梅毒螺旋体特异性抗体检测在血清学诊断中的应用研究

探讨梅毒螺旋体特异性抗体检测方法在血清学诊断中的应用研究。方法 收集来自我院各科室进行检查的403例患者的临床资料。采用 TPPA,化学发光,酶联免疫吸附试验。 三种方法进行了阳性检出率和酶联免疫吸附试验,并与化学发光试验进行了比较。最后的 TPPA试验表明,90个标本为阳性,313个标本为阴性;其中22.33%为阳性。对阳性样品,酶联免疫吸附试验的结果比化学发光试验的结果好,有显著性差异(P<0.05);对阴性样品,酶联免疫吸附试验与化学发光法比较,两种方法无显著性差异,P>0.05。ELISA与化学发光方法联用,其敏感性、特异性、准确率及正、负预测值均优于单一方法,差异有统计学意义(P<0.05)。与 TPPA相比, ELISA与化学发光两种方法的测定值无统计学意义,P>0.05。结论 对于梅毒螺旋体特异性抗体的检测在血清学的诊断研究中,采取ELISA检测联合化学发光法检测,具有和TPPA一致的检测结果,值得临床推广。

梅毒患者12例治疗后血清非梅毒螺旋体抗原试验长期未转阴的临床分析

目的 探讨梅毒患者治疗后血清非梅毒螺旋体抗原试验(RPR)长期不转阴的原因及防治措施。方法 对12例经治疗后血清RPR长期未转阴的梅毒患者进行了回顾性分析。结果 12例梅毒患者,其中3例口服青霉素;3例口服红霉素;1例用广告药;1例未及时治疗,待二期复发后治疗;1例因配偶未治,使其再感染;1例患者合并风湿;2例晚期潜伏梅毒。结论 治疗不正规、合并其他疾病、曾有过复发或再感染、以及梅毒的病期,是梅毒患者治疗后血清RPR长期未转阴的主要原因。这种血清反应的发生就有可能引起症状复发,亦有可能发展为内脏、心血管、神经梅毒等,因此,就不能认为是彻底治愈。为避免发生此反应,必须做到早期明确诊断,治疗剂量充足且规则,治疗后要追踪观察。

梅毒螺旋体重组蛋白rTpN17或rTpN47为抗原的ELISA与TRUST和TPHA血清学检测效果的比较

目的:克隆并构建梅毒螺旋体tpn17、tpn47基因原核表达系统,建立基于rTpN17、rTpN47的ELISAs,并对其用于梅毒血清学诊断的敏感性和特异性进行评价。方法:采用PCR扩增tpn17和tpn47基因并构建tpn17和tpn47基因原核表达系统。采用SDS-PAGE检测目的重组蛋白rTpN17和rTpN47表达情况,Ni-NTA亲和层析法提纯rTpN17和rTpN47,Western blot检测rTpN17和rTpN47免疫反应性。分别以rTpN17和rTpN47为包被抗原,建立检测血清标本中梅毒抗体的ELISAs(rTpN17-ELISA和rTpN47-ELISA),检测200例健康人、25例类风湿关节炎(RA)和17例系统性红斑狼疮(SLE)患者血清样本,并与甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)和梅毒螺旋体间接血凝试验(TPHA)检测效果进行比较。结果:克隆的tpn17和tpn47基因与GenBank中相关序列相似性为100%。rTpN17和rTpN47表达量分别为细菌总蛋白的37.2%和26.8%。提纯后的rTpN17和rTpN47能与梅毒抗体阳性血清发生明显的结合反应。TPHA检测阳性率最高(99.1%,P<0.001),rTpN17-ELISA和rTpN47-ELISA检测阳性率相近(85.3%和84.3%,P=0.427),TRUST检测阳性率低于rTpN17-ELISA(P=0.001),但与rTpN47-ELISA相近(P=0.014)。所有健康人血清、RA和SLE患者血清标本的rTpN17-ELISA、rTpN47-ELISA和TPHA检测结果均为阴性,但有7.1%(3/42)RA和SLE患者血清标本TRUST检测结果阳性。结论:以rTpN17和rTpN47为抗原的ELISAs可作为快速、简便、敏感性和特异性较高的梅毒血清学筛查方法,而且rTpN17和rTpN47仍保持原有免疫反应特异性。

