脂肪间充质干细胞及非甲基化胞嘧啶鸟嘌呤核苷酸对食物过敏幼鼠外周血中CD4^+CD25^+Treg的影响

目的观察脂肪间充质干细胞(ADSC)、非甲基化胞嘧啶鸟嘌呤核苷酸(CpG-ODN)对食物过敏幼鼠外周血中CD4^+CD25^+调节性T细胞(CD4^+CD25^+Treg)的表达水平及免疫干预作用。方法将40只BALB/c雌性小鼠随机分为对照组、过敏组、ADSC治疗组(ADSC组)和非甲基化CpG-ODN治疗组(CpG-ODN组),每组10只;通过卵清蛋白(OVA)腹腔注射基础致敏和灌胃激发致敏建立小鼠食物过敏模型;对照组给予等量生理盐水替代;ADSC组在激发致敏前后两个时间点分别给予腹腔注射ADSC(1×10~6个/只);CpG-ODN组在每次灌胃激发前1 h给予腹腔注射非甲基化CpG-ODN(40μg/只)溶液。模型成功建立后对各组小鼠进行过敏症状评分;酶联免疫吸附法检测各组小鼠血清中OVA-IgE水平;流式细胞仪检测小鼠外周血中CD4^+CD25^+Treg水平;取各组小鼠空肠行苏木精-伊红染色,进行病理分析。结果过敏组过敏症状评分及血清中OVA-IgE水平均高于对照组(P<0.05),ADSC组、CpG-ODN组过敏症状评分及血清中OVAIg E水平比较差异均无统计学意义(P>0.05),但均低于过敏组,高于对照组(P<0.01)。过敏组外周血中CD4^+CD25^+Treg水平低于对照组(P<0.05),ADSC组、CpG-ODN组外周血中CD4^+CD25^+Treg水平均高于过敏组(P<0.05),且与对照组比较及两组间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。病理结果显示过敏组空肠黏膜层绒毛结构破坏、水肿,大量的嗜酸性粒细胞及淋巴细胞浸润;ADSC组和CpG-ODN组空肠黏膜层绒毛结构部分破坏、无明显水肿,有少量嗜酸性粒细胞及淋巴细胞浸润。结论 ADSC和非甲基化CpG-ODN干预对食物过敏均有一定的治疗效果;均可提高食物过敏幼鼠体内CD4^+CD25^+Treg水平,同时降低OVA-IgE的表达水平,与诱导免疫耐受有一定的关联作用,且两种干预效果相当,但具体作用机制仍需要进一步探究。

含非甲基化胞苷-磷酸盐-鸟苷寡脱氧核苷酸在非小细胞肺癌治疗中的应用进展

非甲基化胞苷-磷酸盐-鸟苷(CpG)寡脱氧核苷酸(ODN)属于Toll样受体9(TLR9)激动剂,其功能主要通过TLR9信号系统来体现。根据构效关系,共鉴别出K型、D型、C型和P型4个类别的CpG ODN,分别对B细胞和浆细胞样树状突细胞产生不同刺激作用。无论单独应用CpG ODN,抑或联合化疗、放疗,还是联合靶向药物或疫苗,对非小细胞肺癌的治疗均有一定的增效作用。该文也简述了CpG ODN的安全性。

甲基化SIM2、GNA12、CTGF在子痫前期孕妇中表达水平及其对疾病的预测价值

目的 探究子痫前期孕妇血浆中甲基化DNA的表达水平及对子痫前期发生的预测价值。方法 纳入2022年1-12月在该院确诊的82例子痫前期孕妇作为观察组,另外纳入82例健康孕妇作为对照组。提取患者游离总DNA,经过DNA亚硫酸氢盐修饰后通过实时荧光定量PCR反应(qRT-PCR)检测患者血浆中甲基化单意同源物2(SIM2)、结缔组织生长因子(CTGF)及鸟嘌呤核苷酸结合蛋白(GNA12)基因的相对表达水平,并采用相关性分析及受试者工作特征(ROC)曲线对各甲基化DNA预测子痫前期发生的价值进行评估。结果 观察组血浆甲基化SIM2、GNA12、CTGF相对表达水平均高于对照组(P<0.05),且重度子痫前期孕妇各甲基化DNA相对表达水平更高(P<0.05)。相关性分析结果表明,血浆甲基化SIM2、GNA12、CTGF相对表达水平与孕妇发生子痫前期均呈正相关(P<0.05)。ROC曲线分析结果表明,血浆甲基化SIM2、GNA12、CTGF相对表达水平单独及联合检测对预测孕妇子痫前期的效能均较好,且三者联合检测的预测效能最高(曲线下面积为0.888,95%CI:0.827~0.949)。结论 相较于健康孕妇,子痫前期孕妇血浆中甲基化SIM2、GNA12、CTGF相对表达水平均较高,且其与孕妇子痫前期的发生率呈正相关,血浆甲基化SIM2、GNA12及CTGF相对表达水平有望成为判断子痫前期是否发生的重要指标。

