgE在Eos型哮喘诊断中的意义

目的分析呼出气一氧化氮(FeNO)、外周血嗜酸性粒细胞(Eos)及血清总IgE等生物标志物对嗜酸性粒细胞型哮喘(Eos型哮喘)的诊断价值。方法选择2016年8月3日一2017年2月19日重庆医科大学附属永川医院诊治支气管哮喘患者107例作为研究对象,根据诱导痰细胞分类计数结果将其分为Eos型哮喘组(诱导痰Eos≥3%)和非Eos型哮喘组(诱导痰Eos<3%),纳入同期体检者30例为健康对照组。比较3组FeNO、外周血Eos(%)、血清总IgE水平,研究FeNO水平、外周血Eos(%)、血清总IgE水平与诱导痰Eos(%)的相关关系。将诱导痰Eos≥3%作为鉴别Eos型哮喘和非Eos型哮喘的金标准,通过绘制ROC曲线探讨FeNO水平、外周血Eos(%)、血清总IgE水平对Eos型哮喘的诊断意义及准确度。结果 (1)FeNO水平:Eos哮喘组(83.2ppb±61.5ppb)高于非Eos哮喘组(3l.8Ppb±23.6ppb)高于健康对照组(16.7ppb±6.0ppb)(q=35.4、15.0,P<0.01);(2)血清总IgE水平:EOs哮喘组(239.1IU/ml±224.4IU/ml)高于非Eos哮喘组(134.6IU/ml±167.6ILU/ml)高于健康对照组(23.4IU/ml±20.8IU/ml)(q=5.6、51.0,P<0.05);(3)外周血Eos(%):Eos哮喘组(5.9%±3.50%)高于非Eos哮喘组(3.1%±0.4%)高于健康对照组(1.4%±0.3%)(q=5.3、19.8,P<0.01)。(4)相关分析:FeNO水平与其诱导痰Eos(%)具有显著正相关性(r=0.313,P=0.001),外周血Eos(%)同其诱导痰Eos(%)也具有显著正相关性(r=0.597,P=0.000),血清总IgE水平同诱导痰Eos(%)不具有相关性(r=0.083,P=0.083),FeNO水平与外周Eos(%)具有正相关性(r=0.463,P=0.000)。(5)ROC曲线分析:FeNO曲线下面积为73.3%(95%CI0.6070.860,P=0.002),将FeNO的截断值设为43ppb时,其灵敏度为62.5%,特异度为75.0%,约登指数可取得最大值为0.375;外周血Eos(%)曲线下面积为为78.4%(95%CI 0.667~0.901,P=0.000),将外周血Eos(%)的截断值设为4.5%时,其灵敏度为83.3%,特异度为80.5%,约登指数可取得最大值为0.538;血清总IgE浓度曲线下面积为67.9%(95%CI 0.546~0.812,P=0.015),将血清总IgE截断值设为34.5 IU/ml时,其灵敏度为79.5%,特异度为50.8%,约登指数可取得最大值为0.303。结论血Eos(%)、FeNO水平与诱导痰Eos(%)具有显著正相关性,前两者有助于诊断Eos型哮喘;血Eos(%)的诊断效能略优于FeNO水平,但其诊断的截断值还有待于进一步研究。

银杏叶总黄酮对哮喘小鼠模型支气管肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞凋亡的影响

本研究考察了银杏叶总黄酮(FG)对哮喘小鼠模型支气管肺泡灌洗液(BALF)中嗜酸性粒细胞(EOS)凋亡的影响。采用卵白蛋白致敏的方法建立小鼠的哮喘模型,雾化给药2周后处死小鼠,收集BALF,白细胞分类计数,纯化细胞后进行AO/EB荧光染色考察FG对EOS凋亡形态的影响,细胞分离后进行流式细胞检测考察FG对EOS凋亡比例的影响。FG可明显减少哮喘小鼠的白细胞总数和EOS数目;FG治疗组EOS凋亡形态的细胞明显增多,凋亡细胞的比例明显增加,与模型组比较有显著性差异。FG能通过诱导EOS的凋亡来减少BALF的EOS数目,可能是FG拮抗哮喘炎症的一个重要机制。

