巴马汀/非洲防己碱的合成及其降糖活性的研究

巴马汀和非洲防己碱是原小檗碱类生物碱,具有广泛的生物活性,然而其在自然界中含量较少影响了其应用。为了扩大巴马汀和非洲防己碱的来源,提高黄连的综合开发利用价值,以黄连地上部位合成巴马汀和非洲防己碱。运用1H NMR和HR-MS对其结构进行表征,通过细胞实验和分子对接研究其降糖活性及作用机制。结果表明:黄连地上部位总生物碱提取率为1.4%,由总生物碱合成巴马汀和非洲防己碱的产率分别为43.0%和29.8%,二者总收率分别为0.6%和0.4%;经过100μmol/L浓度药物处理,巴马汀和非洲防己碱能够显著提高HepG2细胞的葡萄糖消耗,与MAPK1、AKT1、TP53、RELA和TNF受体靶蛋白的结合能均小于-5 kcal/mol。本研究以黄连地上部位成功合成具有降糖活性的巴马汀和非洲防己碱,MAPK1、AKT1、TP53、RELA和TNF可能是其潜在靶标基因,其中非洲防己碱可作为先导化合物进行深入研究。

超高效液相色谱-串联质谱法检测大鼠血浆中非洲防己碱

目的建立超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)法检测大鼠血浆中非洲防己碱,并研究非洲防己碱的药代动力学及其绝对生物利用度。方法以格兰地新为内标,采用UPLC BEH C18柱(2. 1 mm×50 mm,1. 7μm)为分离柱,以乙腈-0. 1%甲酸为流动相,进行梯度洗脱,流速为0. 4 ml/min。大鼠血浆样本通过乙腈沉淀法去除蛋白,MRM模式监测定量,非洲防己碱m/z 338→322和内标m/z 322→307,正离子模式电喷雾离子源(ESI)。18只SD雄性大鼠用来药动学研究,分别静脉给药(0. 5 mg/kg和1. 0 mg/kg)和口服给药(10. 0 mg/kg)。结果在1 ng/ml^500 ng/ml内,该方法线性良好(r> 0. 995)。准确度在87. 5%~104. 3%,精密度<15%,基质效应在84. 2%~97. 7%,回收率≥78. 1%。结论该建立的UPLC-MS/MS方法简单、快速,并成功应用于非洲防己碱大鼠静脉和口服后的药代动力学,绝对生物利用率为15. 1%。

海南青牛胆生物碱的研究

目的：研究海南青牛胆（ Ｔｉｎｏｓｐｏｒａ ｈａｉｎａｎｅｎｓｉｓ Ｈ． Ｓ． Ｌｏ ｅｔ Ｚ． Ｘ． Ｌｉ） 藤茎中的生物碱成分。方法：用溶剂提取及硅胶柱色谱分离纯化化学成分，通过 Ｍ Ｓ， Ｎ Ｍ Ｒ， Ｈ Ｍ Ｑ Ｃ， Ｈ Ｍ Ｂ Ｃ 及 Ｘｒａｙ 测定结构。结果：３ 种季铵生物碱以碘化物 形式 被 分 离 并鉴 定 为： 非洲 防 己 碱（ｃｏｌｕ ｍｂａ ｍｉｎｅ ， Ｉ） 、 Ｓ反 式 Ｎ甲 基四 氢 非 洲 防 己 碱（ Ｓｔｒａｎｓ Ｎｍ ｅｔｈｙｌｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｃｏｌｕ ｍｂａｍｉｎｅ ， Ｉ Ｉ） 及 Ｓ反式轮环藤酚碱（ Ｓｔｒａｎｓｃｙｃｌａｎｏｌｉｎｅ ， Ｉ Ｉ Ｉ） 。结论： Ｉ Ｉ Ｉ是新生物碱。

肾衰宁片中黄连6种生物碱类成分含量测定研究

目的建立同时测定肾衰宁片中黄连药材中盐酸药根碱、非洲防己碱、表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀和盐酸小檗碱6种黄连类生物碱成分含量的方法。方法采用高效液相色谱法(HPLC),色谱柱为Shimadzu MGⅡC_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.06 mol/L碳酸氢铵溶液,梯度洗脱;流速1.0 ml/min;柱温30℃;检测波长345 nm,进样量10μl。结果盐酸药根碱、非洲防己碱、表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀和盐酸小檗碱6种成分在各自范围内线性关系良好(r>0.9995),平均加样回收率97.9%~103.7%,RSD为1.5%~2.3%。测定4家生产企业的22批肾衰宁片中6种生物碱的含量结果表明,不同企业及不同批次样品间各成分含量均存在明显差异。结论该方法准确可靠,可应用于肾衰宁片中黄连药材中盐酸药根碱、非洲防己碱、表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀和盐酸小檗碱6种生物碱成分的质量控制,进而全面有效地评价肾衰宁片的质量,为提高该制剂的质量标准提供依据。