甲醛对人Ⅱ型肺泡上皮细胞DNA氧化和甲基化水平的影响

目的：分析甲醛染毒对体外培养的人Ⅱ型肺泡上皮细胞（A549）内8-羟基鸟嘌呤脱氧核苷（8-oxo-dG）水平、DNA 5-甲基胞嘧啶（5-mC）含量的影响及其时间-效应和剂量-效应关系，探讨甲醛所致的细胞DNA氧化与DNA甲基化的关联性。方法：用5～20μmol/L甲醛作用于A549细胞，用高压液相色谱串联电化学检测技术分析细胞DNA 8-oxo-dG水平，用免疫荧光和高效毛细管电泳法检测细胞全基因组DNA 5-mC含量改变。结果：甲醛染毒提高了细胞8-oxo-dG水平，但是降低了细胞的DNA 5-mC含量。甲醛致细胞DNA氧化与DNA甲基化呈现不同特点，A549细胞暴露于20μmol/L甲醛后，DNA氧化水平在1周甚至更早时间就已显著增高，而相同条件下DNA甲基化水平的改变需要6周以上的时间，DNA甲基化的改变滞后于DNA氧化。A549细胞经5～20μmol/L甲醛染毒8周后，DNA氧化水平与甲醛剂量呈正相关关系，而同样条件下DNA甲基化水平与甲醛剂量呈负相关关系。结论：甲醛染毒可提高DNA氧化水平，降低细胞DNA甲基化水平。在甲醛的毒作用效应中，细胞DNA氧化损伤可能是早于其DNA甲基化的一个重要分子事件。

GNA12基因甲基化与子痫前期的相关性分析

目的探讨鸟嘌呤核苷酸结合蛋白(GNA12)基因启动子各位点甲基化水平、基因表达与子痫前期之间的关系。方法选取分娩孕妇中子痫前期患者(病例组)和正常孕妇(对照组)胎盘各50例,外周血各25例,采用甲基化特异性PCR技术和real-time PCR技术分析GNA12基因启动子区Cp G岛甲基化状态和mRNA的表达。结果病例组的胎盘组织及孕母外周血的GNA12 63位点的甲基化程度均低于对照组(P=0.003,P=0.004 3);病例组mRNA表达量高于对照组(P=0.013);胎盘组织甲基化率与外周血甲基化率具有相关性(P<0.000 1)。结论 GNA12基因启动子的甲基化水平与子痫前期的发病存在相关性。通过检测孕母外周血GNA12基因,可能可预测子痫前期的发生。

子痫前期与GNA12启动子甲基化的相关性分析

目的探讨鸟嘌呤核苷酸结合蛋白(GNA12)启动子甲基化程度与子痫前期(pre-eclampsia,PE)的关系。方法选取2016年8月至2017年7月宝鸡市妇幼保健院收治的PE患者共50例作为研究组,另取同期行正常孕检的孕妇50例作为对照组,通过Massar Ray核酸质谱分析系统分析两组胎盘外周血DNA样本中GNA12启动子8个Cp G位点的甲基化水平及m RNA表达情况。结果研究组胎盘DNA样品中,73位点、109位点、185位点及204位点的GNA12甲基化程度显著小于对照组(P<0.05),外周血样品中73位点和185位点的GNA12甲基化程度显著小于对照组(P<0.05)。研究组GNA12基因的m RNA表达水平显著高于对照组(P<0.05)。结论 PE与GNA12启动子的甲基化水平降低相关,可对胎盘和外周血进行基因检测,且外周血检测更加便捷,对PE的早期诊断有一定的临床意义。