TR/Patoc-Ⅰ株抗原肉眼凝集试验在钩端螺旋体病中的临床意义

目的探讨血清学TR/Patoc-Ⅰ株抗原的肉眼凝集试验(即快速玻片凝集反应)在钩端螺旋体病中的应用价值。方法对本院1995年7月～2004年5月收治的32例小儿病人进行临床综合分析。血清学检测采用快速玻片凝集反应,并与活抗原显微镜凝集试验相对照。结果快速玻片凝集反应全部阳性。+～++的16例双份血清3～4周后复查增高++以上的有13例。+++～++++的10例3～4周后降为+～++。双份血清升高或降低++以上的有27例,无变化的5例临床诊断均为闭塞性脑动脉炎。入院后1周内SAT和MAT二者敏感度经统计学卡方检验,统计学上有显著差异(P<0.01)。入院1周内SAT+以上的有32例,MAT抗体滴度1∶100以上的有24例,两者阳性率经卡方检测,统计学上有显著差异(P<0.01)。100例非钩体病儿童检验二者的特异性,经卡方检测,统计学上有显著差异(P<0.01)。32例成对标本中,入院后3～4周32例SAT与MAT均阳性,同时阴性为0例。入院后3～4周SAT与MAT一致率为100%。两者结果有一致性(P<0.01)。结论快速玻片凝集反应操作简便、快速、无传染性,并且准确、特异和敏感,对钩体病早期诊断有一定的价值,值得基层医院推广。

ELISA抗梅毒螺旋体抗原的特异性IgG/IgM抗体在诊断梅毒中的应用

目的探讨酶联免疫吸附测定(ELISA)抗梅毒螺旋体抗原的特异性IgG/IgM抗体在诊断梅毒中的应用。方法临床诊断或怀疑为梅毒的97例患者和74例非梅毒患者的血清同时接受ELISA抗梅毒螺旋体抗原的特异性IgG/IgM抗体和TPPA试验两种检测。结果ELISA抗梅毒螺旋体抗原的特异性IgG/IgM抗体具有较高的敏感性和特异性。结论ELISA抗梅毒螺旋体抗原的特异性IgG/IgM抗体适合于大样本的筛查和确诊。

梅毒螺旋体抗原血清试验方法的比较

梅毒(Srphilis)是由苍白螺旋体(Treponemapallidum，TP)所引起的一种传播疾病。近年来在我国有逐年上升趋势。选择好的检验方法可直接影响到梅毒的治疗和预防。目前我国梅毒螺旋体抗原血清试验方法主要有梅毒螺旋体血球汇集试验(TPHA)、梅毒微粒汇集试验(TPPA)、荧光螺旋体吸收试验(FTA-AbS)lgs-lgm-TPHA和近几年才发展起来的梅毒酶联免疫吸附试验(ELISA)、梅毒印迹试验(WB)、

非梅毒螺旋体抗原血清学试验假阳性发生率及原因分析

目的分析非梅毒螺旋体抗原血清学试验假阳性发生率及原因。方法收集2018年1~12月我院门诊及住院患者3000例的送检血清标本进行梅毒甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)和梅毒螺旋颗粒凝集试验(TPPA),并对试验结果进行分析。结果 3000例的血清标本中,TRUST假阳性率为0.53%(16/3000)。2018年上半年(1~6月份)TRUST试验假阳性率为0.62%(9/1452),2018年下半年(7~12月)TRUST试验假阳性率为0.45%(7/1548),上半年假阳性率略高于下半年,但差异无统计学意义(P>0.05)。TRUST试验假阳性16例的血清标本中,系统性红斑狼疮2例,麻风病患者3例,皮肌炎2例,湿疹1例,孕妇1例,老年人1例,不明原因6例。结论 TRUST试验的假阳性时有发生,临床应高度重视;建议TRUST阳性者以TPPA等梅毒螺旋体抗原血清学试验进行确认。