金线风中5种生物碱含量测定及提取工艺研究

为了建立同时测定金线风药材中木兰花碱、左旋箭毒碱、非洲防己碱、巴马亭红碱及掌叶防己碱5种生物碱成分的高效液相色谱(HPLC)方法及提取工艺的优化。采用HPLC法,Wetch Xtimate C 18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为乙腈(A)-0.5%磷酸水溶液(B),梯度洗脱,检测波长为282 nm,流速为0.5 mL/min,柱温30℃;采用正交实验以乙醇浓度、料液比、pH和提取次数为考察因素,5种生物碱之和的提取率为考察指标对超声微波提取工艺进行优化并验证。木兰花碱、左旋箭毒碱、非洲防己碱、巴马亭红碱及掌叶防己碱分别在测量范围内线性关系良好。正交优化实验得出金线风生物碱最佳提取条件为乙醇浓度60%,料液比1∶18,用盐酸溶液调节提取液pH为2,提取4次。优化后的提取条件可使金线风生物碱提取率达到2.33%。该HPLC法准确可靠,灵敏快捷,重复性高,可为金线风提取物生物碱的质量评价与控制提供实验依据;优化的超声微波提取工艺可重复、稳定。

小檗碱类成分对乙酰胆碱酯酶的抑制作用及血脑屏障透过性分析

目的:从药靶结合亲和力和动力学角度研究非洲防己碱等小檗碱类成分对乙酰胆碱酯酶的抑制作用;并在不同多成分背景下研究这类成分的血脑屏障透过性。方法:采用Ellman改良的光度检测法测量非洲防己碱等小檗碱类成分对乙酰胆碱酯酶的半数抑制浓度(IC50);采用酶活恢复方法测定这类成分与乙酰胆碱酯酶结合的动力学参数(Koff);采用超高效液相色谱-高分辨率质谱法(UPLC-HRMS)对各成分在不同背景下(药材与复方)透过血脑屏障到达脑组织的定性分析。结果:非洲防己碱等小檗碱类成分对乙酰胆碱酯酶有较强的抑制活性,其IC_(50)可达到纳摩尔级,并且多个生物碱成分具有优于阳性药盐酸多奈哌齐的药靶结合动力学特征(更小的Koff,P<0.01),表明该类成分可在乙酰胆碱酯酶上持续更长时间的抑制;非洲防己碱等小檗碱类成分以单体形式、以及在黄连和黄柏药材提取物和复方黄连解毒汤的多成分背景下都可以透过血脑屏障到达脑组织。结论:非洲防己碱等小檗碱类成分对乙酰胆碱酯酶具有较强的抑制作用且在多种成分背景下均可入脑。这在药效物质基础层面上可以佐证临床上复方黄连解毒汤改善阿尔茨海默病的效果,为阐明复方黄连解毒汤的药效物质基础提供了数据支持。

