人非抗凝血块中基因组DNA提取不同方法的比较

目的:比较三种不同方法提取人非抗凝血块基因组DNA的效果差异。方法:分别采用酚/氯仿法,天根试剂盒,Invitrigen purelinkTM试剂盒提取冻存时间较长的非抗凝血块基因组DNA,测定浓度、OD260/280值,琼脂糖凝胶电泳检测提取的DNA浓度和纯度,测定PCR产物灰度值。结果:三种方法都可以提取出基因组DNA,测定DNA浓度分别为:(35.56±15.27)ng/μL,(45.13±16.54)ng/μL,(57.93±14.5)ng/μL,组间存在统计学差异(P<0.01),A260/A280值分别为:1.46±0.19,1.49±0.16,1.519±0.23,三组间比较差异无统计学意义(P>0.05);三种方法提取的基因组DNA都能通过PCR扩增出目的条带,PCR产物电泳灰度值结果分别为:75.421±3.435,149.32±6.875和229.52±19.55,组间比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论:三种不同方法都能提取出冻存时间较长的非抗凝血块基因组DNA,但Invitrigen purelinkTM试剂盒法效果最好。

肝素的非抗凝特性与动脉粥样硬化研究进展

肝素早在1916年被Meclean首次发现并分离纯化后,已用于临床防治血栓闭塞性疾病达半个多世纪,其抗凝作用机制及其在急性心肌梗塞和不稳定型心绞痛防治中的价值业已阐明.近年来随着对动脉粥样硬化发生发展机制的研究不断深入,发现内源性肝素在其中扮演着较为重要的作用.而这些作用似乎与肝素的抗凝作用无关.本文仅对肝素的非抗凝特性在动脉粥样硬化形成中的作用研究进展简要概述.1

非抗凝动物血提取原卟啉二钠的实验研究

探讨非抗凝动物血提取原卟啉二钠的方法。将凝固动物血中的蛋白质水解,分离出血红素,制备原卟啉甲酯、原卟啉等中间产物,最终精制获得原卟啉二钠;并根据原卟啉二钠的光吸收特性,利用分光光度法对其进行定量检测。原卟啉二钠为红褐色结晶,可溶于水,不溶于氯仿、乙醚及丙酮,易溶于酸性溶液。溶于酸性溶液后,在波长600nm、556nm、及408nm显示吸收峰,最大吸收波长为408nm。利用本方法可将非抗凝动物血精制成原卟啉二钠,且该方法是目前以非抗凝动物血为原料提取原卟啉二钠较为理想的方法。

非抗凝动物血制备原卟啉二钠的方法改进

目的利用非抗凝猪血简易制备原卟啉二钠。方法提取非抗凝猪血中的血红素、经氯化血红素、原卟啉二甲酯、原卟啉等中间制备过程,最后制取原卟啉二钠。结果所制得的原卟啉二钠为紫黑色晶体,可溶于水和甲醇,不溶于氯仿、乙醚、丙酮,难溶于稀酸,纯度为91.4%。结论此方法可利用非抗凝动物血中的血红素制备原卟啉二钠。该方法制备条件要求不高,操作简便、原料易得、成本低廉,是一种较为理想的制备原卟啉二钠的方法。

非抗凝猪血提取血红素的工艺优化研究

目的:建立并优化非抗凝猪血提取血红素的工艺。方法:采用L9(34)正交试验法,从匀浆时间、匀浆后双蒸水加入量、盐酸丙酮溶液与溶血液的体积比(V盐酸丙酮∶V溶血液)、搅拌抽提时间4个主要影响因素对非抗凝猪血提取血红素的工艺进行优化。结果:提取血红素的平均产量为10.6 g/kg非抗凝血,纯度为90.8%;确定的最佳提取工艺参数是:匀浆5 min,匀浆后加入等体积双蒸水,V盐酸丙酮∶V溶血液=5∶1,搅拌抽提10 min。结论:利用非抗凝猪血提取血红素切实可行,工艺简单。

低分子肝素的非抗凝作用及在肾脏疾病中的应用进展

低分子肝素在药物代谢及药理作用的某些方面优于肝素。自20世纪80年代开始研究并应用于临床,已取得令人满意的效果,国外已普遍用于代替普通肝素以防治血栓栓塞并发症,国内也作为某些肾脏疾病的常规用药。近年来,肝素的非抗凝特性受到人们关注,笔者就低分子肝素的非抗凝特性及其在肾脏疾病中的应用进展作一综述。

肝素在非抗凝方面的临床应用

肝素在非抗凝方面的临床应用彭晶玮李正斌（湖南省湘潭市中心医院湘潭４１１１００）临床应用发现具有低抗凝作用活性的肝素及其衍生物在影响粘着力、活化和白细胞转运、控制炎症等方面表现一定程度的生物多效性。现综述如下。１难治性溃疡性结肠炎据报道［１］用肝素治疗...

