新疆998例羊水细胞染色体非整倍性的荧光原位杂交分析

目的探讨荧光原位杂交(FISH)技术用于产前诊断胎儿非整倍体的价值。方法对998例未经培养的羊水细胞进行FISH检测,荧光显微镜下观察、判读杂交信号,以脐静脉细胞染色体核型分析结果作为对照。结果在998例羊水细胞样本中,累计检出21-三体综合征8例,18-三体综合征3例,Turner综合征1例,克氏综合征2例,13-单体、21-单体和18-单体胎儿各1例。FISH结果与羊水细胞或脐静脉细胞染色体核型分析结果一致。结论 FISH技术对于染色体数目异常的临床诊断具有重要意义。

单细胞多重替代扩增法结合比较基因组杂交技术检测植入前发育停滞胚胎染色体非整倍性

目的：应用单细胞多重替代扩增法（MDA）结合比较基因组杂交（CGH）技术检测植入前发育停滞胚胎染色体非整倍性情况,探讨植入前胚胎发育停滞机制。方法：胚胎植入前对70枚6~8细胞期发育停滞胚胎中取单个卵裂球与正常男性外周血单个淋巴细胞,分别采用多重替代扩增法（MDA）进行全基因组扩增,将发育停滞卵裂球扩增产物标记绿色荧光,淋巴细胞扩增产物标记红色荧光,应用CGH技术进行分析,观察染色体的非整倍性变化情况。结果：对70枚植入前发育停滞的胚胎有7枚出现染色体非整倍性改变,2枚卵裂球染色体为46,XY,dup（Y）（q12）;其余5枚卵裂球的染色体分别为45,X;47,XY＋21;47,XY＋1;46,XY,dup（17）（q23）;46,XX,dup（20））（p12）;染色体异常的发生率为10%。结论：染色体非整倍性改变可能是植入前胚胎的发育停滞的原因之一。

荧光原位杂交检测7号染色体非整倍性与肌层浸润性膀胱癌的相关性

背景与目的术前预测肌层浸润情况对于充分治疗膀胱癌(bladder cancer,BC)非常重要。目前,术前准确诊断BC肌层浸润状态仍存在一些难点。本研究旨在探讨BC荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)检测结果与肌层浸润情况的相关性,绘制用于术前区分肌层浸润性BC(muscleinvasive BC,MIBC)和非肌层浸润性BC(non-muscle-invasive BC,NMIBC)的细胞遗传学–临床列线图。方法所有符合入选标准的BC患者均接受术前FISH检测,包括4个位点[染色体着丝粒特异性探针(chromosome-specific centromeric probe,CSP)3、7和17以及基因座特异性探针(gene locus-specific probe,GLP)-p16位点]。使用Chi-square检验分析FISH与BC肌层浸润的相关性。在训练集中,采用单因素和多因素logistic回归分析建立术前预测肌层浸润的细胞遗传学–临床列线图。在训练集中评估列线图预测肌层侵润的效果,包括辨别准确度、校准度和临床实用性,并在验证集中进行验证。此外,通过模型比较评估列线图与用于构建该模型的各个变量的鉴别力和临床实用性。结果在CSP3、CSP7和CSP17阳性的BC患者中,肌层浸润更为普遍(OR=2.724,95%CI:1.555–4.774,P<0.001;OR=3.406,95%CI:1.912–6.068,P<0.001;OR=2.483,95%CI:1.436–4.292,P=0.001)。通过训练集多因素logistic分析,影像学测定肿瘤大小、临床肿瘤分期和CSP7状态被确定为BC肌层侵润的独立危险因素。然后,建立了包含这3个独立危险因素的细胞遗传学–临床列线图,并在训练集(AUC=0.784;95%CI:0.715–0.853)和验证集(AUC=0.743;95%CI:0.635–0.850)中得到令人满意的区分度。决策曲线分析(decision curve analysis,DCA)表明列线图具有临床实用性。在模型比较中受试者工作特征(receiver operator characteristic,ROC)曲线分析表明,与任一用于构建该模型的单独因素相比,细胞遗传学–临床列线图显示出更高的鉴别力,并且在DCA中的整个的阈值概率范围内具有最高的净收益。结论CSP7情况是BC患者肌层侵润的独立预测因素,并成功纳入到结合了FISH分析结果与临床危险因素的临床列线图中。