DNA甲基化与肿瘤诊断

DNA甲基化异常是人类肿瘤中常见的表观遗传变化之一,伴随着肿瘤的发生和发展,且该异常现象在肿瘤患者的外周循环血清、血浆和尿液等体液中都可检测到。因此,利用DNA甲基化分析技术检测体液中特定分子DNA甲基化水平是肿瘤早期诊断、病程监控和疗效评估的潜在手段,对临床肿瘤的诊治意义重大。

含非甲基化二核苷酸的寡脱氧核苷酸7909对X射线诱导人肺腺癌A549细胞周期阻滞和凋亡的影响与ATM激酶的关系

目的探讨含非甲基化二核苷酸的寡脱氧核苷酸（unmethylatedcytosine-phosphate．guanineoligodeo。ynucleotides，CpGODN）7909对X射线诱导人肺腺癌A549细胞周期阻滞和凋亡的影响及毛细血管扩张共济失调突变（ATM）激酶磷酸化在这一过程中的作用。方法人肺腺癌A549细胞用随机表法分为5组，对照组、CpG组、单纯照射组、CpG＋x射线组和ATMsiRNA＋CpG＋x射线组。采用集落形成法观察细胞存活率。流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡。Westernblot检测ATM激酶及其下游底物周期检测点激酶2（checkpointkinase2，Chk2）和P53蛋白的表达。结果A549细胞经CpGODN7909预处理后，在x射线照射下生长缓慢，集落形成明显减少，与单纯照射组比较，差异有统计学意义（t=13．41，P〈0．05）；增强了X射线诱导的人肺腺癌A549细胞G2／M期阻滞和凋亡，与单纯照射组比较，差异有统计学意义（t=17．32和7．71，P〈0．05）；明显增加了X射线诱导的ATM、Chk2及P53蛋白磷酸化水平；小分子干扰RNA暂时性抑制ATM的表达后，CpGODN7909对x射线诱导G2／M期阻滞及凋亡的作用减弱，与CpG＋X射线组比较，差异有统计学意义（f=26．84和2．98，P〈0．05）。结论CpGODN7909在体外增强了X射线诱导的人肺腺癌A549细胞ATM激酶磷酸化，这一作用可能参与G2／M期阻滞和凋亡的调节。

含非甲基化二核苷酸的寡脱氧核苷酸1826对Lewis肺癌放疗联合作用及其剂量-效应关系

目的探讨含非甲基化二核苷酸的寡脱氧核苷酸（unmethylatedcytosinephosphate-guanine oligodeoxynucleotide，CpGODN）1826对x射线照射荷瘤小鼠Lewis肺癌的联合作用及其剂量-效应关系。方法在C57BL／6J纯系小鼠右前腋窝接种Lewis肺癌细胞，制备荷瘤小鼠模型。将64只荷瘤小鼠按完全随机化方法随机分为对照组、x射线照射（IR）组、低剂量CpGODN1826组（0．15mg）、中剂量CpGODN1826组（0．30mg）、高剂量CpGODN1826组（0．45mg）、低剂量CpG0DN826＋IR组（CpG18260．15mg＋IR）、中剂量CpGODN1826＋IR组（CpG0．30mg＋IR）和高剂量CpG0DN1826＋IR组（CpG0．45mg＋IR），每组8只。实验的第1、2、9天注射CpGODN1826。实验的第2天开始x射线照射，1次／d，2．50Gy／次，总剂量12．50Gy。观察各组移植瘤生长速度和各治疗组肿瘤生长延迟时间（TGD），用DNA断裂的原位末端标记法检测细胞凋亡。结果成功建立荷瘤小鼠Lewis肺癌模型，成瘤率为100％。经治疗后，各组小鼠肿瘤体积都较对照组明显减小，CpGODN18260．45mg＋IR组移植瘤体积最小。DNA断裂的原位末端标记法（TUNEL）法检测细胞凋亡率分别为（2．40±0．55）％、（5．50±0．76）％、（7．13±0．83）％、（11．63±1．06）％、（19．13±0．83）％、（12．88±0．83）％、（20．57±2．37）％和（28．17±3．31）％。各治疗组都明显高于对照组（t=11．15、7．91、17．82、39．48、24．73、16．61和17．05，P〈0．05），不同剂量CpGODN1826＋IR组显著高于IR组（t=13．78、15．08和17．47，P〈0．05）和不同剂量CpGODN1826组（t=18．53、9．66和7．51，P〈0．05）。结论CpGODN1826能明显地抑制肿瘤细胞生长，促进肿瘤细胞凋亡，且呈剂量-效应关系。

