非接触型角膜内皮显微镜和超声测厚仪测量角膜中央厚度的比较

目的:比较带角膜厚度测量功能的非接触型内皮显微镜和超声测厚仪测量角膜中央厚度的差异。方法:分别应用NONCON ROBO SP-9000型非接触内皮显微镜(KONAN公司)和U P-1000A型超声测厚仪(N IDEK公司)对76人152眼的角膜中央厚度进行测量。结果:非接触内皮显微镜测量角膜中央平均厚度为(551.36±34.23)μm,超声测厚仪测量的角膜中央平均厚度为(550.41±33.84)μm,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:带角膜厚度测量功能的非接触型内皮显微镜和超声测厚仪两者在测量角膜中央厚度的结果比较一致。当临床上两者测量值出现较大差异时,需要重复两种检查方法以获得可靠的角膜中央厚度值。

非接触型角膜内皮显微镜对角膜内皮的观察

目的观察正常人及白内障手术患者角膜内皮细胞。方法应用非接触型角膜内皮显微镜作内皮摄像观察。结果正常人角膜内皮细胞是随年龄增长而发生有规律的改变；白内障手术后周边角膜（切口附近）内皮丢失率大于中央区。结论非接触法检查具有便捷、无痛、非创伤性的特点，并适合内眼术后早期观察，是研究角膜内皮的理想工具。

使用非接触型SL－5D角膜内皮显微镜的体会

使用非接触型ＳＬ－５Ｄ角膜内皮显微镜的体会王志英眼科检查仪器的更新对眼科学新技术的开展有很大的促进作用。角膜内皮显微镜的使用，可为观察、研究正常人角膜病、眼内手术前后高眼压、炎症等角膜内皮的形态、密度改变、进一步提高角膜移植及人工晶体植入等手术的成功...

应用活体共聚焦显微镜观察糖尿病患者的角膜细胞

活体角膜共聚焦显微镜是一种无创、快速且全层面的技术,可以实时、动态地观察角膜组织的所有层面。共聚焦显微镜可以通过直接可视化检查角膜不同层面的形态和细胞密度。随着糖尿病患病率的不断上升,眼部并发症已经变得越发常见,并引起眼科临床工作者和科研工作者越来越多的兴趣和逐渐深入的研究。文章旨在通过采用活体角膜共聚焦显微镜观察糖尿病患者角膜组织各层的研究进展进行综述。

共焦显微镜观察青光眼患者角膜内皮细胞的变化

目的:利用共焦显微镜观察青光眼患者角膜内皮细胞密度及形态学变化,探讨角膜内皮细胞损伤原因,采取必要措施进行保护。方法:选取不同类型青光眼患者97例143眼,与患者年龄相匹配的正常人20例40眼。采用共焦显微镜观察、测量角膜内皮细胞密度和细胞面积、细胞变异系数等各项指标,分析比较不同类型青光眼各组角膜内皮细胞各项测量指标的差异。结果:年龄相匹配正常人组角膜内皮细胞密度2893.88±255.026个/mm2,急性闭角型青光眼组1 674.11±683.95个/mm2,开角型青光眼组2 687.22±391.87个/mm2,慢性闭角型青光眼组2 706.97±351.27个/mm2。,在各项指标中,角膜内皮平均密度、平均面积均有统计学意义(F=62.950,8.795;P值均为0.000),其中尤以急性闭角型青光眼组与各组相比差异显著。结论:急性闭角型青光眼发作眼角膜内皮细胞各项指标明显低于正常人。开角型与慢性闭角型青光眼角膜内皮细胞与正常人相比,有差别但不显著。眼压升高时限是损伤角膜内皮细胞主要因素。