不同妊娠方式及女性年龄对流产组织染色体非整倍性的影响

目的 探讨不同妊娠方式及女性年龄与流产组织染色体异常的关系,为辅助生殖技术在遗传学上的安全性问题提供咨询依据。 方法 回顾性分析2014~2018年行早期流产绒毛染色体检查的494例自然妊娠流产样本(自然妊娠流产组)及396例辅助生殖妊娠流产样本(辅助生殖妊娠流产组),将两组患者以35岁为年龄分割界限,又分为<35岁组和≥35岁组。对比染色体异常在两种妊娠方式及不同年龄组中的发生率。 结果 自然妊娠组患者平均年龄及流产孕周显著小于辅助生殖妊娠流产组(P<0.01)。流产组织中,染色体异常样本共计501例,1~22号,X,Y单一染色体异常382例,三倍体异常15例,≥2条染色体异常46例,染色体微缺失/重复58例。染色体出现单一异常的发生率最高,达76.25%。单一发生的染色体异常中,16号染色体异常102例,占26.70%,22号染色体异常及X染色体异常均有54例,发生率均为14.14%。辅助生殖妊娠流产组69,XXN占比(0.86%)显著低于自然妊娠流产组(4.83%)(P<0.01),而21号染色体异常占比(5.60%)显著高于自然妊娠流产组(2.23%)(P<0.05)。辅助生殖妊娠流产组≥35岁流产患者占比显著大于自然妊娠流产组(P<0.001)。不同妊娠方式组内,<35岁患者染色体非整倍性发生率显著低于≥35岁患者(P<0.01)。染色体非整倍性高发类型中:16号染色体异常发生率在<35岁患者中显著高于≥35岁患者(P<0.01);22号染色体异常发生率在≥35岁人群中显著高于<35岁人群(P<0.01);≥35岁患者≥2条染色体异常发生率显著高于<35岁患者(P<0.001),且辅助生殖妊娠流产组显著高于自然妊娠流产组(P<0.01)。 结论 两种妊娠方式流产组织染色体异常的差异可能与ICSI技术相关,也可能与辅助生殖人群年龄相关。辅助生殖技术并没有增加胚胎染色体非整倍性的发生率,而高龄是胚胎染色体非整倍性的诱发因素。

SUMO化修饰对卵母细胞染色体非整倍性的影响

卵母细胞染色体非整倍性是流产和新生儿出生缺陷的主要原因之一,主要源于以下2个方面:(1)Cohesin蛋白复合物丢失导致的姐妹染色单体过早分离型卵母细胞非整倍性;(2)纺锤体动力异常导致完整姐妹染色体对分离异常的非分离型卵母细胞非整倍性。SUMO化修饰作为一种蛋白质翻译后修饰途径,参与了细胞增殖、分化、凋亡以及周期调控等众多生理调控过程。在卵母细胞中,SUMO化修饰既可调节Cohesin蛋白复合物在染色体上的定位,影响过早分离型卵母细胞非整倍性;同时可调节纺锤体动力学,影响非分离型卵母细胞非整倍性。因此,SUMO化修饰对卵母细胞染色体非整倍性具有重要作用,但尚不清楚是通过修饰哪些底物影响卵母细胞非整倍性,其具体分子机制还有待进一步研究。本文从SUMO化修饰对卵母细胞中Cohesin蛋白复合物的作用及其对微管动力学的影响两方面,探讨了SUMO化修饰在姐妹染色单体过早分离型和非分离型卵母细胞非整倍性中的作用。

多色荧光原位杂交用于胎儿常见非整倍体的快速产前诊断

目的 探讨多色荧光原位杂交（multi-color fluorescence in situ hybridization,m-FISH） 技术用于快速诊断胎儿非整倍染色体的临床价值.方法 纳入符合产前遗传学诊断指征的孕妇126例,行羊膜腔穿刺获取羊水细胞,采用荧光标记的DNA探针对羊水细胞间期核DNA进行杂交,荧光显微镜观察、计数杂交信号类型,同时对每例标本行羊水细胞培养及染色体核型分析.结果 在126例羊水细胞样本中,FISH检出21-三体综合征胎儿4例、18-三体综合征1例、Turner综合征1例、46,XX核型67例、46,XY核型53例.FISH检测结果与羊水细胞核型分析的符合率为100%.结论 FISH结果判读直观,信号明晰,是快速、准确检测染色体数目异常的重要手段.