小檗碱及其体内代谢产物对高糖诱导大鼠H9c2心肌细胞损伤的保护作用

目的 探究小檗碱及其体内代谢产物对高糖诱导大鼠H9c2心肌细胞损伤的保护作用。方法 将H9c2心肌细胞分成对照组、模型组、正常给药组、模型给药组,对照组用无血清DMEM培养,正常给药组于无血清DMEM中加药,模型组用含50 mmol·L^(-1)葡萄糖的无血清DMEM培养(造模剂量筛选实验设置25、50、100、200 mmol·L^(-1)),模型给药组于高糖无血清DMEM中加药,加药浓度分别为小檗碱1.25、2.50、5.00、10.00μmol·L^(-1),二氢小檗碱(DHB) 0.5、1.0、2.0、4.0μmol·L^(-1),小檗红碱1.25、2.50、5.00、10.00μmol·L^(-1),非洲防己碱(COL)1.25、2.50、5.00、10.00μmol·L^(-1),巴马汀3.125、6.250、12.500、25.000μmol·L^(-1),药根碱6.25、12.50、25.00、50.00μmol·L^(-1),去亚甲基小檗碱(DEM)6.25、12.50、25.00、50.00μmol·L^(-1),处理48 h后,通过细胞增殖计数(CCK-8)法检测细胞存活率;通过实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测经典代谢调控通路沉默调节蛋白1(Sirt1)、过氧化物酶体增殖物激活受体-γ共激活因子1α(PGC1α)、过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)基因水平,葡萄糖代谢相关基因丙酮酸脱氢酶激酶4 (PDK4)、葡萄糖激酶(GCK)、己糖激酶(HK2)、葡萄糖转运蛋白4(Glut4)表达水平,线粒体动力学相关基因线粒体融合蛋白2 (Mfn2)、视神经萎缩蛋白1 (OPA1)、动力学相关蛋白1(Drp1)水平及细胞凋亡相关基因天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、Caspase-9、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、 B淋巴细胞瘤-2 (Bcl-2)水平;通过Westernblotting实验检测PGC1α、 Glut4、线粒体氧化磷酸化系统(OXPHOS)蛋白表达。结果 与高糖模型组相比,小檗碱2.5、5.0、10.0μmol·L^(-1),DHB 1、2μmol·L^(-1),COL 5、10μmol·L^(-1),巴马汀12.5μmol·L^(-1),药根碱25、50μmol·L^(-1),DEM 12.5、25.0μmol·L^(-1)处理48 h的细胞存活率均显著上升(P<0.05、0.01、0.001);小檗碱、DHB、药根碱、DEM处理的心肌细胞中PDK4水平显著增加(P<0.05、0.001),小檗碱、DHB、DEM处理的心肌细胞中GCK水平显著增加(P<0.01、0.001),小檗碱、DHB、COL、巴马汀、DEM处理的心肌细胞中HK2水平显著增加(P<0.05、0.01),DEM处理的心肌细胞中Glut4水平显著增加(P <0.001);药根碱、DEM处理的心肌细胞中OPA1水平显著增加(P<0.05、0.001),小檗碱、DHB、COL、巴马汀、药根碱、DEM处理的心肌细胞中Drp1水平显著降低(P<0.01、0.001),小檗碱、DHB、药根碱、DEM处理的心肌细胞中Mfn2水平显著增加(P<0.05、0.001);小檗碱、DHB、COL处理的心肌细胞中Caspase-3水平显著降低(P<0.01、0.001),小檗碱、小檗红碱、COL、巴马汀处理的心肌细胞中Caspase-9水平显著降低(P<0.01、0.001),小檗碱、DHB、小檗红碱、COL、巴马汀、药根碱、DEM处理的心肌细胞中Bax水平显著降低(P<0.05、0.001),小檗碱、DHB、巴马汀处理的心肌细胞中Bcl-2水平显著增加(P<0.01、0.001);小檗碱及其代谢产物处理的心肌细胞中PGC1α、Glut4、OXPHOS表达均明显增加。结论 小檗碱体内代谢产物可以缓解高糖造成的H9c2心肌细胞损伤,其作用机制与调控Sirt1/PGC1α/PPARα信号通路,促进H9c2心肌细胞葡萄糖代谢、改善线粒体功能、抑制细胞凋亡有关。

HPLC-ESI-MS/MS同时测定金果榄中5种成分含量

目的:采用高效液相色谱-电喷雾串联质谱联用技术(HPLC-ESI-MS/MS)同时测定金果榄中β-蜕皮甾酮、非洲防己碱、药根碱、巴马亭红碱、掌叶防己碱的含量。方法:采用Waters CORTECS C_(18)色谱柱(100 mm×2.1mm,1.6μm);流动相为乙腈-0.1%甲酸溶液,梯度洗脱;样品经电喷雾电离离子源(ESI)正离子化后,通过安捷伦三重四级杆串联质谱仪,采用选择多反应监测(MRM)对金果榄进行定量分析。结果:各成分在一定范围内具有较好的线性关系,r值均大于0.9997,精密度、重复性和稳定性的RSD均小于5%,加样回收率均在98.7%~103.2%之间。结论:建立的方法准确度和灵敏度高,专属性好,可作为金果榄的质量控制方法。

