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基于非标记分析方法应用四极杆-静电场轨道阱-线性离子阱三合一高分辨质谱仪鉴定中国仓鼠卵巢细胞膜蛋白
1
作者
刘雅雯
梁雄顺
+3 位作者
胡绪乔
刘小倩
徐万娜
洪文旭
《新发传染病电子杂志》
2024年第2期34-40,共7页
目的 探讨应用四极杆-静电场轨道阱-线性离子阱(Orbitrap fusion lumos)三合一高分辨质谱仪鉴定中国仓鼠卵巢(Chinese hamster overy,CHO)细胞的全蛋白质组和膜蛋白质组的非标记(label-free)分析方法,并评价其应用效果,为研究膜蛋白相...
目的 探讨应用四极杆-静电场轨道阱-线性离子阱(Orbitrap fusion lumos)三合一高分辨质谱仪鉴定中国仓鼠卵巢(Chinese hamster overy,CHO)细胞的全蛋白质组和膜蛋白质组的非标记(label-free)分析方法,并评价其应用效果,为研究膜蛋白相关传染病的发生机制提供方法学基础。方法 贴壁培养中国仓鼠卵巢细胞,提取、富集和酶解处于对数生长期细胞的全蛋白和膜蛋白,用高效液相色谱仪联用四极杆-静电场轨道阱-线性离子阱三合一高分辨质谱仪对酶解后的多肽进行分析,利用Maxquant软件和Uniprot数据库进行搜库及鉴定,最后对鉴定膜蛋白进行基因本体论(gene ontology,GO)功能分类。结果 全蛋白组一共检测出14 300个肽段,搜库得到2708个蛋白,其中可信蛋白2002个(FDR<1%且特异性肽段>1);膜蛋白组一共检测出13 179个肽段,搜库得到2594个蛋白,其中可信蛋白1873个。在鉴定的全蛋白组和膜蛋白组中定量结果前20的蛋白中,全蛋白组中与膜相关的蛋白有4个,占比20%;膜蛋白组中与膜相关的蛋白有10个,占比50%。在膜蛋白组中,GO功能分类表明分子功能上主要涉及结合和催化活性,在生物学进程上主要涉及细胞进程、代谢过程等。结论 膜蛋白组中与膜相关的蛋白显著高于本实验的全蛋白组,基于非标记分析方法应用Orbitrap fusion lumos的分析技术是鉴定细胞膜蛋白的有效方法。
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关键词
中国仓鼠卵巢细胞
膜蛋白质
非标记方法
四极杆-静电场轨道阱-线性离子阱高分辨质谱仪
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职称材料
非标记蛋白定量方法在掺假肉鉴别中的应用
被引量:
2
2
作者
金绍明
宁霄
+1 位作者
曹进
丁宏
《食品安全质量检测学报》
CAS
2019年第1期71-74,共4页
目的建立一种非标记蛋白定量法鉴别牛肉或羊肉中是否掺假。方法采用四极杆串联飞行时间高分辨质谱分析各种肉类蛋白酶解之后的样品,找到每种肉类特异的肽段,再用串联四极杆质谱测定特异肽段的定量结果,判定样本中是否有这种肉类存在。...
目的建立一种非标记蛋白定量法鉴别牛肉或羊肉中是否掺假。方法采用四极杆串联飞行时间高分辨质谱分析各种肉类蛋白酶解之后的样品,找到每种肉类特异的肽段,再用串联四极杆质谱测定特异肽段的定量结果,判定样本中是否有这种肉类存在。结果在测定的牛肉、羊肉、猪肉、鸡肉和鸭肉样本中,均找到每种肉类的特异肽段5~7条,从每种肉中选择3条肽段进行定量分析,可以很好地鉴别出牛羊肉中掺杂的其他肉类。结论该方法操作简便,结果可靠,灵敏度高,可用于在牛肉或羊肉中掺杂其他肉类的鉴别。
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关键词
非
标记
蛋白定量
方法
肽段
四极杆串联飞行时间质谱
串联四极杆质谱
肉类掺假
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职称材料
表面增强拉曼光谱(SERS)技术对非标记蛋白质的研究进展
被引量:
1
3
作者
陈雷
孔卫贺
+1 位作者
韩晓霞
赵冰
《光谱学与光谱分析》
SCIE
EI
CAS
CSCD
北大核心
2016年第10期3087-3091,共5页
基于表面增强拉曼光谱(SERS)技术在非标记蛋白质研究方面的最新进展。SERS是一个特殊的拉曼光谱现象,对于众多被吸附到粗糙金属表面上的拉曼活性分析物,可以提供增强拉曼信号(通常可以增强几个数量级)。SERS是一个灵敏的,选择性的,和通...
