基于褐藻酸钠纳-米金复合物作非酶标记的新型电化学免疫传感器的研制

比较了用三碘甲状腺氨酸抗体(T3抗体)、褐藻酸钠(AS)标记T3抗体及褐藻酸钠 纳米金复合物(ASN)标记的T3抗体,在通过免疫反应结合到免疫电极表面后,引起的电极表面微环境发生改变的程度;用Fe(CN)3-/4-6为电化学探针,用循环伏安法获取金电极表面微环境改变的电流信息来检测T3抗体,检测的线性范围为100～1600ng·ml-1,检出限为45ng·ml-1。

基于新型六方相硫化镉纳米材料的光电化学免疫传感器及前列腺特异性抗原灵敏检测

以新型纳米材料六方相硫化镉(CdS)为光电极,利用空间位阻效应,构建了一种灵敏检测前列腺特异性抗原(PSA)的无标记型光电化学(PEC)免疫传感器。当目标物PSA存在时,修饰在光电极上的抗体特异性识别PSA形成免疫复合物,电极界面空间位阻的增加导致光电流响应的降低。光电极良好的光电性能结合免疫反应的高特异性,使得该免疫传感器具有良好的分析性能。在优化实验条件下,该方法对PSA的检出限为5.0×10^(-13)g/mL,线性范围在1.0×10^(-12)~1.0×10^(-7)g/mL。将该方法应用于人血清中PSA的检测,加标回收率为90.0%~112.0%,相对标准偏差(RSDs)不大于5.0%,结果与信阳市中心医院提供的参考结果基本一致。

非标记凝血酶阵列电化学适体传感器的研究

基于自制的集成化三阵列金膜电极,构建了一个简单、灵敏、非标记的凝血酶阵列电化学适体传感器.以聚乙烯不干胶掩膜版法结合金属溅射沉积技术,在FR-4玻璃纤维板上制作了由3个金膜工作电极、1个大面积金膜对电极和1个厚膜Ag/AgCl参比电极构成的集成化金膜阵列电极系统.以集成化金膜阵列电极作为基础电极,采用巯基自组装技术将带巯基的凝血酶适体固定在3个金工作电极表面,巯基己醇封闭后获得三阵列凝血酶适体传感器,以电活性物质铁氰化钾作为电化学探针,基于凝血酶适体和凝血酶结合前后铁氰化钾在电极表面传质的不同导致电流变化进行凝血酶的测定.采用方波脉冲伏安法,铁氰化钾氧化峰电流的变化值与凝血酶浓度在1.52 ～63 nmol/L范围内呈良好的线性关系,检出限（S/N=3）为0.92 nmol/L.

基于CdS量子点-CNTs复合物的无标记电化学发光免疫传感器

由于尺寸效应的影响，半导体纳米晶体（NCs，又称量子点QDs）具有优良的电学、光学、磁学和电化学性质。半导体纳米晶体因其独特的荧光特性而广泛应用于发光装置与生物标记领域。半导体纳米晶的荧光特性通常通过光致发光（PL）、电致化学发光（ECL）、阴极发光等进行研究。电致化学发光在半导体纳米晶的基础研究和分析应用中是一种非常有用的技术。

基于三金属Au@PdPt纳米颗粒修饰花状MnO_(2)纳米片的无标记电化学免疫传感器应用于NT-proBNP的高灵敏度检测

N-末端脑利钠肽前体(NT-proBNP)的灵敏检测是降低心力衰竭死亡率的重要先决条件。在这项研究中,开发了一种无标记电流免疫传感器来灵敏地检测NT-proBNP。它基于三金属Au@PdPt纳米颗粒修饰花状MnO_(2)纳米片的复合纳米材料。三金属Au@PdPt纳米颗粒提高了催化活性,花状MnO_(2)纳米片具有大的活性表面积能有效阻止Au@PdPt纳米颗粒聚集。因此,该纳米复合材料表现出较高的催化活性,增强的电子转移能力并有效地固定了抗体,从而放大了电流信号。基于上述优点,制备的免疫传感器表现出从1 pg·mL^(-1)到100 ng·mL^(-1)的宽浓度范围和0.76 pg·mL^(-1)的低检测限。此外,这种无标记免疫传感器具有高灵敏度、良好的选择性和长期稳定性,在生物测定分析中具有广阔的应用前景。