单枝味连不同组织部位生物碱含量与其商品等级关联研究

目的对不同商品等级单枝味连Coptis chinensis的皮部/木部生物碱类成分进行比较分析,阐明生物碱类成分在不同组织部位中的分布规律。方法以不同商品等级的单枝味连为研究对象,使用游标卡尺对其皮部和木部的占比进行量化,色差仪测定根茎及其2个组织部位的色差值,紫外分光光度计测定三者的总生物碱含量。使用一测多评法和外标法对木兰花碱、格兰地新、非洲防己碱、药根碱、表小檗碱、黄连碱、巴马汀及小檗碱8种有效成分的含量进行测定,结合方差分析、相关性分析、主成分分析、正交偏最小二乘判别分析方法对皮部/木部化学成分进行比较,寻找皮部木部差异的标志性成分。结果不同商品等级的单枝味连,直径越大,皮部/木部比值越大,其中三等占比0.63、二等占比0.78、一等占比0.87、特等占比1.01。根茎及其皮部色差值L^(*)、a^(*)、b^(*)均小于木部。总生物碱在根茎及其皮部和木部的含量分别为15.96%、16.68%和13.53%,皮部显著高于木部(P<0.001),不同商品等级之间没有显著性差异。所测定的8种成分中,大部分生物碱含量随商品等级的升高呈现降低趋势,外标法和一测多评法结果基本一致。不同商品等级单枝味连根茎生物碱含量与质量、长度和皮部/木部占比没有显著相关性,黄连碱含量与直径呈显著负相关(P<0.05);色差值L^(*)与盐酸药根碱和黄连碱含量呈显著负相关(P<0.05),与盐酸巴马汀和小檗碱含量呈极显著负相关(P<0.01),色差值a^(*)与木兰花碱含量呈极显著正相关(P<0.01),色差值b^(*)与盐酸巴马汀含量呈显著负相关(P<0.05)。不同组织部位颜色测定值L^(*)、a^(*)、b^(*)与生物碱含量呈极显著负相关(P<0.01)。主成分分析筛选出累计贡献率达到81.59%的3个主成分,偏最小二乘法找出皮部木部差异的4个标志性成分,分别为黄连碱、小檗碱、非洲防己碱和巴马汀。结论通过色差分析、紫外分光光度法、高效液相色谱法和化学计量学方法揭示了不同商品等级单枝味连不同组织部位的生物碱类成分分布规律,为黄连“辨状论质”提供了科学依据。

高效液相色谱一测多评法同时测定木丹颗粒中9种成分

目的建立高效液相色谱一测多评法(HPLC-QAMS)同时测定木丹颗粒中巴西苏木素、(±)原苏木素B、四氢非洲防己碱、四氢黄连碱、延胡索乙素、去氢紫堇碱、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、毛蕊异黄酮和芒柄花素的含量。方法采用Agilent Zorbax SB-C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),柱温30℃;流动相为乙腈-0.2%甲酸溶液,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^(-1);检测波长分别为280 nm[检测巴西苏木素、(±)原苏木素B、四氢非洲防己碱、四氢黄连碱、延胡索乙素和去氢紫堇碱]和254 nm(检测毛蕊异黄酮葡萄糖苷、毛蕊异黄酮和芒柄花素)。以延胡索乙素为内参物,建立其他8种成分的相对校正因子,测定含有量。结果巴西苏木素、(±)原苏木素B、四氢非洲防己碱、四氢黄连碱、延胡索乙素、去氢紫堇碱、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、毛蕊异黄酮和芒柄花素分别在4.91~98.20,3.57~71.40,1.03~20.60,2.39~47.80,1.62~32.40,1.79~35.80,1.06~21.20,0.58~11.60,1.86~37.20μg·mL^(-1)范围内线性关系良好(r≥0.9991),平均加样回收率(RSD)分别为100.01%(0.73%)、99.17%(0.59%)、97.93%(0.78%)、98.81%(0.98%)、98.78%(0.43%)、97.74%(0.60%)、96.99%(0.62%)、96.96%(0.46%)和99.28%(0.37%),一测多评法所得结果与外标法结果无明显差异。结论该方法操作便捷、结果准确,重复性好,可用于同时测定木丹颗粒中巴西苏木素、(±)原苏木素B、四氢非洲防己碱、四氢黄连碱、延胡索乙素、去氢紫堇碱、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、毛蕊异黄酮和芒柄花素含量。