基于表面增强拉曼光谱(SERS)技术在非标记蛋白质研究方面的最新进展。SERS是一个特殊的拉曼光谱现象,对于众多被吸附到粗糙金属表面上的拉曼活性分析物,可以提供增强拉曼信号(通常可以增强几个数量级)。SERS是一个灵敏的,选择性的,和通用的技术,并且可以实时、快速的对数据进行采集。因此,在基于仪器仪表技术和数据分析方法以及SERS在生物体系中的诸多优势,SERS经历了快速的发展阶段。重点介绍几个采用SERS技术对生物体系的代表性研究。某些SERS的生物应用发展比较成熟,并已经可以小范围临床应用,而有些还停留在发展的初始阶段(实验室研究阶段)。讨论了最近发展起来的几种基于SERS技术定量分析的方法,选择不同SERS活性基底和技术(如生物分子在电极上,胶体纳米粒子,周期性图案结构和基于针尖拉曼技术)对蛋白质进行直接研究。此外,根据SERS指纹信息的变化可以用来研究蛋白质-蛋白质,蛋白质-配体间的相互作用。基于SERS技术对生物分子进行定性和/或定量分析方面显示出了相当大的优势。
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关键词
表面增强拉曼光谱
蛋白质
非标记方法
定性分析
定量分析
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职称材料
基于石墨烯量子点的荧光探针应用于抗坏血酸检测的研究
被引量:
3
4
作者
赵丽敏
陈丽妮
赵书林
《发光学报》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2017年第1期124-131,共8页
基于石墨烯量子点(GQDs)的荧光性能建立了一种非标记荧光方法,用于灵敏和选择性测定抗坏血酸(AA)。GQDs溶液在紫外光激发下发出很强的蓝色荧光,当向溶液中加入AA后,GQDs溶液的荧光被猝灭。猝灭机理可能为在弱酸性介质中,AA与GQDs发生氧...
基于石墨烯量子点(GQDs)的荧光性能建立了一种非标记荧光方法,用于灵敏和选择性测定抗坏血酸(AA)。GQDs溶液在紫外光激发下发出很强的蓝色荧光,当向溶液中加入AA后,GQDs溶液的荧光被猝灭。猝灭机理可能为在弱酸性介质中,AA与GQDs发生氧化还原反应,AA转移电子给GQDs。荧光猝灭强度与AA浓度在5.0×10^(-6)~7.5×10^(-5)mol/L范围内呈良好的线性关系,检出限低至1.0×10^(-6)mol/L。该体系成本低、操作简单,并且在多种可能干扰的物质存在下对AA表现出很高的选择性。本方法应用于生物样品中AA的检测,回收率在95.2%~115.3%之间。
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关键词
石墨烯量子点
荧光探针
非标记方法
抗坏血酸
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职称材料
题名
基于非标记分析方法应用四极杆-静电场轨道阱-线性离子阱三合一高分辨质谱仪鉴定中国仓鼠卵巢细胞膜蛋白
1
作者
刘雅雯
梁雄顺
胡绪乔
刘小倩
徐万娜
洪文旭
机构
深圳市慢性病防治中心中心实验室
汕头大学公共卫生学院
出处
《新发传染病电子杂志》
2024年第2期34-40,共7页
基金
深圳医疗卫生“三名工程”(SZSM201811057)。
文摘
