二酶系统非竞争性抑制非稳态动力学的布尔函数图论研究

以非稳态酶动力学的布尔函数图形方法 [1 ] ,来研究一类二酶系统非竞争性抑制的非稳态动力学 ,推导出此类反应的非稳态酶动力学方程 ,并对此动力学方程进行了讨论 ,分析了这类二酶系统非竞争性抑制的非稳态动力学过程。

非竞争性抑制作用的非稳态酶动力学分析

本文对非竞争性抑制作用的非稳态酶动力学机制进行了研究，推导出了非竞争性抑制作用的非稳态酶动力学方程，并对此动力学方程进行了讨论，分析了非竞争性抑制作用的非稳态酶动力学过程．

连续搅拌反应器中产物─底物非竞争性抑制动力学的无因次分析

本文研究在ＣＳＴＲ反应器中进行非竞争性抑制微生物反应动力学行为．将产物一底物非竞争性抑制动力学模型无因次处理后，分析可能出现的解的多重态现象，表明在多解操作区内的稳志解是具有高产量、高底物利用率的最优操作态，指出从发酵液中不断移去产物能有效地缓和产物抑制，增大多解操作区的范围．

一类非竞争性抑制的非稳态酶动力学布尔函数图解研究

本文以非稳态酶动力学的布尔函数图形方法［１］，来研究一类非竞争性抑制的非稳态酶动力学问题，推导出此类反应的非稳态酶动力学方程，并对此动力学方程进行了讨论，分析 了此类非竞争性抑制的非稳态酶动力学的动力学过程．

二酶系统非竞争性抑制的稳态酶动力学布尔函数图论研究

用稳态酶动力学的布尔函数图形方法[1] ,对一类二酶系统非竞争性抑制的稳态酶动力学进行了研 究 ,推导出此类反应的稳态酶动力学方程 ,并对该方程进行了讨论 。

霜桑叶提取物对胰脂肪酶活性抑制作用的研究

为发掘霜桑叶中的活性成分,采用分光光度法测定霜桑叶的不同极性提取物对胰脂肪酶的抑制活性;通过酶反应动力学方法确定正己烷提取物对胰脂肪酶的抑制类型,并考察其经人工肠液模拟消化后对胰脂肪酶抑制效果的影响。结果表明,霜桑叶提取物中对胰脂肪酶的抑制活性由强到弱依次是正己烷提取物(半数抑制浓度IC_50=1.14 mg/m L)>二氯甲烷提取物(IC_50=8.51 mg/m L)>乙酸乙酯提取部位(IC_50=13.60 mg/m L)。正己烷提取物对胰脂肪酶的作用类型为非竞争性抑制。体外模拟消化后,正己烷提取物对胰脂肪酶仍有较强的抑制效果,而且抑制率随浓度的升高而增大。由此可见,霜桑叶的正己烷提取物可作为良好的胰脂肪酶抑制剂,具有调节脂质代谢的潜在功效。本研究为进一步以霜桑叶为原料开发降脂、减肥的功能性食品提供了理论依据。

螺旋藻中α-葡萄糖苷酶抑制剂的提取及动力学

研究与开发了钝顶螺旋藻中的α-葡萄糖苷酶抑制剂。采用氯仿-甲醇溶液浸提、大孔吸附树脂脱色、硅胶层析柱,Saphedex LH-20柱层析等步骤分离纯化得到α-葡萄糖苷酶抑制剂;利用紫外及红外图谱分析了所提抑制剂结构;采用双倒数作图法研究其抑制动力学特性。从螺旋藻分离的α-葡萄糖苷酶抑制剂达到了色谱纯,通过多种色谱分析,推测该试样为带有共轭体系的多羟基酯类化合物。对α-葡萄糖苷酶具有较强的抑制效果,抑制剂质量浓度为0.18 g/L时,抑制率达73%;动力学研究表明为典型的非竞争性抑制,为进一步的研究与开发奠定了基础。