抗凝与非抗凝血液标本对4项传染性指标酶联免疫吸附试验影响的研究

目的观察并比较抗凝与非抗凝血液标本对4项传染性指标酶联免疫吸附试验结果的影响效果。方法选择2020年1月至2021年10月乌鲁木齐市中医医院采血的患者264例血液标本进行研究,均为全血标本。每份血液标本均使用非抗凝管留取静脉血,每支5 ml,并使用抗凝管(枸橼酸-枸橼酸钠)留取静脉血,每支2 ml。所有样本均接受离心处理,按照试剂说明书操作步骤手工加样后进行处理,获得最终的检测结果。结果经酶联免疫吸附试验初步检测,抗凝标本与非抗凝标本在乙型肝炎病毒(HBV)、人类免疫缺陷病毒(HIV)、梅毒螺旋体(TP)检测结果方面比较,差异有统计学意义(P<0.05)。264个样本标本中,有5例初次检测结果出现不一致,重复实验后结果显示,上述5例标本的复试结果趋于一致。初次检测0.8≤S/CO≤1的抗凝标本共有22份,对其进行抗凝与非抗凝血各一孔的双孔复试,22份标本经复试后,1份标本的结果为灰区,其余21份标本的结果为非反应性,最终的复试结果一致率为95.45%。结论在血液标本的检测中,与非抗凝血液标本比较,应用枸橼酸-枸橼酸钠抗凝血液标本会对4项传染性指标酶联免疫吸附试验检测结果产生一定的影响,导致一定假阳性的出现,但经复试后,可有效排除干扰。

肝素的非抗凝活性

肝素除作为抗凝剂外，人们又发现它及其衍生物具有调节胚胎生长、轴突派生、组织平衡、伤口愈合、新陈代谢、细胞分化、细胞增殖与炎症反应等多种生物活性。作者从结构-功能关系的角度分析了肝素及其衍生物的某些活性，并讨论了它的治疗潜力。

非抗凝自体血回输对异位妊娠急诊手术患者血常规等的影响观察

目的:观察非抗凝自体血回输对异位妊娠急诊手术患者血常规及免疫功能的影响。方法:选择行急诊手术异位妊娠伴腹腔内出血78例,在自体血回收过程中不加抗凝药,围术期持续监测心率(HR)、血压及血氧饱和度(SpO2)。在自体血回输前后,分别抽取静脉血检测血常规,同时测定红细胞C3b受体花环形成率(RBC-C3bRR)、红细胞免疫复合物花环形成率(RBC-ICR)、白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)等免疫功能指标。记录术中回收血量及术后并发症。结果:(1)与自体血回输前及术前比较,回输后及术后24hHR显著下降(P<0.05);收缩压(SBP)、平均动脉压(MAP)及中心静脉压(CVP)显著升高(P<0.05)。与自体血回输前比较,回输后红细胞压积(Hct)、血红蛋白(Hb)显著升高(P<0.05),血小板(Plt)显著降低(P<0.05);RBC-C3bRR、RBC-ICR显著降低(P<0.05),IL-6、TNF-α显著升高(P<0.05)。(2)术中回收腹腔及术野积血(1153±436)ml/例,经洗涤后回输血量(867±264)ml/例;回输自体血后无一例出现蛋白尿、呼吸困难、血栓等严重并发症。结论:异位妊娠急诊手术患者行非抗凝自体血回输,可有效提高红细胞利用率,改善免疫功能,同时减少对凝血功能的影响。

非抗凝肝素衍生物ROH对脓毒症小鼠脑损伤的保护作用及机制研究

目的研究非抗凝肝素衍生物--ROH对脂多糖(LPS)诱导的脓毒症小鼠脑损伤的保护作用及机制。方法按数表法将Balb/c小鼠随机分为4组:正常组、模型组、对照组和实验组。小鼠腹腔注射LPS 10 mg·kg^-1建立脓毒症急性脑损伤模型。对照组和实验组在造模前15 min,分别尾静脉注射肝素2. 5mg·kg^-1、ROH 7. 5 mg·kg^-1进行干预,正常组注射等体积0. 9%Na Cl。以免疫组化法检测脑组织乙酰肝素酶(HPA)和金属基质蛋白酶-9(MMP-9)表达水平;伊文思蓝染色法检测血脑屏障通透性;TBA法测定脑组织中丙二醛(MDA)的含量。结果正常组、模型组、对照组和实验组的HPA表达水平(光密度值)分别为(8. 0±8. 0)×10^-5,(3. 0±1. 8)×10^-3,(2. 3±1. 1)×10^-4和(5. 4±3. 3)×10^-4;上述这4组的MMP-9表达水平(光密度值)分别为(8. 0±8. 0)×10^-5,(3. 6±1. 8)×10^-3,(3. 9±1. 4)×10^-4和(4. 9±3. 3)×10^-4;上述这4组的脑内伊文思蓝的含量分别为(4. 36±1. 58),(78. 60±14. 75),(36. 28±9. 16)和(44. 09±8. 95)μg·g^-1;上述这4组的MDA含量分别为(6. 91±1. 73),(10. 88±2. 08),(6. 68±1. 58)和(5. 41±1. 50)nmol·mL^-1。模型组与正常组相比,上述指标的差异均有统计学意义(P <0. 05,P <0. 01);对照组和实验组与模型组相比,上述指标的差异均有统计学意义(P <0. 05,P <0. 01)。结论 ROH与肝素一样,通过抑制脓毒症时LPS所致的HPA和MMP-9高表达,保护内皮糖萼的完整性,从而发挥脑保护作用,并提高脓毒症小鼠的生存率。