以多孔金电极为传感界面的电化学双标记免疫传感器研究

本实验中制备得多孔金纳米电极,并采用层层自组装技术制作三明治电化学免疫夹心传感器。采用二种不同电位响应的中性红(NR)和硫堇(TH)为电活性标记物,利用循环伏安法(CV)和示差脉冲伏安法(DPV)定量测量,抗原浓度在1~100 ng/mL范围内,成功实现了正常兔和正常鼠的同时免疫检测,为未来多抗原同时免疫检测奠定了理论基础并具有一定的临床实验价值。

高灵敏肿瘤标志物电化学免疫传感器研究

高灵敏电化学免疫传感器的设计与制备是免疫生物传感器研究进步的重要标志之一。近年来，该文采用多种纳米材料及酶标记技术，结合自组装技术、反电荷技术、生物素一亲和素技术等研制了高灵敏的单一组分或多组分免疫传感器（如CEA、AFP、CA125、CA19—9、CA15—3、HCG）的检测方法。

电化学免疫传感器进展概况

病原菌或异种蛋白质等异物(抗原)进入人体和动物体内后,人体和动物体体内的免疫体系将产生出排除这些异物的抗体。人们从实践中利用动物体这种功能已制出抗激素、酶、病毒、癌抗原、细菌抗原和其他许多蛋白质的抗体。

基于金纳米粒子组装电化学DNA传感器检测p53抑癌基因的研究

基于金纳米粒子修饰金电极,构建了一种检测p53抑癌基因的非标记电化学DNA传感器.采用恒电位沉积法制备金纳米粒子,并将其修饰于电极表面制得金纳米粒子修饰金电极（GNPs/Au）.场发射扫描电镜用于金电极和金纳米修饰电极的表面形貌表征.5 ＇端带巯基的捕获探针DNA通过分子自组装法固定到GNPs/Au.传感器采用循环伏安法和电化学交流阻抗法表征.以亚甲基蓝为杂交指示剂,根据杂交前后吸附指示剂量的不同对p53抑癌基因进行定量测定.在优化的实验条件下,p53抑癌基因在1.0～1000 nmol/L浓度范围内与亚甲基蓝还原峰电流的变化值△I呈线性关系,检出限为0.8 nmol/L（S/N=3）.对50 nmol/L p53抑癌基因平行测定11次,相对标准偏差为3.8％.此传感器能有效区分完全互补序列、单碱基错配序列和三碱基错配序列DNA.

溶胶-凝胶非标记免疫传感器检测乙肝表面抗原

采用溶胶 凝胶 (sol gel)技术包埋乙肝表面抗体 (HBsAb) ,涂布于金盘电极表面 ,构成sol gel HBsAb/Au非标记免疫传感器 ,用于检测人血清中乙肝表面抗原 (HBsAg)。该传感器对HBsAg的电位响应遵循Nernst方程 ,在 1～ 330 μg/L浓度范围内 ,传感器的电位响应值ΔE与HBsAg浓度C的对数呈线性关系 ,线性回归方程为ΔE =1 8.1 7+79.84lgC。响应时间为 3min。癌胚抗原、甲胎蛋白等对测定无明显影响。对于HBsAg阴性血清 ,电位响应值ΔE <30mV ,而对于阳性血清则ΔE >30mV ,据此 ,作为临床判别的依据。对1 0 0例临床血清分别用传感器和酶联免疫法 (ELISA)进行双盲检验 ,两法的符合率为 86 %。

