长链的非编码RNA生长停滞特异性转录本5在骨关节炎中的研究进展

骨关节炎(OA)是一种以软骨退变、骨重建为主要病理特点的慢性关节疾病。目前没有可治愈该疾病的药物及手段,治疗策略有限的根本原因是对其潜在发病机制的认识不足。长链的非编码RNA(LncRNAs)被认为是许多疾病中的一类新的调控因子,是目前研究OA发病机制的一个重要切入点。LncRNA生长停滞特异性转录本5(Cas5)参与调控细胞的增殖、分化及凋亡,是一种在软骨细胞中特异性高表达的LncRNA。然而,由于LncRNA Cas5作用机制复杂,其与OA相关具体分子机制目前仍不明确。该文针对LncRNA Cas5在OA中的软骨细胞凋亡、软骨基质代谢成骨分化及治疗方面的作用进行综述。

循环长链非编码RNA生长停滞特异性转录本5与冠状动脉钙化的相关性研究

目的探讨外周血中长链非编码RNA生长停滞特异性转录本5（lncRNAGAS5）与冠状动脉钙化（CAC）的相关性。方法选取2016年1—3月于首都医科大学附属北京安贞医院就诊的具有典型心绞痛症状和高度疑似冠状动脉粥样硬化性心脏病患者39例，计算所有患者CAC积分。根据CAC积分将患者分为无CAC组（19例，CAC积分为0-100分）和CAC组（20例，CAC积分为101-2800分）。比较2组患者外周血中lncRNAGAS5含量，并分析CAC和lncRNAGAS5的独立相关因素。结果CAC组外周血中IncRNAGAS5含量明显高于无CAC组[（0．0142±0．0111）比（0．0074±0．0072）]，差异有统计学意义（P=0．030）。多元线性回归分析模型显示lncRNAGAS5（t=1．99，P=0．045）、低密度脂蛋白胆固醇（t=2．47，P=0．019）、血钾（t=2．86，P=0．007）是CAC的独立相关因素；白细胞介素6（t=-2．516，P=0．017）和脑钠肽（t=2．236，P=0．032）是lncRNAGAS5的独立相关因素。结论外周血中lncRNAGAS5在CAC患者中表达升高，且可作为预测CAC的指标，其升高可能与炎症指标和心室功能相关。

长链非编码RNA生长停滞特异性转录本5(lncGAS5)促进同型半胱氨酸致肝细胞自噬作用

目的探讨长链非编码RNA生长停滞特异性转录本5(lncGAS5)在同型半胱氨酸(Hcy)致肝细胞自噬中的作用。方法体外培养HL7702人肝细胞,分为对照组和Hcy组。Western blot法检测自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)和P62的表达水平,转染携带双荧光蛋白和LC3(mRFP-GFP-LC3)基因的腺病毒,激光扫描共聚焦显微镜技术观察细胞内自噬流水平变化,实时荧光定量PCR检测lncGAS5的表达水平。转染lncGAS5小干涉RNA(si-lncGAS5)及阴性对照小干涉RNA(si-NC),并用Hcy处理,再次检测LC3B和P62及自噬体的变化。结果与对照组比较,Hcy组LC3BⅡ/LC3BⅠ比值增加,P62蛋白表达降低,细胞内自噬体及自噬溶酶体数量增加,lncGAS5表达升高。敲低lncGAS5后,LC3BⅡ/LC3BⅠ比值减小,P62蛋白表达升高,细胞内自噬体及自噬溶酶体数量减少。结论 lncGAS5促进Hcy致肝细胞自噬。

长链非编码RNA生长停滞特异性转录因子5在宫颈癌中的作用研究进展

长链非编码RNA(lncRNA)是一类由RNA聚合酶Ⅱ合成的含200多个核苷酸的RNA。LncRNA在多种恶性肿瘤的发生、发展中发挥重要生物学功能。生长停滞特异性转录因子5(GAS5)为lncRNA的一种,可发挥肿瘤抑制作用,其在包括宫颈癌在内的多种恶性肿瘤中下调。本文就GAS5在宫颈癌中生物学功能的研究进展进行综述,旨在为宫颈癌的诊断、治疗及预后评估提供参考和方向。