抗凝与非抗凝血液标本对4项传染性指标酶联免疫吸附试验的影响

目的:探讨抗凝与非抗凝血液标本4项传染性指标酶联免疫吸附试验(ELISA)检测结果是否存在差别。方法:方法:①留取380人份经枸橼酸-枸橼酸钠抗凝的血液标本及非抗凝的血标本各一管,进行平行检测。②本中心2007年8-10月初次ELISA检测0.8≤S/CO≤1的32人份抗凝血样标本,进行抗凝血与非抗凝血标本各一孔ELISA试验复试,观察2孔的复试结果是否一致。③对本中心2007年6-10月的15份重复反应性标本初次检测结果与双孔复试结果进行单因素方差分析。结果:①配对t检验发现380人份标本的平行试验,部分项目结果差异有统计学意义。②32份初次检测0.8≤S/CO≤1的抗凝血标本,经抗凝血与非抗凝血标本各一孔复试后,复试结果一致率达96.88%。③15份重复反应性标本初次检测结果与双孔复试结果单因素方差分析,差异无统计学意义。结论:采用枸橼酸-枸橼酸钠抗凝血标本,对血液4项传染性指标ELISA初次检测结果存在着一定干扰,但经抗凝血与非抗凝血标本各一孔复试后,这种干扰可以消除。

抗凝与非抗凝血标本对ELISA检测血清乙肝表面抗原的影响

目的探讨抗凝与非抗凝血液标本对乙肝表面抗原酶联免疫吸附试验(ELASA)检测结果是否存在差别。方法留取160人份血标本各2管,分别经枸橼酸-枸橼酸钠抗凝及非抗凝,进行平行实验。结果 160人份标本的平行试验,部分项目结果差异有统计学意义(P<0.05)。结论采用枸橼酸-枸橼酸钠抗凝血标本,对乙肝表面抗原检测结果存在着一定干扰,采用抗凝血标本进行ELASA检测对试验结果是否有影响已被同行广泛关注。

非肝素类天然抗凝血多糖的研究进展

血液凝固和血小板凝集是局部缺血性疾病发病的最重要的原因,诱发心血管和脑血管甚至全身各处的相关疾病。肝素类物质已被广泛应用于相关疾病的治疗,作用效果显著但副作用较大。本文介绍了非肝素类具有抗凝血功能的天然多糖类物质,其单糖组成主要是葡萄糖(醛酸)、半乳糖(醛酸)、阿拉伯糖、甘露糖、木糖、鼠李糖等,其中源于海洋的多糖均含有硫酸根,与多糖形成多糖硫酸酯类物质;而源于陆地的,一般不含硫酸根,含己糖醛酸或尿酸等酸性成分。不同来源的多糖其分子组成和结构差异较大,抗凝作用机理也不尽相同。本文着重阐述了海藻类、海洋无脊椎动物、植物及其果实、可食用菌等来源的抗凝血多糖结构特点、抗凝作用机理,希望能为高抗凝活性、低毒副作用的天然多糖类药物的进一步研究提供一定的参考。

血清分离胶对生化指标测定的临床应用研究

目的本文主要通过比较血清分离胶对12项生化指标测定结果的影响及其检测结果稳定性的动态分析,广泛提高血清分离胶在临床检验工作中的使用率。方法采用血清分离胶真空采血管(检测组)与传统的普通玻璃采血管(对照组)进行随机采样,采集同一供血者血样标本,观察血清分离时间及其离心情况;并对12项生化指标测定结果分析比较;同时对检测结果的稳定性分析比较。结果血清分离胶真空采血管能明显缩短了血清析出时间,检测组与对照组血清生化指标测定结果经统计学处理比较均无显著性差异(t检验,P>0.05),表明分离胶的加入不影响血清各成份的含量;添加分离胶能有效的将血球与血清隔离,0小时测定结果与4℃放置24小时、48小时测定结果经统计学处理比较无显著性差异(t检验,P>0.05)。结论血清分离胶可用于对非抗凝血标本的血清分离,可以保持被分离血清各成份的性状,并且还可以保持血清各成份的稳定性,在临床检验中有很广泛的用途。

心房颤动合并慢性肾脏病的相关临床研究进展

心房颤动(AF)合并慢性肾脏病(CKD)的患者越来越多,患者相对更容易发生血栓栓塞或出血。随着直接口服抗凝剂(DOAC)的逐渐应用,临床医生及患者有了更多的选择。除抗凝治疗外,非抗凝药物治疗及中医药治疗也逐渐进入临床。文章就心房颤动合并慢性肾脏病的相关临床研究进展进行综述。