关于中药新药质量的刍议

据报载我国医药工业将从五个方面转移,重点是应用高技术创新高效药物。大力发展质量效益型、科技先导型、资源节约型的医药工业。中医药方面则要逐步实现传统医药与现代医药由独立并存向二者有机结合方向转移。我认为这为我们中药新药的研制提供了很重要的信息。中药发展靠仿制不是办法,应当走创新的路子,而“新”应当从高科技高质量上来体现。药品的高质量应从研制一开始就体现,首先是高质量的方剂而不是剪剪贴贴拼凑出来的低水平的东西;其次要有高质量的生产工艺,这当然不能脱离我国的生产实际能力,但也不应当强调困难的一面而在低水平徘徊。即使是用的最常用的水煮酒沉工艺,也不是象一些品种研制材料反映的那样简单。如一个以白术为主药的通便药。

金果榄质量HPLC评价研究

目的:建立同时测定金果榄药材中古伦宾、蜕皮激素和生物碱类成分的含量的方法,并寻找金果榄药材中的质量差异标志物。方法:采用HPLC法同时测定古伦宾、蜕皮激素、非洲防己碱、药根碱和巴马丁的含量,并以检测出的含量为指标,结合聚类分析和偏最小二乘判别分析进一步确定金果榄药材中的质量差异标志物。结果:测定方法精密度、稳定性和重复性良好,聚类分析和偏最小二乘判别分析结果均显示20批样品可分为三大类,变量权重结果证实非洲防己碱、古伦宾、巴马汀为金果榄药材主要质量差异标志物。结论:所建方法利用DAD检测器特性,同时监测多个波长,方便快捷,能显著提高药材质量控制效率;聚类分析和偏最小二乘判别分析结果也可为金果榄药材种植、栽培提供依据。

RP-HPLC测定不同产地黄连中6种生物碱的含量

目的:建立RP-HPLC同时测定黄连中药根碱、非洲防己碱、表小檗碱、黄连碱、巴马汀及小檗碱等6种生物碱含量的方法。方法:XtimateTM C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相为乙腈-30mmol·L-1碳酸氢铵水溶液(含有0.7%氨水、0.1%三乙胺),线性梯度洗脱;检测波长270nm;柱温30℃;流速1.0mL·min-1。结果:6种生物碱分别在0.85～16.96(r=0.9997),1.25～24.96(r=0.9995),2.05～40.96(r=0.9999),3.65～72.96(r=0.9999),2.88～57.60(r=0.9998),13.25～264.96mg·L-1(r=0.9996)具有良好的线性;平均加样回收率(n=6)依次为101.6%(RSD1.3%),102.5%(RSD1.5%),100.8%(RSD1.9%),102.6%(RSD1.2%),97.80%(RSD1.3%),99.01%(RSD1.5%)。不同产地黄连中6种被测生物碱及总生物碱存在显著的差异。结论:该方法准确、可靠,重复性好,可用于同时测定黄连中药根碱、非洲防己碱、表小檗碱、黄连碱、巴马汀及小檗碱的含量。

6种黄连饮片中6种生物碱的RP-HPLC含量测定及与“治消渴”药效学的谱-效关系分析

建立生品、姜炙、醋炙、酒蒸、酒炙、萸炙6种黄连饮片中6种生物碱（盐酸药根碱、盐酸非洲防己碱、盐酸表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱）的含量测定方法,并结合药效学结果探索其与药效学研究结果及中医疗效之间的关系。采用Welch XtimateTMC18（4.6 mm×250 mm,5μm）色谱柱,以0.1%三乙胺溶液（用碳酸氢铵和氨水调节p H 10）为流动相A,乙腈为流动相B,进行梯度洗脱（0~15 min,10%~25%B;15~25 min,25%~30%B;25~40 min,30%~45%B）,流速1.0 m L·min-1,柱温30℃,检测波长270 nm。6种生物碱分别在0.85~16.96 mg·L-1（r=0.999 7）,1.25~24.96 mg·L-1（r=0.999 9）,2.05~40.96 mg·L-1（r=0.999 9）,3.65~72.96 mg·L-1（r=0.999 9）,2.88~57.06 mg·L-1（r=0.999 8）,13.25~264.96 mg·L-1（r=0.999 6）呈现良好的线性关系,平均加样回收率（n=9）分别为102.4%（RSD 1.2%）,101.8%（RSD 1.3%）,100.3%（RSD 1.8%）,100.7%（RSD 1.8%）,101.2%（RSD 1.5%）,97.90%（RSD 2.0%）。测定6种黄连饮片共36个批次的6种生物碱的平均质量分数分别为3.55,4.49,9.12,19.17,15.69,62.56 mg·g-1。该文建立含量测定方法准确性高、重复性好,可用于6种黄连饮片中6种生物碱的含量测定。采用主成分分析、分层聚类分析对含量测定及前期药效学研究结果进行数据分析,结果表明酒蒸、酒炙、萸炙3种黄连饮片与生品黄连饮片存在明显差异,酒蒸饮片与生品饮片具有最大的差异,其差异主要与血清甘油三酯（TG）、空腹血糖水平（FBG）有关,另外,盐酸非洲防己碱是6种生物碱成分中影响最大的生物碱成分。酒蒸、酒炙、萸炙3种黄连饮片用于中医临床“治消渴”（防治糖尿病）更有优势,特别是在治疗糖尿病高脂血症方面。