血清学结合超声检查在非整倍体产前筛查中的应用与护理

目的：探讨血清学结合超声检查在非整倍体产前筛查中的临床应用价值与护理。方法 ：选取2012年4月-2013年5月在我院妇产科进行非整倍体产前筛查的孕中期孕妇2010例作为研究对象,给予三联血清生化指标检测联合胎儿超声检测的方法对高风险孕妇进行诊断和筛查,并经积极的护理配合帮助孕妇进行产前信息的收集与核查,结合相关知识科普与宣传、心理护理提高孕妇对非整倍体畸形的认识程度以及检测异常孕妇的染色体核型分析率。结果：2010例孕妇中,经血清学检测,共检出高危孕妇108例,其中21-三体综合征高风险79例,18-三体综合征高风险8例,神经管畸形高风险21例;经超声检测,共检出高危孕妇11例。对检测异常的胎儿进行腹腔穿刺抽取羊水行染色体核型分析之后,可确诊非整倍染色体异常患者5例。结论：血清学结合超声检查对胎儿非整倍染色体异常情况进行检查,操作方便,诊断快捷,能扩大筛查目标,降低误诊率和漏诊率,提高胎儿非整倍染色体异常的检出率和新生儿的出生质量。

苯诱导小鼠卵母细胞及1细胞合子雌原核染色体非整倍体的研究

目的 研究苯对卵母细胞和 1细胞合子雌原核染色体非整倍体率的影响。方法 成年雌性NIH小鼠 ,1次灌胃 (942、1881和 376 2mg/kg)与多次吸入 (70 6、192 2和 486 4mg/m3 )染毒 ,灌胃后雌雄鼠以 1∶1同笼过夜 ,收集卵母细胞和 1细胞合子作细胞遗传学分析 ,测定非整倍体率。结果 小鼠吸入染毒 3个剂量组的第 2次减数分裂中期 (MⅡ )卵母细胞非整倍体率分别为 7 0 6 %、7 5 0 %和9 76 % ,明显高于对照组 (1 30 % ) ,有剂量 效应关系 ,同时也观察到第 1次减数分裂中期 (MⅠ )卵母细胞减数分裂停滞 ,MⅠ卵母细胞频率分别为 1 16 %、3 6 1%和 5 75 % ,高于对照组 (0 0 0 % ) ,有剂量 效应关系 ,在灌胃组仅见高剂量组MⅡ卵母细胞非整倍体率增高 ,1细胞合子雌原核非整倍体率未见增高。结论 吸入或灌胃给小鼠高剂量苯 。

拟南芥花梗臂发生机制的研究进展

拟南芥是最重要的模式植物之一.近期,拟南芥主茎与花柄之间水平连接的特殊器官——Cantil(中文命名为:花梗臂)被再次报道.该研究对花梗臂的形态、结构进行详细介绍,并利用拟南芥不同生态型以及突变体对花梗臂的产生条件、发育调控机制做了深入的研究.结果表明,MYB13、RTFL/DVL家族成员、ERECTA、染色体非整倍性以及短日照均能促进花梗臂的形成;而FT、异源三聚体G蛋白复合体、长日照等因素都会抑制花梗臂的形成.需要强调的是,花梗臂的形成又与植物健康状态密切相关,作为一个略显神秘的新器官,花梗臂的发生、发育的机制还亟待深入研究.

男方畸形精子症对胚胎植入前遗传学筛查患者胚胎非整倍体及胚胎发育指标的影响

目的探讨胚胎植入前遗传学筛查（preimplantation genetic screening, PGS）患者中男方畸形精子症对胚胎的发育及染色体非整倍性率的影响。方法采取回顾性队列研究,对2011年12月至2016年12月就诊于空军军医大学第二附属医院生殖中心进行PGS的患者进行分析,排除梗阻性无精症、严重少弱精子症的患者,共纳入91例患者,计98个周期。收集基本资料及助孕相关指标,按照WHO第5版规范,以男方畸形精子症诊断标准为分组标准,将患者分为精子畸形率≤96%及〉96%两组,采用单因素及多因素分析男方精子畸形率对PGS患者胚胎非整倍体性发生率、胚胎发育指标的影响。结果单因素分析显示,精子畸形率96%和〉96%组患者受精率[（0.73±0.16）%,（0.68±0.20）%]、优胚率[（0.49±0.24）%,（0.46±0.16）%]、囊胚形成率[（0.53±0.29）%,（0.65±0.25）%]、种植率[（0.70±0.45）%,（0.56±0.44）%]和胚胎染色体非整倍体发生率[（0.64±0.26）%,（0.68±0.31）%]比较,差异均无统计学意义（P〉 0.05）。进一步调整混杂因素,建立多元线性回归方程显示,随男方精子畸形率的增加,上述结局指标比较,差异均无统计学意义（P〉0.05）。对精子畸形率≥99%患者应用倾向性评分与精液参数正常患者的基线资料进行匹配,与精液参数正常患者比较,重度畸形精子症患者上述指标比较,差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论男方精子畸形率对PGS患者胚胎非整倍体性发生率无明显影响。男方精子畸形率的高低不能作为PGS的单一指征。