海洋微生物代谢产物对α-葡萄糖苷酶的抑制活性及抑制类型

[目的]了解海洋微生物代谢产物对α-葡萄糖苷酶抑制剂的能力及其抑制类型,以发现糖尿病等与糖代谢有关的疾病的新型治疗药物。[方法]42株海洋微生物经发酵和乙酸乙酯提取,获得粗提物,用比色法对粗提物进行α-葡萄糖苷酶抑制活性和抑制剂动力学测定。[结果]从中发现6株菌株的代谢产物具有不同程度的α-葡萄糖苷酶抑制活性;其中菌株Act09和Act18抑制活力较强,其IC50分别为2.51μl(含粗提物276.10μg)和1.48μl(含粗提物118.4μg)。菌株Act09产生的是反竞争性抑制物,而菌株Act18产生的是非竞争性抑制物。[结论]海洋微生物代谢产物可能含有新类型的α-葡萄糖苷酶抑制剂。

枸杞多糖对α-葡萄糖苷酶的抑制作用

目的从21味药中筛选对α-葡萄糖苷酶具有活性的中药。方法选用对α-葡萄糖苷酶活性抑制程度较高的中药枸杞作为研究对象。采用烘干、回流脱脂、水提、乙醇沉淀和DEAE纤维素柱层析等方法进行枸杞多糖的提取,并对其活性以及在不同条件下对α-葡萄糖苷酶的影响进行研究。结果0.4 mg的枸杞多糖对α-葡萄糖苷酶的抑制程度达52%,2.0 mg的抑制率高达88%。结论枸杞多糖对α-葡萄糖苷酶具有较强的抑制作用,抑制机理为非竞争性抑制。

枸杞多糖对α-葡萄糖苷酶抑制作用的系列研究Ⅰ

目的:研究枸杞多糖对α-葡萄糖苷酶的抑制作用。方法:提取纯化枸杞多糖,并检测其在不同条件下对α-葡萄糖苷酶活性的影响。结果:枸杞多糖对α-葡萄糖苷酶具有较强的抑制作用。结论:枸杞多糖抑酶效果为非竞争性抑制。

黄芩苷对胰脂肪酶的抑制机理研究

[目的]探讨黄芩苷的脂肪酶抑制机理。[方法]用分光光度法测定脂肪酶活性,研究了浓度、反应时间、加酶量和加入顺序对黄芩苷抑制胰脂肪酶的作用。[结果]在一定浓度下,黄芩苷对脂肪酶的抑制作用呈上升趋势;初期抑制率的上升幅度较大,随着黄芩苷浓度的增大,抑制率的增幅减小。15 min内,抑制率随着反应时间的延长而增大;但当反应时间超过15 min时,黄芩苷对胰脂肪酶的抑制作用趋于稳定。在0.2～1.0 mg/ml的浓度范围内,酶量对抑制率的影响不明显。黄芩苷试剂与胰脂肪酶预热10 min后,加入底物乳液进行反应的胰脂肪酶抑制率最高。黄芩苷对胰脂肪酶的抑制常数为0.505 mg/ml,其抑制作用为非竞争性抑制作用。[结论]该实验证实了中药黄芩中黄芩苷具有抑制胰脂肪酶的作用。

脲酶抑制剂的研究现状与展望

综述了脲酶抑制剂的种类和作用机理,简要介绍了脲酶抑制剂在动植物生产中的应用。

穿心莲内酯衍生物炎琥宁对α-葡萄糖苷酶抑制活性及机制研究

目的测定穿心莲内酯衍生物炎琥宁对α-葡萄糖苷酶的抑制活性,并初步判断其对α-葡萄糖苷酶的抑制作用类型。方法利用体外酶促反应测定穿心莲内酯衍生物炎琥宁对α-葡萄糖苷酶的抑制活性;利用Lineweaver-Burk双倒数作图法初步判断穿心莲内酯衍生物炎琥宁和阿卡波糖对α-葡萄糖苷酶的抑制作用类型。结果体外酶促实验得到炎琥宁的IC50为0.14mmol/L;阿卡波糖组与空白组的Lineweaver-Burk直线交点情况类似于竞争性抑制,与文献报道一致;炎琥宁组与空白组的Lineweaver-Burk直线交点情况类似于非竞争性抑制。结论穿心莲内酯衍生物炎琥宁在体外对α-葡萄糖苷酶具有明显的抑制作用,初步判断其抑制类型属于非竞争性抑制。