HPLC法测定黄连不同部位中6个生物碱

目的建立黄连不同部位中盐酸药根碱、盐酸非洲防己碱、盐酸表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀和盐酸小檗碱的测定方法。方法色谱条件为Phenomenex Gemini-NX C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-30 mmol/L碳酸氢铵溶液(每1 000 mL碳酸氢铵溶液含7 mL氨水及1 mL三乙胺);体积流量1.0 mL/min;检测波长270 nm;柱温30℃。结果黄连须根、根茎、叶中6个生物碱量具有较明显差异。经比较,黄连适宜在移栽后第4年采挖,7～10月的最佳采挖月份是10月。结论该法简便、准确、分离效果好,适用于黄连主要生物碱的定量分析。

黄连-苦参不同配比中特征性成分的量-质变化相关性研究

目的分析不同配比“黄连-苦参”药对的特征性成分量-质变化相关性,为该药对的量-效相关性及临床应用提供合理的用量比例参考。方法采用HPLC法,建立不同配比9批“黄连-苦参”药对(5∶1、4∶1、3∶1、2∶1、1∶1、1∶2、1∶3、1∶4、1∶5),建立药对HPLC特征指纹图谱及其特征性成分含量测定方法,分析9组样品成分的差异性与相关性。结果9种配比的黄连-苦参药对共确定16个共有峰,指认苦参碱、槐定碱、氧化苦参碱、木兰花碱、非洲防己碱、表小檗碱、药根碱、黄连碱、巴马汀、小檗碱共10个共有峰。含量测定结果显示,黄连-苦参配对后相比黄连药材及苦参药材,特征性成分均有显著性差异。黄连-苦参(5∶1)时苦参碱、槐定碱、木兰花碱含量为各比例最高,相比单药材提取具有显著性差异;黄连-苦参(4∶1)时,非洲防己碱、表小檗碱、黄连碱、巴马汀、小檗碱含量为各比例最高,相比单药材提取具有显著性差异,且黄连总生物碱溶出最高;黄连-苦参(1∶1)时苦参总生物碱含量最高,且药根碱含量为各比例最高;黄连-苦参(1∶3)时氧化苦参碱含量为各比例最高。结论黄连-苦参不同配比时,以特征性成分个数与含量为标示的“质”与配伍用“量”之间的相关差异性较明显,显示出一定的成分相互促溶作用。苦参中3种成分的溶出量随黄连比例的降低呈现“U”型分布,而黄连中7种成分溶出量随黄连比例的降低整体呈现降低趋势。与黄连、苦参各药材单提相比,各比例下苦参中总生物碱类成分的溶出均有不同程度的提升,黄连中总生物碱类成分在黄连-苦参(5∶1)及(4∶1)比例下溶出表现为提升,其他比例表现为降低。药对中生物碱类成分的溶出规律与临床验方中药对的使用配比成正相关。为进一步开展该药对的量-效关联性分析确定了物质基础,也为临床潜方时确定适宜用量提供参考。