长链非编码RNA生长停滞特异性转录本5在妇科恶性肿瘤中的研究进展

长链非编码RNA(lncRNA)是一类长度大于200个核苷酸的非编码RNA,已被证明广泛参与各种生理过程以及疾病病理状态。lncRNA生长停滞特异性转录本5(GAS5)作为其中一种lncRNA,能够抑制恶性肿瘤细胞的增殖、迁移、侵袭和上皮-间充质转化,促进细胞凋亡,在恶性肿瘤进展中发挥抑癌作用。lncRNA GAS5在宫颈癌、卵巢癌和子宫内膜癌中显著低表达,与临床病理特征密切相关,其低表达常预示患者预后不良,并能通过不同作用机制参与妇科恶性肿瘤的发生、发展过程。lncRNA GAS5在宫颈癌和卵巢癌的诊断和治疗中已显示出一定的应用价值,未来可能成为研究热点之一。

子痫前期患者胎盘组织中长链非编码RNA生长停滞特异性转录本5表达水平及临床意义

目的检测子痫前期(PE)患者胎盘组织中长链非编码RNA(lncRNA)生长停滞特异性转录本5(GAS5)表达水平,并探讨其临床意义。方法选取2018年6月至2020年5月在监利市人民医院行剖宫产的50例非重度PE患者(非重度PE组)、50例重度PE患者(重度PE组)及50例正常妊娠孕妇(对照组)作为研究对象。分娩后收集胎盘组织,检测胎盘组织螺旋动脉管壁厚度、螺旋动脉管腔面积;实时荧光定量聚合酶链反应法检测胎盘组织中lncRNA GAS5表达水平;Pearson法分析PE患者胎盘组织中lncRNA GAS5水平与螺旋动脉管壁厚度、螺旋动脉管腔面积的相关性。结果与对照组比较,非重度PE组、重度PE组胎盘组织螺旋动脉管壁厚度及lncRNA GAS5表达水平均升高,螺旋动脉管腔面积均降低,差异具有统计学意义(P<0.05);与非重度PE组比较,重度PE组胎盘组织螺旋动脉管壁厚度及lncRNA GAS5表达水平升高,螺旋动脉管腔面积降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。PE患者胎盘组织中lncRNA GAS5表达水平与螺旋动脉管壁厚度存在正相关(r=0.485,P=0.000),与螺旋动脉管腔面积存在负相关(r=-0.614,P=0.000)。结论PE患者胎盘组织中lncRNA GAS5高表达,可能通过影响螺旋动脉灌注影响PE的发生发展,对其水平进行检测有助于临床判断PE患者病情。

生长停滞特异性转录本5在乳腺癌中低表达并抑制上皮细胞-间充质转化

目的探讨生长停滞特异性转录本5(lncRNA-GAS5)在乳腺癌中发展和上皮细胞-间充质转化(EMT)过程中的影响。方法采用实时定量聚合酶链反应法检测乳腺癌组织和癌旁组织(n=36)、乳腺癌MCF-7亲本和耐药细胞中lncRNA-GAS5的表达,并分析GAS5表达与乳腺癌临床分期和淋巴结转移相关性;qRT-PCR法、Western blot和免疫组化法检测细胞周期和EMT相关蛋白的表达;迁移、趋化和黏附分离实验检测细胞生物学活性;通过光学显微镜观察细胞的形态学变化;以耐药细胞株构建裸鼠乳腺癌模型,体内探讨过表达GAS5对紫杉醇抗乳腺癌作用的影响。结果 LncRNA GAS5转录本水平相对于癌旁组织是显著降低的(P<0.05),GAS5低表达与乳腺癌TNM分期和淋巴结转移相关(P<0.05);耐药细胞株中GAS5表达下调(P<0.05),GAS5与P21表达正相关,而与CDK6表达呈负相关;体外干扰GAS5促进乳腺癌亲本细胞株发生EMT表型改变和侵袭能力增加,而过表达lncRNA GAS5可抑制乳腺癌耐药细胞株EMT表型和侵袭能力(P<0.05),并提高紫杉醇的药物敏感性。体内实验发现,过表达GAS5通过逆转EMT标志蛋白,提高紫杉醇抑制肿瘤生长和肺转移的作用。结论 LncRNA GAS5低表达可能通过诱导EMT促进乳腺癌的肺转移,可能是乳腺癌的一个潜在治疗靶点。