原子力显微镜观察角膜内皮细胞诱导后诱导多能干细胞的形态学变化

背景诱导多能干细胞（iPSCs）具有类似胚胎干细胞的分化能力，可以分化为全身各种类型的体细胞，同时不会引起伦理学问题和免疫排斥反应，因此iPSCs有可能作为组织工程角膜内皮重建的种子细胞。目的利用原子力显微镜（AFM）观察人iPSCs与兔角膜内皮细胞（CECs）混合共培养后分化iPSCs的形态学变化，并找出其细胞膜超微结构变化的规律。方法分别培养兔CECs和人MMC-iPSCs细胞系，用免疫组织化学法测定iPSCs细胞的标志物以鉴定iPSCs细胞。将传代后7d的iPSCs与60％融合的CECs在内皮细胞培养基中共培养建立混合共培养模型，利用AFM结合倒置显微镜观察CECs及共培养前后iPSCs的形貌和超微结构变化。结果CECs的长度和宽度分别为（66．93±10．48）μm和（44．85±8．14）μm，共培养前未分化的谮SCs的长度和宽度分别为（12．51±1．40）μm和（10．93±1．69）μm，共培养后分化的iPSCs长度和宽度分别为（36．12±10．29）μm和（31．53±9．65）μm。分化的iPSCs长度和宽度均大于共培养前的iPSCs，差异均有统计学意义（P〈0．05）。分化的iPSCs宽度与CECs比较差异无统计学意义（P〉0．05）。CECs细胞膜表面突起的最大宽度和高度分别为（2．11±1．03）μm和（115．68±92．08）nm，膜表面凹陷为窗孔样凹陷，最大宽度为（1．49±0．65）μm，膜表面结构几何参数均方根粗糙度（Rq）为（39．20±7．82）nm，平均粗糙度（Ra）为（30．37±5．32）nm；未分化的iPSCs细胞膜表面突起为颗粒状，突起的最大宽度和高度分别为（0．39±0．22）μm和（13．11±9．18）nm，膜表面凹陷为虫蚀样，凹陷的最大宽度为（0．34±0．18）μm，Rq和Ra分别为（26．60±4．93）nm和（9．97±3．78）nm；分化的iPSCs细胞膜表面突起为指状，突起的最大宽度和高度分别为（1．91±0．76）μm和（106．55±77．27）nm，膜表面凹陷为窗孔样，凹陷的最大宽度为（1．61±1．25）μm，Rq为（57．33±12．80）nm，Ra为（43．63±11．17）nm。分化的iPSCs细胞膜表面突起最大宽度和高度、凹陷最大宽度、Rq、Ra均大于共培养前未分化的iPSCs，差异均有统计学意义（P〈0．05），与CECs比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论AFM能够敏感地观察到iPSCs与CECs接触共培养7d后iPSCs向CECs方向转化的形态学变化，为进一步研究iPSCs向CECs的分化提供了研究基础。

恒河猴超声乳化角膜内皮失代偿动物模型的活体共聚焦显微镜观察

目的观察恒河猴超声乳化角膜内皮失代偿动物模型在共聚焦显微镜下的角膜特征性变化。方法健康恒河猴4只,以右眼为实验组,通过超声乳化能量破坏角膜中央直径7-9 mm处内表面制作角膜内皮失代偿模型;以左眼为空白对照组。于术前,术后1、2、3、4周应用裂隙灯显微镜和活体共聚焦显微镜观察角膜各层结构变化。采用SPSS 19.0统计软件进行数据分析,基底层下神经丛数量、内皮细胞密度的比较采用配对t检验,角膜厚度采用重复测量方差分析。结果在超声乳化损伤角膜内皮后,角膜改变逐渐出现在内皮层、基质层、前弹力层和基底上皮层。早期主要改变是角膜内皮细胞间隙增宽、细胞轻度水肿,基质层出现活化的基质细胞和细胞形态改变,基质厚度增加;术后2周开始出现前弹力层上皮状神经纤维减少,同时伴有基质层和内皮水肿加重;术后3周基底上皮细胞间隙增宽,少量朗汉细胞浸润,基质层和内皮水肿加重;术后4周基底上皮层大量朗汉细胞浸润,前弹力层仅见少量上皮状神经纤维,基质层大量活化的基质细胞,内皮层严重水肿。术后2周实验组基底膜下神经丛数量（t=6.9192,P=0.002）和内皮细胞密度（t=7.8936,P〈0.0001）明显低于对照组。实验组术后1（t=28.31,P〈0.0001）、2（t=63.56,P〈0.0001）、3（t=123.22,P〈0.0001）、4周（t=180.80,P〈0.0001）的角膜厚度明显高于对照组。结论活体共聚焦显微镜可清晰显示超声乳化后恒河猴角膜的变化,主要特征是逐渐加重的内皮细胞间隙增宽、基质细胞活化、朗汉细胞增多和基底上皮层下神经丛减少。