外源性白细胞介素10抑制嗜酸性粒细胞型慢性鼻窦炎伴鼻息肉中白细胞介素33表达

目的研究慢性鼻窦炎伴鼻息肉(CRSwNP)患者鼻息肉中白细胞介素10(IL-10)、IL-33的表达水平,及外源性IL-10刺激对嗜酸性粒细胞型CRSwNP(eosinophilic CRSwNP,ECRSwNP)中IL-33表达水平的影响。方法手术获取ECRSwNP 12例、非嗜酸性粒细胞型CRSwNP(non-eosinophilic CRSwNP,nECRSwNP)8例及12例正常鼻黏膜组织,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定组织中IL-10及IL-33表达水平。另收集10例ECRSwNP样本,以含或不含100 ng/ml IL-10的培养基分别培养同一患者样本24 h后,ELISA及免疫组化检测IL-33表达量。结果IL-10在ECRSwNP组、nECRSwNP组、对照组中表达无显著差异(P>0.05)。IL-33在ECRSwNP组中的表达水平高于对照组,差异有统计学意义(P=0.0043)。在ECRSwNP组中,IL-10与IL-33表达水平呈显著负相关(r=-0.7470,P=0.0052);在nECRSwNP组及对照组中两者无明显相关性(P>0.05)。相比于空白对照组,IL-10刺激组中IL-33的表达显著下降(P=0.0197)、免疫组化观察到IL-33阳性细胞显著减少(P=0.0183)。结论在ECRSwNP中IL-33的表达量显著增高,IL-10与IL-33负相关。外源性IL-10可以抑制ECRSwNP中IL-33的表达。

DEHP对哮喘模型大鼠气道高反应性和肺嗜酸性粒细胞浸润的影响

为探讨邻苯二甲酸二乙基己酯〔di-(2-ethylhexyl)phthalate,DEHP〕在诱发哮喘和哮喘发病机理方面的作用,将Wistar大鼠随机分为正常组、卵清白蛋白(OVA)致敏组和DEHP染毒组,每组8只.用OVA致敏加激发的方法制作大鼠哮喘模型.DEHP染毒组分为2个组,每天分别给予0.7mg.kg-1和70mg.kg-1邻苯二甲酸二乙基己酯灌胃,连续30d.OVA致敏组、DEHP染毒组大鼠均在第31d给予1%OVA雾化,诱发哮喘.第38d测定大鼠在不同氯化乙酰甲胆碱(MCH)剂量下的肺功能,进行支气管肺泡灌洗液(BALF)的嗜酸性粒细胞(EOS)计数.结果显示,与OVA组相比,DEHP染毒组气道高反应性增强,嗜酸性粒细胞比例明显增多(p<0.01).因此,邻苯二甲酸二乙基己酯可增强哮喘模型大鼠气道高反应性和嗜酸性粒细胞浸润,可诱导哮喘的发生.

重楼对大鼠哮喘模型IgE水平及嗜酸性粒细胞的影响

目的研究大鼠哮喘模型血清IgE、嗜酸性粒细胞(EOS)含量变化及重楼对其的影响。方法50只雄性SD大鼠随机分成对照组、哮喘组、重楼高剂量组(50g/kg)、重楼低剂量组(5g/kg)、地塞米松组5组,每组10只。用鸡清卵蛋白(OVA)致敏及诱发哮喘模型,用地塞米松和不同剂量的重楼干预治疗,对照组以生理盐水代替OVA。观察各组大鼠血中IgE和EOS含量以及支气管黏膜炎性变化。结果重楼高、低剂量组及地塞米松组大鼠哮喘症状缓解,组织水肿、上皮气道损伤等炎性反应状况明显减轻,外周血IgE水平降低,EOS比例减少,且重楼高剂量组改善优于重楼低剂量组,重楼高剂量组与地塞米松组差异无统计学意义(P>0.05)。结论重楼能有效缓解哮喘气道炎性反应,其机制可能与降低模型动物血清IgE和EOS有关。

针刺对肾上腺切除大鼠哮喘模型嗜酸性粒细胞计数及血清皮质酮水平的影响

观察肾上腺切除 (ADX)大鼠哮喘模型针刺后的血液嗜酸性粒细胞计数和血清皮质酮水平的变化 ,并与ADX大鼠哮喘模型非针刺、ADX大鼠哮喘模型捆绑处理、普通大鼠哮喘模型和空白组作对照。结果表明 ,针刺能明显降低ADX大鼠哮喘模型的血液嗜酸性粒细胞计数 ,对血清皮质酮水平无明显影响。提示针刺对哮喘能从减少血液嗜酸性粒细胞方面发挥其治疗作用 ,亦表明针刺对血液嗜酸性粒细胞的减少不依赖肾上腺皮质激素。