LncRNA GAS5通过miR-21调控脊髓损伤后神经细胞凋亡的机制研究

目的 明确长链非编码RNA生长阻滞特异性转录因子5(LncRNA GAS5)与微小RNA-21(miR-21)的关系,阐明LncRNA GAS5调控miR-21参与脊髓损伤后神经细胞凋亡的机制。方法 建立脊髓损伤大鼠和氧糖剥夺复氧(OGD/R)处理的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC-12)模型;沉默和过表达GAS5,构建下调shGAS5表达的慢病毒,通过生物信息学分析预测LncRNA GAS5与miR-21存在结合位点等。通过双荧光素酶报告基因实验等探究GAS5与miR-21的结合位点;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测miR-21、GAS5、同源性磷酸酶-张力蛋白(phosphatase and tensin homolog,PTEN)基因、半胱天冬氨酸蛋白酶3(Caspase 3)、B淋巴细胞瘤(Bcl)-2相关X基因(Bax)、Bcl-2和蛋白激酶B(AKT)的RNA表达水平;Western blot检测Cleaved caspase 3、Bax、Bcl-2、AKT和磷酸化AKT(p-AKT)的蛋白表达水平;TUNEL技术检测神经细胞凋亡程度。结果 大鼠脊髓损伤后脊髓中miR-21、Bcl-2及pAKT表达水平降低(P<0.05),GAS5、PTEN、Bax及Cleaved caspase-3表达均升高(P<0.05)。PC-12体外培养与OGD/R损伤后出现与大鼠脊髓损伤模型类似结果,且于OGD/R处理后2 h最显著。GAS5可通过碱基互补配对方式结合miR-21,进而调控下游PTEN信号通路。下调GAS5或过表达miR-21可抑制PC-12细胞凋亡(P<0.05)。结论 GAS5通过结合miR-21,上调PTEN并抑制AKT磷酸化,进而促进脊髓损伤诱导的神经细胞凋亡。

长链非编码生长停滞特异性蛋白6反义RNA1靶向miRNA-374a-3p调控高糖诱导的人肾小管上皮细胞损伤及纤维化分子机制的研究

目的探讨长链非编码生长停滞特异性蛋白6反义RNA1(LncRNA DLX6-AS1)对高糖诱导的人肾小管上皮细胞HK-2损伤及纤维化的影响及其可能作用机制。方法高糖诱导HK-2细胞建立细胞损伤模型,实验分为正常对照(Con)组、高糖组(HG)、LncRNA DLX6-AS1小分子干扰RNA阴性对照(si-NC)+HG组(si-NC+HG组)、LncRNA DLX6-AS1小分子干扰RNA(si-LncRNA DLX6-AS1)+HG组(si-LncRNA DLX6-AS1+HG组)、miR-374a-3p寡核苷酸模拟物阴性对照mimic NC序列(miR-NC)+HG组(miR-NC+HG组)、miR-374a-3p寡核苷酸模拟物(miR-374a-3p mimics)+HG组(miR-374a-3p+HG组)、miR-374a-3p特异性寡核苷酸抑制剂阴性对照(anti-miR-NC)+si-LncRNA DLX6-AS1+HG组(anti-miR-NC+si-LncRNA DLX6-AS1+HG组)、miR-374a-3p特异性寡核苷酸抑制剂(anti-miR-374a-3p)+si-LncRNA DLX6-AS1+HG组(anti-miR-374a-3p+si-LncRNA DLX6-AS1+HG组)。qRT-PCR法检测LncRNA DLX6-AS1、miR-374a-3p表达,ELISA法检测TNF-α、IL-1β水平,双荧光素酶报告实验检测LncRNA DLX6-AS1和miR-374a-3p的靶向关系,Western blot法检测人平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、纤维连接蛋白(Fn)、I型胶原α1链(COL1a1)、COL3a1蛋白表达量。结果转染si-LncRNA DLX6-AS1或miR-374a-3p mimic可降低TNF-α、IL-1β水平和α-SMA、Fn、COL1a1、COL3a1蛋白水平(P<0.05)。LncRNA DLX6-AS1可靶向调节miR-374a-3p表达。共转染anti-miR-374a-3p与si-LncRNA DLX6-AS1可恢复转染si-LncRNA DLX6-AS1对HG诱导的HK-2细胞炎症及纤维化作用。结论干扰LncRNA DLX6-AS1表达可通过上调miR-374a-3p表达抑制高糖诱导的肾小管上皮细胞炎症反应及纤维化。