虎杖提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用

目的研究虎杖水溶性提取物对α-葡萄糖苷酶的作用。方法采用大孔吸附树脂柱色谱法进行虎杖水溶性总提取物初步分离,研究其总提取物和不同组分对α-葡萄糖苷酶活性的影响及其抑制反应的类型。结果虎杖总提取物(RRPC)与30%醇洗脱物(RRPCⅡ)对α-葡萄糖苷酶的IC50分别为74、15μg/mL,而蒸馏水(RRPCⅠ)、50%乙醇(RRPCⅢ)、70%乙醇(RRPCⅣ)、95%乙醇(RRPCⅤ)洗脱物的IC50均大于200μg/mL。结论RRPC及RRPCⅡ能显著抑制α-葡萄糖苷酶活性,RRPCⅡ的抑制机制为可逆性的非竞争性抑制。

柴胡皂甙抑制Na^+、K^+-ATP酶活性的构效关系

报道在离体条件下各种单体柴胡皂甙抑制Ｎａ＋、Ｋ＋－ＡＴＰ酶活性构效关系。结果表明，各种柴胡皂甙抑制Ｎａ＋、Ｋ＋－ＡＴＰ酶活性作用强度依次为：ｂ２＞ｄ＞ｂ１＞ｂ４＞ａ＞ｂ３＞ｅ＞ｃ。其中柴胡皂甙结构中的Ｃ２３－ＯＨ，Ｃ１６－ＯＨ以及Ｃ１１和Ｃ１３的共轭双烯可能对其抑制活性起重要作用。证明，柴胡皂甙ｄ对Ｎａ＋、Ｋ＋－ＡＴＰ酶的抑制为非竟争性抑制。

女贞子多糖对α-葡萄糖苷酶的抑制作用

α-葡萄糖苷酶是一种存在于小肠绒毛粘膜细胞刷状缘的酶类，通过水解α-1，4糖苷键，可以从淀粉和其它有关多糖的非还原端水解下葡萄糖。人体对摄入的淀粉、蔗糖等碳水化合物的吸收利用，依赖于小肠内该酶的活性。α-葡萄糖苷酶抑制剂通过抑制小肠内α-葡萄糖苷酶的活性，延缓或抑制葡萄糖在肠道内的吸收．从而有效地降低了餐后血糖的峰值，减少高血糖对胰腺的刺激，

琯溪蜜柚柚皮苷纯化鉴定及其对胰脂肪酶的抑制作用

为了探索琯溪蜜柚黄酮作为胰脂肪酶抑制剂的应用价值,本实验采用Sephadex LH-20葡聚糖柱层析、高效液相色谱-质谱联用、傅里叶变换红外光谱对琯溪蜜柚柚皮黄酮进行分离纯化及结构鉴定,并通过酶反应动力学和分子对接技术研究其对胰脂肪酶的抑制类型和分子间相互作用。高效液相色谱-质谱联用和傅里叶变换红外光谱分析结果表明,纯化后的琯溪蜜柚柚皮主要黄酮成分为柚皮苷;纯化鉴定的柚皮苷对胰脂肪酶半抑制浓度(half inhibitory concentration,IC_(50))为0.99μg/mL,抑制类型为可逆非竞争型,抑制常数Ki=0.58μg/mL;该黄酮与胰脂肪酶的结合自由能为-30.14 kJ/mol,相互间的分子作用力包括范德华力、疏水相互作用、氢键、π键等,结合区域位于酶催化活性中心之外的位点。本研究表明琯溪蜜柚的主要黄酮成分柚皮苷对胰脂肪酶具有强烈的抑制作用,为利用琯溪蜜柚黄酮开发高效安全的胰脂肪酶抑制剂提供了理论依据。