益肺纳肾汤加减联合舒利迭对支气管哮喘缓解期患者抑制嗜酸性粒细胞的浸润效果分析

目的:观察益肺纳肾汤加减联合舒利迭对支气管哮喘缓解期抑制嗜酸性粒细胞的浸润效果。方法:选取我院于2017年9月~2019年12月收治的140例支气管哮喘缓解期患者,分为对照组和观察组。根据治疗方案分为两组。对照组给予舒利迭治疗,观察组给予益肺纳肾汤加减联合舒利迭治疗。比较两组哮喘控制(ACT)评分、小气道功能指标、T淋巴细胞所释放的细胞因子及嗜酸粒细胞趋化因子-1(CCL11)嗜酸粒细胞趋化因子-2(CCL24)、趋化因子受体3(CCR3)的变化,统计两组总有效率。结果:观察组总有效率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,观察组和对照组的外周血Th1细胞上升,CCL11、CCL24、CCR3及外周血Th2细胞、Th2细胞/Th1细胞下降,且观察组Th1细胞高于对照组,CCL11、CCL24、CCR3及Th2细胞、Th2细胞/Th1细胞较对照组低(P<0.05)。治疗后,观察组和对照组的用力呼出25%、50%、75%肺活量的呼气流量(FEF25、50、75)下降,ACT评分上升,且观察组小气道功能较对照组低,ACT评分较对照组高(P<0.05)。结论:益肺纳肾汤加减联合舒利迭治疗支气管哮喘缓解期可抑制气道嗜酸性粒细胞的浸润,调节免疫功能,改善小气道功能,提高疗效。

删除嗜酸性粒细胞对支气管哮喘模型小鼠sPLA2-X的影响

目的:探讨支气管哮喘中的分泌型磷脂酶A2-X(sPLA2-X)与嗜酸性粒细胞的关联,为支气管哮喘的治疗提供新的思路与策略。方法:SPF级6~8周雌性BABL/c小鼠48只,分为4组,每组12只,分为健康对照组、哮喘对照组、哮喘/嗜酸性粒细胞删除组及哮喘/嗜酸性粒细胞删除同型对照组。构建小鼠支气管哮喘模型,除健康对照组小鼠于0、7、14 d腹腔注射生理盐水外,其余组小鼠每只分别于0、7、14 d腹腔注射50μg OVA与2 mg氢氧化铝凝胶(溶于200μL生理盐水)。随后根据分组于第21和26天分别进行嗜酸性粒细胞删除抗体(anti-CCR3)及同型对照的腹腔注射及吸入麻醉后的删除抗体滴鼻。于雾化结束后48 h内完成小鼠肺功能检测,每组小鼠一半行全肺灌洗、一半用于肺组织切片HE染色,全血用于检测血清IgE,肺泡灌洗液(BALF)上清液应用于检测细胞因子,肺泡灌洗液细胞用于细胞总数、细胞分类及流式分析。结果:(1)与哮喘对照组相比,哮喘/嗜酸性粒细胞删除组小鼠的气道、肺泡炎症反应显著减轻。(2)哮喘/嗜酸性粒细胞删除组(OVA/anti-CCR3)支气管肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞的百分比显著降低(P<0.05)。(3)与哮喘对照组比较,哮喘/嗜酸性粒细胞删除组小鼠气道高反应显著降低(P<0.05)。(4)与哮喘对照组相比,哮喘/嗜酸性粒细胞删除组小鼠BALF上清与血清中的sPLA2-X水平均显著降低(P<0.05)。(5)与哮喘对照组对比,哮喘/嗜酸性粒细胞删除组小鼠BALF上清中的IL-4、IL-5和IL-13水平显著降低,血清中IgE的水平也显著降低(P<0.05)。结论:支气管哮喘中嗜酸性粒细胞与sPLA2-X有重要的关联。

大鼠哮喘模型中嗜酸性粒细胞和IL-10改变研究

目的探讨大鼠哮喘模型中白细胞介素-10(IL-10)、嗜酸性粒细胞(EOS)的变化及其在哮喘发病机制中的作用。方法30只SD大鼠随机分为正常对照组、3周哮喘组和4周哮喘组,用ELISA法测定各组大鼠外周血清IL-10,并计数外周血和肺泡灌洗液(BALF)中EOS。结果各哮喘组IL-10显著低于对照组(P均<0.05),且4周哮喘组IL-10显著高于3周哮喘组(P均<0.05);外周血EOS计数各哮喘组显著高于正常对照组(P均<0.05);在BALF中,各哮喘组显著高于正常对照组(P均<0.01),但2个哮喘组间无显著性差异。血清IL-10浓度与外周血和BALF中EOS绝对计数无显著相关性。结论大鼠哮喘模型中有血清IL-10下降现象,在4周后有升高趋势,但仍低于正常对照组,其升高趋势与EOS计数无线性相关,IL-10升高趋势与气道重塑可能相关。