裂隙灯显微镜对角膜内皮细胞形态观察的应用

目的探讨裂隙灯显微镜镜面反光照射法对角膜内皮细胞形态观察的应用,以期指导临床诊断与治疗。方法选择2013年1月至6月就诊于我院,经非接触式角膜内皮细胞计数仪检查发现内皮细胞形态变异,数量减少至700个/mm2以下的患者10例和角膜内皮细胞数量及形态正常的健康者12例,对比裂隙灯显微镜镜面反光照射法与内皮细胞计数仪内皮照相两种方法观察内皮细胞形态的效果。结果所有患者利用裂隙灯显微镜(40倍)的镜面反光照射法均可拍摄到清晰的角膜内皮细胞。内皮细胞数量减少的患者,由于内皮细胞数量减少,直径变大,并可见融合变形细胞;对照角膜内皮计数仪检查可见细胞融合增大。同样用裂隙灯显微镜镜面反光照射方法观察正常人角膜内皮细胞,隐约可见细小六边形内皮细胞,内皮细胞数量越多,边界越难以清晰辨别。对照角膜内皮细胞计数仪可以得到同样的结果。裂隙灯显微镜放大倍数减少到16倍时,内皮细胞数量小于700个/mm2者仍可以观察到内皮细胞,但正常人的内皮细胞则无法分辨。结论利用裂隙灯显微镜镜面反光照射法对角膜内皮细胞形态及密度进行观察,是一种有效而快捷的临床技术。

HAI EB-3000XYZ型眼库内皮显微镜对供体角膜内皮的评估

目的 评价HAI EB-3000XYZ型眼库内皮显微镜对供体角膜内皮细胞检测的可靠性。方法 选取供体角膜材料35例,年龄11～50岁;按供体死亡时间分为3组:A组≤6h;B组7～12h;C组>12h。术前分别对3组行内皮显微镜检查,PKP术后对剩余角膜环行台盼蓝-茜素红联合染色。对两者所测得的内皮细胞密度进行比较;对内皮显微镜测得的内皮细胞六边形比例和染色测得的活性率行相关分析。结果 在A、B两组中,内皮显微镜检测得的内皮细胞密度与染色结果无明显差别;C组两者之间的差别有显著统计学意义(P=0.000)。3组的内皮细胞六边形比例与活性率之间均没有明显的相关性。结论 HAI EB-3000XYZ型眼库内皮显微镜对死亡时间在12h以内的供体角膜内皮细胞密度检测较为准确,而对死亡12h以上的供体材料的检测则存在一定误差。

LASIK术后远期角膜基质细胞及内皮细胞的共焦显微镜观察

目的应用共焦显微镜在细胞水平观察术后远期角膜基质细胞及内皮细胞变化。方法选择我院门诊行LASIK手术患者68例68眼,根据术前球镜度数,分为高度近视眼组(36例36眼)和低、中度近视眼组(32例32眼),术后随访6～44月,同时选择门诊行屈光检查的近视患者61例122眼作为对照组,对所有患者行共焦显微镜检查,并对结果进行统计学分析,比较LASIK手术对角膜基质及内皮细胞的影响。结果LASIK术后,高度近视眼组角膜前、后基质角膜细胞密度均减少,内皮细胞密度下降,内皮细胞多形性百分比增加,异型性百分比下降,与对照组之间差异有统计学意义(t=0.4077,P=0.000)。LASIK术后界面下基质角膜细胞密度明显减少(562个·mm-2±86个·mm-2),“无细胞区”长期存在;含“无细胞区”的基质深度与激光能量、削切深度、手术时间、年龄均无相关性。结论术后远期,适量激光切削对低、中度近视眼的角膜深层组织影响较小,对高度近视眼影响较大,所以高度近视眼应慎行LASIK手术。

