药物新靶标非神经性乙酰胆碱系统的分布特征与功能

非神经性乙酰胆碱系统 (non neuronalacetyl cholinesystem ,NNAs)广泛存在于各种非神经支配的组织或器官中。非神经性ACh ,以自分泌或旁分泌方式 ,通过相应的受体参与细胞基本功能的调节 ,如基因表达、增生、分化、细胞骨架的组成、细胞间接触、细胞运动、迁移、液体的分泌与重吸收以及细胞的营养等功能 ,也对细胞因子的释放和系统急性炎症等方面具有重要调节作用。非神经性胆碱系统具有的广泛的生物学功能提示 ,非神经胆碱系统功能异常在一些疾病如炎症、动脉粥样硬化、局部及系统感染以及肿瘤等中具有重要的作用。因此 ,NNAs已成为药物研究的新靶标。

血管内皮细胞非神经性乙酰胆碱系统的研究进展

血管内皮细胞作为人体主要的代谢库,存在ACh ,并伴有ChAT的表达,有机阳离子载体(OCTs)参与血管内皮细胞ACh的转运和释放,血管内皮细胞AChE活性的广泛表达可以使非神经性ACh的活性仅仅局限于它的合成和释放区域,成为一种细胞因子。mAChR和nAChR同非神经性ACh一样,广泛存在于血管内皮细胞中,ACh通过其受体发挥重要的病理生理功能。nAChR参与血管内皮细胞多种生物活性物质的分泌和释放,其中α7受体在血管新生中发挥重要作用。非神经性ACh诱发内皮依赖的血管舒张反应,一种不同于神经性mAChR的血管内皮细胞非神经性M受体在其中发挥重要作用,并且在动脉粥样硬化和血栓的发生发展过程中起着重要的作用。

非神经性乙酰胆碱系统的结构和功能特征

非神经性乙酰胆碱系统包括乙酰胆碱、胆碱乙酰转移酶、胆碱酯酶、毒蕈碱乙酰胆碱能受体和烟碱胆碱能受体,广泛地存在于角质化细胞、肿瘤细胞、内皮细胞、胶质细胞、上皮细胞、淋巴细胞、生殖器官等非神经性细胞和组织,参与这些细胞和组织的功能调节,并与一些疾病的病理生理变化相关。本文归纳了非神经性乙酰胆碱系统的概况,并具体介绍了内皮细胞、胶质细胞、上皮细胞和淋巴细胞的非神经性乙酰胆碱系统的结构和功能特征。非神经性乙酰胆碱系统不但与神经性乙酰胆碱系统不尽相同,而且不同组织的非神经性乙酰胆碱系统也不完全一样。

离体乳内动脉乙酰胆碱M受体亚型的功能研究

目的为了从胆碱能受体角度研究抑制围术期乳内动脉(IMA)痉挛的方法,对离体乳内动脉胆碱能受体亚型的功能进行研究。方法取30例行冠状动脉旁路移植术(CABG)患者内皮完整的离体乳内动脉血管段,根据应用不同浓度的拮抗剂处理,采用随机数字表法分为对照组(未用拮抗剂)、阿托品组(非选择性M受体拮抗剂)、哌仑西平组(M1受体拮抗剂)和美索曲明组(M2受体拮抗剂)。分析不同浓度拮抗剂对血管舒张反应的影响,应用Scott比值法计算受体亲和力指数(pD2),应用Schild plot作图法求出拮抗指数(pA2)。结果乙酰胆碱介导氯化钾预收缩的内皮完整的乳内动脉是浓度依赖的舒张反应,其对乙酰胆碱的pD2为6.92±0.05。阿托品组、哌仑西平组、美索曲明组对内皮完整的乙酰胆碱介导的剂量-效应曲线的影响均是浓度依赖性的,随着拮抗剂浓度的增加,乙酰胆碱介导的剂量-效应曲线均明显右移(P<0.05)。阿托品、哌仑西平、美索曲明竞争性拮抗血管对乙酰胆碱的反应,其pA2分别为9.62±0.15,7.70±0.08和6.30±0.08。结论乙酰胆碱介导的内皮完整的乳内动脉舒张反应是浓度依赖性的。根据不同拮抗剂的亲和力不同,离体乳内动脉乙酰胆碱介导的舒张反应是通过作用于非神经性乙酰胆碱M1受体亚型实现的。