黄芪糖蛋白干扰lncRNA GAS5/miR-21/TLR4信号轴抑制细胞焦亡改善佐剂性关节炎大鼠心肌损伤

目的基于长链非编码RNA生长停滞特异性转录本5/微小RNA 21/Toll样受体4(lncRNA GAS5/miR-21/TLR4)信号轴探究黄芪糖蛋白(HQGP)对佐剂性关节炎(AA)大鼠心肌损伤的作用及机制。方法将SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、甲氨蝶呤(MTX)组、HQGP组,每组6只。复制AA模型,第19天开始给药,连续4周。检测各组AA大鼠足趾肿胀度、关节炎指数(AI),HE染色观察大鼠心肌组织病理变化,透射电镜观察心肌组织超微结构的变化及焦亡小体情况,ELISA检测血清白细胞介素6(IL-6)、IL-18、IL-1β和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测心肌组织LDH释放量,实时荧光定量PCR检测心肌组织核因子κB p65(NF-κB p65)、胱天蛋白酶1(caspase-1)、含pyrin结构域核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、消皮素D(GSDMD)的mRNA以及lncRNA GAS5/miR-21/TLR4信号轴分子的表达,Western blot法检测心肌组织TLR4、NF-κB p65、caspase-1、NLRP3和GSDMD蛋白水平。结果与正常对照组相比,模型组大鼠足趾肿胀度、AI显著升高;大鼠心肌纤维溶解、断裂,肌节结构模糊,心肌纤维排列紊乱,组织间有炎性细胞浸润,线粒体嵴明显断裂稀疏,焦亡小体数量增加;血清促炎细胞因子IL-6、IL-18、IL-1β和TNF-α表达显著升高;心肌组织中GAS5表达显著降低,miR-21表达显著升高,LDH释放量、TLR4、NF-κB p65、caspase-1、NLRP3、GSDMD的mRNA和蛋白表达水平显著升高。与模型组比较,HQGP组大鼠足趾肿胀度、AI和心肌组织病理状态明显改善;血清IL-6、IL-18、IL-1β和TNF-α表达显著降低;心肌组织中GAS5表达显著升高,miR-21表达显著降低,LDH释放量、TLR4、NF-κB p65、caspase-1、NLRP3的mRNA和蛋白表达水平显著降低,GSDMD的mRNA表达降低且蛋白水平显著降低。结论HQGP通过上调lncRNA GAS5抑制miR-21/TLR4信号传导,抑制细胞焦亡,减少促炎细胞因子表达,改善AA大鼠心肌损伤。

长链非编码RNA生长停滞特异性转录子5负调控核仁磷酸蛋白1对胃癌细胞顺铂耐药性的影响

目的 研究长链非编码RNA(LncRNA)生长停滞特异性转录子5(growth arrest specific transcript 5,GAS5)负调控核仁磷酸蛋白1(nucleophosmin 1,NPM1)对胃癌细胞顺铂(cisplatin,DDP)耐药性的影响。方法 选取正常人胃黏膜细胞系GES-1和人胃癌细胞系BG3-823、MGC-803、AGS作为研究对象,qRT-PCR法检测各细胞中LncRNA GAS5水平。诱导AGS细胞DDP耐药(AGS/DDP)后,将实验分为对照组、空质粒组(BC组)、GAS5无义干扰组(pLJM-GAS5NC组)、GAS5过表达组(pLJM-GAS5组),MTT法检测DDP对AGS、AGS/DDP细胞增殖能力的影响;Western blot法检测AGS、AGS/DDP细胞中NPM1、多药耐药基因1 (multidrug resistance 1,MDR1)、耐药基因切除修复交叉互补基因1(excision repair cross complementation group 1,ERCC1)、多药耐药相关蛋白1 (multidrug resistance-associated protein 1,MRP1)、神经性钙黏附素(N-cadherin)水平。结果 与人正常胃黏膜GES-1细胞相比,人胃癌BG3-823、AGS细胞中LncRNA GAS5水平明显降低,其中AGS细胞中LncRNA GAS5水平最低,因此选择AGS细胞进行后续试验。与对照组相比,BC和pLJM-GAS5 NC组AGS细胞中LncRNA GAS5水平明显降低,NPM1、MDR1、ERCC1、MRP1、N-cadherin水平显著升高;与BC组和pLJM-GAS5 NC组相比,pLJM-GAS5组AGS/DDP细胞中LncRNA GAS5水平显著升高,NPM1、MDR1、ERCC1、MRP1、N-cadherin水平显著降低;同浓度DDP(除0μmol/L外)处理后,与对照组相比,BC、pLJM-GAS5 NC组AGS/DDP细胞增殖抑制率明显降低;与BC、pLJM-GAS5 NC组相比,pLJM-GAS5组AGS/DDP细胞增殖抑制率显著升高。DDP对pLJM-GAS5组AGS/DDP细胞48 h的半抑制浓度(IC_(50))为(65.38±5.04)μmol/L,明显低于BC[(120.74±4.17)μmol/L]、pLJM-GAS5 NC组[(120.24±4.29)μmol/L]。结论 上调AGS/DDP细胞中LncRNA GAS5水平,可逆转AGS/DDP细胞耐药性,可能与下调NPM1的表达有关。

