非特异性二元醇氧化还原酶的克隆与表达

利用PCR技术分别从克雷伯氏产酸杆菌、克雷伯氏肺炎杆菌中扩增出基因yqhD,编码非特异性二元醇氧化还原酶(OX)。并利用强启动子使重组质粒OX1-pDK、OX2-pDK在生产菌株K.pneumoniaeAC01中得到高效表达。DNA测序结果表明,扩增的序列与已报道的yqhD阅读框同源性分别为80.84%和80.67%。在有氧条件下摇瓶发酵培养,含OX1-pDK的基因工程菌1,3-PDO产量比对照菌株增长了8.18%,含OX2-pDK的基因工程菌1,3-PDO产量比对照菌株增长了14.33%。

吡喃糖氧化酶底物特异性研究

目的:评价吡喃糖氧化酶(PROD)对不同的糖底物、甘油和乙二醇的催化作用。方法:应用相同酶试剂和固定参数对12种糖、甘油和乙二醇进行催化率实验。结果:将其对葡萄糖的催化作用定为100%时,PROD对单糖中的山梨糖催化率最高(87.51%),其次是木糖(83.17%)和1,5-脱水-D-山梨醇(82.32%),半乳糖为40.69%,对果糖、甘梨醇、山梨醇几乎无催化作用;PROD对双糖中的麦芽糖催化率为3.19%,对乳糖、蔗糖、纤维二糖几乎无催化作用;对同等浓度的非糖类物质甘油和乙二醇的催化作用很小,但是对高浓度的甘油和乙二醇(应用浓度在2.2%～3.3%)催化活性很高。结论:建立1,5-脱水-D-山梨醇测定方法前应进行PROD对不同糖底物、甘油和乙二醇的特异性催化实验。

胚胎停育绒毛组织中PRX3、PLGF、PSG1的表达

目的:分析过氧化物还原酶3(PRX3)、胎盘生长因子胚胎生长因子(PLGF)、妊娠特异性糖蛋白1(PSG1)在胚胎停育患者绒毛组织中的表达。方法:选取2020年1月-2022年8月本院收治的84例胚胎停育患者作为观察组,60例正常早孕行人工流产者作为对照组;采用PCR及western blot法检测两组绒毛组织中PRX3、PLGF、PSG1的mRNA及蛋白水平,logistics模型分析绒毛组织PRX3、PLGF、PSG1与胚胎停育关系。结果:观察组PRX3及PSG1 mRNA(3.43±0.84、3.31±1.34)和蛋白水平(1.74±0.39、2.39±0.54)均高于对照组(1.54±0.42、2.26±0.43、1.01±0.27、1.83±0.39),PLGF mRNA(0.34±0.05)和蛋白水平(0.51±0.11)均低于对照组(0.42±0.06、0.93±0.24);绒毛组织中高PRX3、PSG1水平和低PLGF水平均与胚胎停育有关(均P<0.05)。结论:相较于正常早孕,胚胎停育患者绒毛组织中PRX3、PSG1明显偏高,PLGF水平明显偏低。

光质对彩色甜椒幼苗生长及酶活性影响

探讨了不同光质(白光、红光、黄光、绿光和蓝光)对不同品种彩色甜椒幼苗生长及酶活性的影响。结果表明,白光和黄光培养壮苗的效果最好,蓝光和红光次之,绿光下徒长。幼苗生长过程中,白光下叶片的过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、硝酸还原酶(NR)和抗坏血酸酶(APX)活性最高,超氧化物氧化酶(SOD)活性最低,绿光下SOD活性最高。各种光质间存在差异性,白光较好。