Fuchs角膜内皮营养不良患者的共焦显微镜特征

目的:探讨共焦显微镜下Fuchs角膜内皮营养不良患者角膜各层的活体形态学特征。方法:对16眼Fuchs角膜内皮营养不良患者的中央部角膜进行活体共焦显微镜检查,应用NAVIS软件测量、分析角膜各层组织细胞形态和密度、以及滴状赘疣和角膜神经的直径。结果:①有症状组:9眼的角膜内皮层均见到滴状赘疣,直径20～60μm,内皮细胞密度低;4眼后弹力膜增厚;6眼角膜后基质层有长条形暗区结构;9眼角膜基质反光普遍增强;7眼Bowman膜有局灶性高反光区域;5眼显示正常的角膜神经结构;②无症状组:7眼的角膜内皮层均见到滴状赘疣,数目较有症状组者少,直径15～40μm;内皮细胞密度正常;角膜其余各层未见异常。结论:本研究初步揭示了Fuchs内皮营养不良患者共焦显微镜下的形态学特征;活体共焦显微镜检查有助于Fuchs角膜内皮营养不良患者的诊断,特别适用于角膜水肿、角膜内皮镜无法成像的患者。

正常人角膜内皮细胞的内皮显微镜观察

目的:观察正常人眼角膜中央及周边区内皮细胞。方法:应用非接触型角膜内皮显微镜进行观察。结果:角膜内皮细胞随着年龄的增长其密度、六角形细胞百分率逐渐降低,细胞面积逐渐增大。结论:角膜内皮细胞随年龄增长而发生的一系列变化属生物学上细胞衰老的表现。

不同分期圆锥角膜内皮细胞密度和形态变化

目的评估不同分期圆锥角膜患者角膜内皮细胞密度(CD)及形态变化。方法采用横断面研究方法,纳入2018年3月至2021年10月就诊于山东第一医科大学附属眼科医院的圆锥角膜患者119例199眼,按照圆锥角膜Amsler-Krumeich分期标准将患者分为Ⅰ期圆锥角膜组58例111眼、Ⅱ期圆锥角膜组30例41眼和Ⅲ期圆锥角膜组31例47眼。同期纳入年龄和性别匹配的健康受试者25人50眼作为正常对照组。采用Pentacam三维眼前节分析仪获取角膜地形图及角膜曲率(K)、中央角膜厚度(CCT)、最薄处角膜厚度(TCT)、前房深度(ACD)、角膜直径、角膜体积等眼前节参数。通过"中心法"使用非接触式角膜内皮显微镜检查并获取中央区角膜内皮CD、六角形细胞的百分数(6A)、平均细胞面积(AVE)、最大细胞面积(MAX)、最小细胞面积(MIN)、细胞面积标准差(SD)和细胞面积变异系数(CV)。采用Spearman秩相关分析角膜内皮CD和形态参数与角膜地形图相关参数的相关性。结果正常对照组以及Ⅰ期、Ⅱ期和Ⅲ期圆锥角膜组CD分别为2941(2809,3072)、2825(2667,3030)、2747(2475,2903)和2370(2142,2525)个/mm^(2),随着圆锥角膜患者病情进展,CD逐渐降低,各组CD总体比较差异有统计学意义(H=94.862,P<0.001)。各组CV和6A总体比较差异均有统计学意义(H=45.018、20.421,均P<0.001);Ⅲ期圆锥角膜组CV明显高于正常对照组和Ⅰ、Ⅱ期圆锥角膜组,6A明显低于正常对照组和Ⅰ期圆锥角膜组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。随着圆锥角膜病情进展,MAX、MIN、AVE和SD逐渐增大,各组MAX、MIN、AVE和SD总体比较差异均有统计学意义(H=37.905、32.437、110.182、72.941,均P<0.001);Ⅲ期圆锥角膜组MAX和MIN显著高于Ⅰ期圆锥角膜组和正常对照组,AVE和SD明显高于正常对照组和Ⅰ、Ⅱ期圆锥角膜组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。所有圆锥角膜患者CD与CCT、TCT呈中等程度正相关(r_(s)=0.47,P<0.001;r_(s)=0.53,P<0.001),与平均角膜曲率(Km)呈中等程度负相关(r_(s)=-0.59,P<0.001);6A与CCT、TCT呈弱正相关(r_(s)=0.18,P=0.01;r_(s)=0.22,P=0.002),与Km呈弱负相关(r_(s)=-0.32,P<0.001);CV与CCT、TCT呈弱负相关(r_(s)=-0.35,P<0.001;r_(s)=-0.37,P<0.001),与Km呈中等程度正相关(r_(s)=0.48,P<0.001);CD、CV、6A与ACD、角膜体积无明显相关性。结论随着圆锥角膜病情进展,角膜前突变薄,角膜内皮CD和6A降低,细胞变异性增加;角膜地形图相关参数与角膜内皮细胞的密度及形态变化存在相关性。