长链非编码RNA生长停滞特异性转录本5在糖尿病肾病进展中作用机制研究

目的探讨长链非编码RNA生长停滞特异性转录本5(LncRNA GAS5)在糖尿病肾病(DN)进展中的作用机制。方法选取10只健康5周龄大鼠为研究对象。将大鼠分为模型组与对照组,每组各5只。构建DN细胞模型,并分为LncRNA GAS5干扰组、LncRNA GAS5过表达组与阴性对照组。通过实时荧光定量聚合酶链式反应及蛋白质印迹法检测LncRNA GAS5、miR⁃135a⁃5p及沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)的表达水平。采用双荧光素酶报告实验验证miR⁃135a⁃5p与LncRNA GAS5、SIRT1之间的相互作用。结果模型组肾组织、血清外泌体、人肾小球系膜细胞(HMC)及上清外泌体中LncRNA GAS5表达水平均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。敲减或过表达LncRNA GAS5后,LncRNA GAS5过表达组HMC细胞中miR⁃135a⁃5p表达水平相应高于或低于阴性对照组,而SIRT1表达水平相应低于或高于阴性对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。感染miR⁃135a⁃5p或转染siSIRT1后,LncRNA GAS5过表达组对HMC细胞增殖的抑制作用及对α⁃平滑肌肌动蛋白、纤连蛋白、α(I)胶原表达的抑制作用均弱于阴性对照组,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论LncRNA GAS5可通过miR⁃135a⁃5p/SIRT1通路调控DN的进展。

血浆lncRNA-GAS5和lncRNA-CCAT1表达对非小细胞肺癌的诊断价值

目的:探讨血浆lncRNA生长停滞特异性转录本5(lncRNA-GAS5)和lncRNA-CCAT1表达水平对非小细胞肺癌(NSCLC)的临床诊断价值。方法:分别收集60例NSCLC及60例良性肺病患者的血浆样本,采用实时荧光定量PCR法检测血浆中lncRNA-GAS5和lncRNA-CCAT1的表达水平,比较两者在NSCLC组和良性肺病组的表达差异。构建受试者工作特征(ROC)曲线,根据ROC曲线图确定lncRNA-GAS5和lncRNA-CCAT1诊断NSCLC的折点(cut off),计算两种lncRNA分别诊断及联合诊断NSCLC的敏感性、特异性、准确性、阳性预测值和阴性预测值,同时与经典肿瘤标志物癌胚抗原、细胞角蛋白19(Cyfra21-1)进行比较,评估这两种lncRNA诊断肺癌的效能。结果:与良性肺病患者相比,NSCLC患者血浆中lncRNA-GAS5表达显著下调,而lncRNA-CCAT1表达明显上调(P均<0. 05)。除血浆lncRNA-GAS5表达与吸烟相关外,血浆lncRNA-GAS5和lncRNA-CCAT1表达与NSCLC患者的性别、年龄、组织分型、临床分期均无相关性(P均> 0. 05)。lncRNA-GAS5和lncRNA-CCAT1的ROC曲线下面积(AUC)略高于癌胚抗原和Cyfra21-1。血浆lncRNA-GAS5和lncRNA-CCAT1诊断NSCLC的敏感性分别为86. 7%和88. 3%,高于癌胚抗原和Cyfra21-1(66. 7%和45. 0%)。相比于单独诊断,两种lncRNA联合诊断时敏感性提升到91. 7%,但特异性略有降低。当lncRNA-GAS5及lncRNA-CCAT1联合传统肿瘤标志物时诊断效能增加,且敏感性得到明显提升,特异性保持良好。结论:lncRNA-GAS5和lncRNA-CCAT1在NSCLC患者血浆中的表达水平与良性肺病患者比较有显著差异,对NSCLC的诊断有一定价值。

