包裹天然骨架CpG ODN和HBsAg的非磷脂脂质体疫苗的免疫效果

非磷脂脂质体NovasomeR○(Np )是由Brij5 2、胆固醇和油酸组成 ,可作为同时传递佐剂和抗原的载体。我们将HBsAg与天然骨架CpGODN (phosphodiesterCpGODN ,pdCpGODN )包裹于Np后免疫BALB/c小鼠 ,检测其免疫效果。结果显示 ,包裹pdCpGODN和HBsAg的Np在小鼠中诱导了很高滴度的抗 HBs抗体产生并诱生了HBsAgS2 8 3 9特异性的CTL ,而铝佐剂组和仅包裹HBsAg的Np组诱生的抗体滴度较低 ,未检测到CTL活力。抗体亚类分析结果表明包裹pdCpGODN和HBsAg的Np诱生的免疫应答类型与pdCpGODN剂量有关 ,较低剂量 (2 4 μgpdCpGODN )诱生的为IgG2a为主的Th1型应答 ,而较高剂量(4 7μgpdCpGODN )诱生的是Th1/Th2混合型应答。铝佐剂和仅包裹HBsAg的Np组诱生的是以IgG1为主的Th2型应答。此外 ,包裹pdCpGODN和HBsAg的Np免疫小鼠脾淋巴细胞在体外HBsAg刺激培养后特异性增殖并分泌高水平的IFN γ。这些结果表明包裹pdCpGODN和HBsAg的Np能增强HBsAg的免疫原性 ,诱生体液 /细胞免疫均衡应答 。

非磷脂脂质体佐剂在免疫血清制备中的应用研究

目的研究非磷脂脂质体在免疫血清制备中的佐剂效应。方法用无菌人血清、人血清+完全福氏佐剂(CFA)、人血清+非磷脂脂质体(NPL)分别经背部皮下多点注射免疫家兔制备免疫血清,采用双向免疫扩散和EL ISA间接法检测免疫血清抗体效价。结果①人血清+CFA组和人血清+NPL组血清抗体效价均明显高于无菌人血清组;②在免疫血清的制备中NPL的佐剂作用与CFA的作用相当,但其毒性作用明显低于CFA。结论在免疫血清制备中,NPL佐剂可以代替CFA。

破伤风类毒素非磷脂脂质体疫苗的实验研究

以二氧乙烯十六烷醚、胆固醇和油酸为原料制备非磷脂脂质体 ,试验证明其包裹率高、稳定性好。与破伤风类毒素(TT )铝佐剂疫苗相比较 ,TT非磷脂脂质体疫苗二针免疫小鼠产生的抗体应答水平高一倍左右 ,抗体亚类以IgG1为主 ,加入IFN γ可增加IgG2a亚类应答。但免疫脾细胞IL 2产量不高。此外 ,该疫苗鼻粘膜接种可诱导显著的血清抗体应答。因而这种新型脂质体值得疫苗工作者重视。

非磷脂脂质体介导反义c-myc基因质粒转染对人脑胶质瘤细胞U251的影响

目的 确定非磷脂脂质体 (non phospholipidliposome ,NPL)介导反义c myc基因转染人脑胶质瘤 (glioma)的作用。方法 以金属离子诱导表达人反义c myc基因的质粒pHMTASCMHDNA与NPL结合转染人脑恶性胶质瘤细胞U2 5 1,转染 6h后加入 2 0 0 μmol/LZnCl2 作实验组 ,不加ZnCl2 转染细胞和单用NPL为对照组。在实验的第 2 4、48、72和 96h分别测定细胞还原四甲基偶氮唑盐 (MTT)的光吸收值。将实验第 2 4小时或 72小时的细胞分别进行annexin V FLUOS或TUNEL染色 ;细胞裂解后做ELISA检测c myc基因表达产物含量的变化。结果 显微镜下观察转染 48h实验组瘤细胞开始出现多角型细胞 ,细胞胞浆内产生空泡 ;MTT实验结果发现其细胞活性下降 ;annexin V FLUOS染色与TUNEL实验显示细胞出现明显的程序性细胞死亡特征 ;c myc基因表达产物下降。结论 非磷脂脂质体介导反义c myc基因转染脑胶质瘤细胞可特异性地抑制c myc基因表达 ,抑制瘤细胞生长 ,细胞活性下降 。