目的 探讨应用四极杆-静电场轨道阱-线性离子阱(Orbitrap fusion lumos)三合一高分辨质谱仪鉴定中国仓鼠卵巢(Chinese hamster overy,CHO)细胞的全蛋白质组和膜蛋白质组的非标记(label-free)分析方法,并评价其应用效果,为研究膜蛋白相关传染病的发生机制提供方法学基础。方法 贴壁培养中国仓鼠卵巢细胞,提取、富集和酶解处于对数生长期细胞的全蛋白和膜蛋白,用高效液相色谱仪联用四极杆-静电场轨道阱-线性离子阱三合一高分辨质谱仪对酶解后的多肽进行分析,利用Maxquant软件和Uniprot数据库进行搜库及鉴定,最后对鉴定膜蛋白进行基因本体论(gene ontology,GO)功能分类。结果 全蛋白组一共检测出14 300个肽段,搜库得到2708个蛋白,其中可信蛋白2002个(FDR<1%且特异性肽段>1);膜蛋白组一共检测出13 179个肽段,搜库得到2594个蛋白,其中可信蛋白1873个。在鉴定的全蛋白组和膜蛋白组中定量结果前20的蛋白中,全蛋白组中与膜相关的蛋白有4个,占比20%;膜蛋白组中与膜相关的蛋白有10个,占比50%。在膜蛋白组中,GO功能分类表明分子功能上主要涉及结合和催化活性,在生物学进程上主要涉及细胞进程、代谢过程等。结论 膜蛋白组中与膜相关的蛋白显著高于本实验的全蛋白组,基于非标记分析方法应用Orbitrap fusion lumos的分析技术是鉴定细胞膜蛋白的有效方法。
关键词
中国仓鼠卵巢细胞
膜蛋白质
非标记方法
四极杆-静电场轨道阱-线性离子阱高分辨质谱仪
Keywords
Chinese hamster ovary cells
Membrane protein
Non labeling method
Orbitrap fusion high-resolution mass spectrometer
分类号
Q73 [生物学—分子生物学]
R34 [医药卫生—基础医学]
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职称材料
题名
非标记蛋白定量方法在掺假肉鉴别中的应用
被引量:
2
2
作者
金绍明
宁霄
曹进
丁宏
机构
中国食品药品检定研究院食品检定所
出处
《食品安全质量检测学报》
CAS
2019年第1期71-74,共4页
基金
中国食品药品检定研究院中青年发展研究基金(2014C8)~~
文摘
目的建立一种非标记蛋白定量法鉴别牛肉或羊肉中是否掺假。方法采用四极杆串联飞行时间高分辨质谱分析各种肉类蛋白酶解之后的样品,找到每种肉类特异的肽段,再用串联四极杆质谱测定特异肽段的定量结果,判定样本中是否有这种肉类存在。结果在测定的牛肉、羊肉、猪肉、鸡肉和鸭肉样本中,均找到每种肉类的特异肽段5~7条,从每种肉中选择3条肽段进行定量分析,可以很好地鉴别出牛羊肉中掺杂的其他肉类。结论该方法操作简便,结果可靠,灵敏度高,可用于在牛肉或羊肉中掺杂其他肉类的鉴别。
关键词
非
标记
蛋白定量
方法
肽段
四极杆串联飞行时间质谱
串联四极杆质谱
肉类掺假
Keywords
non-labeled protein quantification method
peptides
quadrupole tandem time-of^flight mass spectrometry
triple quadrupole tandem mass spectrometry
meat adulteration
分类号
TS207.3 [轻工技术与工程—食品科学]
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职称材料
题名
表面增强拉曼光谱(SERS)技术对非标记蛋白质的研究进展
被引量:
1
3
作者
陈雷
孔卫贺
韩晓霞
赵冰
机构
吉林师范大学环境友好材料制备与应用教育部重点实验室
吉林大学超分子结构与材料国家重点实验室
出处
《光谱学与光谱分析》
SCIE
EI
CAS
CSCD
北大核心
2016年第10期3087-3091,共5页
基金
国家自然科学基金项目(21403082
21273091)
+2 种基金
吉林省科技发展计划项目(20150520015JH)
吉林省教育厅项目(2016-217)
吉林师范大学博士科研启动项目(2014004)资助
文摘