原发性膜性肾病患者外周血lncRNA GAS5-AS1、白细胞介素-27表达及与Treg/Th17平衡的关系

目的检测原发性膜性肾病(primary membranous nephropathy,PMN)患者外周血长链非编码RNA-生长停滞特异性转录本5反义RNA1(long non-coding RNA growth arrest-specific transcript 5 antisense RNA1,lncRNA GAS5-AS1)、白细胞介素(interleukin,IL)-27表达,并分析其与患者调节性T细胞/辅助性T细胞17(regulatory T cell/T help 17cells,Treg/Th17)平衡的关系。方法选择2019年9月至2020年9月间河北以岭医院收治的PMN患者94例作为PMN组。另选取同期体检健康者96例作为对照组。收集所有研究对象外周血标本,实时荧光定量PCR(realtime quantitative PCR,qRT-PCR)法测定血清lncRNA GAS5-AS1水平、酶联免疫吸附法(enzymelinked immunosorbent assay,ELISA)法测定IL-27、IL-17、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、IL-10、转化生长因子β1(transforming growth factor betal,TGF-β1)水平,流式细胞仪测定外周血Treg细胞、Th17细胞比例,并计算Treg/Th17比值。Pearson法分析PMN患者lncRNA GAS5-AS1、IL-27水平与IL-17、TNF-α、IL-10、TGF-β1、Treg/Th17的相关性。结果对照组血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)为(4.03±0.66)mmol/L,PMN组患者BUN为(6.52±1.05)mmol/L;对照组血尿酸(uric acid,UA)为(266.13±44.35)μmol/L,PMN组患者UA为(338.92±56.45)μmol/L;对照组胱抑素C(cystatin C,Cys C)为(0.72±0.12)mg/L,PMN组患者Cys C为(1.38±0.23)mg/L;对照组抗磷脂酶A2受体抗体(phospholipase A2 receptor antibody,PLA2R-Ab)为(9.37±1.92)RU/mL,PMN组患者PLA2R-Ab为(32.92±6.19)RU/mL;对照组24 h尿蛋白定量(0.11±0.02)g,PMN组患者24 h尿蛋白定量(7.96±0.94)g;对照组lncRNA GAS5-AS1为(1.02±0.17),PMN组患者lncRNA GAS5-AS1为(3.46±0.56);对照组IL-27为(62.71±10.44)ng/L,PMN组患者IL-27为(124.76±20.77)ng/L;对照组Th17为(0.75±0.12)%,PMN组患者Th17为(4.86±0.81)%;对照组Th17/Treg为(0.11±0.02),PMN组患者Th17/Treg为(1.43±0.23)。对照组肾小球滤过率(glomerular filtration rate,GFR)为(109.22±14.85)mL·min^(−1)·(1.73 m^(2))^(−1),PMN组患者GFR为(57.47±10.24)mL·min^(−1)·(1.73 m^(2))^(−1);对照组Treg水平为(6.42±1.07)%,PMN组患者Treg水平为(3.21±0.53)%。不同危险程度PMN患者Th17/Treg、IL-17、TNF-α、IL-10、TGF-β1、lncRNA GAS5-AS1、IL-27水平差异均有统计学意义(P<0.05);PMN患者外周血lncRNA GAS5-AS1与Th17/Treg、IL-17、TNF-α正相关(r=0.632、0.554、0.572,P<0.05),与IL-10负相关(r=−0.468,P<0.05);IL-27与Th17/Treg、IL-17正相关(r=0.581、0.602,P<0.05),与IL-10、TGF-β1负相关(r=−0.533、−0.436,P<0.05)。结论PMN患者血清lncRNA GAS5-AS1、IL-27均高表达,二者均调节Th17/Treg免疫平衡,在PMN中发挥重要作用,有望成为PMN的研究靶点。

LncRNA-GAS5和miR-103在浸润性乳腺癌中的表达关系及意义

目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)-生长停滞特异性转录物5(GAS5)与微小RNA(miR)-103在浸润性乳腺癌中的表达关系及临床意义。方法收集72例浸润性乳腺癌经手术切除的癌组织及癌旁正常组织标本,实时荧光定量聚合酶链式反应法(qRT-PCR)测定LncRNA-GAS5、miRNA-103相对表达量,并收集患者病理资料,分析浸润性乳腺癌LncRNA-GAS5、miRNA-103表达与病理参数的关系及两者表达的相互关系。结果浸润性乳腺癌癌组织LncRNAGAS5相对表达量低于癌旁组织,miR-103相对表达量高于癌旁组织(P<0.05)。随临床分期的上升,LncRNA-GAS5表达降低,miR-103表达上升;伴淋巴结转移浸润性乳腺癌患者癌组织LncRNA-GAS5表达低于未伴淋巴结转移者,miR-103高于未伴淋巴结转移患者(P<0.05)。浸润性乳腺患者癌组织LncRNA-GAS5与miR-103表达呈负相关(P<0.05)。结论浸润性乳腺癌患者癌组织LncRNA-GAS5呈低表达,miR103呈高表达,两者表达呈负相关,且均与乳腺癌临床分期、淋巴结转移有关。