穿透性角膜移植术后共焦显微镜下角膜移植片内皮细胞异常研究

目的分析穿透性角膜移植术后共焦显微镜下角膜移植片的内皮细胞异常显现情况。方法收集行穿透性角膜移植术患者共40例(40眼)作为研究对象。根据是否有内皮细胞异常显现分为观察组(有异常)20眼、对照组(无异常)20眼,比较2组患眼在角膜形态学指标以及术后并发症发生率的差异。结果观察组的内皮细胞密度和六边形细胞比例均低于对照组(P均<0.01)。观察组的内皮细胞面积、六边形细胞变异率和内皮细胞丢失率均高于对照组(P均<0.01)。2组的角膜中央厚度比较差异无统计学意义(P>0.05)。观察组患眼术后继发性青光眼发生率为35%,一过性高眼压发生率为55%,均高于对照组(P均<0.05)。结论共焦显微镜检查可清晰显示穿透性角膜移植术后患者角膜移植片的内皮细胞异常状态,如检查结果提示患者角膜内皮形态结构有异常改变,其发生并发症的可能性高,需要引起临床重视。

后部多形性角膜营养不良49例共聚焦显微镜影像学观察

目的:探讨49例后部多形性角膜营养不良(PPCD)患者在共聚焦显微镜(IVCM)下的影像学特征。方法:回顾性病例研究。收集我院2013-01/2021-01诊断为PPCD患者49例86眼,包括男32例,女17例,平均年龄42.5±22.9岁。所有患者均进行IVCM检查,分析角膜内皮细胞密度及不同类型病变的镜下特点。结果:所有患者病灶区内皮细胞数量均较外周细胞数量低。IVCM下病变呈1型囊泡型的有44眼(51%),表现为角膜内皮层的圆形或不规则弹坑样病灶,单个或多个出现;2型条带型16眼(19%),表现为边缘弧形凸起,部分可见似赘疣样影像散在或条索状分布;3型弥漫型26眼(30%),表现为内皮细胞大面积缺失,大部分区域内皮成像不清,呈匍匐样、条索样延展的凸起,成像较清晰处部分同条带型病灶。观察病例中有2例患者随访4~5a,IVCM下病灶均较前有变化,包括中央角膜内皮数量的减少和上皮层铁质沉着等。结论:IVCM能够显示PPCD患者各期内皮细胞和Descemet膜水平的特征性显微结构改变,通过观察其影像学特点可以为疾病提供有效的诊断价值。

用镜面反射显微镜对正常人不同年龄组角膜内皮细胞的观察

应用非接触型内皮显微镜对正常人204只眼角膜内皮细胞进行观察。结果表明:正常人角膜内皮细胞平均密度随年龄增大而减少;平均面积随年龄增大而增大;男女内皮细胞和左右眼内皮细胞无明显差异;内皮细胞形态学变化是年龄越大,多形性越明显,黑区出现率越高。角膜的透明性与其内皮细胞的结构和功能有密切关系,术前了解内皮细胞状况,有助于减少大泡性角膜病变的发生。本文研究结果与近来国内外研究结果基本一致。