基于纳米金/壳聚糖掺杂碳纳米管修饰金电极非标记免疫传感器的研究

应用吸附法将羊抗人IgG抗体直接固定于纳米金（GNPs）/壳聚糖（Chit）掺杂碳纳米管（CNTs）修饰的金电极表面,制备了用于人IgG抗原检测的非标记电化学免疫传感器。利用循环伏安法和交流阻抗研究了修饰电极表面的电化学特性,用差分脉冲伏安法研究了测试底液的pH值对免疫传感器性能的影响。实验表明,在含不同浓度人IgG的PBS溶液（pH7.0）中,免疫传感器的响应电流与人IgG的质量浓度在0.05~455μg/L范围内呈良好的线性关系,相关系数（r2）为0.991 1,其检出限（S/N=3）为0.01μg/L。与传统方法相比,该免疫传感器无需信号放大试剂,具有制备简单、灵敏度高、稳定性好等特点。

双层类脂膜非标记乙型肝炎表面抗原免疫传感器

采用固体铂盘电极支撑的双层类脂膜(Pt-BLM)技术固定乙肝表面抗体(HBsAb),研制成Pt-BLM-HBsAb电位型非标记免疫传感器,用于检测人血清中乙肝表面抗原(HBsAg).对影响构筑BLM的各种因素进行了研究,用循环伏安法对pt-BLM进行了表征.传感器对HBsAg呈Nernst响应,其线性范围为2～320μg/L,线性回归方程为△V=-1.09+32.4lg ρ(HBsAg),线性相关系数r=0.999 8.该传感器响应迅速,灵敏度高,稳定性及选择性好,于4℃干态保存4周,其响应信号基本不变.将其用于临床血清检验,结果满意.

一种基于纳米金/石墨烯/普鲁士蓝(PB)修饰玻碳电极非标记免疫传感器

采用电聚合的方法将普鲁士蓝(PB)聚合在玻碳电极表面,再将石墨烯修饰在PB上面,然后再采用电沉积的方法将HAuCl4直接还原成纳米金粒子,沉积在石墨烯表面,最后将羊抗人IgG抗体直接固定于该修饰的玻碳电极表面,制备了用于人IgG抗原检测的非标记电化学免疫传感器。利用循环伏安法和交流阻抗研究了修饰电极表面的电化学特性,用差分脉冲伏安法对人IgG抗原进行了测定。实验表明,此免疫传感器在含不同浓度人IgG的PBS溶液(pH6.98)中测定,响应电流与人IgG浓度在5.55～455.5ng/mL范围内有良好的线性关系,其相关系数r=0.9926,检测限为0.015ng/mL(S/N=3)。该免疫传感器具有制备简单、响应时间快(5min)、稳定性好等特点。

基于Pd/COF-LZU1非标记型C-反应蛋白免疫传感器的研制

采用溶剂热法,通过有机单体合成了一种亚胺键连接的共价有机框架材料（COF-LZU1）;在常温常压条件下,通过后合成的方法将贵金属钯（Ⅱ）引入到COF材料中,合成了复合材料Pd/COF-LZU1,该材料具有优良的催化性能.利用Pd/COF-LZU1多孔复合材料将C-反应蛋白（CRP）抗体（anti-CRP）固定在玻碳电极表面,构建了一种非标记型CRP免疫传感器.当抗体与抗原发生免疫反应时,形成的免疫复合物会阻碍电化学探针[Fe（CN）6]^4-/3-的电子传递,降低其响应电流,从而实现CRP的快速检测.采用交流阻抗和差示脉冲伏安法（DPV）考察了免疫传感器的电化学特性,同时考察了测试底液的p H值、抗原培育时间和抗体固定浓度等实验条件对传感器性能的影响.在最优的实验条件下,采用DPV法对CRP进行检测的线性范围为5-180 ng/m L,检出限为1.66 ng/m L,线性相关系数为0.992.

非标记型河虾免疫传感器的制备及应用

四乙氧基硅在HCl催化下水解形成硅溶胶。将硅溶胶与河虾抗体混合均匀后,涂于玻碳电极表面制备得非标记型河虾抗体免疫传感器。采用Fe（CN）6^3-/4-的磷酸盐缓冲溶液（pH 6.5）为测试底液,研究此传感器在免疫反应中的循环伏安和交流阻抗特性。结果显示免疫反应后传感器的循环伏安图上未出现新的氧化-还原峰,表明该免疫反应属于非氧化还原过程。采用交流阻抗监测电极表面,发现传感器阻抗值随虾过敏原浓度的增加而增大。对交流阻抗图进行分析,结果表明电极表面的免疫反应是一个受电子转移控制的过程。当虾过敏原浓度在0-10 ng/mL之间,电极表面电子转移阻抗的增加值与虾过敏原浓度呈线性关系,检出限为0.1 ng/mL（S/N=3）。该方法已成功应用于河虾制品中过敏原的测定。