LncRNAGAS5通过miR-137/SIRT6轴抑制糖尿病大鼠心肌细胞凋亡的机制研究

目的探讨长链非编码RNA生长停滞特异性转录因子5(LncRNA GAS5)对糖尿病心肌病(DCM)大鼠心肌细胞凋亡的影响及其分子机制。方法通过高糖高脂饮食联合链脲佐菌素腹腔注射构建大鼠DCM模型,分为假手术(Sham)组和DCM组。苏木素-伊红(HE)染色观察心肌组织的病理变化;Masson染色检测大鼠心肌纤维化程度;实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测心肌组织LncRNA GAS5的表达情况。大鼠心肌细胞(H9c2)随机分为对照组、高糖组、高糖+GAS5组、高糖+miR-137 mimics组、高糖+miR-137 mimics+GAS5组、高糖+沉默调节蛋白6(SIRT6)组、高糖+SIRT6+miR-137 mimics组并进行相应处理。qRT-PCR检测LncRNA GAS5、miR-137的表达量;Western blot检测B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(Bax)、SIRT6蛋白表达量;流式细胞术检测细胞凋亡情况;细胞计数试剂盒8检测细胞活力;双荧光素酶报告基因实验验证LncRNAGAS5与miR-137、miR-137与SIRT6的靶向作用。结果HE染色和Masson染色结果显示,与Sham组相比,DCM组心肌细胞肥大,排列紊乱,胶原纤维增多,大量炎性细胞浸润。与Sham组比较,DCM组LncRNAGAS5表达降低(P<0.01)。与对照组比较,高糖组LncRNAGAS5表达水平随高糖培养时间延长逐渐降低(P<0.01)。与高糖组比较,高糖+GAS5组LncRNAGAS5表达量、细胞活力、Bcl-2表达增加(P<0.05);miR-137、细胞凋亡比例、Bax表达降低(P<0.05)。与高糖组比较,高糖+miR-137 mimics组miR-137、Bax蛋白表达量、细胞凋亡率增加(P<0.05);细胞活力、SIRT6、Bcl-2蛋白表达量降低(P<0.05)。与高糖+miR-137 mimics组相比,高糖+GAS5+miR-137 mimics组细胞活力、Bcl-2表达增加(P<0.01);细胞凋亡比例、Bax表达降低(P<0.05)。与高糖组比较,高糖+SIRT6组细胞活力、Bcl-2、SIRT6蛋白表达增加(P<0.01);细胞凋亡比例、Bax表达降低(P<0.01)。与高糖+SIRT6组比较,高糖+SIRT6+miR-137 mimics组细胞凋亡率、Bax蛋白表达量升高;细胞活力、Bcl-2蛋白表达量降低(P<0.01)。双荧光素酶报告基因实验证实LncRNA GAS5和miR-137、miR-137和SIRT6存在靶向关系。结论过表达LncRNAGAS5可通过内源性竞争机制减少miR-137与SIRT6的结合,促进SIRT6表达抑制DCM大鼠心肌细胞凋亡。

鼻咽癌患者血清中长链非编码RNA GAS5的表达变化及其意义

目的观察鼻咽癌患者血清中长链非编码RNA生长停滞特异性转录本5(lncRNA-GAS5)的表达变化,并探讨其意义。方法采用qRT-PCR法检测鼻咽癌患者、健康志愿者血清lncRNA-GAS5,分析血清lncRNA-GAS5表达与鼻咽癌临床病理参数及患者预后、生存的关系。结果鼻咽癌患者、健康志愿者血清lncRNA-GAS5相对表达量分别为3.69±1.33、7.13±1.93,两者比较,P<0.05。血清lncRNA-GAS5表达与鼻咽癌TNM分期、淋巴结转移有关(P均<0.05)。单因素分析显示,lncRNA-GAS5表达水平、肿瘤直径、淋巴结转移、TNM分期与鼻咽癌患者预后有关(P均<0.05);多因素分析显示,lncRNA-GAS5的低表达、肿瘤直径≥3 cm与鼻咽癌患者不良预后有关(P均<0.05)。Kaplan-Meier结果显示,血清lncRNA-GAS5高表达及低表达患者总生存期分别为50.3、27.5个月,两者比较,P<0.05。结论鼻咽癌患者血清中lncRNA-GAS5表达降低,其表达与鼻咽癌TNM分期、淋巴结转移及患者预后、生存密切相关,此指标可作为鼻咽癌患者新的预后标志物。