含CpG元件的寡脱氧核苷酸可在体外抑制乙肝病毒复制

据医学空间网9月6日报道（原载Immunol Lett 2005 Aug 13），在特定位点含有非甲基化的胞嘧啶-鸟嘌呤二核苷酸（CpG元件）的寡脱氧核苷酸（ODNs）是有力的免疫激活剂，还可诱导若干Th1类免疫调节因子的生成。动物试验提示，CpG ODNs有望作为疫苗佐剂及免疫保护因子。

含非甲基化二核苷酸的寡脱氧核苷酸1826对大鼠放射性肺纤维化的预防作用

目的 初步探讨含非甲基化二核苷酸的寡脱氧核苷酸（CpG ODN） 1826对大鼠放射性肺纤维化的防护作用.方法 采用6MVX射线单次左肺照射20 Gy,建立大鼠放射性肺纤维化模型.SD大鼠按完全随机法分为健康对照组、单纯照射组和药物干预组3组,每组30只.在照后0、1、3、5和7d,腹腔注射CpG ODN1826.照后5、15、30和90 d,取材,记录肺系数.照射肺石蜡切片HE染色、Masson染色,行肺纤维化评分.ELISA法检测血清TGF-β1浓度,碱化水解法检测肺组织羟脯氨酸（Hyp）浓度.结果 成功建立了放射性肺纤维大鼠模型.照后5d,健康对照组肺系数低于单纯照射组和药物干预组（t =3.046、2.252,P＜0.05）.照后15、30和90 d,药物干预组肺系数低于单纯照射组（t=4.120、5.226和5.719,P＜0.05）.单纯照射组及药物干预组照后30 d肺系数最高.药物干预组肺纤维化评分低于单纯照射组（t=3.212、4.959,P＜0.05）.药物干预组血清TGF-β1浓度低于照射组（t=4.138、5.924、5.294和4.076,P＜0.05）.单纯照射组照射肺Hyp含量高于药物干预组（t=7.527、8.416,P＜0.05）.结论 CpG ODN1826可以降低放射性肺纤维化大鼠血清TGF-β1浓度及Hyp含量,预防放射性肺纤维化.

免疫刺激序列对鼠实验性过敏性结膜炎的作用研究

目的构建豚草花粉诱导的小鼠过敏性结膜炎动物模型,观察免疫刺激序列胞嘧啶-磷酸-鸟嘌呤(cytidine-phosphate-guanosine,CpG)DNA对过敏性结膜炎的免疫刺激作用。方法将16只BALB/c小鼠分为CpG DNA实验组和对照组,每组各8只,均于左足部局部注射豚草花粉和氢氧化铝悬浮液进行初次致敏,在注射后第14天右眼结膜囊内滴用豚草花粉溶液进行再次致敏;其中CpG DNA实验组在再次致敏前3d给予CpG DNA滴眼,对照组给予PBS滴眼。观测指标包括症状得分、眼穹隆部结膜嗜酸性粒细胞的数量及结膜IL-12p40 mRNA的表达情况。结果 CpG DNA实验组小鼠仅偶有眼睑或球结膜充血水肿等过敏反应,眼局部反应均较对照组明显减轻(均为P<0.01)。CpG DNA实验组临床症状得分为(5.50±1.60)分,明显低于对照组的(10.88±1.73)分,差异有统计学意义(t=3.560,P=0.003)。CpG DNA实验组小鼠穹隆部结膜组织中嗜酸性粒细胞每高倍视野镜下细胞计数为(16.12±9.31)个,明显少于对照组的(67.25±20.63)个,差异有统计学意义(t=6.39,P<0.01)。CpG DNA实验组结膜组织中IL-12p40 mRNA的表达上调,是对照组IL-12p40 mRNA相对表达量的9.2倍。结论在致敏初始阶段给予CpG DNA能够明显抑制小鼠过敏性结膜炎的过敏反应和晚期炎症反应,其作用可能与CpG DNA诱导IL-12p40过表达有关。