电化学适配体传感器的研究进展

核酸适配体是通过指数富集的配体系统进化技术（SELEX）体外筛选获得的,是一个短的单链脱氧核糖核酸（DNA）或核糖核酸（RNA）分子[1]。核酸适配体通过分子内的相互作用折叠形成特定的三维结构而与靶标分子特异性结合,其功能类似于抗体,因此核酸适配体被人们称为“化学抗体”。

苝二酰亚胺衍生物-聚苯胺-氮化碳非标记型C-反应蛋白免疫传感器的研制

本文以苝二酰亚胺衍生物(PDI)-聚苯胺(PANI)-氮化碳(C3N4)复合材料为电化学活性物质和基底材料构建了一种非标记型免疫传感器用于C反应蛋白(CRP)的定量检测。首先,将带有氨基的PDI与PANI结合,然后,加入羧基化的C3N4形成复合材料PDI-PANI-C3N4,提高了材料的导电性。本文所构建的免疫传感器采用差分脉冲伏安法(DPV)于PBS(pH 7.4)中定量检测CRP,无需在溶液中加入其他电活性物质。当CRP抗体和抗原在电极表面特异性结合后,能够阻碍电流的传导,其响应电流会随着结合的CRP抗原的量增多而降低,由此实现CRP实时快速的检测。本实验对CRP抗体浓度、培育时间对免疫传感器的影响进行探究,在最优检测条件下,CRP抗原浓度与响应电流呈线性关系,线性范围为5~200 ng·mL^-1,检测下限为1.66 ng·mL^-1。同时,该免疫传感器在面对多种干扰物时,具有良好的抗干扰能力。

PdAu纳米颗粒非标记免疫传感器测定牛奶中的黄曲霉素B_1

用溶剂热法合成PdAu纳米颗粒,将其修饰在玻碳电极表面,然后根据抗体的自组装作用将黄曲霉素B1的抗体固定在PdAu/GCE表面,制得免疫传感器。以[Fe（CN）6]3-作为探针对黄曲霉素B1实现灵敏的间接检测。优化了实验条件对传感器性能的影响。结果表明,在电位为0.2V条件下,该传感器检测黄曲霉素B1的线性范围为0.1~12μg/L;其检测限为0.033μg/L。该传感器选择性好、灵敏度高、具有良好的重现性。

基于电化学适配体传感器超灵敏检测赭曲霉毒素A的研究进展

以赭曲霉毒素A为切入点,从电化学检测手段以及电化学适配体传感器类型的角度出发进行综述,对目前存在的传感器构建过程及策略进行详述,并分析了其优缺点。

基于聚硫堇/亚甲基蓝和纳米金放大的免疫传感器检测贝类毒素大田软海绵酸

采用聚硫堇（PTH）修饰电极为传感界面提供一个生物修饰功能基质膜,借助纳米金（GNPs）的导电性、生物相容性与高比表面积特性实现抗体的有效固定,并以亚甲基蓝（MB）为电子媒介加速电极表面电化学反应的电子传递,构建了一种高灵敏的非标记电化学免疫传感器,用于贝类毒素大田软海绵酸（OA）的检测.当分子结构中含有羧基和酚基的OA与其抗体特异性结合后,生成以阴离子形式存在的抗原-抗体复合物,阻碍了传感器表面电子的传递,导致峰电流下降.利用免疫反应前后峰电流的变化,可对OA进行特异性识别和准确定量.在优化实验条件下,OA浓度的对数在0.2～100 μg/L范围内与其峰电流的变化值（△I）呈线性相关,线性方程为△I=1.721 7＋1.083 6lgρ,相关系数为0.992 0,检出限为0.1μg/L.该免疫传感器重现性好、特异性强,用于实际贝类样品的测定,回收率为85.3％～ 112％.