孟鲁司特对咳嗽变异型哮喘患者嗜酸性粒细胞的影响

目的探讨孟鲁司特对咳嗽变异型哮喘(CVA)患儿嗜酸性粒细胞(EOS)的影响。方法将96例CVA患儿分为两组,观察组口服孟鲁司特,对照组口服博利康尼;治疗前后比较两组EOS计数变化,比较观察组体液免疫指标变化。结果与对照组比较,观察组近期疗效及体液免疫指标明显改善,EOS计数明显降低,复发率明显小于对照组,不良反应少见。结论孟鲁司特治疗CVA疗效好,值得临床推广。

咳喘落口服液对哮喘模型小鼠肺组织中嗜酸性粒细胞凋亡及调控因素的影响

目的:观察咳喘落口服液对哮喘小鼠嗜酸性粒细胞(eosinophil,EOS)凋亡及调控因素的影响,旨在进一步阐明咳喘落抑制气道炎症的机制。方法:56只BALB/c小鼠分为正常组、模型组、咳喘落组和西药(强的松龙)组。除正常对照组外,其余各组小鼠用卵白蛋白和硫酸铝钾致敏激发BALB/c小鼠,复制哮喘模型。在不同时相(末次激发后0h,第3、7和14天)分别采用改良的Giemsa染色法检测各组小鼠肺组织中EOS数量;免疫组化结合图像分析方法检测各组小鼠肺组织中Fas、Fas配体(Fas ligand,FasL)和Bcl-XL表达的情况;采用TdT介导的带生物素dUTP缺口末端标记技术(terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated biotin-dUTP nick end labeling,TUNEL)检测EOS凋亡率。结果:末次激发后第3、7和14天,哮喘模型组小鼠气道炎症明显,以末次激发后第3天最为严重,而咳喘落组、西药组各时相气道组织炎症均明显减轻,EOS数量低于模型组(P<0.05)。咳喘落组末次激发后第3天,其肺组织内FasL、EOSFas阳性面积和凋亡率较模型组升高,差异有统计学意义(P<0.01),且凋亡率达顶峰,而Bcl-XL的阳性面积及EOS数量低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05);末次激发后第7和14天,中药组EOS中Fas阳性面积和Bcl-XL的阳性面积较模型组明显下降(P<0.01);且第14天,其肺组织中FasL表达和EOS凋亡率均明显下降(P<0.01)。西药阳性对照组的作用与中药治疗组类似。结论:哮喘小鼠存在以EOS浸润为主的气道炎症,同时伴有凋亡受抑和凋亡延迟。咳喘落可以提高炎症早期肺组织EOS凋亡率,可能是通过减少EOS,提高FasL、Fas表达和降低Bcl-XL表达实现的。

嗜酸性粒细胞在激素抵抗型哮喘中的作用

目的了解嗜酸性粒细胞在激素抵抗型哮喘 (SRA)的发病机理和诊断中的意义。方法采集 SRA患者和非激素抵抗型哮喘 (NSRA)患者的外周血， Percoll密度梯度法分离嗜酸性粒细胞，分别应用 DPH染色荧光分光光度计测量嗜酸性粒细膜粘性和罗丹明 123染色流式细胞仪测定其线粒体膜电位。结果 SRA患者低密度嗜酸性粒细胞 (HE)比例增加，嗜酸性粒细胞的膜粘滞度增加，线粒体膜电位的相对荧光强度下降。结论功能活跃的 HE增多可能是 SRA发生的机理之一，嗜酸性粒细胞膜流动性及线体膜电位的改变，有助于 SRA和其他哮喘的鉴别。

大鼠哮喘模型中嗜酸性粒细胞上前列腺素D_2受体改变研究

目的:研究大鼠哮喘模型中外周血嗜酸性粒细胞(EOS)上前列腺素D2(PGD2)受体改变,了解其对EOS的调控作用。方法:动物模型复制:20只雄性SD清洁级大鼠,随机分2组(A组:卵白蛋白(OVA)激发组,B组:应用生理盐水雾化吸入组,为正常对照组),雾化诱喘。测定外周血和肺泡灌洗液(BALF)的EOS,并用放射配体分析其外周血EOS上的PGD2受体。结果:B组外周血和BALF的EOS计数较正常组显著增加,(外周血0.48±0.01和0.12±0.03(×109/L),BALF:1.21±0.47和0.39±0.24(×107/L));外周血EOS上CRTH2受体结合容量和总结合比正常对照组和增加(fmol/106细胞)(CRTH 2分别为:313.58±86.17和121.32±69.88;DP总结合分别为449.19±121.49和298.85±79.64)(P<0.01),DP1无显著性差异(A组180.72±47.44和B组198.68±87.22)(P>0.05)。结论:在大鼠哮喘模型中外周血和BALF中EOS绝对值增高,其表面DP总结合显著增加,主要与CRTH2受体(DP2)显著增加有关,DP1受体结合容量无显著改变,CRTH2结合容量增加可能与哮喘发病机制有关。