梅毒螺旋体重组抗原酶联免疫吸附试验的建立及应用

建立梅毒螺旋体重组抗原酶联免疫吸附试验 (ELISA) ,用于梅毒血清学诊断和调查。其法 ,用表达的重组抗原TPN17和TmpA ,建立检测血清特异抗体的间接ELISA ,并与其它检测方法比较 ,分别检测梅毒参比血清、病人及献血员血清。其结果 ,敏感性、特异性均为 10 0 %。新建ELISA与TPHA的总符合率为 95 .7% ,明显高于RPR与TPHA的总符合率 ( 89.1% )。献血员人群抗体阳性率为 0 .3%～ 0 .6 9% 。

化学发光微粒子免疫分析法筛查梅毒螺旋体特异性抗体的临床研究

目的：用化学发光微粒子免疫分析法（CM IA ）联合梅毒螺旋体明胶凝集试验（T PPA ）和甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）检测梅毒抗体（TP-Ab），探讨CMIA在筛查梅毒螺旋体特异性抗体中的临床应用价值。方法采用CMIA对住院和门诊患者进行TP-Ab筛查，阳性标本再进行TPPA和TRUST 的检测，对比分析3种检测方法的检验结果的符合率。结果25030例血清标本经CM IA筛查共检出T P-Ab阳性732例，检出率为2．9％。以TPPA和TRUST对阳性标本进行联合检测的阳性检出率分别为78．7％、37．2％。以 TPPA为标准参考方法， CM IA S/CO在1～＜9的阳性符合率为29．7％～90．1％，S/CO≥9的阳性符合率为100．0％。结论 CM IA可取代传统的非密螺旋体抗原血清试验用于高通量梅毒抗体的筛查。

基因重组抗原ELISA法在梅毒螺旋体抗体检测中的评价

目的 评价基因重组抗原ELISA法在梅毒螺旋体抗体检测中的意义。方法 用甲苯胺红不加热血清试验 (TRUST)、梅毒螺旋体重组抗原酶联免疫吸附试验 (ELISA)和梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)对 335份梅毒患者和非梅毒者的临床血清标本进行检测。结果 以TPPA阳性者为标准 ,TRUST有 6份为假阴性 ,4份为假阳性 ;ELISA假阳性 1份 ,无假阴性。TRUST和ELISA的敏感性、特异性分别为 94.8%、98.2 %和 1 0 0 %、99.5 %。TRUST与TPPA的符合率为 97.0 % ,ELISA与TPPA的符合率为99 .7%。ELISA的敏感性、特异性都优于TRUST ,与TPPA符合率高。结论 重组抗原ELISA法检测梅毒螺旋体特异性抗体具有敏感性高、特异性好、结果客观、自动化程度高等优点 ,适用于梅毒初筛和确诊。

梅毒螺旋体基因重组抗原研究及其临床应用

梅毒是一种由梅毒螺旋体引起的、可治愈的、慢性经典性传播疾病,梅毒的病原体为梅毒螺旋体(Treponemapaltidum,Tp),其基因重组抗原的研究在梅毒血清学检测中应用广泛。为此,结合与临床诊断学有关的梅毒螺旋体基因重组抗原的生物学特性和临床应用进展进行综述,并展望今后的研究及发展方向。

血清特异性抗尘螨IgE、皮肤试验与小儿哮喘

应用酶联免疫吸附试验(简称ELISA)测定血清中特异性IgE,比放射性过敏原吸附试验更为简便,是体外测定的一种可靠而灵敏的方法,用以确诊外源性哮喘的有关过敏原,对选择有效的免疫疗法也有指导意义。

