基于四极杆-飞行时间质谱的非标记蛋白定量检测方法学研究

以四极杆飞行时间质谱检测的蛋白肽段的质谱信息为基础,开发了一种简单、准确的蛋白定性、定量检测方法,并用于牛血清白蛋白的定性、定量检测。对酶解肽段的梯度洗脱条件和流速等液相色谱条件进行了优化;进行蛋白样品的酶解及质谱检测,利用MassHunter定量软件对数据进行分析;为减少假阳性结果的出现,实验优化了数据处理软件中的设置参数,并对方法的重现性进行了考察。结果显示,重复检测的8个肽段峰面积的RSD均在3.0%以下。该方法对牛血清白蛋白的检出限为100 ng。实验发现,样品中蛋白的含量与检测到的肽段匹配率呈对数关系,并从检测到的丰度较高的8个肽段中确定可用于BSA蛋白定性检测的肽段为:HLVDEPQNLIK,定量检测的肽段为:ATEEQLK,方法的回收率为106%。该方法操作简便,检测快速,成本较低,专一性强,可用于蛋白特异性肽段的筛选及复杂生物样品中蛋白的检测。

Si基微环谐振腔化学传感检测方法研究

提出了一种非标记光化学传感检测方法:光波导谐振谱检测,通过感应环形波导表面有效折射率变化进行化学传感;理论分析,并结合光学测试系统,利用此方法实现了微环谐振腔结构对Na Cl离子、结晶紫分子溶液的在线浓度测量,实验得到:其检测灵敏度分别达181.47 pm/10-2,227 nm/(mol·L-1),证明了该方法可以应用于化学溶液检测领域。

Non-iterative image feature matching algorithm based on reference point correspondences

Based on the coded and non-coded targets, the targets are extracted from the images according to their size, shape and intensity etc., and thus an improved method to identify the unique identity（D） of every coded target is put forward and the non-coded and coded targets are classified. Moreover, the gray scale centroid algorithm is applied to obtain the subpixel location of both uncoded and coded targets. The initial matching of the uncoded target correspondences between an image pair is established according to similarity and compatibility, which are based on the ID correspondences of the coded targets. The outliers in the initial matching of the uncoded target are eliminated according to three rules to finally obtain the uncoded target correspondences. Practical examples show that the algorithm is rapid, robust and is of high precision and matching ratio.

光波导模式谱(OWLS)用于生物医学检测的研究进展

生物分子的识别、检测技术是生物分子学和生物医学研究中极为重要的领域。光波导模式谱(opticalwaveguidelightmodespectroscopy,OWLS)是一种非标记光学检测方法。OWLS方法通过检测波导附近的有效折射率的变化进行传感,无需进行放射性、荧光、或其他标记方法。通过同时对TM/TE两种传导模式的测定,可以实时定量分析波导表面吸附物质的质量。OWLS目前已经被应用到生物大分子相互作用、生物材料表征、环境及食品安全监测等领域。总结了以OWLS为原理构建的光栅生物传感器(opticalgratingcouplerbiosensor,OGCB)的原理,与其他非标记方法在传感指标方面的比较及应用领域的最新国外研究进展,并对该传感器的发展方向进行预测。

用光波导光模光谱技术研究DNA-DNA结合蛋白相互作用

探讨了应用光波导光模光谱(Optical waveguide lightmode spectroscopy,OWLS)技术研究DNA-DNA结合蛋白相互作用的可行性和灵敏性。以固定在传感器芯片表面的DNA探针为捕捉分子,溶液中同时含有探针结合序列和NF—κB结合位点序列的寡核苷酸与NF-κB亚单位p50同源二聚体形成的DNA-蛋白质复合物为检测分子,用光波导光模光谱检测技术建立非标记DNA-DNA结合蛋白相互作用检测研究体系。利用这一体系对不同样品中NF-κB p50浓度和具不同NF-κB结合位点序列的寡核苷酸与NF-κB p50亲合和力进行检测。样品中低至0．33 nmol/1的NF-κB p50被光波导光模光谱检测出,不同的NF-κB结合序列与NF-κB p50亲合力有显著的差异。研究发现,光波导光模光谱技术可以用于DNA-DNA结合蛋白相互作用研究,所建立的非标记检测研究体系可以进行样品中结合蛋白含量高灵敏检测和核酸序列与结合蛋白的亲合力的检测研究。