LncRNA-GAS5、LDH表达与胶质瘤放射治疗预后的关系研究

目的探讨长链非编码RNA生长停滞特异性转录物5(LncRNA-GAS5)、乳酸脱氢酶(LDH)表达与胶质瘤放射治疗预后的关系。方法选取广西壮族自治区南溪山医院2017年6月~2019年6月收治的行放射治疗的脑胶质瘤患者112例,通过检测机体LncRNA-GAS5、LDH表达水平情况,分析其表达水平与患者预后的关系。结果截止随访时间点112例患者死亡43例,生存69例,两者间lncRNA-GAS5、LDH水平比较,差异有统计学意义(P<0.05);Spearman相关性分析发现lncRNA-GAS5表达水平与患者不良预后呈负相关(P<0.05),LDH水平与患者不良预后则呈正相关性(P<0.05);受试者工作特征曲线(ROC)显示:lncRNA-GAS5、LDH联合预测脑胶质瘤患者放射治疗后预后不良的曲线下面积为0.859,明显高于LDH曲线下面积(P<0.05);单因素分析发现肿瘤直径、病理分级及lncRNA-GAS5、LDH水平与脑胶质瘤患者放射治疗后预后不良有关(P<0.05);logistic多因素分析发现肿瘤直径≥3 cm、病理分级(Ⅳ级)及lncRNA-GAS5<0.41、LDH≥123.60 U/L是脑胶质瘤患者放射治疗后预后不良的危险因素(P<0.05)。结论lncRNA-GAS5、LDH表达水平与胶质瘤放射治疗后患者的预后情况密切相关,是影响患者预后的危险因素,对分析患者的预后情况具有较高的评估价值。

LncRNA GAS5对结直肠癌5-FU耐药的作用研究

目的 探讨长链非编码RNA生长停滞特异性转录本5(LncRNA GAS5)对结直肠癌5-氟尿嘧啶(5-FU)耐药的作用。方法 选取人结肠癌细胞系HCT-8和SW480,建立5-FU耐药细胞株,构建LncRNA GAS5过表达结直肠癌细胞模型。反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测LncRNA GAS5在结直肠癌5-FU耐药细胞系中表达;CCK-8检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡。结果 RT-PCR检测显示,LncRNA GAS5在结直肠癌HCT-8细胞与SW480细胞中的表达水平低于正常结肠细胞,差异有统计学意义(P<0.05);LV5-GAS5组HCT-8细胞、SW480细胞中LncRNA GAS5表达高于Vector组,差异有统计学意义(P<0.05)。CCK-8实验检测显示,LncRNA GAS5能明显抑制HCT-8细胞和SW480细胞的增殖(P<0.05)。AnnexinV/PI双重染色及流式细胞术结果显示,在结直肠癌HCT-8细胞与SW480细胞中LV5-GAS5组的细胞凋亡比例高于Vector组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 LncRNA GAS5在结直肠癌5-FU耐药中发挥重要作用,能抑制结肠癌细胞系的增殖,并促进细胞凋亡。

LncRNA-GAS5在鼻咽癌中的表达及临床意义

目的探讨长链非编码RNA生长停滞特异性转录本5(lncRNA-GAS5)在鼻咽癌组织中的表达及其临床意义。方法收集2013年3月~2018年12月广东医科大学附属医院鼻咽癌组织标本56例为鼻咽癌组,正常鼻咽组织标本42例为对照组。qRT-PCR技术检测lncRNA-GAS5在两组的表达水平,分析lncRNA-GAS5的表达与患者临床病理特征及预后的相关性。结果鼻咽癌组lncRNA-GAS5相对表达量低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。TNM分期、淋巴结转移、肿瘤分化程度与lncRNA-GAS5的表达水平密切相关(P<0.05)。lncRNA-GAS5高表达患者的生存期显著高于低表达(P<0.01)。结论lncRNA-GAS5在鼻咽癌组织中表达降低,可能成为鼻咽癌患者新的预后因子。