竹叶椒对α-葡萄糖苷酶的抑制作用及机制研究

采用体外抑制模型方法评价竹叶椒生物碱对α-葡萄糖苷酶(酵母菌来源、小鼠小肠来源)抑制作用,并采用Lineweaver-Burk双倒数法分析其抑制α-葡萄糖苷酶活性的机制。结果显示,竹叶椒脂溶性生物碱和水溶性生物碱都对α-葡萄糖苷酶有一定的抑制作用。竹叶椒脂溶性生物碱和水溶性生物碱对酵母来源α-葡萄糖苷酶IC50(半数抑制浓度)分别为(0.73±0.17) mg/mL、(2.74±0.28) mg/mL;脂溶性生物碱对小鼠小肠来源α-葡萄糖苷酶的IC_(50)为(1.94±0.13) mg/mL。动力学研究表明,竹叶椒生物碱提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用类型为典型的非竞争性抑制。竹叶椒生物碱对α-葡萄糖苷酶有较好的抑制作用,为进一步的开发利用提供强有力的理论依据。

血人参总黄酮纯化工艺的优化及其对酪氨酸酶的抑制作用研究

目的优化大孔吸附树脂分离纯化血人参总黄酮的工艺条件,研究血人参总黄酮对酪氨酸酶的抑制作用。方法以吸附率、解吸率等为考察指标,采用静态吸附-解吸试验对6种不同型号的大孔吸附树脂进行筛选,优选最佳的树脂型号。采用单因素试验考察上样液pH、上样液浓度、上样体积、上样体积流量、洗脱溶剂、洗脱液体积流量、洗脱剂体积对血人参总黄酮纯化的影响,确定最佳纯化工艺;以L-酪氨酸、L-多巴为底物,测定血人参总黄酮对酪氨酸单酚酶和二酚酶的抑制作用,并对其抑制机理和抑制类型进行分析。结果AB-8型大孔吸附树脂对血人参总黄酮的分离纯化效果最好。最佳纯化工艺参数为:上样液pH为4、上样体积为70 mL(4.7 BV)、上样体积流量为1 mL·min^(-1)、上样液浓度为5.38 mg·mL^(-1)、洗脱溶剂为70%乙醇、洗脱剂体积流量为3 mL·min^(-1)、洗脱剂体积为120 mL(8 BV),血人参总黄酮对酪氨酸单酚酶和二酚酶均有抑制作用,其最大半数抑制浓度分别为88.78 mg·L^(-1)和36.46 mg·L^(-1),对二酚酶的抑制类型为可逆非竞争性抑制。结论AB-8型大孔吸附树脂可用于纯化血人参总黄酮,纯化后血人参总黄酮的纯度为46.01%,建立的工艺条件稳定可靠。纯化后的血人参总黄酮对酪氨酸酶有抑制作用,抑制类型为可逆非竞争性抑制。

山楂提取物对脂肪酶活性的抑制作用研究

建立从中药山楂中筛选脂肪酶抑制剂的气相色谱法，探讨山楂提取物对脂肪酶的抑制活性及机理。以三丁酸甘油酯为底物，采用猪胰脂肪酶抑制剂活性筛选模型对各组分进行筛选。通过气相色谱对产物正丁酸与内标物己酸的峰面积比值进行定量分析。在0．10-5．00mmoL／L范围内，正丁酸与内标物己酸的峰面积比值线性关系良好，得到线性方程为Y=1．5269x-0．0723（R2=0．9987）。计算得水、乙醇、氯仿和乙酸乙酯提取物IC50分别为17．44、7．0、2．91me／mL和1．31mg／mL。Dixon图和Lineweaver-Burk图表明山楂提取物对胰脂肪酶的抑制作用为非竞争性抑制，Ki=0．91g／L。实验研究表明，山楂的乙酸乙酯提取物是脂肪酶的有效抑制剂。