siRNA沉默ATM增强CpG ODN 7909对肺癌A549细胞的放射增敏作用

目的:研究siRNA沉默毛细血管扩张—共济失调突变(atxia-telangiectasia mutated,ATM)基因的表达增强胞嘧啶鸟嘌呤二核苷酸寡脱氧核苷酸(cytosine-phophate-guanine oligodeoxynucleotide,CpG ODN)7909对人非小细胞肺癌A549细胞的放射增敏作用。方法:将ATM-siRNA转染至A549细胞中,Western blotting检测A549细胞中ATM蛋白的表达。A549细胞随机分为6组:对照组、CpG组、X射线(IR)组、CpG+IR组、ATM-siRNA+CpG+IR组和NC-siRNA+CpG+IR组,克隆形成分析法检测各组细胞克隆形成率,Graphpad prism 5.0软件进行单击多靶模型和L-Q线性模型拟合辐射后A549细胞的生存曲线,以D0、Dq、N、α/β及SF2等参数分析A549细胞辐射损伤修复能力,流式细胞术检测A549细胞的凋亡。结果:ATM-siRNA转染可明显抑制A549细胞中ATM蛋白的表达(P<0.01)。X射线可剂量依赖性抑制A549细胞的克隆形成能力(P<0.05);且CpG+IR组A549细胞的克隆形成能力进一步降低(P<0.01);ATM-siRNA转染后,CpG处理的A549细胞克隆形成能力再度降低[10 Gy时,(0.05±0.00)%vs(0.71±0.00)%,P<0.01]。辐射损伤剂量生存曲线结果显示,ATM-siRNA转染后,ATM-siRNA+CpG+IR组较CpG+IR组A549细胞的α/β值明显增大(1.48 vs 0.97,P<0.05),对放射损伤修复能力明显减弱。CpG+IR组较IR组细胞凋亡率显著升高[(9.18±0.16)%vs(6.56±0.33)%,P<0.01];ATM-siRNA+CpG+IR组A549细胞凋亡率进一步升高[(10.45±0.40)%vs(9.18±0.16)%,P<0.05]。结论:siRNA沉默ATM的表达可增强CpGODN 7909对A549细胞的放射增敏作用,ATM可作为肺癌治疗的潜在靶点。

CpG ODN对小鼠哮喘模型气道炎症及信号转导子和转录激活子6(STAT6)表达的影响

目的:研究寡核甘酸免疫刺激序列(CpGoligonucleotides,CpG ODN)对急性支气管哮喘小鼠气道炎症及信号转导子和转录激活子6(STAT6)表达的调控作用。方法:将32只雄性BALB/c小鼠随机分为对照组、哮喘组、地塞米松干预组和CpG ODN干预组,建立急性哮喘气道炎症模型。对支气管肺泡灌洗液(BALF)进行细胞总数、嗜酸粒细胞(EOS)分类计数;取左叶肺组织切片做HE染色观察气道和肺组织炎症改变;用免疫组织化学法检测气道上皮组织中STAT6表达。结果:哮喘组小鼠BALF中细胞总数、EOS绝对值显著高于对照组(P<0.05),地塞米松组和CpG ODN组上述炎症细胞计数比哮喘组明显减少(P<0.05)。HE染色示地塞米松组和CpG ODN组小鼠肺组织炎症程度较哮喘组减轻。STAT6在气道上皮细胞表达,哮喘组气道上皮细胞中STAT6表达较对照组增强,地塞米松组和CpG ODN组STAT6表达与哮喘组比较有明显减少(P<0.05),较对照组增加。支气管上皮细胞STAT6蛋白表达与BALF中的EOS绝对值呈显著正相关(r=0.748),而地塞米松组和CpG ODN组之间的作用无统计学差异(P>0.05)。结论:应用地塞米松和CpG ODN均可在一定程度上减轻哮喘小鼠的气道炎症,CpGODN可能通过下调肺组织中STAT6蛋白的过度表达,从而抑制依赖于STAT6/IL-4通路的急性气道炎症,减轻哮喘的症状。