用细胞学方法研究番木瓜组培苗的遗传稳定性

利用细胞学和形态学方法研究组织培养技术生产的番木瓜种苗的遗传稳定性。通过对番木瓜（2n=18）主栽品种蔬罗1号1～38代组培苗体细胞的染色体数的初步观察和统计，发现1～32代苗所观察的体细胞染色体全部为2n=18，大田种植后表型与亲代相比未发生明显的变异。但是在第33，36，37代发现了染色体非整倍性的细胞，田间种植后与亲代相比挂果率和抗病性下降。这一研究结果为番木瓜组培苗的继代培养和规模化生产提供了有价值的理论依据。

中国云南三产地淡水三角涡虫核型分析

利用空气干燥法,对采自云南省丽江市束河古镇、保山市龙王塘和香格里拉市小中甸3产地淡水三角涡虫(Dugesia sp.)的染色体和核型进行分析,结果表明:丽江市束河古镇淡水三角涡虫体细胞的染色体数目以16条为主,为二倍体(2n=2x=16=16m);保山市龙王塘淡水三角涡虫体细胞的染色体数目以24条为主(2n=3x=24=24m),少数为16条(2n=2x=16=16m),为三倍体和为二倍体的混合倍体;值得注意的是:香格里拉市小中甸淡水三角涡虫体细胞的染色体数目以极少见的26条为主(2n=3x+2=24+2=21m+3st+2m),少数为25条(2n=3x+1=24+1=21m+3st+1m)和24条(2n=3x=24=21m+3st),为三倍性混合倍体。研究根据核型结果对上述三产地淡水三角涡虫的分类和染色体非整倍性进行了分析。

ART患者早期流产组织染色体异常及相关因素分析

目的:分析ART患者早期流产组织染色体异常及其相关影响因素。方法:回顾性分析2013-2017年ART患者行早期流产组织染色体检查的409例样本,分析胚胎染色体非整倍性发生及其与女方年龄、不孕年限、不孕因素、促排卵指标之间的关系。结果:ART流产患者中,流产组织染色体非整倍性发生率为57.46%,发生频次以16三体占比最高(23.95%),其次是22三体(13.45%)及Turner(9.24%)。流产组织染色体非整倍性患者平均年龄高于染色体整倍性患者(P<0.001)。16三体组患者年龄低于22三体(P<0.01)及Turner组(P<0.05)。16三体组患者平均Gn使用量低于22三体组(P<0.05)。16三体组患者移植15天血HCG值低于22三体(P<0.05)及Turner组(P<0.01)。结论:ART患者流产组织染色体非整倍性与女方年龄正相关,但16三体及Turner的发生与女方年龄相关性不大,且16三体更容易引发早期流产。

微阵列比较基因组杂交胚胎植入前遗传学筛查技术在复发性流产患者中的应用研究

目的：探讨微阵列比较基因组杂交胚胎植入前遗传学筛查（aCGH—PGS）技术对复发性流产（RM）患者辅助生殖临床结局的影响。方法：54例RM患者分为aCGH-PGS组（n=25）与非PGS组（n=29）。aCGH-PGS组胚胎行aCGH筛查，选择染色体整倍性胚胎植入，其临床结局与非PGS组相比较。结果：aCGH—PGS组中染色体整倍性胚胎占26．93％（42／156）；平均移植胚胎1．3±0．8个，低于非PGS组2．6±0．6个（P〈0．01）；胚胎着床率（57．58％）与临床妊娠率（61．90％）高于非PGS组（27．03％，P〈0．01；46．43％，P〉0．05），早期流产率（7．69％）低于非PGS组（38．46％，P〈O．01）。结论：经aCGH—PGS，植入1-2个染色体整倍性胚胎，可使RM患者获得更高的胚胎着床率及较低的早期流产率，是RM患者临床治疗的有效途径。