非神经性烟碱型乙酰胆碱受体在直肠癌组织中的表达及意义

目的探讨非神经性烟碱型乙酰胆碱受体(α7nicotinic acetylcholine receptor,α7nAChR)在直肠癌组织中的表达及临床意义。方法直肠癌患者72例,取其手术切除直肠癌组织及癌旁组织标本,采用免疫组织化学SP法检测α7nAChR阳性表达率,Spearman法分析α7nAChR阳性表达与临床病理特征的相关性。结果肿瘤组织α7nAChR阳性表达率(69.4%)高于癌旁组织(16.7%)(P<0.05);α7nAChR阳性表达率在肿瘤Dukes分期A+B期者(62.0%)低于C+D期者(86.4%),高分化+中分化者(60.4%)低于低分化+未分化者(87.5%),肿瘤直径<5cm者(63.0%)低于≥5cm者(80.8%)(P<0.05);Spearman相关分析结果显示,Dukes分期C+D期、低分化+未分化、肿瘤直径≥5cm与α7nAChR阳性表达呈明显正相关(r=0.553,P=0.021;r=0.489,P=0.032;r=0.533,P=0.029)。结论α7nAChR在直肠癌组织中呈高表达,且其阳性表达与原发病灶低分化+未分化、肿瘤直径≥5cm、Ducks分期C+D期明显相关。

盐酸戊乙奎醚对正常人离体白细胞炎性介质的影响

目的通过对正常人离体白细胞促炎和抗炎处理,观察盐酸戊乙奎醚对人离体白细胞炎性介质分泌的影响。方法严格无菌抽取正常成年人静脉血10ml,加入淋巴细胞分离液,2000r/min离心15min,取出白细胞,加1640培养液使白细胞浓度为106个/ml。平均分为五组,每组6个样本。Ⅰ组:对照组;Ⅱ组:加内毒素;Ⅲ组:加盐酸戊乙奎醚后20min加内毒素;Ⅳ组:加内毒素1h后加盐酸戊乙奎醚;Ⅴ组:加阿托品(与盐酸戊乙奎醚等量)20min后加内毒素。所有组加药后放置培养箱,4h后加肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)检测试剂。结果与Ⅰ组相比,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组TNF-α、IL-6、IL-10水平均明显增高;与Ⅱ组相比,Ⅲ、Ⅳ组TNF-α、IL-6、IL-10水平均有不同程度的下降(P<0.01),且Ⅲ组下降程度较Ⅳ组更明显(P<0.05),Ⅴ组TNF-α、IL-6、IL-10水平虽有所变化,但差异无统计学意义。结论抗胆碱药能作用于白细胞非神经性胆碱能受体,抑制白细胞炎性介质的分泌,盐酸戊乙奎醚的作用更明显,尤以提前干预为佳。

弓形虫淋巴结炎组织中ACh、ChAT及CGRP的表达

目的 探讨弓形虫淋巴结炎组织中乙酰胆碱（ACh）、胆碱乙酰转移酶（ChAT）与降钙素基因相关肽（CGRP）表达的意义。方法 分别应用间接原位PCR法及免疫组化PicTureTM二步法检测淋巴结炎组织中的弓形虫及ACh、ChAT和CGRP。将弓形虫检测结果分为阳性及阴性组，两组的ACh、ChAT、CGRP的检测结果用统计学方法进行对照分析。结果 71例淋巴结炎组织中41例弓形虫阳性。ACh、ChAT在弓形虫阳性组中表达强度增强，与阴性组表达强度经统计学处理差异非常显著（P〈0．005）。CGRP在两组中表达强度相似，经统计学处理无明显差异（P〉0．05）。三种阳性标志物在两组淋巴结炎中的分布大致相似，主要分布在淋巴细胞，淋巴滤泡生发中心巨噬细胞，浆细胞及单核细胞，多呈颗粒状位于胞质，也可见于胞膜或／及核。结论 弓形虫淋巴结炎ACh、ChAT、CGRP的变化是弓形虫感染的结果，还是由于先有免疫抑制，后有弓形虫感染尚难定论，但提示弓形虫可能影响非神经性乙酰胆碱系统与神经内分泌免疫网络，二者可互为因果，对弓形虫病的病程演变有一定影响。