5-AZA-CdR联合EGCG对HL-60和K562的影响

目的探讨细胞因子INFα和甲基化抑制剂5-杂氮脱氧胞嘧啶核苷(5-AZA-CdR)能否诱导HL-60和K562 Xaf1表达,以及Xaf1表达诱导剂联合表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)是否具有协同抗癌作用。方法(1)1000U/mlINFα和不同剂量的5-AZA-CdR作用于HL-60和K56248h,通过RT-PCR检测Xaf1和XIAP mRNA的表达并比较差异。(2)最佳Xaf1表达诱导剂联合EGCG作用于白血病细胞,流式细胞技术检测Bcl-2家族成员、线粒体膜电位和细胞凋亡的情况。结果(1)随5-AZA-CdR剂量增加,HL-60和K562Xaf1 mRNA表达增加,INFα也能诱导Xaf1表达,以5-AZA-CdR(5μmol/L)的作用最强;INFα和5-AZA-CdR均不影响XIAP mRNA的表达。(2)5-AZA-CdR和EGCG可改变HL-60和K562细胞Bcl-2(Bcl-xl)和Bax的表达,降低线粒体膜电位,诱导细胞凋亡,二者联合作用被加强。结论(1)INFα和5-AZA-CdR能诱导HL-60和K562Xaf1 mRNA的表达,且5-AZA-CdR的作用具有剂量依赖性。(2)5-AZA-CdR和EGCG在体外能诱导白血病细胞凋亡,并具有协同效应。

增强CpG免疫刺激作用途径的研究进展

CpG基序（CpG motifs）是指含有非甲基化的胞嘧啶（C）和鸟嘌呤（G）核苷酸核心的寡聚脱氧核苷酸（ODN）序列，又称为免疫刺激序列，一般为6个寡聚核苷酸。

ALKBH5调控GEFT的m6A修饰对胆管癌转移及EMT的实验研究

目的探究alkB同源蛋白5(ALKBH5)调控鸟嘌呤核苷酸交换因子T(guanine nucleotide exchange factors T,GEFT)的m6A修饰对胆管癌转移和上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响。方法将HuCCT1细胞按照转染类别分为Control组,NC-sh组、ALKBH5-sh组、NC-LV组、ALKBH5-LV组、ALKBH5-LV+NC-sh组和ALKBH5-LV+GEFT-sh组。Control组细胞不进行转染,使用Lipofectamine 2000对其他组细胞分别转染相应的慢病毒。采用MTT法检测细胞增殖水平,流式细胞仪检测细胞凋亡水平,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭水平。采用RT-qPCR分析HuCCT1细胞中的ALKBH5,GEFT,Bax,Bcl-2,MMP2,MMP9,E-cadherin,N-cadherin和Vimentin的mRNA水平。采用Western blot分析HuCCT1细胞中的ALKBH5和GEFT蛋白水平。采用MeRIP-qPCR分析HuCCT1细胞中GEFT m6A甲基化水平。结果与Control组和NC-sh组比较,ALKBH5-sh组ALKBH5和GEFT的mRNA和蛋白水平降低,相对细胞活力降低,细胞凋亡率和Bax mRNA水平升高,Bcl-2 mRNA水平降低,迁移和侵袭细胞数量降低,MMP2和MMP9 mRNA水平降低,E-cadherin mRNA水平升高,N-cadherin和Vimentin水平降低,GEFT m6A甲基化水平升高,差异具有统计学意义(F=43.347~1995.868,均P<0.001)。与Control组和NC-LV组比较,ALKBH5-LV组ALKBH5和GEFT的mRNA和蛋白水平升高,相对细胞活力升高,细胞凋亡率和Bax mRNA水平降低,Bcl-2 mRNA水平升高,迁移和侵袭细胞数量升高,MMP2和MMP9 mRNA水平升高,E-cadherin mRNA水平降低,N-cadherin和Vimentin水平升高,GEFT m6A甲基化水平降低,差异具有统计学意义(F=42.421~720.275,均P<0.001)。与ALKBH5-LV+NC-sh组比较,ALKBH5-LV+GEFT-sh组GEFT的mRNA和蛋白水平降低,相对细胞活力降低,细胞凋亡率和Bax mRNA水平升高,Bcl-2 mRNA水平降低,迁移和侵袭细胞数量降低,MMP2和MMP9 mRNA水平降低,E-cadherinmRNA水平升高,N-cadherin和Vimentin水平降低,差异具有统计学意义(t=7.175~77.872,均P<0.001)。结论ALKBH5和GEFT均促进胆管癌细胞的生长和转移,ALKBH5可能通过调控GEFT m6A甲基化修饰来影响胆管癌的转移及EMT。