自然流产患者绒毛与复发性流产患者胚胎植入前遗传学筛查微阵列比较基因组杂交结果对比分析

目的:探讨植入前遗传学筛查(PGS)降低复发性流产(RSA)患者早期流产率的可能原因及临床意义。方法:通过微阵列比较基因组杂交(aCGH)检测,统计自然流产(SA)患者绒毛染色体非整倍性异常高发核型,分析该高发核型在RSA患者胚胎中的发生几率。结果:SA患者绒毛中16、X、15号3条染色体的非整倍性占绒毛染色体非整倍性异常的52.27%;在RSA患者胚胎中,该3条染色体非整倍性占胚胎染色体非整倍性异常的50.50%。结论:SA患者绒毛染色体异常类型相对集中,具有明显的高发核型;RSA患者胚胎染色体非整倍性高发核型与流产绒毛相一致,提示对RSA患者行PGS助孕,可规避染色体异常胚胎的着床,从而降低早期流产率。

无创DNA检测技术在产前筛查中的临床应用

目的探讨无创DNA基因检测技术应用于产前筛查中的临床价值及意义。方法回顾性分析在我院2015年1月~2017年1月针对553例孕妇包括预产期年龄≥35岁的高龄产妇、唐筛结果为高风险、临界风险或单项指标异常、超声软指标等孕妇。在充分知情同意,进行遗传咨询后选择胎儿无创DNA产前检测,对检测结果为高风险孕妇进一步进行染色体核型分析,对低风险孕妇进行电话追踪随访。结果 553例孕妇外周血中,541例低风险,12例高风险,在高风险病例中7例提示21三体异常;2例提示18号染色体异常;1例提示13三体异常;2例提示胎儿性染色体异常;无创DNA检测结果为高风险的12例孕妇,均进行了羊水或脐血穿刺,7例21三体高风险中7例为47,XN,+21;2例18三体高风险者中1例为47,XN,+18,1例为46,XN;1例13三体高风险者中1例为47,XN,+13;2例性染色体异常中,1例为XXY,1例为45X。并对无创DNA检测阴性的出生新生儿进行随访,未诉明显异常。应用无创DNA检测技术诊断胎儿染色体疾病的敏感度为100.00%,特异度为99.91%,假阴性率为0,假阴性率为0.09%,无创DNA产前检测对21三体,13三体和性染色体的符合率为100.00%,对18三体的符合率为50.00%。结论无创DNA检测技术在产前筛查中准确性高,假阳性和假阴性低的优点,可提高产前筛查效率,减少染色体疾病患儿的出生,是快捷、安全、较介入性产前诊断易于接受、值得推广的安全可靠的产前筛查方法,是今后发展的必然趋势。但无创DNA检测出的高风险孕妇,也必须进行羊水穿刺进一步确诊。

细胞融合与肿瘤关系研究进展

细胞融合,是生物体在发展和达到动态平衡过程中产生的。而肿瘤的发展是一个多步骤的复杂过程,从肿瘤的发生及生长,到肿瘤发生转移,这些过程都与细胞融合关系密切。目前对细胞融合与肿瘤之间关系的研究较多,主要集中于几个方面:细胞融合研究机制;不同细胞之间的融合;细胞融合与其它学说如上皮-间质转化(EMT)、染色体非整倍性、肿瘤异质性等之间的关系;细胞融合与血管生成和肿瘤转移的研究等等。本文主要从以上几个方面入手,初步探究细胞融合与肿瘤之间的关系,从而为肿瘤治疗提供新的目标和方向。

高龄患者行胚胎植入前遗传学筛查的有效性分析

目的通过胚胎植入前遗传学筛查(PGS)及自然流产组织检测数据的回顾性分析,阐述年龄与胚胎染色体异常的相关性,进而评估高龄患者行胚胎植入前遗传学筛查的有效性。方法对我中心2014.01-2016.12期间PGS患者胚胎及自然流产患者流产组织染色体异常分布频数进行计算比对;并将PGS患者及自然流产患者按照年龄分为n<30岁,30岁≤n<35岁,35岁≤n<40岁,n>40岁4个组,计算各组胚胎及流产组织染色体正常/异常数(率);统计分析各组PGS患者的临床妊娠率、流产率。结果胚胎及流产组织中染色体异常占比分别为59.02%及52.28%。依照4个年龄分组,胚胎及流产组织中染色体非整倍性比率分别为56%、61%、65%、78%和44.55%、46.05%、81.32%、85%。4组PGS患者临床妊娠率无显著差异(P>0.05);n>40岁组流产率显著高于其他各组(P<0.05)。结论 PGS能有效避免因染色体异常胚胎植入而引起的自然流产;随女性年龄增长,胚胎染色体非整倍性增加;PGS能帮助高龄患者获得较好的临床结局。