化学发光法检测梅毒螺旋体特异性抗体的价值

目的评价化学发光法在临床筛查中检测梅毒螺旋体(treponema pallidum,TP)特异性抗体的特异性。方法选取2020年1—12月万江医院检验科1000份患者的术前检查血清标本,采用化学发光法进行检测,对于初筛阳性标本加用甲苯胺红不加热血清试验(tolulized red unheated serum test,TRUST),通过梅毒螺旋体明胶凝集试验(treponema pallidum particle assay,TPPA)复检,对所得结果采用SPSS 24.0统计学软件分析。结果1000份术前患者检查的标本中,总计筛选出46份抗-TP抗体阳性标本,通过TPPA复检后,38份为阳性,8份为阴性;TRUST试验检测结果阳性20份,阴性26份;化学发光法检测梅毒螺旋体特异性抗体的特异性为99.85%。结论化学发光法检测梅毒螺旋体特异性抗体的特异性较高,TPPA试验作为特异性抗体筛查试验的补充试验方法,效果显著。

8791例患者手术前梅毒螺旋体血清学检测结果分析

梅毒螺旋体，又称苍白密螺旋体（Treponema pallidum．TP）苍白亚种，可引起慢性、系统性的全世界流行的性传播疾病，几乎可侵犯全身各组织器官，临床表现多种多样，且时显时隐，病程较长，易造成漏诊、误诊。梅毒的诊断依赖病史、症状和体征、梅毒病原学诊断和血清学诊断。后者包括非梅毒螺旋体抗原试验即以心磷脂等作为抗原检查血清中的反应素，如甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）、快速血浆反应素环状卡片试验（RPR）、性病研究实验室试验（VDRL）、不加热血清反应素试验（USR）等，

化学发光免疫测定在梅毒螺旋体抗体检测中的临床应用

目的探讨全自动化学发光免疫分析仪在梅毒螺旋体特异性抗体(TPsAb)检测中的临床应用价值。方法验证ARCHITECT I2000全自动化学发光免疫分析仪在TPsAb检测中的精密度、灵敏度、抗干扰能力及携带污染。对50例化学发光免疫测定TPsAb阴性及307例TPsAb阳性临床标本分别进行梅毒螺旋体抗体明胶颗粒凝集试验(TPPA)和甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)检测。结果 ARCHITECT I2000系统批内、批间变异系数均小于10%。高值标准品稀释后用TPsAb和TP-PA同时检测,TPsAb检测1:16稀释标本为阴性,TPPA检测1:8稀释标本为阴性。ARCHITECT I2000系统的携带污染率为0.13%。30.0mmol/L三酰甘油、120.0g/L血红蛋白、320.0mol/L胆红素对测定结果的响影小于4%。TPsAb与TPPA检测临床标本阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。结论全自动化学发光免疫分析仪检测TPsAb,其精密度较好,特异性强,灵敏度高于TPPA,抗干扰能力强,无携带污染,值得在临床推广。

棉花大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)血清学检测——抗原处理的比较

分别以棉花黄萎病菌V20的菌丝研磨物、菌丝蛋白、超氧化物歧化酶酶带Ⅰ、超氧化物歧化酶酶带Ⅱ为抗原免疫家兔,制备了抗血清As1、As2、As3、As4。琼脂双扩散法(ADD)和间接ELISA方法测定其特异性,发现这4种抗血清既可与同种的抗原发生阳性反应,也可与不同种的抗原发生交叉反应。用异种抗原黑白轮枝菌和尖孢镰刀菌吸附这4种抗血清,排除其非特异性成分后,抗血清专化性明显提高,消除了交叉反应。特异性测定表明:经吸附后的4种抗血清可以准确地将大丽轮枝菌鉴定到种的水平,但仍不能区分其生理型和致病类型。另外,当分别使用菌丝研磨物或菌丝蛋白为特异性测定抗原时,ADD检测的结果虽然一致,但前者阳性反应沉淀线粗糙,轮廓不清晰,后者的沉淀线较细,且清晰、明显。因此适宜选择菌丝蛋白为抗原进行抗血清的特异性测定试验。