基于表面增强拉曼光谱(SERS)技术在非标记蛋白质研究方面的最新进展。SERS是一个特殊的拉曼光谱现象,对于众多被吸附到粗糙金属表面上的拉曼活性分析物,可以提供增强拉曼信号(通常可以增强几个数量级)。SERS是一个灵敏的,选择性的,和通用的技术,并且可以实时、快速的对数据进行采集。因此,在基于仪器仪表技术和数据分析方法以及SERS在生物体系中的诸多优势,SERS经历了快速的发展阶段。重点介绍几个采用SERS技术对生物体系的代表性研究。某些SERS的生物应用发展比较成熟,并已经可以小范围临床应用,而有些还停留在发展的初始阶段(实验室研究阶段)。讨论了最近发展起来的几种基于SERS技术定量分析的方法,选择不同SERS活性基底和技术(如生物分子在电极上,胶体纳米粒子,周期性图案结构和基于针尖拉曼技术)对蛋白质进行直接研究。此外,根据SERS指纹信息的变化可以用来研究蛋白质-蛋白质,蛋白质-配体间的相互作用。基于SERS技术对生物分子进行定性和/或定量分析方面显示出了相当大的优势。
关键词
表面增强拉曼光谱
蛋白质
非标记方法
定性分析
定量分析
Keywords
SERS
Proteins
Label-free method
Quantitative analysis
Qualitative analysis
分类号
O657.3 [理学—分析化学]
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职称材料
题名
基于石墨烯量子点的荧光探针应用于抗坏血酸检测的研究
被引量:
3
4
作者
赵丽敏
陈丽妮
赵书林
机构
安阳市质量技术监督检验测试中心
广西师范大学化学与药学学院教育部药用资源化学与药物分子工程重点实验室
出处
《发光学报》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2017年第1期124-131,共8页
基金
国家自然科学基金(21305020
21175030)
广西自然科学基金(2014GXNSFBA118041)资助项目~~
文摘
基于石墨烯量子点(GQDs)的荧光性能建立了一种非标记荧光方法,用于灵敏和选择性测定抗坏血酸(AA)。GQDs溶液在紫外光激发下发出很强的蓝色荧光,当向溶液中加入AA后,GQDs溶液的荧光被猝灭。猝灭机理可能为在弱酸性介质中,AA与GQDs发生氧化还原反应,AA转移电子给GQDs。荧光猝灭强度与AA浓度在5.0×10^(-6)~7.5×10^(-5)mol/L范围内呈良好的线性关系,检出限低至1.0×10^(-6)mol/L。该体系成本低、操作简单,并且在多种可能干扰的物质存在下对AA表现出很高的选择性。本方法应用于生物样品中AA的检测,回收率在95.2%~115.3%之间。
关键词
石墨烯量子点
荧光探针
非标记方法
抗坏血酸
Keywords
graphene quantum dots
fluorescence probe
label-free method
ascorbic acid
分类号
O482.31 [理学—固体物理]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基于非标记分析方法应用四极杆-静电场轨道阱-线性离子阱三合一高分辨质谱仪鉴定中国仓鼠卵巢细胞膜蛋白
刘雅雯
梁雄顺
胡绪乔
刘小倩
徐万娜
洪文旭
《新发传染病电子杂志》
2024
0
下载PDF
职称材料
2
非标记蛋白定量方法在掺假肉鉴别中的应用
金绍明
宁霄
曹进
丁宏
《食品安全质量检测学报》
CAS
2019
2
下载PDF
职称材料
3
表面增强拉曼光谱(SERS)技术对非标记蛋白质的研究进展
陈雷
孔卫贺
韩晓霞
赵冰
《光谱学与光谱分析》
SCIE
EI
CAS
CSCD
北大核心
2016
1
下载PDF
职称材料
4
基于石墨烯量子点的荧光探针应用于抗坏血酸检测的研究
赵丽敏
陈丽妮
赵书林
《发光学报》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2017
3
下载PDF
职称材料
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