HPLC法比较延胡索炮制前后7个生物碱成分的含量

目的：采用反相高效液相色谱法分别测定中药延胡索生品与醋制品中四氢非洲防己碱、原阿片碱、延胡索乙素、黄连碱、巴马汀、小檗碱、去氢延胡索甲素7个生物碱的含量,并对其进行比较。方法：采用Benetnach C18色谱柱（4.6 mm×250mm,5μm）,以乙腈-0.1%磷酸水溶液（含0.08%三乙胺）为流动相,梯度洗脱,流速1.0 m L·min^-1,柱温35℃,检测波长280nm,洗脱时间为70 min。结果：四氢非洲防己碱、原阿片碱、延胡索乙素、黄连碱、巴马汀、小檗碱、去氢延胡索甲素7个生物碱线性范围分别为1.12~56.0、1.27~63.5、3.37~168.5、1.02~51.0、0.89~44.5、0.88~44.0、3.22~161.0μg·m L^-1（r≥0.999 3）;平均回收率（n=6）为98.3%~103.6%,RSD≤2.8%。炮制前后7个生物碱含量的质量分数测定结果分别为163.90~376.28、140.24~207.29、973.61~1 158.33、180.49~433.49、68.01~196.76、18.43~46.10、550.57~1 489.84μg·g^-1。结论：醋制品中四氢非洲防己碱比生品含量低,原阿片碱、延胡索乙素、巴马汀、小檗碱、去氢延胡索甲素含量均有不同程度的升高,黄连碱含量变化不定。本实验所建立方法经方法学验证,可为延胡索醋制品的质量控制提供科学依据。

香附四物汤全方及其效应部位中3个生物碱类成分在比格犬体内的药动学比较研究

目的:研究香附四物汤全方水提液(QF)及其效应部位(BW)中3个生物碱类成分经口服给药后药物代谢动力学特征的差异。方法:采集比格犬灌胃QF及BW后不同时间点的血浆样本,采用LC-MS/MS以多反应离子监测(MRM)方式进行正离子检测,测定血浆中普鲁托品、延胡索乙素、四氢非洲防己碱的浓度,DAS软件计算主要药动学参数。结果:普鲁托品在QF与BW中的各项参数除Cmax外差异没有统计学意义,BW中Cmax大于QF(P<0.05);延胡索乙素在体内消除缓慢,QF和BW均出现了双峰现象,QF中Tmax、AUC0～T与BW相比明显增大(P<0.05);四氢非洲防己碱达峰较快,BW中Cmax大于QF(P<0.05)。结论:QF和BW药动学参数的差异有统计学意义,提示两者的差异成分会对普鲁托品、延胡索乙素和四氢非洲防己碱的体内过程产生影响。

2D-HPLC结合捕集柱同时测定黄连药材中6个生物碱

目的：建立二维高效液相色谱法（2D—HPLC）结合捕集柱同时测定黄连药材中非洲防己碱、药根碱、表小檗碱、黄连碱、巴马汀和小檗碱的含量。方法：第一维液相色谱系统色谱柱为Kromasil—C18（100mm×4．6mm，5μm），流动相为100mmol·L^-1磷酸二氢铵溶液（pH为5．30）-乙腈（50：50）；第二维液相色谱系统色谱柱为Ultimate XB—Phenyl柱（250mm×4．6mm，5μm），以100mmol·L^-1磷酸二氢铵溶液（用磷酸调节pH为3．30）（A）一乙腈（B）为流动相进行梯度洗脱（1～2min，36％B-30％B；2—10min，30％B→34％B；10—16min，34％B→64％B）。采用“中心切割”模式及捕集柱转移目标物，检测波长345nm，柱温40℃。结果：不同产地黄连药材中非洲防己碱、药根碱、表小檗碱、黄连碱、巴马汀和小檗碱在19rain内完成分析，含量分别为3．8—4．4、3．3—4．0、10．1～11．2、18．9—20．8、14．4～16．6、55．6～61．3mg·g^-1。6个生物碱的平均回收率为95．5％-104．2％，RSD为0．23％～1．4％。结论：该方法能同时测定黄连药材中非洲防己碱、药根碱、表小檗碱、黄连碱、巴马汀和小檗碱的含量，可用于黄连药材的质量评价。

延胡索生物碱的高速逆流分离制备和纯化

目的采用高速逆流色谱法,制备延胡索中的4个主要生物碱。方法应用高速逆流色谱仪,以氯仿-甲醇-0.1mol/L盐酸(4∶3∶2,V/V/V)或(4∶3∶4,V/V/V)的上相为固定相,下相为流动相,组成溶剂系统对延胡索的生物碱进行分离纯化。结果分离得到4个生物碱,分别为非洲防己碱、黄连碱、巴马汀、去氢紫堇碱,纯度依次为91%、94%、92%、97%。结论建立的高速逆流色谱法,可用于延胡索中主要生物碱的制备,该方法快速、简便,产物得率和纯度较高。