角膜移植术后内皮型免疫排斥反应的活体共聚焦显微镜分析

目的研究分析角膜移植术后内皮型免疫排斥反应的活体共聚焦显微镜。方法选择2013年10月至2015年11月本院收治的32例行角膜移植术患者为研究对象,应用激光共聚焦显微镜于治疗前后对病灶特点位点实施检查,观察分析检查情况。结果共聚焦显微镜显示,治疗前16例患者可发现典型内皮排斥线,另外16例患者呈植片弥漫水肿混浊。治疗后,23例患者好转,激光共聚焦显微镜可清晰的发现基质细胞核,且内皮细胞表面免疫细胞个数减少,上皮基底层下炎性细胞也明显减少。结论激光共聚焦显微镜可动态观察角膜移植术后内皮型免疫排斥反应过程及转归,对疾病治疗具有一定的参考意义。

维吾尔族及汉族角膜内皮细胞密度对比分析

目的:观察50～79岁汉族和维吾尔族患者中央区角膜内皮细胞密度。方法:选择50～79岁年龄段维吾尔族患者180例,50～59岁年龄段60例,60～69岁年龄段60例,70～79岁年龄段60例;及汉族患者180例,50～59岁年龄段60例,60～69岁年龄段60例,70～79岁年龄段60例,均取右眼,应用非接触型角膜内皮显微镜观察角膜内皮细胞密度。结果:50～59岁年龄段维吾尔族角膜内皮细胞密度为2 608.4±327.6个/mm2,汉族角膜内皮细胞密度为2 728.6±284.6个/mm2,两者对比P<0.05;60～69岁年龄段维吾尔族角膜内皮细胞密度为2 547.0±292.5个/mm2,汉族角膜内皮细胞密度为2 672.9±312.5个/mm2;70～79岁年龄段维吾尔族角膜内皮细胞密度为2 452.8±434.5个/mm2,汉族角膜内皮细胞密度为2 660.2±374.9个/mm2,两者对比P<0.05。50～79岁年龄段维吾尔族角膜内皮细胞密度为2 536.1±360.4/mm2,汉族角膜内皮细胞密度为2 688.6±324.9个/mm2,两者对比P<0.05;结论:在50～59岁,60～69岁,70～79岁各年龄段,及50～79岁年龄段比较,汉族患者角膜内皮细胞密度较维吾尔族角膜内皮细胞密度高。

应用共焦显微镜观察白内障超声乳化术后角膜内皮变化情况

目的应用共焦显微镜观察白内障超声乳化术后角膜内皮细胞密度(CD)及六角形细胞百分比(6A%)的变化。方法随机选取2017年1月至2017年6月期间,在我院行白内障超声乳化吸出联合人工晶体植入术的年龄相关性白内障患者48例50眼。分别于术前1天、术后1周、术后1个月及术后3个月应用共焦显微镜对患者进行角膜内皮检查,记录所有患者的角膜内皮细胞密度(CD)及六角形细胞百分比(6A%),最后进行统计学分析。结果内皮细胞密度(CD)在术后各时间点与术前相比差异均有统计学意义(P<0.05),这种差异随着患者恢复时间的延长,有逐渐缩减的趋势。六角形细胞百分比(6A%)在术后呈下降趋势,1周时最显著,差异有统计学意义(P<0.05),之后逐渐恢复,到3个月时已基本恢复到术前水平。术后细胞早期呈多型性,细胞水肿,体积增大,术后3个月已基本恢复。结论共焦显微镜可以用来观察活体角膜内皮细胞的密度、形态结构及其动态变化;白内障超声乳化术后角膜内皮细胞密度及六角形细胞比例均有不同程度下降,至术后3个月均有所修复;角膜内皮细胞无法再生。

KONAN角膜内皮细胞显微镜——高端技术、防盲治盲

KONAN医疗器械株式会社在日本国内具有多年医疗产品研发历史，是日本国内领先的医疗器械企业．其产品出口遍布至世界多个国家。KONAN角膜肉皮显微镜是KONAN医疗器械株式会社旗下的产品，此次首次进入中国．很好地弥补了国内眼科医疗器械行业产品缺失、功能不完备等缺点。